Name: derivation of adult human fibroblasts and their direct conversion into expandable neural progenitor cells
Uploaded: 2015-07-29T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Derivation of Adult Human Fibroblasts and their Direct Conversion into Expandable Neural Progenitor Cells at JoVE.com

We willen graag alle leden van de Stem Cell en Regenerative Medicine Group van de Universiteit van Würzburg voor nuttige tips en Martina Gebhardt evenals Heike Arthen bedanken voor een uitstekende technische ondersteuning. Dit werk werd ondersteund door subsidies van de Deutsche Forschungsgemeinschaft DFG (ED79 / 1-2), het Duitse ministerie van Onderwijs en Onderzoek BMBF (01 GN 0813), de Beierse Research Network geïnduceerde pluripotente stamcellen &quot;forIPS&quot; en de &quot;Stiftung Sibylle Assmus &quot;. Figuur 1 werd geproduceerd met behulp van Servier Medical Art, verkrijgbaar bij www.servier.com.

De menselijke fibroblasten die in deze studie werden verkregen uit een huid punch biopsie na het krijgen van informed consent en ethische goedkeuring door de ethische commissie van de Universiteit van Würzburg, Duitsland (ethische verslag nr: 96/11 dd 10.06.2011). 1. Punch biopsie <ol><li> Ontsmet de huid van de patiënt. Verdoven huid waarvan een deel biopsie zal worden genomen van (bij voorkeur een minder zon blootgestelde gebied) met 0,5 tot 1 ml mepivacaine hydrochloride intracutaan e...

Hier tonen we de isolatie en rechtstreekse omzetting van humane fibroblasten in expandeerbare-transgen vrije neurale stamcellen en hun gedifferentieerde nakomelingen als mogelijke basis voor cell-vervangingstherapie of toepassing in geneesmiddelscreening analyses. Direct lineage omzetting van somatische cellen in NPC is bereikt door geforceerde expressie van afstammings-specifieke transcriptiefactoren 26,33,34. Niettemin vaak foetale fibroblasten werden voor transdifferentiatie experimenten 33,34. ...

In 2006 Yamanaka en collega&#39;s voor het eerst konden aantonen de mogelijkheid van herprogrammering van somatische cellen in een pluripotente toestand 1. Deze dedifferentiatie werd bereikt door overexpressie van vier transcriptiefactoren Oct4, Sox2, Klf4, en c-Myc in murine fibroblasten. Het gegenereerde zogenaamde geïnduceerde pluripotente stamcellen (iPSCs) vertonen functionele equivalentie embryonale stamcellen (SER) en kan dus worden onderscheiden in alle celtypes van het volwassen organisme. Een jaar later herprogrammering iPSCs kan ook worden bereikt voor humane fibroblasten 2. Experimenten in diermodellen aangetoond dat iPSC-afgeleide cellen kunnen in het algemeen worden gebruikt voor celvervangingstherapie, bijvoorbeeld in Parkinson&#39;s Disease (PD) 3-5. Echter verscheidene beperkingen van het gebruik van iPSCs vormen obstakels voor de volledige hun therapeutisch potentieel. Allereerst herprogrammering van cellen in een pluripotente toestand en daaropvolgendekwaliteitscontrole is over het algemeen een tijdrovend en inefficiënt proces waardoor in uitgebreide en dus dure procedures celcultuur. Ten tweede moeten iPSCs opnieuw worden gedifferentieerd in de gewenste celtype van belang voor biomedische toepassing en de kans op resterende pluripotente cellen in gedifferentieerde latie aanzienlijke tumorigene potentieel en vertoont dus een hoog risico na celtransplantatie 6. Ten derde, wordt het herprogrammeringsproces gewoonlijk bereikt door het induceren van de herprogrammering factoren door lenti- of retrovirale infectie. De integratie van deze virussen in het gastheergenoom kan leiden tot mutagenese en / of ongecontroleerde heractivering van de transgenen 7,8. Non-integratieve systemen zijn ontwikkeld om de herprogrammering factoren leveren aan doelcellen, waardoor het risico van insertie mutagenese en transgene reactivering minimaliseren. Voorbeelden van deze transgen vrije benaderingen herprogrammering van cellen met niet-integrerendeAdeno of Sendai virus 9,10, DNA-gebaseerde vectoren 11 en de toepassing van DNA-vrije werkwijzen zoals transfectie van synthetisch mRNA 12 of transductie van recombinante eiwitten 13,14. Een andere veelbelovende methode voor het afleiden van transgene vrije iPSC het gebruik van loxP gemodificeerde lentivirale herprogrammering constructen en daaropvolgende verwijdering van transgenen met het Cre-loxP DNA recombinatiesysteem 15,16. Een eenvoudiger benadering van neurale cellen te genereren voor celvervangingstherapie vertegenwoordigt directe omzetting van fibroblasten in post-mitotische neuronen 17-20. Vierbuchen et al. Gerapporteerd dat de overexpressie van transcriptiefactoren Ascl1, Brn2 en Myt1l resulteert in het genereren van 20% neuronen tegen murine fibroblasten 17. In 2011 werd aangetoond, dat dezelfde drie transcriptiefactoren in combinatie met overexpressie van NeuroD1 mogelijk transdifferentiatie van humane fibroblasten in neuRons 19. Human geïnduceerde neuronen kunnen ook worden gegenereerd door overexpressie van Ascl1 en Ngn2 onder dual SMAD- en GSK3β- remming 20. Met name directe omzetting van fibroblasten in neuronen genereert een non-proliferatie, post-mitotische cel populatie die verdere uitbreiding en biobanking niet toestaat. Onlangs heeft de directe omzetting van fibroblasten in een prolifererende neurale stamcellen / voorlopercellen cel populatie werd gerapporteerd 21-26. Duidelijkheidshalve zullen al deze celtypen worden genoemd geïnduceerd neurale stamcellen (iNPCs) in dit rapport. Han et al. Overexpressie Brn4, Sox2, c-Myc en Klf4 iNPCs te genereren. Net als hun tegenhangers neurale stamcellen afgeleid van zowel primaire weefsel of pluripotente cellen deze iNPCs zijn tripotential en kon worden onderscheiden in neuronen, astrocyten en oligodendrocyten 21. Onze groep rapporteerde een iets andere conversie protocol waarbij overexpressie van Sox2, Klf4En c-Myc en geïnduceerde Oct4 expressie slechts 5 dagen. Met deze aanpak kunnen we stabiel uitdijende iNPCs van muizen embryonale en volwassen fibroblasten dat volledige silencing vertonen van de herprogrammering factoren 22 genereren. In tegenstelling tot iPSCs, hoeft iNPCs geen tumorigeen potentieel vertonen na transplantatie 27. We gebruikten geconverteerde cellen in een diermodel van demyelinisatie, myeline deficiënte ratten, aangetoond dat iNPCs klinisch bruikbaar 22. Tot die tijd, kon NPCs alleen worden gegenereerd uit pluripotente stamcellen of primaire zenuwweefsel 28-32. iNPCs zijn stabiel expandeerbare cellen die kunnen worden gecryoconserveerd en kunnen differentiëren tot neuronen, astrocyten en oligodendrocyten. Veel inspanningen werden geleverd om de directe omzetting protocol uit muizen passen aan menselijke cellen 23,26,33,34. In 2012 werd gepubliceerd dat overexpressie van de enkele factor Sox2 in fibroblasten is voldoende om muizen en menselijke iNPCs genereren <sup&gt; 33. De auteurs gemeld generatie van de menselijke iNPCs uit foetaal voorhuid fibroblasten en gekenmerkt hen door kleuring tegen Sox2 en Nestin. De doelwitcellen voor herprogrammering slechts een zeer bepaald celtype die niet met de klinische praktijk en er was geen functionele karakterisatie van omgezet cellen door transplantatie in een diermodel uitgevoerd. Een recente publicatie beschrijft de vorming van neuronale voorlopercellen beperkt uit humane foetale fibroblasten door overexpressie van Sox2, c-Myc en hetzij Brn2 of Brn4 34. De gegenereerde cellijnen vertoonden zelfvernieuwingscapaciteit en kunnen worden gedifferentieerd in verschillende soorten terminal neuronen. Echter, het gebruik van foetale fibroblasten ongunstig, omdat deze cellen zijn van heterogene oorsprong naar de aanwezigheid van residuele bijvoorbeeld neurale stamcellen in de preparaten niet uit. In 2014, Zhu et al. Beschreven de directe omzetting van humane volwassen en neonatale fibroblasten in tripotential neurale stamcellen door overexpressie van Sox2 met Oct4 of Oct4 staan ​​toevoeging van kleine moleculen aan het celkweekmedium. Met name op basis van hun studie Sox2 alleen was onvoldoende om rechtstreekse omzetting 26 induceren. Recenter Lu et al. Beschreven dat de overexpressie van het Yamanaka factoren Oct4-, Sox2-, Klf4-, c-Myc van Sendai virus 24 uur en daaropvolgende inactivering van het virus door verhoogde temperatuur resulteert in het genereren van expandeerbare tripotential neurale precursorcellen 23. Samenvattend, alhoewel de conversie protocollen gepubliceerd menselijke cellen hebben gemeen overexpressie van ten minste één of meer van de Yamanaka factoren vaak tijdig beperkte wijze tot nu toe is er geen duidelijke aanwijzing voor de minimale moleculaire factoren nodig direct besturen omzetting in iNPCs. De tijdige beperkte overexpressie van Oct4 door een genetische middelen transfectie met synthetisch mRNA of cell-permeant eiwit met constitutieve expressie van Sox2, Klf-4, en c-Myc niet resulteren in stabiele humane INPC lijnen nog. Zo is de toepassing van Sendai virus al Yamanaka factoren overexpressie tijdig hun activiteiten beperken door hitte inactivatie van het virus 23 met geoptimaliseerde neurale media inductieomstandigheden 22,31 vertegenwoordigt de voorkeursstrategie tot nu toe. Verschillende studies tonen de mobiele functionaliteit van NSC of hun gedifferentieerde tegenhangers in verschillende dierziekten modellen. Neurale voorlopercellen uit menselijke pluripotente stamcellen werden getransplanteerd in muismodellen van de neuro-inflammatoire aandoening multiple sclerose 35,36. De toepasselijkheid van hESC-afgeleide neurale stamcellen in EAE (experimentele auto-immune encephalomyelitis) -mice werd voor het eerst getoond in 2008 35. Multipotente neurale voorloper cellen werden geïnjecteerd in de ventrikels van de hersenen van muizen, en de transplantatie resultaated in de vermindering van de klinische symptomen van EAE. Kim et al. Gegenereerd oligodendrogliale voorlopers van hESCs en getransplanteerd die intracerebroventriculair in EAE-muizen. Hoewel transplantatie overleefden niet langer dan 10 dagen, muizen vertoonden significante verbetering van neurologische functie en vermindering van proinflammatoire immuuncellen in de witte stof 36. Stamcel therapie is ook toegepast voor preklinische richten van de ziekte van Parkinson als NPC succes kan worden toegepast bij de respectieve diermodellen. Hiervoor werden progenitorcellen hetzij verkregen uit foetaal hersenweefsel 37 opzichte van pluripotente stamcellen 38-40 of mesenchymale 41 stamcellen werden gebruikt. In 2012 toonden we aan dat muis iNPCs kunnen proteolipide eiwit, het belangrijkste myeline eiwitcomponent na transplantatie produceren in de hersenen van myeline-deficiënte (md) 22 ratten. Door dat proof-of-principle experiment de therapeutische applicabilheid van iNPCs werd eerst bewezen en al snel bevestigd door een andere studie 32. Echter, het volledige potentieel van therapeutische gebruik van menselijke iNPCs moet nog worden onderzocht. Hier tonen we een robuuste en geïntegreerde werkwijze (i) winning van menselijke primaire cellen uit volwassen patiënten via huidbiopsie, (ii) rechtstreekse omzetting van humane fibroblasten in een neurale staat en (iii) het vermogen van iNPCs worden gedifferentieerd tot neuronale en gliale lijnen. Het gebruik van dit protocol zal helpen bij het versnellen generatie van autologe menselijke cellen voor therapeutische toepassingen.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Astrocyte media</td>
			<td>ScienCell</td>
			<td align="right">1801</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27</td>
			<td>LifeTechnologies</td>
			<td>17504-044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BDNF</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>450-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biopsy Punch</td>
			<td>pfm medical</td>
			<td align="right">48301</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cAMP</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A6885</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CHIR99021</td>
			<td>Axon medchem</td>
			<td align="right">1386</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase Type2</td>
			<td>Worthington Biochemical</td>
			<td>LS004177</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dispase</td>
			<td>PAN&#160;</td>
			<td>P10-032100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>LifeTechnologies</td>
			<td>41966-029</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM F12</td>
			<td>LifeTechnologies</td>
			<td>11320-033</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMSO</td>
			<td>Roth</td>
			<td align="right">4720</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPBS</td>
			<td>LifeTechnologies</td>
			<td>14190-094</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EGF</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>PHG0313</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FCS</td>
			<td>Biochrom AG</td>
			<td align="right">50115</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GDNF</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>450-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gentamicin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G1397</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GFAP-antibody</td>
			<td>Dako</td>
			<td>Z0334</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GlutaMAX</td>
			<td>LifeTechnologies</td>
			<td>35050-038</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hLIF</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>300-05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin</td>
			<td>Seralab</td>
			<td>GEM-700-112-P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ki67-antibody</td>
			<td>NeoMarkers</td>
			<td>RM-9106-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Glutamine</td>
			<td>LifeTechnologies</td>
			<td>25030-024</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>L2020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N2</td>
			<td>LifeTechnologies</td>
			<td>17502-048</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nestin-antibody</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>MAB1259</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neurobasal</td>
			<td>LifeTechnologies</td>
			<td>21103-049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-essential amino acids</td>
			<td>LifeTechnologies</td>
			<td>11140-050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NSC freezing media</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C6295</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oct4-antibody</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>sc9081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pax6-antibody</td>
			<td>Covance</td>
			<td>PRB-278P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SB431542</td>
			<td>Invivogen</td>
			<td>inh-sb43</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sendai virus: CytoTune Sendai Reprogramming Kit</td>
			<td>&#160;LifeTechnologies</td>
			<td>A1378001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodiumpyruvate</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>11360-039</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sox1-antibody</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>AF3369</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sox2-antibody</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>MAB2018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T3</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>sc-205725</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin/EDTA</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>15400-054</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TUJ1-antibody</td>
			<td>Covance</td>
			<td>MMS-435P-250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vitamin C</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A4544</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Y27632</td>
			<td>Calbiochem</td>
			<td>CAS 146986-50-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#946;-Mercaptoethanol</td>
			<td>LifeTechnologies</td>
			<td align="right">21985023</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

derivation of adult human fibroblasts and their direct conversion into expandable neural progenitor cells

Generatie van geïnduceerde pluripotente stamcellen (iPSCs) uit volwassen huid fibroblasten en de daaropvolgende differentiatie in somatische cellen biedt fascinerende perspectieven voor de afleiding van autologe transplantaties dat histocompatibiliteit barrières te omzeilen. Echter, doorlopen van een pluripotente toestand en daaropvolgende volledige differentiatie in gewenste lineages blijft een wegversperring van de klinische toepassing van iPSC technologie vanwege de geassocieerde neoplastisch potentieel en genomische instabiliteit. Onlangs hebben wij en anderen aangetoond dat somatische cellen niet alleen worden omgezet in iPSCs maar ook in verschillende soorten multipotente somatische stamcellen met gedefinieerde factoren, waardoor progressie omzeilen door de pluripotente toestand. Met name de directe omzetting van humane fibroblasten in veroorzaakte neurale stamcellen (iNPCs) kondigt de mogelijkheid van een nieuw autologe cel bron voor diverse toepassingen zoals mobiele vervanging, ziektemodelen drug discovery. We beschrijven hier de isolatie van volwassen humane primaire fibroblasten uit biopsie huid en het efficiënte directe omzetting in iNPCs door tijdige beperkte expressie van Oct4, Sox2, Klf4, alsmede c-Myc. Sox2-positieve neuro-kolonies verschijnen na 17 dagen van inductie en INPC lijnen efficiënt kunnen worden vastgesteld door monoklonale isolatie en expansie. Nauwkeurige aanpassing van virale multipliciteit van infectie en aanvulling van leukemie remmende factor tijdens de inductiefase vertegenwoordigen kritische factoren conversie rendementen tot 0,2% te bereiken. Tot nu toe kon patiëntspecifieke INPC lijnen te breiden tot meer dan 12 passages en uniform tonen morfologische en moleculaire kenmerken van neurale stam / progenitorcellen, zoals de expressie van Nestin en Sox2. De INPC lijnen kunnen worden gedifferentieerd tot neuronen en astrocyten, zoals beoordeeld door kleuring tegen TUJ1 en GFAP, respectievelijk. Tot slot melden we een robuust protocol voor de afleiding en direct omzetting van de menselijke fibroblasten in stabiel uitbreidbaar neurale stamcellen die een mobiele bron voor biomedische toepassingen zou kunnen bieden zoals autologe neurale cel vervangen en de ziekte modelleren.

Hier presenteren we beschrijving van een geïntegreerd proces genereren van geïnduceerde neurale progenitorcellen (iNPCs) uit humane fibroblasten die zijn verkregen door een punch biopsie van de huid in minder dan 8 weken (figuur 1) mogelijk maakt. Patient-specifeke iNPCs kan verder worden onderscheiden in neuronale en gliacellen geslachten en de haven enorm potentieel voor celvervangingstherapie en de ziekte modelleren. Infectie van de fibroblasten met Oct4-, Klf4-, Sox2- ...

Watch this Scientific Journal Video about Derivation of Adult Human Fibroblasts and their Direct Conversion into Expandable Neural Progenitor Cells at JoVE.com

Derivation of Adult Human Fibroblasts and their Direct Conversion into Expandable Neural Progenitor Cells

Generatie van geïnduceerde pluripotente stamcellen biedt fascinerende perspectieven voor de afleiding van autologe transplantaties. Echter, de progressie door middel van een pluripotente toestand en moeizaam re-differentiatie nog belemmert klinische vertaling. Hier beschrijven we de afleiding van volwassen humane fibroblasten en hun directe omzetting in geïnduceerde neurale progenitor cellen en de daaropvolgende differentiatie tot neuronale lijnen.

Afleiding van volwassen menselijke fibroblasten en hun directe omzetting in Expandable Neural Progenitor Cellen

Generation of&#160;induced pluripotent stem cell (iPSCs) from adult skin fibroblasts and subsequent differentiation into somatic cells provides ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Time-lapse Live Imaging of Clonally Related Neural Progenitor Cells in the Developing Zebrafish Forebrain

Time-lapse Live-Imaging van klonaal verwante neurale progenitorcellen in de ontwikkelingslanden zebravis voorhersenen

Precise patterns of division, migration and differentiation of neural progenitor cells are crucial for proper brain development and function1,2. To ...

Neural-Colony Forming Cell Assay: An Assay To Discriminate Bona Fide Neural Stem Cells from Neural Progenitor Cells

Neurale-Colony Forming Cell-test: Een test om Bona Fide neurale stamcellen van Neural Progenitor Cellen Discrimineer

The neurosphere assay (NSA) is one of the most frequently used methods to isolate, expand and also calculate the frequency of neural stem cells (NSCs). ...

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

Live-cell Imaging of Sensory Organ Precursor Cells in Intact Drosophila Pupae

Live-cell imaging van zintuig voorloper cellen in Intact Drosophila Poppen

Since the discovery of Green Fluorescent Protein (GFP), there has been a revolutionary change in the use of live-cell imaging as a tool for understanding ...

Lineage-reprogramming of Pericyte-derived Cells of the Adult Human Brain into Induced Neurons

Lineage-herprogrammering van pericyte-afgeleide cellen van het volwassen menselijke hersenen in Induced Neuronen

Direct lineage-reprogramming of non-neuronal cells into induced neurons (iNs) may provide insights into the molecular mechanisms underlying neurogenesis ...

Feeder-free Derivation of Neural Crest Progenitor Cells from Human Pluripotent Stem Cells

Voedingsvrije Afleiding van neurale stamcellen uit humane pluripotente stamcellen

Human pluripotent stem cells (hPSCs) have great potential for studying human embryonic development, for modeling human diseases in the dish and as a ...

Cell Sorting of Neural Stem and Progenitor Cells from the Adult Mouse Subventricular Zone and Live-imaging of their Cell Cycle Dynamics

Celsortering van neurale stamcellen en stamcellen uit de Adult Mouse subventriculaire zone en Live-beeldvorming van de celcyclus Dynamics

Neural stem cells (NSCs) in the subventricular zone of the lateral ventricles (SVZ) sustain olfactory neurogenesis throughout life in the mammalian brain. ...

Development of a Refined Protocol for Trans-scleral Subretinal Transplantation of Human Retinal Pigment Epithelial Cells into Rat Eyes

Ontwikkeling van een verfijnde Protocol voor Trans-scleral Subretinal transplantatie van menselijke retinale Pigment epitheliale cellen in de ogen van de Rat

Degenerative retinal diseases such as age-related macular degeneration (AMD) are the leading cause of irreversible vision loss worldwide. AMD is ...

Homochronic Transplantation of Interneuron Precursors into Early Postnatal Mouse Brains

Homochronic transplantatie van Interneuron precursoren in vroege postnatale muis hersenen

Neuronal fate determination and maturation requires an intricate interplay between genetic programs and environmental signals. However, disentangling the ...

Identifying Cell Surface Markers of Primary Neural Stem and Progenitor Cells by Metabolic Labeling of Sialoglycan

Identificeren van celoppervlak markeringen van primaire neurale stam en voorlopercellen door metabole labeling van Sialoglycan

Neural stem and progenitor cells (NSPCs) are the cellular basis for the complex structures and functions of the brain. They are located in specialized ...

Conversion of Human Induced Pluripotent Stem Cells (iPSCs) into Functional Spinal and Cranial Motor Neurons Using PiggyBac Vectors

Conversion of Human Induced Pluripotent Stem Cells iPSCs into Functional Spinal and Cranial Motor Neurons Using PiggyBac Vectors

Conversie van menselijke geïnduceerde pluripotente stamcellen (iPSCs) in functionele spinale en craniale motor neuronen met behulp van PiggyBac vectoren

We describe here a method to obtain functional spinal and cranial motor neurons from human induced pluripotent stem cells (iPSCs). Direct conversion into ...