Name: in vivo and ex vivo approaches to study ovarian cancer metastatic colonization of milky spot structures in peritoneal adipose
Uploaded: 2015-10-14T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vivo and Ex Vivo Approaches to Study Ovarian Cancer Metastatic Colonization of Milky Spot Structures in Peritoneal Adipose at JoVE.com

Supported by grants from the Department of Defense (W81XWH-09-1-0127), the NIH (2-R01-CA089569), the Elsa U. Pardee Foundation, a Marsha Rivkin Center for Ovarian Cancer Research Pilot Study Award, and generous philanthropic support from Section of Urology and Section of Research in the Department of Surgery, University of Chicago.

सभी चूहों संस्थागत पशु की देखभाल और उपयोग समिति (IACUC) के दिशा निर्देशों को और शिकागो पशु संसाधन केंद्र के विश्वविद्यालय की देखरेख अनुसार रखे बनाए रखा और euthanized थे। प्रायोगिक अध्ययन के लिए 1. तैयार...

<ol>
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प्रचारित कोशिकाओं को लक्षित करने के उपचारों के विकास मेटास्टेटिक उपनिवेशवाद की एक यंत्रवत समझ, पेरिटोनियल रोग के विकास में महत्वपूर्ण पहला कदम की आवश्यकता है। हम वपा का अनूठा ऊतक संरचना और वास्त?...

सबसे ठोस ट्यूमर के विपरीत, उच्च ग्रेड तरल डिम्बग्रंथि के कैंसर (HGSC) से मेटास्टेसिस पेरिटोनियल गुहा 1 तक सीमित हैं। इस प्रकार, प्रभावी पेरिटोनियल उपचारों संभावित नियंत्रण या HGSC उन्मूलन सकता है। वर्तमान में, एक मानक चिकित्सकीय दृष्टिकोण कीमोथेरेपी 1-3 के साथ संयुक्त शल्य cytoreduction है। दुर्भाग्य से, रोगियों के विशाल बहुमत का अनुभव है और रोग की पुनरावृत्ति की जटिलताओं का शिकार। ये निराशाजनक आँकड़ों मेटास्टेटिक उपनिवेशवाद की बेहतर समझ के लिए की जरूरत को दिखाने के लिए, प्रक्रिया है जिसके द्वारा कैंसर की कोशिकाओं, उपयोग, और मेटास्टेसिस 2 फार्म के लिए मेजबान ऊतकों के भीतर पैदा करना स्थानीय बनाना। वपा HGSC मेटास्टेसिस 4-7 की वरीय जल्दी साइट है। अन्य पेरिटोनियल वसा के विपरीत, omental वसा ऊतकों पेरिटोनियल homeos में महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं, जो बी, टी, और एन.के. कोशिकाओं और मैक्रोफेज होते हैं, जो दूधिया धब्बे, के रूप में जाना असामान्य प्रतिरक्षा संरचनाओं में शामिलtasis 8,9। उनकी शारीरिक कार्यों के अलावा, हम दूधिया धब्बे या गर्भाशय के कैंसर मेटास्टेटिक उपनिवेशन 4 में एक सक्रिय भूमिका निभा पाया। तेजी से घर दूधिया स्पॉट करने के लिए या गर्भाशय के कैंसर की कोशिकाओं, कोशिकाओं एक secreted कीमोटैक्टिक कारक की ओर आगे बढ़ रहे हैं, सुझाव है कि; प्रयोगात्मक मेटास्टेसिस assays, SKOV3ip.1, CaOV3, और HeyA8 (मानव) और ID8 (C57BL 6 / murine) में। दिलचस्प है, कैंसर की कोशिकाओं को दूधिया स्पॉट (यानी, जननांगों और गर्भाशय वसा) 4 कमी पेरिटोनियल वसा उपनिवेश नहीं है। दूधिया मौके उपनिवेशन के विनियमन तंत्र की पहचान करने के लिए, हम मेटास्टेटिक उपनिवेशन 4 के समय के पाठ्यक्रम पर सेलुलर और आणविक घटनाओं से पूछताछ के लिए सक्षम है कि xenograft मॉडल अनुकूलित है। यहाँ बताया दृष्टिकोण का एक विशिष्ट लाभ पूरी तरह से विवो में एकीकृत और मीटर के पूर्व vivo मॉडल में उपयोगकर्ताओं परिकल्पना का परीक्षण करने के लिए सक्षम बनाता है जो ऊतक वास्तुकला और समारोह पर जोर है,etastatic उपनिवेशन 4,10। होते हैं या दूधिया धब्बे की कमी है, जो या तो पेरिटोनियल वसा डिपो में कैंसर सेल स्थानीयकरण और विकास की तुलना करके, जांचकर्ताओं दर्ज कराने और physiologically प्रासंगिक ऊतकों में या गर्भाशय के कैंसर कोशिकाओं के प्रगतिशील विकास के लिए दूधिया स्पॉट भीतर adipocytes और कोशिकाओं के रिश्तेदार योगदान (एस) का परीक्षण कर सकते हैं।

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Dissection Tools</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Geimsa</td>
			<td>Fluka/Sigma Aldrich</td>
			<td>48900</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5% Formalin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>HT501320</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Corning</td>
			<td>10-013-CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25200-056</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Corning</td>
			<td>21-040-CV</td>
			<td>Without calcium and Magnesium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>26 gauge needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>329652</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BSA</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A7906</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase</td>
			<td>Worthington</td>
			<td>LS004196</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stomacher</td>
			<td>Seward Labsystems</td>
			<td>Stomacher 80 Biomaster</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microstomacher bag</td>
			<td>Stomacher Lab Systems</td>
			<td>BA6040/Micro</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ACK Lysis Buffer</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>A10492-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Millicell culture plate insert</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>PICM01250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell-Tak</td>
			<td>BD</td>
			<td>354240</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vivo and ex vivo approaches to study ovarian cancer metastatic colonization of milky spot structures in peritoneal adipose

उच्च ग्रेड तरल डिम्बग्रंथि के कैंसर (HGSC), व्यापक पेरिटोनियल मेटास्टेसिस के कारण, एक अत्यंत गरीब पूर्वानुमान है जारी; महिलाओं के कम से कम 30% 5 साल के निदान के बाद जीवित हैं। वपा HGSC मेटास्टेसिस के गठन के लिए एक पसंदीदा स्थल है। इस microenvironment के नैदानिक ​​महत्व के बावजूद, डिम्बग्रंथि कैंसर की प्रगति के लिए omental वसा ऊतकों के योगदान understudied बनी हुई है। यह वाहिका के घने घोंसले आसपास के दूधिया बी, टी के शामिल हैं जो धब्बे, और एन.के. कोशिकाओं, मैक्रोफेज, और पूर्वज कोशिकाओं के रूप में जाना जाता संरचनाओं में शामिल है कि में omental वसा असामान्य है। दूधिया स्पॉट पेरिटोनियल समस्थिति के लिए आवश्यक हैं जो वपा की शारीरिक काम करता है, में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं। हम दूधिया धब्बे भी पेरिटोनियल वसा की या गर्भाशय के कैंसर मेटास्टेटिक उपनिवेशन, पेरिटोनियल मेटास्टेसिस के विकास में एक महत्वपूर्ण कदम को बढ़ावा देने के दिखाया है। यहाँ हम दृष्टिकोण हम मूल्यांकन करें और प्रति में दूधिया स्पॉट यों के लिए विकसित किया वर्णनवसा itoneal और इन विवो और पूर्व vivo में दोनों omental ऊतकों की डिम्बग्रंथि के कैंसर कोशिका मेटास्टेटिक उपनिवेशन को उनके कार्यात्मक योगदान का अध्ययन। इन तरीकों इस प्रकार व्यापक पेरिटोनियल मेटास्टेसिस के विकास के लिए दूधिया मौके संरचनाओं के लिए कोशिकाओं की प्रारंभिक स्थानीयकरण से या गर्भाशय के कैंसर मेटास्टेसिस गठन के अध्ययन को सक्षम, माउस मॉडल और सेल लाइनों के अतिरिक्त करने के लिए generalizable हैं।

पेरिटोनियल वसा डिपो की पहचान और histologic परीक्षा सकल शारीरिक विच्छेदन पेरिटोनियल वसा (चित्रा 1 ए) के पांच प्राथमिक स्रोतों में से चार की पहचान के लिए अनुमति देता है। शीर्ष केंद्र से ?...

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In Vivo and Ex Vivo Approaches to Study Ovarian Cancer Metastatic Colonization of Milky Spot Structures in Peritoneal Adipose

We outline a protocol that implements both in vivo and ex vivo approaches to study ovarian cancer colonization of peritoneal adipose tissues, particularly the omentum. Furthermore, we present a protocol to quantitate and analyze immune cell-structures in the omentum known as milky spots, which promote metastases of peritoneal adipose.

विवो और पूर्व vivo पेरिटोनियल वसा में दूधिया स्पॉट संरचनाएं की डिम्बग्रंथि के कैंसर Metastatic औपनिवेशीकरण अध्ययन के लिए दृष्टिकोण में

High-grade serous ovarian cancer (HGSC), the cause of widespread peritoneal metastases, continues to have an extremely poor prognosis; fewer than 30% of ...

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In Vivo and Ex Vivo Approaches to Study Ovarian Cancer Metastatic Colonization of Milky Spot Structures in Peritoneal Adipose

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