Name: real-time x-ray imaging of lung fluid volumes in neonatal mouse lung
Uploaded: 2016-07-18T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Real-time X-ray Imaging of Lung Fluid Volumes in Neonatal Mouse Lung at JoVE.com

This work is supported by a grant awarded to MNH by Children's Healthcare of Atlanta, the APS 2014 Short-Term Research Education Program to Increase Diversity in Health-Related Research (STRIDE) fellowship awarded to PT, and the University of Notre Dame Integrated Imaging Facility.

يجب أن تتم جميع التقنيات التجريبية وفقا للمبادئ التوجيهية الرعاية المؤسسية واللجنة الاستخدام. 1. الأشعة السينية التصوير اكتساب <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> برنامج نظرة عامة (انظر الشكل 1 لمحة عامة عن إعد?...

<ol>
	<li>Institute of Laboratory Animal Resources. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. , (2011).</li><li>Helms, M. N., Torres-Gonzalez, E., Goodson, P., Rojas, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+tracheal+instillation+of+solutes+into+mouse+lung.">Direct tracheal instillation of solutes into mouse lung.</a> J Vis Exp. , (2010).</li><li>Hilgendorff, A., Reiss, I., Ehrhardt, H., Eickelberg, O., Alvira, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+lung+disease+in+the+preterm+infant.+Lessons+learned+from+animal+models.">Chronic lung disease in the preterm infant. Lessons learned from animal models.</a> Am J Respir Cell Mol Biol. 50, 233-245 (2014).</li><li>Goodson, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nadph+oxidase+regulates+alveolar+epithelial+sodium+channel+activity+and+lung+fluid+balance+in+vivo+via+O2-+signaling.">Nadph oxidase regulates alveolar epithelial sodium channel activity and lung fluid balance in vivo via O2- signaling.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 302, L410-L419 (2012).</li><li>McNeilly, T. N., Tennant, P., Lujan, L., Perez, M., Harkiss, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+infection+efficiencies+of+peripheral+lung+and+tracheal+tissues+in+sheep+infected+with+Visna/maedi+virus+via+the+respiratory+tract.">Differential infection efficiencies of peripheral lung and tracheal tissues in sheep infected with Visna/maedi virus via the respiratory tract.</a> J Gen Virol. 88, 670-679 (2007).</li><li>Starcher, B., Williams, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+for+intratracheal+instillation+of+endotoxin+into+the+lungs+of+mice.">A method for intratracheal instillation of endotoxin into the lungs of mice.</a> Lab Anim. 23, 234-240 (1989).</li><li>Downs, C. A., Kumar, A., Kreiner, L. H., Johnson, N. M., Helms, M. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=H2O2+regulates+lung+ENaC+via+ubiquitin-like+protein+Nedd8.">H2O2 regulates lung ENaC via ubiquitin-like protein Nedd8.</a> J Biol Chem. 288, 8136-8145 (2013).</li><li>Gammon, S. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+anatomical,+molecular,+and+functional+imaging+of+the+lung+with+multiple+modalities.">Preclinical anatomical, molecular, and functional imaging of the lung with multiple modalities.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 306, L897-L914 (2014).</li><li>Takemura, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cholinergic+regulation+of+epithelial+sodium+channels+in+rat+alveolar+type+2+epithelial+cells.">Cholinergic regulation of epithelial sodium channels in rat alveolar type 2 epithelial cells.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 304, L428-L437 (2013).</li><li>Lewis, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+imaging+of+the+lungs+using+x-ray+phase+contrast.">Dynamic imaging of the lungs using x-ray phase contrast.</a> Phys Med Biol. 50, 5031-5040 (2005).</li><li>Nyren, S., Radell, P., Mure, M., Petersson, J., Jacobsson, H., Lindahl, S. G., Sanchez-Crespo, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhalation+anesthesia+increases+V/Q+heterogeneity+during+spontaneous+breathing+in+healthy+subjects.">Inhalation anesthesia increases V/Q heterogeneity during spontaneous breathing in healthy subjects.</a> Anesthesiology. 113 (6), 1370-1375 (2010).</li></ol>

باستخدام التصوير بالأشعة السينية، صور واضحة من الرئتين حديثي الولادة يمكن تحليلها لكميات السوائل في الرئة. نحن 7،3،11، والبعض الآخر 10، وقد استخدمت بنجاح التصوير بالأشعة السينية لتحديد التغيرات الديناميكية في حجم السوائل في الرئة في نماذج حيوانية بحرية ا?...

عند الولادة، يجب الرئة حديثي الولادة الانتقال من إفراز السائل لجهاز امتصاص ثانية السوائل لإنشاء التهوية الكافية والأوكسجين في الجسم. لا تزال الآليات التي تيسر (أو يعرقل) إزالة فعالية من السائل الرئة في وقت ولادة غير واضحة. والنمذجة من معدل إزالة السوائل السنخية في C57BL / 6 الجراء الماوس حديثي الولادة يؤدي إلى فهم أفضل للعوامل التنظيمية التي يمكن أن تعزز أو تخفف من معدل امتصاص السوائل. ويمكن أيضا أن يتم تطبيقه على نماذج الوليدية الأخرى من إصابة الرئة الحادة أو العدوى، ويمكن أن يؤدي إلى استراتيجيات علاجية جديدة للأطفال الرضع حديثي الولادة مع ضيق في التنفس. منذ الرئتين حديثي الولادة هي ضئيلة مقارنة الرئتين الكبار، والتدابير التقليدية لإزالة السوائل السنخية التي تعتمد على قياسات غسيل أو gravimetrical قد لا تكون مناسبة لدراسة بدقة إزالة السوائل في الرئة في نماذج الرئة لحديثي الولادة. في هذا البروتوكول، ونحن لشرح مقايسة التي تسمح للتحديد دقيق لمعدلات إزالة السوائل السنخية في ما بعد الولادة الجراء يوم 10 C57BL / 6 الماوس باستخدام جهاز تصوير الحيوانات الصغيرة. واحدة من أهم فوائد استخدام نهج فلووروسكبيك هو أن الحيوانات يتم تصوير في الجسم الحي. تنفسوا بحرية وقد يتعافى من هذا الاختبار الغازية الحد الأدنى للمراقبة ودراسة في المستقبل. ويتمثل الهدف العام من هذه الطريقة هو نموذج وذمة رئوية في الرئة حديثي الولادة، وتقييم معدل إزالة السوائل السنخية في الرئة لحديثي الولادة. وقد تم تطوير هذه التقنية، في جزء منه، واستراتيجية للحد من لتقليل عدد الحيوانات اللازمة، ولكن تعظيم الانتاج التجريبي. هذا الأسلوب يسمح أيضا للكشف متفوقة من كميات السوائل في الرئة باستخدام التصوير بالأشعة السينية ويتطلب الكفاءة في ضبط النفس الحيوانية الأساسية والتعامل مع 1؛ صغير العمليات الجراحية الحيوانية والقصبة الهوائية تقطير 2، جهاز تصوير الحيوانات الصغيرة، وصورة برامج التحليل الأساسي. المحققون الذين يرغبون في تقييم كميات السوائل في الرئة في الجسم الحي (الف بحريةتخدير athing نماذج حيوانية) قد تجد هذا الإجراء المناسب لتطبيقها. وأخيرا، يمكن هذا البروتوكول تزيد النماذج الأخرى الموجودة في إصابة الرئة لحديثي الولادة المستخدمة في الدراسة الميكانيكية للخلل التنسج القصبي الرئوي، بما في ذلك الضرر الناجم عن فرط التأكسج الرئة والتهوية الميكانيكية، ونماذج من التهاب الرئة 3.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="826">
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:443px;">Preclinical Imaging System (In- Vivo MS FX PRO)</td>
			<td style="width:241px;">Bruker; Billerica, MA</td>
			<td style="width:143px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Ketamine</td>
			<td>Ketaset; Fort Dodge Animal Health, IA</td>
			<td>26637-411-01</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Xylazine</td>
			<td>Lloyd Laboratories; Shenandoah, IA</td>
			<td>4821</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Dulbecco&#39;s Phosphate Buffered Saline (with Calcium and Magnesium)&#160;</td>
			<td>Lonza; Walkersville, MD</td>
			<td>17-513F</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Sodium chloride</td>
			<td>Amresco; Solon, OH</td>
			<td>241</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Potassuim chloride</td>
			<td>Fisher Scientific; Fair Lawn, NJ</td>
			<td>P217-3</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Calcium chloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich; St. Loius, MO</td>
			<td>C5080</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">HEPES</td>
			<td>Sigma-Aldrich; St. Loius, MO</td>
			<td>H3375</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">0.3 mL insulin syringe with 31Gx5/16&#34; (8mm) needle</td>
			<td>BD Insulin Syringe; Franklin Lakes, NJ</td>
			<td>328438</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

real-time x-ray imaging of lung fluid volumes in neonatal mouse lung

عند الولادة، يخضع الرئة التحول المظهري عميق من إفراز لامتصاص، والتي تسمح للتكيف مع التنفس بشكل مستقل. تعزيز واستدامة هذا النمط الظاهري هو في غاية الأهمية في نمو والغاز الطبيعي الصرف السنخية في جميع مراحل الحياة. اتسمت عدة في الدراسات المختبرية دور البروتينات الأساسية التنظيمية، والجزيئات يشير، وهرمونات الستيرويد يمكن أن يؤثر على معدل إزالة السوائل في الرئة. ومع ذلك، في الامتحانات الجسم الحي يجب أن يؤديها لتقييم ما إذا كانت هذه العوامل التنظيمية تلعب أدوارا فسيولوجية هامة في تنظيم فترة ما حول الولادة امتصاص السائل الرئة. على هذا النحو، والاستفادة من الوقت الحقيقي التصوير بالأشعة السينية لتحديد ما حول الولادة الرئة إزالة السوائل، أو وذمة رئوية، يمثل التقدم التكنولوجي في هذا المجال. هنا، نحن شرح وتوضيح نهج لتقييم معدل السنخية إزالة السوائل في الرئة والفيضانات السنخية في C57BL / 6 الفئران في آخر يوم الولادة 10 إليناجي التصوير بالأشعة السينية وتحليل. نجاح تنفيذ هذا البروتوكول يتطلب موافقة مسبقة من اللجان المؤسسية رعاية الحيوان واستخدام (IACUC)، وهو في فيفو الحيوانات الصغيرة نظام التصوير بالأشعة السينية، ومتوافق برامج التصوير الجزيئي.

لوحات اليسار في الأرقام 9-10 هي من PN 10 الرئتين الماوس تصويرها في الأساس (ما قبل غرسها). تظهر هذه الصور تقطير ناجحة من التحديات المالحة في الفص الأيسر من الرئة لحديثي الولادة. في الشكل 9، والرئة الماوس تغرس tracheally مع محلول ملحي المحددة أ...

Watch this Scientific Journal Video about Real-time X-ray Imaging of Lung Fluid Volumes in Neonatal Mouse Lung at JoVE.com

Real-time X-ray Imaging of Lung Fluid Volumes in Neonatal Mouse Lung

We present a protocol to assess the rate of alveolar fluid clearance or pulmonary edema in neonatal mouse lung using X-ray imaging technology.

في الوقت الحقيقي الأشعة السينية التصوير من الرئة أحجام السوائل في الأطفال حديثي الولادة الرئة ماوس

At birth, the lung undergoes a profound phenotypic switch from secretion to absorption, which allows for adaptation to breathing independently. Promoting ...

Research

JoVE Journal

Medicine

X-ray Dose Reduction through Adaptive Exposure in Fluoroscopic Imaging

الأشعة السينية من خلال خفض الجرعة التعرض التكيفية في التصوير جهاز أشعة

X-ray fluoroscopy is widely used for image guidance during cardiac intervention. However, radiation dose in these procedures can be high, and this is a ...

Segmentation and Measurement of Fat Volumes in Murine Obesity Models Using X-ray Computed Tomography

تجزئة والقياس من وحدات تخزين الدهون في الفئران نماذج السمنة عن طريق الأشعة السينية التصوير المقطعي

Obesity is associated with increased morbidity and mortality as well as reduced metrics in quality of life.1 Both environmental and genetic factors are ...

A Simple Method of Mouse Lung Intubation

طريقة بسيطة لتركيب الانبوبة الرئة ماوس

A  simple procedure to intubate mice for pulmonary function measurements would  have several advantages in longitudinal studies with limited numbers or  ...

Cerebrospinal Fluid MicroRNA Profiling Using Quantitative Real Time PCR

النخاعي السوائل عن طريق الرنا الميكروي التنميط الكمي في الوقت الحقيقي PCR

MicroRNAs (miRNAs) constitute a potent layer of gene regulation by guiding RISC to target sites located on mRNAs and, consequently, by modulating their ...

Diagnostic Ultrasound Imaging of Mouse Diaphragm Function

التشخيص بالموجات فوق الصوتية التصوير من ماوس الحجاب الحاجز وظيفة

Function analysis of rodent respiratory skeletal muscles, particularly the diaphragm, is commonly performed by isolating muscle strips using invasive ...

Implantation of Fibrin Gel on Mouse Lung to Study Lung-specific Angiogenesis

زرع الليفين جل في الرئة ماوس لدراسة الأوعية الدموية الرئة محددة

Recent significant advances in stem cell research and bioengineering techniques have made great progress in utilizing biomaterials to regenerate and ...

Mouse Pneumonectomy Model of Compensatory Lung Growth

الماوس استئصال الرئة نموذج النمو الرئة التعويضي

In humans, disrupted repair and remodeling of injured lung contributes to a host of acute and chronic lung disorders which may ultimately lead to ...

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

طريقة معزولة<em&gt; فيفو السابقين</em&gt; الإرواء الرئة في الفئران نموذج: الدروس المستفادة من تطوير برنامج EVLP الجرذ

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed ...

Evaluation of Lung Metastasis in Mouse Mammary Tumor Models by Quantitative Real-time PCR

تقييم الرئة الانبثاث في ماوس الثديية ورم المجموعات بواسطة الكمي في الوقت الحقيقي PCR

Metastatic disease is the spread of malignant tumor cells from the primary cancer site to a distant organ and is the primary cause of cancer associated ...