Name: high-frequency ultrasound imaging of mouse cervical lymph nodes
Uploaded: 2015-07-25T14:00:00
Duration: 10 min 2 s
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इस काम के पश्चिम वर्जीनिया विश्वविद्यालय मैरी Babb रैनडॉल्फ कैंसर केंद्र से डोरोथी डी रेडफोर्ड बंदोबस्ती कोष द्वारा समर्थित किया गया। वेस्ट वर्जीनिया विश्वविद्यालय के पशु मॉडल और इमेजिंग सुविधा (AMIF) और माइक्रोस्कोपी इमेजिंग सुविधा (MIF) के उपयोग (मरियम Babb रैनडॉल्फ कैंसर सेंटर और एनआईएच अनुदान P20 RR16440 द्वारा समर्थित, P30 RR032138 / GM103488 और S10 के RR026378) कृतज्ञता से स्वीकार किया है।

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इस लेख के लिए प्रकाशन लागत दृश्य Sonics द्वारा प्रायोजित कर रहे हैं।

वर्णित प्रोटोकॉल दृश्य के लिए और गैर इनवेसिव HFUS इमेजिंग का उपयोग murine गर्भाशय ग्रीवा लिम्फ नोड्स के सीटू मूल्यांकन में अनुमति देता है। बी मोड और बिजली डॉपलर इमेजिंग का उपयोग ग्रीवा लिम्फ नोड आकृति विज्ञान, मात्रा और लिम्फ नोड रक्त प्रवाह नैदानिक ​​व्यवहार में गर्भाशय ग्रीवा के रोगी नोड्स के लक्षण वर्णन के लिए प्रयोग किया जाता है कि इसी तरह पूर्व नैदानिक ​​माउस मॉडल प्रणाली का एक प्रयोगात्मक विश्लेषण के लिए प्रदान करता है कल्पना करने के लिए। ठीक सुई बायोप्सी के माध्यम से cervial लिम्फ नोड्स निगरानी करने की क्षमता भी प्रतिरक्षा सेल परिवर्तन और चूहों में मौखिक गुहा रोग प्रेरित lymphadenopathies दौरान विदेशी प्रकार की कोशिकाओं या जीवाणुओं की उपस्थिति का पता लगाने के लिए एक उपयोगी तकनीक प्रदान करता है। उपयोग और HFUS के साथ जुड़े कम लागत की आसानी पशु मॉडल की एक विस्तृत विविधता में ग्रीवा लिम्फ नोड स्थिति की तेजी से जांच के लिए अनुमति देता है। इस प्रोटोकॉल में एक महत्वपूर्ण कदम HFUS छवियों में गर्भाशय ग्रीवा लिम्फ नोड्स के आरंभिक सफल पहचान है। हमारी सुविधा HFUS ट्रॅन के एक वर्गीकरण हैहम उच्चतम गुणवत्ता के चित्र प्राप्त करने के लिए उन्हें इस्तेमाल किया है ताकि के रूप में sducers, का वर्णन किया। हम वर्णन ट्रांसड्यूसर उपलब्ध नहीं हैं हालांकि, अगर यह अन्य ट्रांसड्यूसर का उपयोग कर इमेजिंग अनुकूलित करने के लिए संभव है। इस प्रयोजन के लिए एक पर्याप्त छवि प्राप्त करने के लिए छवि गहराई और चौड़ाई का समायोजन सभी आवश्यक है कि है। इस तरह के चित्र का संकल्प भिन्न हो सकते हैं, लेकिन यह अभी भी HFUS का उपयोग करके उच्च गुणवत्ता के चित्र प्राप्त करने के लिए संभव होना चाहिए। मौखिक गुहा और थायरॉयड ग्रंथि की इमेजिंग स्थलों बहुत लिम्फ नोड्स अनुवादित हैं जहां उचित क्षेत्र के लिए उपयोगकर्ता orienting में सहायता करेगा। त्वचा की सतह के पास की विशेषता अंडाकार आकार, hypoechoic प्रकृति और सतही स्थान उचित गर्दन क्षेत्र के भीतर गर्भाशय ग्रीवा लिम्फ नोड्स का तेजी से पुष्टि की पहचान के लिए अनुमति देता है। सभी तीन नोड्स एक एकल इमेजिंग विमान (3B चित्रा) में दिख रहा हो सकता है, आम तौर पर एक या दो नोड्स इमेजिंग के दौरान कब्जा कर रहे हैं। ट्रांसड्यूसर स्थिति की मामूली समायोजन उखड़ना करने के लिए आयोजित किया जा सकता हैएर विभिन्न इमेजिंग गर्दन के एक ही पक्ष पर सभी नोड्स के दृश्य की अनुमति, दिखाई विमानों। हम ग्रीवा लिम्फ नोड्स की पहचान करने के लिए विश्वसनीय वर्णित तकनीक मिल गया है, वहीं इमेजिंग और बायोप्सी तकनीक के लिए विशिष्ट सीमाएं हैं। यहां तक ​​कि मामूली दबाव transducer सिर के माध्यम से त्वचा के लिए लागू किया जाता है जब माउस ग्रीवा लिम्फ नोड्स के सतही प्रकृति अत्यधिक गतिशीलता प्रदान करता है। इस ऐतिहासिक छवियों पहचान कर रहे हैं जब तक धीरे-धीरे माउस गर्दन पर अल्ट्रासाउंड जेल में ट्रांसड्यूसर सिर लागू करने के द्वारा counteracted जा सकता है। लिम्फ नोड गतिशीलता भी उच्च संकल्प (50 मेगाहर्ट्ज) रेंज में ट्रांसड्यूसर का उपयोग करते हुए, खासकर जब ठीक सुई बायोप्सी जटिल हो सकता है। बायोप्सी के लिए लिम्फ नोड्स के केंद्रित छवियों आम तौर पर होने के कारण overlying त्वचा और कैप्सूल पंचर करने के लिए आवश्यक बायोप्सी सुई के बल को देखने के क्षेत्र से बाहर धकेल रहे हैं। यह सुई प्रविष्टि की दिशा की ओर लिम्फ नोड के बंद केंद्र पोजीशनिंग द्वारा remedied किया जा सकता हैलिम्फ नोड के लिए स्थान उपलब्ध कराने के पार धकेल दिया है लेकिन अभी भी बायोप्सी के दौरान देखने के क्षेत्र के भीतर रहते होंगे। हमारे अनुभव, लिम्फ नोड्स&gt; में 10 मिमी 3 बायोप्सी करने के लिए बहुत मुश्किल हो जाता है, और अक्सर सुई उन्नति के दौरान सुई द्वारा धक्का बजाय प्रवेश कर रहे हैं। इस प्रकार, बायोप्सी सबसे अच्छा 10 मिमी 3 ग्रीवा क्षेत्र के भीतर पर्याप्त नोड लक्ष्य आकार और स्थिरता सुनिश्चित करने के लिए&gt; आकार है जहां बढ़े हुए लिम्फ नोड्स के लिए आरक्षित है। इसके अलावा, बायोप्सी सामग्री बड़ा सेल नंबर (जैसे, प्रवाह cytometry) की आवश्यकता होती है जहां प्रक्रियाओं के लिए पर्याप्त सेल नंबर में नहीं हो सकता। HFUS सफलतापूर्वक Orthotopic HNSCC 25 ट्यूमर कल्पना करने के लिए प्रयोग किया जाता है, और मौखिक ट्यूमर 24 के साथ चूहों में गर्भाशय ग्रीवा नोड मेटास्टेसिस की निगरानी करने की क्षमता है किया गया है। अल्ट्रासाउंड के अलावा, bioluminescence इमेजिंग भी रहते चूहों 26,27 में Orthotopic मौखिक ट्यूमर गठन और गर्भाशय ग्रीवा लिम्फ नोड मेटास्टेसिस कल्पना करने के लिए इस्तेमाल किया गया है। एक altern के रूप मेंative दृष्टिकोण, bioluminescence इमेजिंग सीधे ही पशुओं में समय के साथ ट्यूमर प्रगति और मेटास्टेटिक बोझ यों के लिए सक्षम होने में HFUS पर एक विशिष्ट लाभ है। इसमें शक नहीं उपयोगी है, जबकि bioluminescence इमेजिंग लिम्फ नोड आकृति विज्ञान, नोडल संस्करणों या रक्त प्रवाह सहित HFUS द्वारा कल्पना मापदंडों के कई उपाय करने के लिए असमर्थ है। Bioluminescence इमेजिंग भी ठीक सुई बायोप्सी के लिए अनुकूलन के लिए अनुपयुक्त इस तकनीक का प्रतिपादन, इमेजिंग के दौरान चूहों को बनाए रखने के लिए विशेष अंधेरे बक्से की आवश्यकता है। इसके अलावा, bioluminescence इमेजिंग स्थिरतापूर्वक, या luciferase अभिव्यक्ति को सीमित कि inducible ऊतक विशेष ट्रांसजेनिक सिस्टम के साथ प्रतिरक्षा अक्षमता चूहों में luciferase ट्रांसफ़ेक्ट ट्यूमर कोशिकाओं के साथ Orthotopic xenografts के मामलों में ही इस्तेमाल किया जा करने के लिए इस तकनीक की इजाजत दी, luciferase एंजाइम व्यक्त कि ट्यूमर कोशिकाओं के उत्पादन की आवश्यकता है ट्यूमर मूल के ऊतक के लिए विशिष्ट एक spatio- लौकिक ढंग से। इसके विपरीत, HFUS यू हो सकता हैके रूप में अच्छी तरह से पूरा प्रतिरक्षा प्रणाली 28,29 के साथ चूहों में कैसरजन प्रेरित मौखिक ट्यूमर के मॉडल में गर्भाशय ग्रीवा लिम्फ नोड्स इमेजिंग के लिए सक्षम होने के रूप में, इन मॉडलों में bioluminescence छवियों के साथ संयोजन के रूप में sed। HFUS ट्यूमर कोशिकाओं luciferase अकेले इमेजिंग साधन किसी से ग्रीवा लिम्फ नोड भागीदारी का एक और पूरी तस्वीर प्रदान कर सकते हैं व्यक्त जहां मौखिक कैंसर, bioluminescence और प्रणालियों में HFUS इमेजिंग से प्राप्त किया जा सकता है कि संयुक्त जानकारी का सबसे माउस मॉडल के लिए अधिक अनुकूल हो सकता है। इस तकनीक पशु अल्पकालिक संज्ञाहरण के तहत एक उलट स्थिति में बनाए रखा जा सकता है, जहां भड़काऊ लिम्फाडेनोपैथी में परिणाम है कि मौखिक रोग के अधिकांश मॉडल में इस्तेमाल किया जा करने के लिए वास्तविक समय में माउस ग्रीवा लिम्फ नोड्स की पहचान और पता लगाने की क्षमता देता है। लिम्फ नोड मेटास्टेसिस या बैक्टीरिया के संक्रमण और रहने वाले जानवरों में लिम्फ नोड आकृति विज्ञान पर सहवर्ती प्रभाव का पता लगाने के पारंपरिक तरीकों पर एक महत्वपूर्ण लाभ प्रस्तुत करता हैलिम्फ नोड्स ऊतकीय प्रसंस्करण के लिए मरे हुए जानवरों से हटाया जा करने की आवश्यकता होती है। ठीक सुई बायोप्सी के साथ संयोजन HFUS मौखिक गुहा रोगों के सबसे वर्तमान माउस मॉडल में रोग प्रगति की निगरानी के लिए एक बेहतर तरीका उपलब्ध कराने के क्लिनिक में आयोजित किया जाता है के समान ग्रीवा लिम्फ नोड्स, की दिनचर्या रोग विश्लेषण के संचालन के लिए एक साधन की अनुमति देता है।

मध्य ऊतक तरल पदार्थ की लसीका जल निकासी मौखिक और मैक्सिलोफैशियल क्षेत्र 1,2 में उत्पन्न होने वाली संक्रामक सूक्ष्मजीवों और कैंसर के लिए प्रचार-प्रसार की मुख्य विधि है। ग्रीवा लिम्फ नोड्स के नैदानिक ​​मूल्यांकन मौखिक गुहा में उत्पन्न होने वाले रोगों की उपस्थिति या प्रगति का निर्धारण करने के लिए इस्तेमाल एक आम नैदानिक ​​अभ्यास है। यह मौखिक रोग निदान 3 के लिए बहुमूल्य शारीरिक साइटों के रूप में इकट्ठा करने ग्रीवा लिम्फ नोड्स के महत्व को रेखांकित करता है। कई विशेष इमेजिंग के तरीके में चिकित्सकीय रोगग्रस्त गर्भाशय ग्रीवा लिम्फ नोड्स की पहचान करने के लिए उपयोग किया जाता है। ये पोजीट्रान एमिशन टोमोग्राफी (पीईटी), गणना टोमोग्राफी (सीटी) और चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग (एमआर) शामिल हैं। अत्यधिक मूल्यवान हैं, इन तरीकों के सभी सक्षम या इमेजिंग प्रक्रिया को बढ़ाने के संचलन में व्यापक रोगी तैयारी, अति विशिष्ट उपकरण और / या रासायनिक निषेचन की आवश्यकता होती है। Sonographic इमेजिंग (अल्ट्रासाउंड, अमेरिका) IM करने के लिए इस्तेमाल आमतौर पर लागू तकनीक हैसंक्रमण के कारण या मेटास्टैटिक भागीदारी 4-6 करने के लिए लिम्फाडेनोपैथी के साथ पेश उम्र ग्रीवा लिम्फ नोड्स। अमेरिका अक्सर सर्जिकल छांटना 7 के लिए ट्यूमर मचान और आवश्यकता का निर्धारण करने के लिए मदद कर रहा है, रोगी लिम्फ नोड की स्थिति के लिए एक व्यापक प्रतिनिधित्व प्रदान करने के लिए पीईटी-सीटी और एमआर इमेजिंग के साथ संयुक्त है। अमेरिका के गैर-आक्रामक प्रकृति भी उपयोग में आसानी, कम लागत, कम से कम मरीज की परेशानी और तैयारी सहित अन्य इमेजिंग रूपरेखा, निहित फायदे हैं। सबसे ग्रीवा लिम्फ नोड्स के सतही चमड़े के नीचे स्थान अमेरिका नैदानिक ​​सटीकता 8 में सुधार, वृद्धि की परिशुद्धता के साथ न्यूनतम इनवेसिव ठीक सुई आकांक्षा बायोप्सी का मार्गदर्शन करने के लिए अनुमति देता है। वाणिज्यिक उच्च आवृत्ति (HF) अमेरिका 30 माइक्रोन से 9 तक की आंतरिक शारीरिक संरचनाओं का विस्तृत संकल्प प्रदान करता है। 22-70 मेगाहर्ट्ज से लेकर ट्रांसड्यूसर का प्रयोग, HFUS आसानी से vivo में आंतरिक अंगों की वास्तविक समय इमेजिंग अनुमति देने के लिए प्रयोगात्मक कृंतक प्रणालियों की एक किस्म के लिए लागू किया गया है।; HFUS सामान्य और विशिष्ट विपरीत वृद्धि agents9 की संख्या के साथ के रूप में अच्छी तरह से पारंपरिक चमक (बी) -mode में ट्यूमर गठन के दृश्य के लिए अनुकूलित किया गया है। HFUS के साथ सत्ता डॉपलर का प्रयोग लाइव चूहों 10,11 में वाहिकाजनक छिड़काव के लिए एक व्यापक मूल्यांकन के लिए अनुमति देता है, माउस ट्यूमर के भीतर रक्त प्रवाह की निगरानी करने की क्षमता प्रदान करता है। HFUS नैदानिक ​​अभ्यास करने के लिए इस प्रौद्योगिकी के समानांतर उपयोगिता का प्रदर्शन, मुख्य शरीर गुहा के भीतर रोगग्रस्त माउस लिम्फ नोड्स कल्पना करने के लिए इस्तेमाल किया गया है। विशेष रूप से भड़काऊ और मेटास्टैटिक आंत लिम्फ नोड परिवर्तन में स्तन 12,13, अग्नाशय के 14, कोलोरेक्टल 15 और फेफड़ों के 16 ट्यूमर है, साथ ही रेशेदार histocytomas 17, और अधिग्रहण hydronephrosis 18 वर्ष की एक वृद्ध माउस मॉडल को शरण देने के कैंसर के माउस मॉडल में मनाया गया है । ये उदाहरण ro की एक विस्तृत विविधता में ट्यूमर प्रेरित लिम्फाडेनोपैथी के लिए एक शक्तिशाली खोजी उपकरण के रूप में HFUS के मूल्य जमनासेंध सिस्टम। जीवाणु संक्रमण 19,20 और सिर और गर्दन के स्क्वैमस सेल कार्सिनोमा के कई मॉडल (HNSCC) 21,22 पूर्व नैदानिक ​​सेटिंग में इन रोगों का अध्ययन करने के लिए विकसित किया गया है। मनुष्य के लिए इसके विपरीत, चूहों मौखिक गुहा ऊतकों (जबड़े, अवअधोहनुज जबड़े और सतही कर्णमूलीय 23) से लसीका सर्वेक्षण कि तीन ग्रीवा लिम्फ नोड्स होते हैं। हाल ही में, हम HNSCC 24 की एक कैसरजन प्रेरित माउस मॉडल में लिम्फ नोड मात्रा और रक्त प्रवाह में परिवर्तन की निगरानी, ​​इन लिम्फ नोड्स के स्थान और आकृति विज्ञान नक्शा करने के लिए HFUS के उपयोग की सूचना दी। यहाँ, हम, की पहचान करने और इमेजिंग रहने वाले चूहों में गर्भाशय ग्रीवा लिम्फ नोड्स का विश्लेषण करने के लिए HFUS के उपयोग के लिए एक विस्तृत प्रोटोकॉल प्रदान करते हैं। इस प्रोटोकॉल भी टी पर ग्रीवा लिम्फ नोड सामग्री में परिवर्तन और विकृतियों के histological निगरानी की अनुमति देता है, बढ़े हुए माउस ग्रीवा लिम्फ नोड्स की छवि निर्देशित ठीक सुई बायोप्सी का संचालन करने के HFUS व्यवहार्यता का उपयोग दर्शाता हैएक ही पशुओं में IME। इस प्रोटोकॉल चूहों में किसी भी आक्रामक मौखिक गुहा की बीमारी से परिणामी ग्रीवा लिम्फ नोड विकृतियों के विस्तृत अध्ययन के लिए अनुमति देने के लिए आसानी से अनुकूलनीय है।

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1067">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;width:577px;">Vevo2100 High Resolution Micro-ultrasound Imaging System, with integrated software Version 1.6.0</td>
			<td style="width:153px;">VisualSonics, Toronto, Ontario, Canada</td>
			<td style="width:139px;">VS-11945</td>
			<td style="width:199px;"></td>
		</tr>
		<tr height="58">
			<td height="58" style="height:58px;width:577px;">Power Dopper Mode and 3D Mode</td>
			<td style="width:153px;">VisualSonics, Toronto, Ontario, Canada</td>
			<td style="width:139px;">VS-11952; VS-11484</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;">Vevo compact anesthesia system</td>
			<td style="width:153px;">VisualSonics, Toronto, Ontario, Canada</td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;">Vevo integrated rail system including 3D motor and micromanipulator for injections</td>
			<td style="width:153px;">VisualSonics, Toronto, Ontario, Canada</td>
			<td style="width:139px;">SA-11983</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;">Thermasonic Gel Warmer</td>
			<td style="width:153px;">VisualSonics, Toronto, Ontario, Canada</td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td>Optional</td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;">Transducers &#8211; MS-550D (Broadband frequency: 22 MHz - 55 MHz)</td>
			<td style="width:153px;">VisualSonics, Toronto, Ontario, Canada</td>
			<td style="width:139px;">VS-11960</td>
			<td style="width:199px;">Referred to as 40 MHz Transducer</td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;">Transducers &#8211; MS-700 (Broadband frequency: 30 MHz - 70 MHz)</td>
			<td style="width:153px;">VisualSonics, Toronto, Ontario, Canada</td>
			<td style="width:139px;">VS-12026</td>
			<td style="width:199px;">Referred to as 50 MHz Transducer</td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;">Ophthalmic Ointment</td>
			<td style="width:153px;">Patterson Veterinary</td>
			<td style="width:139px;">07-888-1663</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Electrode gel</td>
			<td style="width:153px;">Parker Laboratories</td>
			<td style="width:139px;">174-1525</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tape</td>
			<td style="width:153px;">Medical Arts Press</td>
			<td style="width:139px;">174-153000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Depilatory Cream</td>
			<td style="width:153px;">Carter Products</td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cotton swabs</td>
			<td style="width:153px;">General Supply</td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Gauze</td>
			<td style="width:153px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:139px;">22-037-907</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Water</td>
			<td style="width:153px;">General Supply</td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Lubricating gel</td>
			<td style="width:153px;">Parker Laboratories</td>
			<td style="width:139px;">57-05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ultrasound gel</td>
			<td style="width:153px;">Parker Laboratories</td>
			<td style="width:139px;">01-50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;">Microcentrifuge tube rack</td>
			<td style="width:153px;">General Supply</td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td style="width:199px;">Used to raise mouse platform for optimal biopsy position</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">27G &#189; inch needle with 1 ml syringe</td>
			<td style="width:153px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:139px;">14-826-87</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">ThinPrep PreservCyt Solution</td>
			<td style="width:153px;">Hologic</td>
			<td style="width:139px;">70097-002</td>
			<td>Refered to as biopsy media</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Microcentrifuge tubes</td>
			<td style="width:153px;">General Supply</td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;">Thinprep 2000 processor</td>
			<td style="width:153px;">Cytyc, Marlborough, MA</td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td>Blue Filter</td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;">Olympus AX70 Provis Microscope</td>
			<td style="width:153px;">Olympus, Center Valley, PA</td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

high-frequency ultrasound imaging of mouse cervical lymph nodes

उच्च आवृत्ति अल्ट्रासाउंड (HFUS) व्यापक रूप से प्रयोगात्मक छोटे जानवर सिस्टम में आंतरिक संरचनाओं शारीरिक इमेजिंग के लिए एक गैर-आक्रामक तरीके के रूप में कार्यरत है। HFUS 30 माइक्रोन के रूप में छोटे रूप में संरचनाओं पता लगाने की क्षमता, चमक (बी) -mode में कृन्तकों में सतही लिम्फ नोड्स दृश्यमान करने के लिए उपयोग किया गया है कि एक संपत्ति है। बी मोड इमेजिंग के साथ संयोजन शक्ति डॉपलर लिम्फ नोड्स और अन्य अंगों के भीतर संचार रक्त के प्रवाह को मापने के लिए अनुमति देता है। HFUS माउस मॉडल प्रणाली का एक संख्या में लिम्फ नोड इमेजिंग के लिए उपयोग किया गया है, वहीं चूहों में HFUS इमेजिंग और गर्भाशय ग्रीवा लिम्फ नोड्स के लक्षण वर्णन का वर्णन एक विस्तृत प्रोटोकॉल नहीं बताया गया है। यहाँ, हम HFUS का पता लगाने और चूहों में गर्भाशय ग्रीवा लिम्फ नोड्स चिह्नित करने के लिए अनुकूलित किया जा सकता है। संयुक्त बी मोड और बिजली डॉपलर इमेजिंग immunologically-बढ़े ग्रीवा नोड्स में रक्त के प्रवाह में वृद्धि का पता लगाने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। हम भी कोई ग्रीवा लिम्फ के ठीक सुई बायोप्सी संचालन करने के लिए बी मोड इमेजिंग के उपयोग का वर्णनदेस ऊतकीय विश्लेषण के लिए लसीका ऊतक निकालते हैं। अंत में, सॉफ्टवेयर सहायता प्राप्त चरणों लिम्फ नोड मात्रा में परिवर्तन की गणना करने के लिए और छवि पुनर्निर्माण निम्नलिखित लिम्फ नोड आकृति विज्ञान में परिवर्तन कल्पना करने के लिए वर्णित हैं। नेत्रहीन समय के साथ ग्रीवा लिम्फ नोड जीव विज्ञान में परिवर्तन की निगरानी करने की क्षमता मौखिक गुहा रोग के पूर्व नैदानिक ​​माउस मॉडल में ग्रीवा लिम्फ नोड परिवर्तन की गैर इनवेसिव निगरानी के लिए एक सरल और शक्तिशाली तकनीक प्रदान करता है।

इमेजिंग और बायोप्सी प्रक्रियाओं के लिए समग्र योजनाबद्ध चित्र 1 में दिखाया गया है। प्रक्रिया में महत्वपूर्ण कदम इमेजिंग के लिए माउस का समुचित तैयारी, गर्भाशय ग्रीवा लिम्फ नोड्स की पहचान, सही तैयारी और सुई बायोप्सी का आयोजन करने, और बी का विश्लेषण शामिल -mode और डॉपलर छवियों की मात्रा और कंप्यूटर सॉफ्टवेयर का उपयोग कर प्रत्येक चयनित नोड के भीतर vascularity की मात्रा को मापने के लिए। माउस ग्रीवा लिम्फ नोड्स के HFUS इमेजिंग लागू करने और इमेजिंग अवधि (2A चित्रा) के दौरान उचित संज्ञाहरण, साथ ही पूरे गर्दन क्षेत्र (चित्रा 2 बी) को कवर बाल की पूरी तरह हटाने को बनाए रखने की आवश्यकता है। depilated क्षेत्र के लिए अल्ट्रासाउंड जेल के उदारवादी आवेदन प्रक्रिया (चित्रा -2) के दौरान एक स्पष्ट HFUS संकेत सुनिश्चित करता है। गर्दन क्षेत्र के HFUS इमेजिंग विशेषता sonographic छवियों का उत्पादन है कि गर्भाशय ग्रीवा संरचनात्मक स्थलों के दृश्य के द्वारा सहायता प्राप्त है। चित्रा3 बी मोड (चित्रा 3 डी) में और बिजली डॉपलर मोड (3E चित्रा) में महत्वपूर्ण अंगों के उदाहरण (चित्रा 3 ए-सी), गर्भाशय ग्रीवा लिम्फ नोड्स पता चलता है। Anesthetized चूहों में वास्तविक समय HFUS इमेजिंग नैदानिक ​​व्यवहार में आयोजित किया जाता है के समान ग्रीवा नोड्स के निर्देशित ठीक सुई बायोप्सी के लिए अनुमति देता है। नियंत्रित microinjector उपकरणों के लिए बायोप्सी सुई और संलग्न संग्रह सिरिंज की नियुक्ति चित्रा -4 ए में दिखाया गया है। इसके बाद बी मोड sonographic छवियों बायोप्सी (चित्रा 4D) के दौरान आदर्श पूर्व बायोप्सी (चित्रा 4 बी) के लिए सुई स्थान, एक ग्रीवा लिम्फ नोड (चित्रा 4C) में सुई टिप प्रविष्टि, और सुई की स्थिति को दर्शाते हैं। बंद हुआ छवि लिम्फ नोड (चित्रा 4E) की मज्जा के भीतर सुई की नोक से पता चलता है। Cytospin द्वारा बायोप्सी घटकों के प्रसंस्करण सफल लिम्फ नोड पुष्टि करने प्रचुर मात्रा में ल्य्म्फोइड सेल समूहों और एसोसिएटेड संयोजी ऊतक, पता चलता हैबायोप्सी (चित्रा 4F)। विस्तृत जानकारी के लिम्फ नोड वास्तुकला, मात्रा और नाड़ी प्रवाह के संबंध में प्राप्त किया जा करने के लिए HFUS छवियों के कम्प्यूटेशनल आधारित विश्लेषण की अनुमति देता है। बिजली डॉपलर मोड और 3 डी की मात्रा माप प्रतिशत vascularity (पीवी) का उपयोग करते हुए पूरे नोड्स (चित्रा 5A) को शामिल छवि श्रृंखला से गणना की जा सकती है। इसके अतिरिक्त, 3 डी इमेजिंग समग्र लिम्फ नोड स्थलाकृति (चित्रा 5 ब) खुलासा, आभासी लिम्फ नोड पुनर्निर्माण के लिए अनुमति देता है। <img alt="चित्र 1" src="/files/ftp_upload/52718/52718fig1.jpg" /> चित्रा 1:। चूहों में नैदानिक ​​HFUS ग्रीवा लिम्फ नोड इमेजिंग में शामिल कदम का अवलोकन योजनाबद्ध महत्वपूर्ण कदम शामिल हैं 1: HFUS इमेजिंग के लिए चूहों की तैयारी और तीन माउस ग्रीवा लिम्फ नोड्स युक्त गर्दन क्षेत्र के 40 और 50 मेगाहर्ट्ज संकल्प छवियों प्राप्त । 2: गर्भाशय ग्रीवा लिम्फ नोड्स और बाद में histological विश्लेषण के ठीक सुई छवि निर्देशित बायोप्सी<html> की सामग्री biopsied। 3: कंप्यूटर सहायता प्राप्त छवि विश्लेषण और नाड़ी प्रवाह के संबंधित लिम्फ नोड मात्रा और प्रतिशत (%) निर्धारित करने के लिए बी मोड और डॉपलर में प्राप्त लिम्फ नोड छवियों के 3 डी पुनर्निर्माण। <img alt="चित्र 2" src="/files/ftp_upload/52718/52718fig2.jpg" /> चित्रा 2:। ग्रीवा लिम्फ नोड आकलन और बायोप्सी के लिए विवो माइक्रो इमेजिंग प्रणाली में उच्च संकल्प का अवलोकन (ए) HFUS प्रणाली ग्रीवा लिम्फ नोड इमेजिंग के लिए तैयार एक anesthetized माउस के साथ दिखाया गया है। यह भी पता चला microinjector (एमआई) और 3 डी-मोटर मंच (3 डी एम एस) सहायक उपकरण है। (बी) के गर्दन के क्षेत्र में हटाया बालों के साथ HFUS इमेजिंग के लिए तैयार एक anesthetized माउस के मद्देनजर ऊपर बंद करें। (सी) गर्दन पर जगह में 50 मेगाहर्ट्ज ट्रांसड्यूसर के साथ एक ही माउस। गर्दन क्षेत्र इमेजिंग की सुविधा के लिए इस्तेमाल किया अतिरिक्त अल्ट्रासाउंड जेल ध्यान दें। 718fig3.jpg &quot;/&gt; चित्रा 3: बी मोड और बिजली डॉपलर में प्रतिनिधि HFUS ग्रीवा शरीर रचना विज्ञान छवियों। (ए, बी) नाक गुहा के लिए निकटतम इमेजिंग द्वारा कल्पना मुख गुहा (ईसा पूर्व) और जीभ (टी) दिखा मौखिक गुहा के बी मोड छवियों,। गर्दन के प्रत्येक पक्ष पर पाया तीन ग्रीवा लिम्फ नोड्स (एम, जबड़े में लेबल, एसएम, अवअधोहनुज, सपा, सतही कर्णमूलीय) (बी) के रूप में दिखाया गया है, एक एकल इमेजिंग विमान में hypoechoic संरचनाओं के एक समूह के रूप में दिखाई देते हैं। (सी) एक ठोस, ​​प्रतिध्वनिजनक तितली के आकार का संरचना के रूप में दिखाई दे रहा है, ऊपरी वक्ष क्षेत्र में कल्पना के रूप में थायरॉयड ग्रंथि (ध)। (एसी) एक 40 मेगाहर्ट्ज ट्रांसड्यूसर के साथ कल्पना कर रहे थे; पैमाने बार = 1 मिमी। (डी, ई) सामान्य (डी) के प्रतिनिधि छवियों और बी मोड और बिजली डॉपलर (लाल) के साथ बढ़े (ई) ग्रीवा लिम्फ नोड्स। बिंदीदार रेखा व्यक्ति लिम्फ नोड्स रूपरेखा। स्केल बार = 0.5 मिमी। <img alt="चित्रा 4" sआर सी = &quot;/ फ़ाइलें / ftp_upload / 52,718 / 52718fig4.jpg&quot; /&gt; चित्रा 4: ग्रीवा लिम्फ नोड बायोप्सी सेट अप, इमेजिंग और बायोप्सी सामग्री की Cytospin विश्लेषण (ए) माउस गर्दन के पास सूक्ष्म सुई लगानेवाला और सुई प्लेसमेंट दिखा इमेजिंग मंच।। एक विस्तृत microcentrifuge ट्यूब रैक (नारंगी ब्लॉक) से थोड़ा अभी भी 3 डी मोटर चरण के लिए अंतरिक्ष की अनुमति है जबकि उचित सुई नियुक्ति को सक्षम करने, प्लेटफार्म बढ़ाने के लिए प्रयोग किया जाता है। यह व्यवस्था प्रत्येक माउस के लिए मोटर चरण हटाने बिताए समय को कम करता है। (बी - डी) पूरे गर्दन HFUS छवियों 50 मेगाहर्ट्ज ट्रांसड्यूसर का उपयोग कर एक ग्रीवा लिम्फ नोड बायोप्सी के एक वीडियो से ली गई है। (बी) बायोप्सी करने से पहले गर्दन की ओर करने के लिए तैनात सुई दिखा HFUS बी मोड छवि। सुई की नोक सिर्फ सुई प्रक्षेपवक्र निरूपित करने के लिए इमेजिंग के दौरान आरोपित सुई गाइड की स्थिति (हरी बिंदीदार रेखा) से नीचे hyperechoic संरचना है। लिम्फ नोड के केंद्र में हैछवि। स्केल बार = 1 मिमी। लिम्फ नोड में (सी) सुई प्रविष्टि। ग्रीवा लिम्फ नोड (डी) बायोप्सी। (ई) ग्रीवा लिम्फ नोड के तेजी से बढ़ी बायोप्सी। स्केल बार = 0.5 मिमी। सफल बायोप्सी की पुष्टि के प्रतिनिधि बायोप्सी लिम्फ सामग्री की (एफ) Cytospin विश्लेषण। स्केल बार = 100 माइक्रोन। <img alt="चित्रा 5" src="/files/ftp_upload/52718/52718fig5.jpg" /> चित्रा 5:। 3 डी ग्रीवा लिम्फ नोड छवियों के कंप्यूटर विश्लेषण एक लिम्फ नोड के (ए) प्रतिनिधि स्क्रीनशॉट कंप्यूटर सॉफ्टवेयर का उपयोग कर विश्लेषण किया गया। नोड नीले रंग में घिरा है; विश्लेषण के परिणाम 3 डी की मात्रा और संकेत के रूप में प्रतिशत vascularity (पीवी) दिखा। (बी) 3 डी विश्लेषण के बाद ही नोड की सतह से देख छवि। एक में ले लिया माप के आधार पर लिम्फ नोड की पूरी मात्रा प्रदान करता है।

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High-frequency Ultrasound Imaging of Mouse Cervical Lymph Nodes

इस प्रोटोकॉल इमेजिंग माउस ग्रीवा लिम्फ नोड्स के लिए उच्च आवृत्ति अल्ट्रासाउंड (HFUS) के आवेदन का वर्णन है। इस तकनीक दृश्य और ग्रीवा लिम्फ नोड आकृति विज्ञान, मात्रा और रक्त प्रवाह की मात्रा का ठहराव का अनुकूलन। ग्रीवा लिम्फ नोड्स और histological मूल्यांकन के लिए लसीका ऊतक के प्रसंस्करण की छवि निर्देशित बायोप्सी भी प्रदर्शन किया है।

माउस सरवाइकल लिम्फ नोड्स की उच्च आवृत्ति अल्ट्रासाउंड इमेजिंग

High-frequency ultrasound (HFUS) is widely employed as a non-invasive method for imaging internal anatomic structures in experimental small animal ...

Research

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Medicine

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