Name: viral-mediated labeling and transplantation of medial ganglionic eminence (mge) cells for in vivo studies
Uploaded: 2015-04-23T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Viral-mediated Labeling and Transplantation of Medial Ganglionic Eminence MGE Cells for In Vivo Studies at JoVE.com

وأيد هذا العمل من المنح المقدمة لJLRR من: التوحد يتحدث، نينا ايرلندا، مؤسسة الملاذات ويستون، NIMH R01 MH081880، وNIMH R37 MH049428. وأيد PRW من قبل زمالة من مجلس العلوم الوطني لتايوان. وأيد SFS التي كتبها F32 (MH103003).

بيان الأخلاق: وقد تمت الموافقة على الإجراءات التالية لدينا من قبل المؤسسة والحيوان البروتوكول. تأكد من الحصول على موافقة لجميع الإجراءات التي تنطوي على عملية جراحية البقاء على قيد الحياة قبل بداية التجارب والتحقق من جميع البروتوكولات هي حتى الآن. <p class="jove_title"...

<ol>
	<li>Huang, Z. J., Di Cristo, G., Ango, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+GABA+innervation+in+the+cerebral+and+cerebellar+cortices.">Development of GABA innervation in the cerebral and cerebellar cortices.</a> Nat. Rev. Neurosci. 8 (9), 673-686 (2007).</li><li>Rubenstein, J. L. R., Merzenich, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Model+of+autism:+increased+ratio+of+excitation/inhibition+in+key+neural+systems.">Model of autism: increased ratio of excitation/inhibition in key neural systems.</a> Genes, brain, and behavior. 2 (5), 255-267 (2003).</li><li>Anderson, S. A., Eisenstat, D. D., Shi, L., Rubenstein, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interneuron+migration+from+basal+forebrain+to+neocortex:+dependence+on+Dlx+genes.">Interneuron migration from basal forebrain to neocortex: dependence on Dlx genes.</a> Science. 278 (5337), 474-476 (1997).</li><li>Wonders, C. P., Anderson, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+origin+and+specification+of+cortical+interneurons.">The origin and specification of cortical interneurons.</a> Nat. Rev. Neurosci. 7 (9), 687-696 (2006).</li><li>Gelman, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Wide+Diversity+of+Cortical+GABAergic+Interneurons+Derives+from+the+Embryonic+Preoptic+Area.">A Wide Diversity of Cortical GABAergic Interneurons Derives from the Embryonic Preoptic Area.</a> J. Neurosci. 31 (46), 16570-16580 (2011).</li><li>Miyoshi, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+fate+mapping+reveals+that+the+caudal+ganglionic+eminence+produces+a+large+and+diverse+population+of+superficial+cortical+interneurons.">Genetic fate mapping reveals that the caudal ganglionic eminence produces a large and diverse population of superficial cortical interneurons.</a> J. Neurosci. 30 (5), 1582-1594 (2010).</li><li>Batista-Brito, R., Fishell, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+developmental+integration+of+cortical+interneurons+into+a+functional+network.">The developmental integration of cortical interneurons into a functional network.</a> Curr. Top. Dev. Bio. 87, 81-118 (2009).</li><li>Inan, M., Welagen, J., Anderson, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spatial+and+Temporal+Bias+in+the+Mitotic+Origins+of+Somatostatin.">Spatial and Temporal Bias in the Mitotic Origins of Somatostatin.</a> and Parvalbumin-Expressing Interneuron Subgroups and the Chandelier Subtype in the Medial Ganglionic. 22 (4), 820-827 (2012).</li><li>Taniguchi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Resource+of+Cre+Driver+Lines+for+Genetic+Targeting+of+GABAergic+Neurons+in+Cerebral+Cortex.">A Resource of Cre Driver Lines for Genetic Targeting of GABAergic Neurons in Cerebral Cortex.</a> Neuron. 71 (6), 995-1013 (2011).</li><li>Madisen, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+robust+and+high-throughput+Cre+reporting+and+characterization+system+for+the+whole+mouse+brain.">A robust and high-throughput Cre reporting and characterization system for the whole mouse brain.</a> Nature Neuroscience. 13 (1), 133-140 (2010).</li><li>Hippenmeyer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+developmental+switch+in+the+response+of+DRG+neurons+to+ETS+transcription+factor+signaling.">A developmental switch in the response of DRG neurons to ETS transcription factor signaling.</a> PLoS Bio. 3 (5), e159 (2005).</li><li>Southwell, D. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interneurons+from+embryonic+development+to+cell-based+therapy.">Interneurons from embryonic development to cell-based therapy.</a> Science. 344 (6180), 1240622 (2014).</li><li>Hunt, R. F., Girskis, K. M., Rubenstein, J. L., Alvarez-Buylla, A., Baraban, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=GABA+progenitors+grafted+into+the+adult+epileptic+brain+control+seizures+and+abnormal.">GABA progenitors grafted into the adult epileptic brain control seizures and abnormal.</a> Nature Neuroscience. 16 (6), 692-697 (2013).</li><li>Braz, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Forebrain+GABAergic+Neuron+Precursors+Integrate+into+Adult+Spinal+Cord+and+Reduce+Injury-Induced+Neuropathic+Pain.">Forebrain GABAergic Neuron Precursors Integrate into Adult Spinal Cord and Reduce Injury-Induced Neuropathic Pain.</a> Neuron. 74, 663-675 (2012).</li><li>Vogt, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lhx6+Directly+Regulates+Arx+and+CXCR7+to+Determine+Cortical+Interneuron+Fate+and+Laminar+Position.">Lhx6 Directly Regulates Arx and CXCR7 to Determine Cortical Interneuron Fate and Laminar Position.</a> Neuron. 82 (2), 350-364 (2014).</li><li>Alvarez-Dolado, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cortical+inhibition+modified+by+embryonic+neural+precursors+grafted+into+the+postnatal+brain.">Cortical inhibition modified by embryonic neural precursors grafted into the postnatal brain.</a> J. Neurosci. 26 (4), 7380-7389 (2006).</li><li>Du, T., Xu, Q., Ocbina, P. J., Anderson, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NKX2.1+specifies+cortical+interneuron+fate+by+activating+Lhx6.">NKX2.1 specifies cortical interneuron fate by activating Lhx6.</a> Development. 135 (8), 1559-1567 (2008).</li><li>Arguello, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dapper+Antagonist+of+Catenin-1+Cooperates+with+Dishevelled-1+during+Postsynaptic+Development+in+Mouse+Forebrain+GABAergic+Interneurons.">Dapper Antagonist of Catenin-1 Cooperates with Dishevelled-1 during Postsynaptic Development in Mouse Forebrain GABAergic Interneurons.</a> PLoS ONE. 8 (6), e67679 (2013).</li><li>Lee, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pyramidal+neurons+in+prefrontal+cortex+receive+subtype-specific+forms+of+excitation+and+inhibition.">Pyramidal neurons in prefrontal cortex receive subtype-specific forms of excitation and inhibition.</a> Neuron. 81 (1), 61-68 (2014).</li><li>Chen, Y. J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+&#8220;MGE+Enhancers&#8221;+for+Labeling+and+Selection+of+Embryonic+Stem+Cell-Derived+Medial+Ganglionic+Eminence+(MGE)+Progenitors+and+Neurons.">Use of &#8220;MGE Enhancers&#8221; for Labeling and Selection of Embryonic Stem Cell-Derived Medial Ganglionic Eminence (MGE) Progenitors and Neurons.</a> PLoS ONE. 8 (5), e61956 (2013).</li><li>Pattabiraman, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcriptional+regulation+of+enhancers+active+in+protodomains+of+the+developing+cerebral+cortex.">Transcriptional regulation of enhancers active in protodomains of the developing cerebral cortex.</a> Neuron. 82 (5), 989-1003 (2014).</li></ol>

استخدام GABAergic السلائف عصبون القشرية من الفضيلة العقدية الجنينية (غيس) للعلاجات الخلايا استنادا تبدو واعدة للعديد من الحالات 12 -1 4. وهناك حاجة إلى تقنيات جزيئية دقيقة لتتبع، والتعبير عن جينات الفائدة في مجموعات فرعية عصبون محددة. هنا نقدم بروتوكول مفصلة لوصفها ا...

تشمل GABAergic interneurons القشرية ~ 20-30٪ من الخلايا العصبية في القشرة المخية الحديثة الثدييات، في حين أن بقية تتوافق مع مثير، الخلايا العصبية الرئيسية glutamatergic. Interneurons ومتنوعة للغاية في الخصائص الكهربية، محور عصبي والتغصنات التشكل ومتشابك استهداف 1، وافترض الاختلالات في مثير لهجة / المثبطة لتكمن وراء بعض الظواهر من الاضطرابات العصبية والنفسية / العصبية بما في ذلك مرض التوحد والفصام والصرع 2. الهدف العام للبروتوكول الموصوفة هنا هو توفير وسيلة لتعديل بكفاءة وراثيا GABAergic الأسلاف عصبون القشرية قبل زرع في الجسم الحي التحليلات. ولدت interneurons القشرية GABAergic في الفضيلة العقدية وسطي والذيلية (MGE وفريق الخبراء الاستشاري، على التوالي) 3،4 وكذلك الباحة أمام البصرية 5. الأسلاف عصبون القشرية تخضع جاءت لمسافات طويلة الهجرة عرضيةالهجرة شعاعي للوصول إلى الأهداف النهائية. لدى وصولهم إلى وجهاتهم، يجب هذه interneurons القشرية تدمج بشكل صحيح في شبكة الخلايا العصبية الموجودة، وسيكون على كل عصبون فرعية فريدة تسهم في الدوائر القشرية بطرق محددة. أربع مجموعات فرعية رئيسية يمكن تمييزها بواسطة الواسمات الجزيئية: السوماتوستاتين MGE المشتقة (SST) + وparvalbumin (PV) + مجموعات فرعية، وفريق الخبراء الاستشاري المستمدة من الببتيد المعوي الفعال في الأوعية (VIP) + وريلين reelin +. SST - مجموعات فرعية 6. ولدت مختلفة مجموعات فرعية عصبون القشرية على أوقات مختلفة أثناء التطور الجنيني في MGE وفريق الخبراء الاستشاري 7 و 8. وقد استخدمت هذه وغيرها من القشرية GABAergic علامات عصبون لتوليد خطوط جنة المساواة العرقية سائق محددة للعديد من هذه المجموعات الفرعية 9-11. برزت زرع الأسلاف MGE كعلاج خلية القاعدة المحتملة لعلاج الاضطرابات التي قد تكون ناجمة عن اختلال التوازنفي الإثارة / تثبيط 12 - 24. قد تكون هذه الفوائد العلاجية يرجع ذلك جزئيا إلى قدرة فريدة من الأسلاف MGE (لتفريق، التفريق والاندماج في الدماغ المضيف)، أو يحتمل أن تكون لأنه يتم الحصول العديد من شبه جسدية PV المثبطة + الخلايا من MGE. خلايا MGE يمكن أن يكون أيضا بسرعة وكفاءة transduced مع lentiviruses قبل زرع 15، مما يسمح للخلايا التي يتم تعديلها وراثيا في المختبر ليتم دراستها في الجسم الحي. كان المبرر لتطوير هذا النهج للتغلب على الحواجز في دراسة GABAergic تطوير عصبون القشرية والنضج. على وجه الخصوص، يسمح زرع MGE الباحثين لدراسة تطوير خلايا متحولة في الجسم الحي، عندما الماوس متحولة، لولا ذلك لقوا حتفهم في نقطة الوقت المبكر. وعلاوة على ذلك، من خلال إدخال جينات من الفائدة قبل الزرع، يمكن تقييم آثار جينات معينة على النمط الظاهري متحولة في المؤسسة فكرةالطريقة icient. هنا، ونحن نقدم بروتوكول مفصلة لتنبيغ الخلايا MGE مع lentiviruses قبل الزرع. وبالإضافة إلى ذلك، وتبين لنا كيف يمكن تكييف هذه التقنية للتعبير عن الجينات في المصالح في مجموعات فرعية عصبون محددة من مجموعة غير متجانسة من السلائف عصبون القشرية، وذلك باستخدام مزيج من lentiviruses التعبير لجنة المساواة العرقية التي تعتمد على والمتاحة خطوط الماوس لجنة المساواة العرقية سائق. وعلاوة على ذلك، فإن هذا البروتوكول يقدم تقنيات ومنبرا للباحثين لتعديل وراثيا GABAergic السلائف عصبون القشرية لفي الدراسات المجراة بطريقة فريدة من نوعها. ميزة واحدة من هذه التقنية على النهج الحالية الأخرى هي أن الخلايا المزروعة MGE سوف تفريق بعيدا عن موقع الحقن. أيضا، على عكس الحقن الفيروسية التنسيق، بعد تفريق خلايا MGE التشكل هو أسهل لتقييم. هذا النهج يمكن أن تستخدم لدراسة تأثير إدخال جينات من الفائدة في النوع البري أو خلايا متحولة، وإدخال نوع من الخلايا المحددةمراسل لتقييم التشكل، أو يحتمل أن تكون لدراسة تأثير الأليلات المرض في الجسم الحي.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Reagents and equipment for MGE cell transplantation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 ml syringe</td>
			<td>REF 309602</td>
			<td colspan="2">BD, Becton Dickinson and company</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>301/2 gauge needle</td>
			<td>305106</td>
			<td colspan="2">BD, Becton Dickinson and company</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precision bore to deliver 5 &#181;l (comes with plunger)</td>
			<td>5-000-1005</td>
			<td colspan="2">Drummond scientific company</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parafilm</td>
			<td>PM-999</td>
			<td colspan="2">Polysciences, Inc.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo microscope with boomstand **</td>
			<td>MZ6</td>
			<td>Leica</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital just for mice stereotaxic instrument **</td>
			<td>51725D</td>
			<td colspan="2">Stoelting company</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Single-axis oil hydraulic fine micromanipulator **</td>
			<td>MO-10</td>
			<td>Narishige</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Diamond coated rotary beveler</td>
			<td>n.a.</td>
			<td colspan="2">made in house</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle pipette puller</td>
			<td>730</td>
			<td colspan="2">Kopf instruments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mineral oil</td>
			<td>n.a.</td>
			<td colspan="2">Any drug store or pharmacy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="2">Any pipette and tips that can reliaby measure 1 &#181;l of volume</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="2">** These are the particular models we use, but many other setups should work</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Optional Reagents (for making Lentiviruses)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25 mm, 0.45 &#181;m filter</td>
			<td>09-719B</td>
			<td colspan="2">Fisher Scientific</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra-clear centrifuge tubes (25 x 89 mm)</td>
			<td>344058</td>
			<td colspan="2">Beckman Coulter&#174;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipofectamine 2000 (1.5 ml size)</td>
			<td>11668019</td>
			<td colspan="2">Invitrogen</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Other commercially available supplies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pMDLg/pRRE plasmid encoding gag/pol</td>
			<td>12251</td>
			<td>Addgene</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pRSV-Rev plasmid encoding Rev</td>
			<td>12253</td>
			<td>Addgene</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pMD2.G plasmid encoding VSVG</td>
			<td>12259</td>
			<td>Addgene</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pAAV-Flex-GFP</td>
			<td>28304</td>
			<td>Addgene</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

viral-mediated labeling and transplantation of medial ganglionic eminence (mge) cells for in vivo studies

GABAergic interneurons القشرية، والمستمدة من الإنسي الجنينية والفضيلة العقدية الذيلية (MGE وفريق الخبراء الاستشاري)، وظيفيا ومتنوعة شكليا. من إحراز تقدم في فهم أدوار متميزة مجموعات فرعية عصبون القشرية، ومع ذلك، لا يزال هناك العديد من الآليات التي عملت بها التي قد تسهم في تطوير ونضوج أنواع مختلفة من الخلايا GABAergic. وعلاوة على ذلك، يمكن أن تسهم تغيير GABAergic يشير إلى الظواهر التوحد والفصام والصرع. وقد بدأت لجنة المساواة العرقية خطوط سائق محددة للا يتجزأ من مهام فرعية عصبون فريدة من نوعها. وعلى الرغم من التقدم في نماذج الماوس، غالبا ما يكون من الصعب دراسة GABAergic الأسلاف عصبون القشرية بكفاءة مع النهج الجزيئية في الجسم الحي. أسلوب واحد الهامة المستخدمة لدراسة الخلية البرمجة مستقلة من هذه الخلايا هي زرع الخلايا MGE إلى القشور المضيف. هذه الخلايا المزروعة تهاجر على نطاق واسع، تمييز، وهوالثانية دمج وظيفيا. وبالإضافة إلى ذلك، وخلايا MGE يمكن transduced بكفاءة مع الفيروسة البطيئة السابقة على الفور لزراعة الأعضاء، مما يسمح للعديد من الأساليب الجزيئية. نحن هنا بالتفصيل بروتوكول لتنبيغ الخلايا MGE بكفاءة قبل زرع في الجسم الحي التحليل، وذلك باستخدام خطوط جنة المساواة العرقية سائق المتاحة وناقلات التعبير لجنة المساواة العرقية التي تعتمد على. هذا النهج هو مفيد لأنه يجمع بين التلاعب الجيني الدقيق مع قدرة هذه الخلايا لتفريق بعد الزرع، والسماح بمزيد من قرار معين الخلية من نوع في الجسم الحي.

منذ خلايا MGE لديها قدرة فريدة على الهجرة والاندماج عندما زرعها في القشرة المخية الحديثة المضيف 16، لأنها توفر نظام نموذجا ممتازا للتلاعب الجيني قبل الدراسات في الجسم الحي. هنا، وتبين لنا كيف يمكن للمرء أن عزل الأنسجة MGE من أجنة E13.5 (الشكلان 1 و 2)، وال...

Watch this Scientific Journal Video about Viral-mediated Labeling and Transplantation of Medial Ganglionic Eminence MGE Cells for In Vivo Studies at JoVE.com

Viral-mediated Labeling and Transplantation of Medial Ganglionic Eminence MGE Cells for In Vivo Studies

GABAergic الأسلاف عصبون القشرية تفريق وتطوير وsynaptically الاندماج في القشرة المضيف بعد الزرع. هذه الخلايا يمكن transduced بسهولة قبل الزرع لفي الدراسات المجراة السلائف GABAergic المعدلة وراثيا. هنا، وتبين لنا تقنيات وضع العلامات الفيروسية لاستهداف مجموعات فرعية عصبون محددة باستخدام خطوط جنة المساواة العرقية القائمة وصحفيين لجنة المساواة العرقية التي تعتمد على.

وصفها والفيروسية بوساطة زرع الإنسي العقدية سماحة (MGE) خلايا ل<em&gt; في فيفو</em&gt; دراسات

GABAergic cortical interneurons, derived from the embryonic medial and caudal ganglionic eminences (MGE and CGE), are functionally and morphologically ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Viral-mediated Labeling and Transplantation of Medial Ganglionic Eminence (MGE) Cells for In Vivo Studies

An Efficient Method to Obtain Dedifferentiated Fat Cells

وسيلة فعالة للحصول على خلايا Dedifferentiated الدهون

Tissue engineering and cell therapy hold great promise clinically. In this regard, multipotent cells, such as mesenchymal stem cells (MSCs), may be used ...

Structure-function Studies in Mouse Embryonic Stem Cells Using Recombinase-mediated Cassette Exchange

الدراسات هيكل الوظائف في الخلايا الجذعية الجنينية الماوس عن طريق بوساطة Recombinase-كاسيت تبادل

Gene engineering in mouse embryos or embryonic stem cells (mESCs) allows for the study of the function of a given protein. Proteins are the workhorses of ...

Whole-cell Patch-clamp Recordings of Isolated Primary Epithelial Cells from the Epididymis

خلية كاملة التصحيح المشبك تسجيلات من الخلايا الظهارية الأولية المعزولة من البربخ

The epididymis is an essential organ for sperm maturation and reproductive health. The epididymal epithelium consists of intricately connected cell types ...

A Novel Mammary Fat Pad Transplantation Technique to Visualize the Vessel Generation of Vascular Endothelial Stem Cells

تقنية زرع الثدي الثديية الرواية جديدة لتصور الجيل سفينة من الخلايا الجذعية البطانية الأوعية الدموية

Endothelial cells (ECs) are the fundamental building blocks of the vascular architecture and mediate vascular growth and remodeling to ensure proper ...

Horizontal Whole Mount: A Novel Processing and Imaging Protocol for Thick, Three-dimensional Tissue Cross-sections of Skin

أفقي جبل كامل: A معالجة الرواية والتصوير بروتوكول للثدي، ثلاثة-- الأبعاد الأنسجة عبر-- أقسام الجلد

Processing a tissue of interest to generate a microscopic image that supports a scientific argument can be challenging. The acquisition of high-quality ...

Immuno-fluorescent Labeling of Microtubules and Centrosomal Proteins in Ex Vivo Intestinal Tissue and 3D In Vitro Intestinal Organoids

Immuno-fluorescent Labeling of Microtubules and Centrosomal Proteins in Ex Vivo Intestinal Tissue and 3D In Vitro Intestinal Organoids

وسم المناعية-فلوري Microtubules والبروتينات سينتروسومال في 3D في المختبر أورجانويدس الأمعاء والأنسجة المعوية السابقين فيفو

The advent of 3D in vitro organoids that mimic the in vivo tissue architecture and morphogenesis has greatly advanced the ability to study key biological ...

Single-cell Photoconversion in Living Intact Zebrafish

فوتوكونفيرسيون خلية واحدة في معيشة سليمة الزرد

Animal and plant tissue is composed of distinct populations of cells. These cells interact over time to build and maintain the tissue and can cause ...

Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

التحليل الحسابي ل Germline ايليجانس كاينورهابديتيس دراسة توزيع الأنوية، والبروتينات، وسيتوسكيليتون

The Caenorhabditis elegans (C. elegans) germline is used to study several biologically important processes including stem cell development, apoptosis, and ...

Single-cell Transcriptomic Analyses of Mouse Pancreatic Endocrine Cells

تحليلات ترانسكريبتوميك خلية واحدة من خلايا الغدد الصماء البنكرياس الماوس

Pancreatic endocrine cells, which are clustered in islets, regulate blood glucose stability and energy metabolism. The distinct cell types in islets, ...

Intravenous and Intra-amniotic In Utero Transplantation in the Murine Model

Intravenous and Intra-amniotic In Utero Transplantation in the Murine Model

عن طريق الحقن الوريدي وداخل السلي في الرحم زرع في نموذج مورين

In utero transplantation (IUT) is a unique and versatile mode of therapy that can be used to introduce stem cells, viral vectors, or any other substances ...