Name: viral-mediated labeling and transplantation of medial ganglionic eminence (mge) cells for in vivo studies
Uploaded: 2015-04-23T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Viral-mediated Labeling and Transplantation of Medial Ganglionic Eminence MGE Cells for In Vivo Studies at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet med tilskudd til JLRR fra: Autism Speaks, Nina Irland, Weston Havens Foundation, NIMH R01 MH081880, og NIMH R37 MH049428. PRW ble støttet av et fellesskap fra National Science Council of Taiwan. SFS ble støttet av F32 (MH103003).

Etikk uttalelse: Følgende prosedyrer er godkjent av vår institusjon og dyr protokollen. Sørg for å få godkjenning for alle prosedyrer som involverer overlevelses operasjoner før du begynner eksperimenter og kontrollere alle protokoller er oppdatert. 1. Lentivirus Forberedelse (valgfritt trinn) <ol><li> Delt i tre 10 cm plater av HEK293T celler for hver lentivirus å bli gjort, i nærvær av 10 ml DMEM / 10% FBS, og vokse til ~ 60-70% konfluens. Dyrke cellene i en inkubator v...

<ol>
	<li>Huang, Z. J., Di Cristo, G., Ango, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+GABA+innervation+in+the+cerebral+and+cerebellar+cortices.">Development of GABA innervation in the cerebral and cerebellar cortices.</a> Nat. Rev. Neurosci. 8 (9), 673-686 (2007).</li><li>Rubenstein, J. L. R., Merzenich, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Model+of+autism:+increased+ratio+of+excitation/inhibition+in+key+neural+systems.">Model of autism: increased ratio of excitation/inhibition in key neural systems.</a> Genes, brain, and behavior. 2 (5), 255-267 (2003).</li><li>Anderson, S. A., Eisenstat, D. D., Shi, L., Rubenstein, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interneuron+migration+from+basal+forebrain+to+neocortex:+dependence+on+Dlx+genes.">Interneuron migration from basal forebrain to neocortex: dependence on Dlx genes.</a> Science. 278 (5337), 474-476 (1997).</li><li>Wonders, C. P., Anderson, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+origin+and+specification+of+cortical+interneurons.">The origin and specification of cortical interneurons.</a> Nat. Rev. Neurosci. 7 (9), 687-696 (2006).</li><li>Gelman, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Wide+Diversity+of+Cortical+GABAergic+Interneurons+Derives+from+the+Embryonic+Preoptic+Area.">A Wide Diversity of Cortical GABAergic Interneurons Derives from the Embryonic Preoptic Area.</a> J. Neurosci. 31 (46), 16570-16580 (2011).</li><li>Miyoshi, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+fate+mapping+reveals+that+the+caudal+ganglionic+eminence+produces+a+large+and+diverse+population+of+superficial+cortical+interneurons.">Genetic fate mapping reveals that the caudal ganglionic eminence produces a large and diverse population of superficial cortical interneurons.</a> J. Neurosci. 30 (5), 1582-1594 (2010).</li><li>Batista-Brito, R., Fishell, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+developmental+integration+of+cortical+interneurons+into+a+functional+network.">The developmental integration of cortical interneurons into a functional network.</a> Curr. Top. Dev. Bio. 87, 81-118 (2009).</li><li>Inan, M., Welagen, J., Anderson, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spatial+and+Temporal+Bias+in+the+Mitotic+Origins+of+Somatostatin.">Spatial and Temporal Bias in the Mitotic Origins of Somatostatin.</a> and Parvalbumin-Expressing Interneuron Subgroups and the Chandelier Subtype in the Medial Ganglionic. 22 (4), 820-827 (2012).</li><li>Taniguchi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Resource+of+Cre+Driver+Lines+for+Genetic+Targeting+of+GABAergic+Neurons+in+Cerebral+Cortex.">A Resource of Cre Driver Lines for Genetic Targeting of GABAergic Neurons in Cerebral Cortex.</a> Neuron. 71 (6), 995-1013 (2011).</li><li>Madisen, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+robust+and+high-throughput+Cre+reporting+and+characterization+system+for+the+whole+mouse+brain.">A robust and high-throughput Cre reporting and characterization system for the whole mouse brain.</a> Nature Neuroscience. 13 (1), 133-140 (2010).</li><li>Hippenmeyer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+developmental+switch+in+the+response+of+DRG+neurons+to+ETS+transcription+factor+signaling.">A developmental switch in the response of DRG neurons to ETS transcription factor signaling.</a> PLoS Bio. 3 (5), e159 (2005).</li><li>Southwell, D. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interneurons+from+embryonic+development+to+cell-based+therapy.">Interneurons from embryonic development to cell-based therapy.</a> Science. 344 (6180), 1240622 (2014).</li><li>Hunt, R. F., Girskis, K. M., Rubenstein, J. L., Alvarez-Buylla, A., Baraban, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=GABA+progenitors+grafted+into+the+adult+epileptic+brain+control+seizures+and+abnormal.">GABA progenitors grafted into the adult epileptic brain control seizures and abnormal.</a> Nature Neuroscience. 16 (6), 692-697 (2013).</li><li>Braz, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Forebrain+GABAergic+Neuron+Precursors+Integrate+into+Adult+Spinal+Cord+and+Reduce+Injury-Induced+Neuropathic+Pain.">Forebrain GABAergic Neuron Precursors Integrate into Adult Spinal Cord and Reduce Injury-Induced Neuropathic Pain.</a> Neuron. 74, 663-675 (2012).</li><li>Vogt, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lhx6+Directly+Regulates+Arx+and+CXCR7+to+Determine+Cortical+Interneuron+Fate+and+Laminar+Position.">Lhx6 Directly Regulates Arx and CXCR7 to Determine Cortical Interneuron Fate and Laminar Position.</a> Neuron. 82 (2), 350-364 (2014).</li><li>Alvarez-Dolado, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cortical+inhibition+modified+by+embryonic+neural+precursors+grafted+into+the+postnatal+brain.">Cortical inhibition modified by embryonic neural precursors grafted into the postnatal brain.</a> J. Neurosci. 26 (4), 7380-7389 (2006).</li><li>Du, T., Xu, Q., Ocbina, P. J., Anderson, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NKX2.1+specifies+cortical+interneuron+fate+by+activating+Lhx6.">NKX2.1 specifies cortical interneuron fate by activating Lhx6.</a> Development. 135 (8), 1559-1567 (2008).</li><li>Arguello, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dapper+Antagonist+of+Catenin-1+Cooperates+with+Dishevelled-1+during+Postsynaptic+Development+in+Mouse+Forebrain+GABAergic+Interneurons.">Dapper Antagonist of Catenin-1 Cooperates with Dishevelled-1 during Postsynaptic Development in Mouse Forebrain GABAergic Interneurons.</a> PLoS ONE. 8 (6), e67679 (2013).</li><li>Lee, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pyramidal+neurons+in+prefrontal+cortex+receive+subtype-specific+forms+of+excitation+and+inhibition.">Pyramidal neurons in prefrontal cortex receive subtype-specific forms of excitation and inhibition.</a> Neuron. 81 (1), 61-68 (2014).</li><li>Chen, Y. J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+&#8220;MGE+Enhancers&#8221;+for+Labeling+and+Selection+of+Embryonic+Stem+Cell-Derived+Medial+Ganglionic+Eminence+(MGE)+Progenitors+and+Neurons.">Use of &#8220;MGE Enhancers&#8221; for Labeling and Selection of Embryonic Stem Cell-Derived Medial Ganglionic Eminence (MGE) Progenitors and Neurons.</a> PLoS ONE. 8 (5), e61956 (2013).</li><li>Pattabiraman, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcriptional+regulation+of+enhancers+active+in+protodomains+of+the+developing+cerebral+cortex.">Transcriptional regulation of enhancers active in protodomains of the developing cerebral cortex.</a> Neuron. 82 (5), 989-1003 (2014).</li></ol>

Bruken av gabaergic kortikal Interneuron forløpere fra embryonale ganglieblokkere eminenser (GES) for cellebasert terapi viser lovende for mange forhold 12 -1 4. Presise molekylære teknikker for å spore, og uttrykke gener av interesse i bestemte Interneuron undergrupper. Her har vi gi en detaljert protokoll for merking embryonale MGE celler med lentivirus før transplantasjon, og viser hvordan denne teknikken kan brukes til å uttrykke gener som er av interesse i spesielle Interneuron undergrupper kortikal...

Gabaergic kortikale interneuroner omfatter ~ 20-30% av nevroner i pattedyr neocortex, mens resten svarer til eksitatoriske, glutamaterge viktigste nevroner. Interneuroner er svært forskjellige i elektrofysiologisk egenskaper, axon og dendrite morfologi og synaptic målretting en, og ubalanser i eksitatorisk / hemmende tone er antatt å ligge til grunn noen fenotyper av nevrologiske / nevropsykiatriske lidelser, inkludert autisme, schizofreni og epilepsi 2. Det overordnede målet i protokollen beskrevet her er å gi et middel for å effektivt genmodifisere gabaergic kortikale Interneuron stamfedre før transplantasjon for in vivo analyser. Kortikal gabaergic interneuroner er født i mediale og caudal ganglieblokkere eminenser (MGE og CGE, henholdsvis) 3,4 samt preoptic område 5. Kortikale Interneuron stamfedre gjennomgå langdistanse tangential migrasjon fulgtved radial migrasjon for å nå sine endelige mål. Ved ankomst til sine destinasjoner, må disse kortikale interneuroner riktig integrere i eksisterende nevronale nettverk, og hver unike interneuron undergruppe vil bidra til kortikal kretser på bestemte måter. Fire hoved undergrupper kan være preget av molekylære markører: MGE-avledet somatostatin (SST) + og parvalbumin (PV) + undergrupper, og CGE-avledet vasoaktive intestinal peptid (VIP) + og Reelin +; SST - undergrupper 6. Ulike Interneuron undergrupper kortikale er født over forskjellige tider under embryonal utvikling i MGE og CGE 7, 8. Disse og andre kortikale gabaergic Interneuron markører har blitt brukt til å generere spesifikke Cre-driver linjer for mange av disse undergruppene 9-11. Transplantasjon av MGE stamfedre har dukket opp som en potensiell cellebasert terapi for å behandle lidelser som kan være forårsaket av ubalanseri eksitasjon / hemming 12-24. Disse terapeutiske fordeler kan skyldes delvis den unike evnen til MGE stamfedre (å spre seg, differensiere og integrere i en rekke hjernen), eller potensielt fordi mange peri-somatiske hemmende PV + celler er utledet fra MGE. MGE celler kan også være raskt og effektivt transdusert med lentivirus før transplantasjon 15, slik at celler som er genetisk modifisert in vitro for å bli studert in vivo. Begrunnelsen for å utvikle denne tilnærmingen var å overvinne veisperringer i å studere GABAergic kortikal interneuron utvikling og modning. Spesielt MGE transplantasjon tillates forskere for å studere utviklingen av mutante celler in vivo, når den mutante mus ellers ville ha dødd på et tidlig tidspunkt. Videre, ved innføring av gener som er av interesse før transplantasjon, virkningene av spesifikke gener på en mutant fenotype kan bli vurdert i en efficient måte. Her gir vi en detaljert protokoll for å transduce MGE celler med lentiviruses før transplantasjon. I tillegg viser vi hvordan denne teknikken kan tilpasses til å uttrykke et gen av interesse i bestemte Interneuron undergrupper fra en heterogen gruppe av cortical Interneuron forløpere, ved hjelp av en kombinasjon av Cre-avhengige uttrykk lentiviruses og tilgjengelige Cre-driver mus linjer. Dessuten introduserer denne protokollen teknikker og en plattform for forskere å genmodifisere gabaergic kortikal Interneuron forløpere for in vivo studier på en unik måte. En fordel med denne teknikken fremfor andre nåværende metoder er at de transplanterte cellene MGE vil spre seg borte fra injeksjonsstedet. Også, i motsetning fokale virale injeksjoner, etter MGE celler spre deres morfologi er lettere å vurdere. Denne tilnærmingen kan brukes for å studere effekten av innføring av gener som er av interesse inn i villtype eller mutante celler, innføring av en celletype spesifikkreporter for å vurdere morfologi, eller eventuelt for å studere effekten av sykdoms alleler in vivo.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Reagents and equipment for MGE cell transplantation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 ml syringe</td>
			<td>REF 309602</td>
			<td colspan="2">BD, Becton Dickinson and company</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>301/2 gauge needle</td>
			<td>305106</td>
			<td colspan="2">BD, Becton Dickinson and company</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precision bore to deliver 5 &#181;l (comes with plunger)</td>
			<td>5-000-1005</td>
			<td colspan="2">Drummond scientific company</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parafilm</td>
			<td>PM-999</td>
			<td colspan="2">Polysciences, Inc.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo microscope with boomstand **</td>
			<td>MZ6</td>
			<td>Leica</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital just for mice stereotaxic instrument **</td>
			<td>51725D</td>
			<td colspan="2">Stoelting company</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Single-axis oil hydraulic fine micromanipulator **</td>
			<td>MO-10</td>
			<td>Narishige</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Diamond coated rotary beveler</td>
			<td>n.a.</td>
			<td colspan="2">made in house</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle pipette puller</td>
			<td>730</td>
			<td colspan="2">Kopf instruments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mineral oil</td>
			<td>n.a.</td>
			<td colspan="2">Any drug store or pharmacy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="2">Any pipette and tips that can reliaby measure 1 &#181;l of volume</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="2">** These are the particular models we use, but many other setups should work</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Optional Reagents (for making Lentiviruses)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25 mm, 0.45 &#181;m filter</td>
			<td>09-719B</td>
			<td colspan="2">Fisher Scientific</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra-clear centrifuge tubes (25 x 89 mm)</td>
			<td>344058</td>
			<td colspan="2">Beckman Coulter&#174;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipofectamine 2000 (1.5 ml size)</td>
			<td>11668019</td>
			<td colspan="2">Invitrogen</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Other commercially available supplies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pMDLg/pRRE plasmid encoding gag/pol</td>
			<td>12251</td>
			<td>Addgene</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pRSV-Rev plasmid encoding Rev</td>
			<td>12253</td>
			<td>Addgene</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pMD2.G plasmid encoding VSVG</td>
			<td>12259</td>
			<td>Addgene</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pAAV-Flex-GFP</td>
			<td>28304</td>
			<td>Addgene</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

viral-mediated labeling and transplantation of medial ganglionic eminence (mge) cells for in vivo studies

Gabaergic kortikale interneuroner, avledet fra embryonale mediale og caudal ganglieblokkere eminenser (MGE og CGE), er funksjonelt og morfologisk mangfoldig. Innhugg har blitt gjort i å forstå rollene til forskjellige Interneuron undergrupper bark, men det er fortsatt mange mekanismer for å bli jobbet ut som kan bidra til utvikling og modning av ulike typer gabaergic celler. Videre kan forandres GABAergic signale bidra til fenotyper av autisme, schizofreni og epilepsi. Spesifikke Cre-driver linjer har begynt funksjonene til unike Interneuron undergrupper å pakke ut. Til tross for fremskritt i musemodeller, er det ofte vanskelig å effektivt studere gabaergic kortikal Interneuron stamfedre med molekylære metoder in vivo. En viktig teknikk som brukes for å undersøke celleautonome programmering av disse cellene er transplantasjon av MGE celler i vertsekser. Disse transplanterte cellene vandrer mye, differensiere, ennd funksjonelt integrere. I tillegg kan MGE celler effektivt transdusert med lentivirus umiddelbart før transplantasjonen, slik at for et mangfold av molekylære tilnærminger. Her har vi detalj en protokoll for å effektivt transduce MGE celler før transplantasjon for in vivo analyse, ved hjelp av tilgjengelige Cre-driver linjer og Cre-avhengige ekspresjonsvektorene. Denne fremgangsmåten er fordelaktig fordi den kombinerer nøyaktig genetisk manipulasjon med evnen til disse cellene for å dispergere etter transplantasjonen, hvilket tillater større celletype spesifikk oppløsning in vivo.

Siden MGE celler har en unik evne til å migrere og integrere når transplantert inn en rekke neocortex 16, de gir en utmerket modellsystem for genetisk manipulasjon før in vivo studier. Heri viser vi hvordan man kan isolere MGE vev fra E13.5 embryoer (figur 1 og 2), som deretter kan bli transdusert med lentivirus, enten in vitro eller in en hurtig måte før transplantasjon for in vivo-studier. Merking MGE via lentiviruses er utført før du bruker en for...

Watch this Scientific Journal Video about Viral-mediated Labeling and Transplantation of Medial Ganglionic Eminence MGE Cells for In Vivo Studies at JoVE.com

Viral-mediated Labeling and Transplantation of Medial Ganglionic Eminence MGE Cells for In Vivo Studies

Gabaergic kortikal Interneuron stamfedre spre seg, utvikle og postsynaptisk integrere i en verts cortex etter transplantasjon. Disse cellene kan lett omformet før transplantasjon for in vivo studier av genmodifiserte gabaergic forløpere. Her viser vi viral merking teknikker for å målrette bestemte Interneuron undergrupper ved hjelp av eksisterende Grobunn linjer og Cre-avhengige journalister.

Viral-mediert Merking og transplantasjon av Medial ganglieblokkere Eminence (MGE) Cells for<em&gt; I Vivo</em&gt; Studier

GABAergic cortical interneurons, derived from the embryonic medial and caudal ganglionic eminences (MGE and CGE), are functionally and morphologically ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Viral-mediated Labeling and Transplantation of Medial Ganglionic Eminence (MGE) Cells for In Vivo Studies

An Efficient Method to Obtain Dedifferentiated Fat Cells

En effektiv metode for å få dedifferensierte fettcellene

Tissue engineering and cell therapy hold great promise clinically. In this regard, multipotent cells, such as mesenchymal stem cells (MSCs), may be used ...

Structure-function Studies in Mouse Embryonic Stem Cells Using Recombinase-mediated Cassette Exchange

Struktur-funksjon studier i mus embryonale stamceller Bruke recombinase-mediert Cassette Veksling

Gene engineering in mouse embryos or embryonic stem cells (mESCs) allows for the study of the function of a given protein. Proteins are the workhorses of ...

Whole-cell Patch-clamp Recordings of Isolated Primary Epithelial Cells from the Epididymis

Hele-celle Patch-clamp Opptak av isolerte primære epitelceller fra epididymene

The epididymis is an essential organ for sperm maturation and reproductive health. The epididymal epithelium consists of intricately connected cell types ...

A Novel Mammary Fat Pad Transplantation Technique to Visualize the Vessel Generation of Vascular Endothelial Stem Cells

En ny mammarfettpute-transplantasjonsteknikk for å visualisere fartøygenerering av vaskulære endotelceller

Endothelial cells (ECs) are the fundamental building blocks of the vascular architecture and mediate vascular growth and remodeling to ensure proper ...

Horizontal Whole Mount: A Novel Processing and Imaging Protocol for Thick, Three-dimensional Tissue Cross-sections of Skin

Horisontal helmontering: En romanbehandlings- og bildeprotokoll for tykke, tredimensjonale vev Tverrsnitt av huden

Processing a tissue of interest to generate a microscopic image that supports a scientific argument can be challenging. The acquisition of high-quality ...

Immuno-fluorescent Labeling of Microtubules and Centrosomal Proteins in Ex Vivo Intestinal Tissue and 3D In Vitro Intestinal Organoids

Immuno-fluorescent Labeling of Microtubules and Centrosomal Proteins in Ex Vivo Intestinal Tissue and 3D In Vitro Intestinal Organoids

Immuno-fluorescerende merking av piskehale som henger og Centrosomal proteiner i Ex Vivo tarmen Tissue og 3D In Vitro Intestinal Organoids

The advent of 3D in vitro organoids that mimic the in vivo tissue architecture and morphogenesis has greatly advanced the ability to study key biological ...

Single-cell Photoconversion in Living Intact Zebrafish

Encellede Photoconversion i levende intakt sebrafisk

Animal and plant tissue is composed of distinct populations of cells. These cells interact over time to build and maintain the tissue and can cause ...

Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

Beregningsorientert analyse av Caenorhabditis elegans Germline å studere distribusjon av kjerner, proteiner og Cytoskeleton

The Caenorhabditis elegans (C. elegans) germline is used to study several biologically important processes including stem cell development, apoptosis, and ...

Single-cell Transcriptomic Analyses of Mouse Pancreatic Endocrine Cells

Encellede Transcriptomic analyser av musen bukspyttkjertelen endokrine celler

Pancreatic endocrine cells, which are clustered in islets, regulate blood glucose stability and energy metabolism. The distinct cell types in islets, ...

Intravenous and Intra-amniotic In Utero Transplantation in the Murine Model

Intravenous and Intra-amniotic In Utero Transplantation in the Murine Model

Intravenøs og Intra-amniotic In Utero transplantasjon i Murine modellen

In utero transplantation (IUT) is a unique and versatile mode of therapy that can be used to introduce stem cells, viral vectors, or any other substances ...