Name: denver papillae protocol for objective analysis of fungiform papillae
Uploaded: 2015-06-08T14:00:00
Duration: 10 min 50 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Denver Papillae Protocol for Objective Analysis of Fungiform Papillae at JoVE.com

Эта работа была частично финансируется науки, образования, премии партнерства (SEPA) R25 RR025066 между 2008-2012 от Национальных Институтов Здоровья и Национального центра исследовательских ресурсов. Спасибо коллегам в области вкуса для вдумчивого обсуждения литературы, наших результатов и обратной связи по использованию DPP в различных лабораторных сценариев: Джон Хейс, Сью Coldwell, Павел Бреслин, Карла Шуберта. Спасибо также к руководству на Денверский музей природы и науки и персонала в поддержку граждан науки в генетике вкуса Lab в течение экспедиции здравоохранения. Наконец, спасибо всем нашим добровольцев ученые граждан для их времени и преданности к разработке и использовании этого протокола, в том числе: Медведь Арагон, Майк Арчер, Су атамана, Майкл Бэгли, A&#39;nette Бертран, Диана Boyles, Венди Covert, Саша Дули Пэтти Drever, Джессика Эрн, Лаура Harmacek, Шон Хиббард, Джойс Hutchens, Мэтт Джу, Лета Кин, Виллем Leenhouts, Стефания Луkjan, Эшли Мэтьюз, Майк Маузер, Стефани Миллер, Холли Морган-Родригес, Гриффин Scherma, Алисса Шикеданц, Терри Саймон, Дилан Томас, Руди Торрес, Тайлер Уилсон, Диана Woltkamp.

<ol>
	<li>Miller, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+taste+bud+density+across+adult+age+groups.">Human taste bud density across adult age groups.</a> J Gerontol. 43 (1), B26-B30 (1988).</li><li>Miller, I. J., Reedy, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+fungiform+papillae+and+taste+pores+in+living+human+subjects.">Quantification of fungiform papillae and taste pores in living human subjects.</a> Chem Senses. 15 (3), 281-294 (1990).</li><li>Miller, I. J., Reedy, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variations+in+Human+Taste+Bud+Density+and+Taste+Intensity+Perception.">Variations in Human Taste Bud Density and Taste Intensity Perception.</a> Physiol Behav. 47 (6), 1213-1219 (1990).</li><li>Shahbake, M., Hutchinson, I., Laing, D. G., Jinks, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+quantitative+assessment+of+fungiform+papillae+density+in+the+human+tongue.">Rapid quantitative assessment of fungiform papillae density in the human tongue.</a> Brain Res. 1052 (2), 196-201 (2005).</li><li>Bartoshuk, L. M., Duffy, V. B., Miller, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PTC/PROP+tasting:+anatomy,+psychophysics,+and+sex+effects.">PTC/PROP tasting: anatomy, psychophysics, and sex effects.</a> Physiol Behav. 56 (6), 1165-1171 (1994).</li><li>Essick, G. K., Chopra, A., Guest, S., McGlone, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lingual+tactile+acuity,+taste+perception,+and+the+density+and+diameter+of+fungiform+papillae+in+female+subjects.">Lingual tactile acuity, taste perception, and the density and diameter of fungiform papillae in female subjects.</a> Physiol Behav. 80 (2-3), 289-302 (2003).</li><li>Delwiche, J. F., Buletic, Z., Breslin, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+of+papillae+number+to+bitter+intensity+of+quinine+and+PROP+within+and+between+individuals.">Relationship of papillae number to bitter intensity of quinine and PROP within and between individuals.</a> Physiol Behav. 74 (3), 329-337 (2001).</li><li>Kim, U. K., Jorgenson, E., Coon, H., Leppert, M., Risch, N., Drayna, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Positional+cloning+of+the+human+quantitative+trait+locus+underlying+taste+sensitivity+to+phenylthiocarbamide.">Positional cloning of the human quantitative trait locus underlying taste sensitivity to phenylthiocarbamide.</a> Science. 299 (5610), 1221-1225 (2003).</li><li>Hayes, J. E., Bartoshuk, L. M., Kidd, J. R., Duffy, V. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Supertasting+and+PROP+bitterness+depends+on+more+than+the+TAS2R38+gene.">Supertasting and PROP bitterness depends on more than the TAS2R38 gene.</a> Chem Senses. 33 (3), 255-265 (2008).</li><li>Garneau, N. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Crowdsourcing+taste+research:+genetic+and+phenotypic+predictors+of+bitter+taste+perception+as+a+model.">Crowdsourcing taste research: genetic and phenotypic predictors of bitter taste perception as a model.</a> Front Integr Neurosci. 8 (33), (2014).</li><li>Fox, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relationship+between+chemical+constitution+and+taste.">The relationship between chemical constitution and taste.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 18 (1), 115-120 (1932).</li><li>Tepper, B. J., Nurse, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fat+Perception+is+related+to+PROP+taster+status.">Fat Perception is related to PROP taster status.</a> Physiol Behav. 61 (6), 949-954 (1997).</li><li>Duffy, V. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bitter+receptor+gene+(TAS2R38.),+6-n.-Propylthiouracil+(PROP)+bitterness+and+alcohol+intake.">Bitter receptor gene (TAS2R38.), 6-n.-Propylthiouracil (PROP) bitterness and alcohol intake.</a> Alcohol Clin Exp Res. 28 (11), 1629-1637 (2004).</li><li>Yackinous, C., Guinard, J. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relation+between+PROP+taster+status+and+fat+perception,+touch,+and+olfaction.">Relation between PROP taster status and fat perception, touch, and olfaction.</a> Physiol Behav. 72 (3), 427-437 (2001).</li><li>Fischer, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+related+to+fungiform+papillae+density:+The+Beaver+Dam+Offspring+Study.">Factors related to fungiform papillae density: The Beaver Dam Offspring Study.</a> Chem Senses. 38 (8), 669-677 (2013).</li><li>Feeney, E. L., Hayes, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regional+differences+in+suprathreshold+intensity+for+bitter+and+umami+stimuli.">Regional differences in suprathreshold intensity for bitter and umami stimuli.</a> Chemosens Percept. 7 (3-4), 147-157 (2014).</li><li>Saito, T., Narita, N., Yamada, T., Manabe, Y., Ito, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphology+of+human+fungiform+papillae+after+severing+chorda+tympani+nerve.">Morphology of human fungiform papillae after severing chorda tympani nerve.</a> Ann Otol Rhinol Laryngol. 120 (5), 300-306 (2011).</li><li>Miller, I. J., Doty, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomy+of+the+peripheral+taste+system.">Anatomy of the peripheral taste system.</a> Handbook of Olfaction and Gustation. , 521-547 (1995).</li><li>Cheng, L. H. H., Robinson, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+distribution+of+fungiform+papillae+and+taste+buds+on+the+human+tongue).">The distribution of fungiform papillae and taste buds on the human tongue).</a> Arch Oral Biol. 36 (8), 583-539 (1991).</li><li>Cruickshanks, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+taste+impairment+in+epidemiologic+studies-The+Beaver+Dam+Offspring+Study.">Measuring taste impairment in epidemiologic studies-The Beaver Dam Offspring Study.</a> Ann N Y Acad Sci. 1170, 543-552 (2009).</li><li>McNamara, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetics+of+Taste+summative+evaluation+report+prepared+for+Denver+Museum+of+Nature+&amp;+Science.">Genetics of Taste summative evaluation report prepared for Denver Museum of Nature &amp; Science.</a> Independent Evaluator. , (2012).</li><li>Arvidson, K., Friberg, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+taste:+Response+and+taste+bud+number+in+fungiform+papillae.">Human taste: Response and taste bud number in fungiform papillae.</a> Science. 209 (4458), 807-808 (1980).</li></ol>

Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих финансовых интересов.

Использование DPP, дисперсия в изображении рассчитывает через независимых бомбардиров и рассчитывает в течение бомбардиром снизилась значительно. Хотя этот метод делает визуальный анализ плотности FP без видеомикроскопии менее субъективным, следует отметить, что этот метод оценки лишь FP. DPP не может гарантировать, что структуры, классифицированные как FP есть вкусовые поры и, следовательно, вкусовая сосочки, ни что на счету отражают реальный вкус плотности бутона 20,23 .Отель природа этого метода является то, что он устанавливает надежность через консистенции и точности; Однако, это может быть смещение результаты в том же направлении. Чтобы проверить точность по сравнению с другими методами с использованием истинную меру плотности бутона вкуса (например, видеомикроскопии) будет выходить за рамки данного study.However, характеризуя морфологию FP более строго и создание дихотомичный ключ, этот метод рассматривает Миллер &amp; заряд Reedy на поле, что более характеристик FPдолжно быть сделано для того, чтобы иметь консенсус по их морфологии и количественного 2. Кроме того, они указали, что эта характеристика может «прояснить некоторые различия между субъектами и объяснить некоторые из разрозненных результатов среди исследователей 2.&quot; Предоставляя унифицированный метод количественного, многие из расхождений по вопросу о роли FP вкуса и питанием связанные исследование может быть исправлено. Дихотомическое ключ может быть настроен для различных методов получения изображений. Известно расстояние для измерительной шкалы может быть легко установлен в диаметре, используемой в каждой лаборатории и рецессии нельзя сбрасывать со счетов, если сарана обертывание или стекло были помещены на языке для захвата изображения. В ПРТ Lab, было установлено, что нейтральный язык при условии, лучшее определение сосочков. Это может быть связано с количеством света в лаборатории что вызвало Saran Wrap или стекла, чтобы отражать свет обратно в камеру создания бликов, который сделал ословпасо трудно. Некоторые лаборатории сказали, что они найти краситель сложнее рассчитывать, но ПРТ Лаборатория нашел разбавленный голубой пищевой краски в концентрации 1:36, предоставленной идеальный контраст между грибовидные и нитевидных сосочков на большинство языков. Создание дихотомической ключа для FP характеристики позволят исследователям в различных лабораториях, используя различные методы получения изображений, последовательно проанализировать структуры на язык и есть уверенность в отчетности их результатов. Наконец, использование дихотомического ключа может иметь цели в других областях научной методологии, где качества сооружений или объектов, обеспечивающих противоречивые цифры от исследования к исследованию.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Image J</td>
			<td>National Institutes of Health</td>
			<td><a href="http://rsb.info.nih.gov/ij">http://rsb.info.nih.gov/ij</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Food dye, Deep Blue Shade</td>
			<td>Esco</td>
			<td>http://escofoods.com/blue-food-coloring.html</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Rayon Tipped OB/GYN Applicators</td>
			<td>Puritan</td>
			<td>25-808 1PR</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Grade 1 Filter Paper</td>
			<td>Whatman</td>
			<td>Whatman No.: 1001-325</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coolpix P100 (10.3 megapixels) and P500 (12.1 megapixels)</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>http://imaging.nikon.com/lineup/coolpix/</td>
			<td>neither model appears to be available on the website any longer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paper Hand Towels</td>
			<td>Kleenex</td>
			<td>https://www.kleenex.com/HandTowelsDetail.aspx</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

denver papillae protocol for objective analysis of fungiform papillae

Цель Денвере сосочков протокола является использование дихотомического ключа, чтобы определить приоритеты и характеристики грибовидных сосочков (FP) для обеспечения последовательного счет между бомбардиров. Этот протокол основывается офф необходимости, возникшей из последних двух десятилетий вкус исследований с использованием FP в качестве прокси для плотности вкус пор. Плотность FP исторически были проанализированы с помощью Миллера &amp; Риди в 1990 характеризации их морфологии: круглый, окрашенных светлее, большой, и повышение. В этой работе, авторы предупреждали, что строгие определения FP морфологии, необходимой для быть изложены. Несмотря на это призыв к действию, следить за литературой было недостаточно, и в большинстве исследований, продолжающих привести Миллера &amp; Риди в оригинальное произведение. Следовательно, отчеты плотности FP были весьма изменчивы и, в сочетании с малыми размерами образца, может внести свой вклад в несоответствующих выводы о роли FP в вкусовой чувствительности. Генетика вкуса Лаборатории исследовали эту очевидную Inconсогласованность при подсчете и обнаружили, что бомбардиров индивидуально приоритетов важность этих характеристик по-разному и не было никаких указаний на когда сосочек были некоторые, но не все, из сообщенных качеств FP. Результатом этого субъективности сильно варьирует FP отсчетов на одном языке изображения. Денвер Папиллы протокол был разработан для решения этой следствие путем использования дихотомического ключа, который дополнительно определяет и приоритет отдается важность характеристик, выдвинутых Миллером и Риди. Предложенный метод может помочь создать стандартный способ количественного FP для исследователей в области вкуса и питательных исследований.

Здесь представитель фотография забил два отдельных бомбардиров при использовании широко используемых Miller &amp; Риди методологию для идентификации FP на основе стандартов полевых раунде, большой, розовый или окрашенные светлее, и повышение, а затем то же самое фотография забил два бомбардиров с помощью DPP. Счетчики Указаны представитель высокой дисперсии наблюдается с помощью оригинального метода по сравнению с нижней дисперсии с использованием DPP. <img alt="Рисунок 4" src="/files/ftp_upload/52860/52860fig4.jpg" /> Рисунок 4:. Миллер и Риди Количественное против DPP количественной Изображение слева является представителем пунктам двух бомбардиров &quot;с использованием Миллер и Риди метода. Изображение справа представляет два пункта бомбардиров &quot;, используя DPP. Красный бомбардиром 1, Желтый бомбардиром 2, Зеленый бомбардиров 1 &amp; 2. Статистическая надежность DPР ранее изучались с помощью линейной смешанной модели для оценки изменчивости 10. Вкратце, для получения данных для оценки роли DPP играет в последовательности баллов, пятнадцать изображения забили дважды. В первой партии баллов, DPP наивные бомбардиров используется метод Miller &amp; Риди 2. Бомбардиров затем обучены использовать DPP и изображения индивидуально rescored без заключительном этапе консенсус, описанной в разделе 2.7 подробно контроля качества (рис 5). Набор счет данных ФП был затем использован в смешанной модели для оценки комбинированных различия в связи с протоколом (рисунок 6), в-бомбардир изменчивости и взаимодействия между ними. Эта модель показала значительную разницу в выигрыше при использовании метода Миллера и пронзительные по сравнению с DPP (р-значение &lt;1 х 10 -6) с DPP, ведущей к более высоким счетом в 6.99 (SE = 0,99); 5.2% изменчивости в счете было связано с обучением, 25,9% из-за бомбардира, и оставшиеся из-заизменчивости характерных для изображения 10. Далее, для получения данных для определения внутри-бомбардиру изменчивость, серия из тридцати изображений в произвольном порядке забили 11 человек. Без ведома бомбардиров, это серия изображений включал три изображения, которые были неоднократные. Мы наблюдали резкое различие в изменчивости баллов по сравнению различных изображений versusrepeated изображения. <img alt="Рисунок 5" src="/files/ftp_upload/52860/52860fig5.jpg" /> Рисунок 5:. DPP-наивного против сообщение ДПП Обучение Панели обеспечивают присущи рефлективный, вербальный партитур оппонентом для 15 изображений до и после обучения Денвер Папиллы протокол. Для каждого boxplot, заполнено в круг указывает на среднее, тогда как открытый круг указывает на выброс. <img alt="Рисунок 6" src="/files/ftp_upload/52860/52860fig6.jpg" /> Рисунок 6:. Изменение бомбардир дисперсии серый представляет тон дисперсии для отдельных бомбардиров до DPP обучения. Черный же бомбардиром после ДПП обучение.

Watch this Scientific Journal Video about Denver Papillae Protocol for Objective Analysis of Fungiform Papillae at JoVE.com

Denver Papillae Protocol for Objective Analysis of Fungiform Papillae

Здесь мы приводим протокол для измерения плотности грибовидные сосочка из цифровых фотографий. Этот метод основывается приоритетов и объективные показатели, характерные в исходное описательной работы на грибовидных сосочков Миллера и Риди (1990).

Денвер Папиллы Протокол объективного анализа грибовидных сосочков

The goal of the Denver Papillae Protocol is to use a dichotomous key to define and prioritize the characteristics of fungiform papillae (FP) to ensure ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

T-maze Forced Alternation and Left-right Discrimination Tasks for Assessing Working and Reference Memory in Mice

T-лабиринту Принудительное чередование и влево-вправо дискриминации Задачи для оценки рабочей и обращение к памяти у мышей

Forced alternation and left-right discrimination tasks using the T-maze have been widely used to assess working and reference memory, respectively, in ...

Isolation and Culture of Human Fungiform Taste Papillae Cells

Выделение и культуры клеток человека Вкус Fungiform Сосочки

Taste cells are highly specialized, with unique histological, molecular and physiological characteristics that permit detection of a wide range of simple ...

Visualization and Genetic Manipulation of Dendrites and Spines in the Mouse Cerebral Cortex and Hippocampus using In utero Electroporation

Visualization and Genetic Manipulation of Dendrites and Spines in the Mouse Cerebral Cortex and Hippocampus using In utero Electroporation

Визуализация и генетических манипуляций дендритов и шипы в мышь коры головного мозга и гиппокамп использования<em&gt; Внутриутробное</em&gt; Электропорация

In utero electroporation (IUE) has become a powerful technique to study the development of different regions of the embryonic nervous system 1-5. To date ...

Laser Capture Microdissection of Neurons from Differentiated Human Neuroprogenitor Cells in Culture

Лазерная Захват микродиссекция нейронов от Дифференцированный человека нейрональные клетки в культуре

Neuroprogenitor cells (NPCs) isolated from the human fetal brain were expanded under proliferative conditions in the presence of epidermal growth factor ...

Measuring Oral Fatty Acid Thresholds, Fat Perception, Fatty Food Liking, and Papillae Density in Humans

Измерение Минет жирных кислот пороговых значений, Fat восприятия, жирной пищи симпатии, и сосочки Плотность в людях

Emerging evidence from a number of laboratories indicates that humans have the ability to identify fatty acids in the oral cavity, presumably via fatty ...

Protocol for Three-dimensional Confocal Morphometric Analysis of Astrocytes

Протокол трехмерной конфокальной морфометрического анализа астроцитов

As glial cells in the brain, astrocytes have diverse functional roles in the central nervous system. In the presence of harmful stimuli, astrocytes modify ...

Peering at Brain Polysomes with Atomic Force Microscopy

Вглядываясь мозга полисом с атомно-силовой микроскопии

The translational machinery, i.e., the polysome or polyribosome, is one of the biggest and most complex cytoplasmic machineries in cells. Polysomes, ...

Protocol for Isolating the Mouse Circle of Willis

Протокол Выделяя мыши Круг Уиллис

The cerebral arterial circle (circulus arteriosus cerebri) or circle of Willis (CoW) is a circulatory anastomosis surrounding the optic chiasma and ...

An Objective and Reproducible Test of Olfactory Learning and Discrimination in Mice

Объективный и воспроизводимые тест обонятельных обучения и дискриминации в мышей

Olfaction is the predominant sensory modality in mice and influences many important behaviors, including foraging, predator detection, mating, and ...

Where You Cut Matters: A Dissection and Analysis Guide for the Spatial Orientation of the Mouse Retina from Ocular Landmarks

Где вы режете вопросы: Рассечение и анализа руководство для пространственной ориентации мыши сетчатки от глазной достопримечательности

Accurately and reliably identifying spatial orientation of the isolated mouse retina is important for many studies in visual neuroscience, including the ...