Name: spot the correct tissue every time in multi-tissue blocks
Uploaded: 2015-05-31T14:00:00
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लेखकों पांडुलिपि की महत्वपूर्ण समीक्षा प्रदान करने के लिए डॉ ब्रेंट हैरिस को धन्यवाद देना चाहूंगा। ये अध्ययन एनआईएच / NCI अनुदान P30-CA051008 में भाग द्वारा समर्थित है जो लोम्बार्डी व्यापक कैंसर केंद्र हिस्तोपैथोलोजी और ऊतक साझा संसाधन में आयोजित की गई। सामग्री केवल लेखकों की जिम्मेदारी है और जरूरी राष्ट्रीय कैंसर संस्थान या स्वास्थ्य के राष्ट्रीय संस्थान के आधिकारिक विचार का प्रतिनिधित्व नहीं करता है।

स्पॉट 1. निर्माण <ol><li> 1 मिनट के लिए या पूरी तरह से भंग कर दिया जब तक एक 15 मिलीलीटर शंक्वाकार ट्यूब या 2 मिलीलीटर microfuge ट्यूब और भंवर में 1 मिलीलीटर ऊतक अंकन डाई करने के लिए गोजातीय सीरम albumin (बीएसए) के 50 मिलीग्राम ?...

<ol>
	<li>Jawhar, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+microarray:+a+rapidly+evolving+diagnostic+and+research+tool.">Tissue microarray: a rapidly evolving diagnostic and research tool.</a> Ann. Saudi. Med. 29 (2), 123-127 (2009).</li><li>Dhir, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+microarrays:+an+overview.">Tissue microarrays: an overview.</a> Methods Mol. Bio. 441, 91-103 (2008).</li><li>Parsons, M., Grabsch, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+to+make+tissue+microarrays.">How to make tissue microarrays.</a> Diagn. 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Morphol. 20 (4), 410-412 (2012).</li><li>Jones, M., Calabresdi, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Agar-gelatin+for+embedding+tissues+prior+to+paraffin+processing.">Agar-gelatin for embedding tissues prior to paraffin processing.</a> BioTechniques. 42, 569-570 (2007).</li><li>Carson, F., Hladik, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Histotechnology: A Self-Instructional Text. , (2009).</li><li>Suvarna, S., Layton, C., Bancroft, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Bancroft&#8217;s Theory and Practice of Histological Techniques. 7th ed. , (2013).</li></ol>

स्पॉट की सफल तैयारी और उपयोग कुछ तकनीकी कदम को सावधान पालन की आवश्यकता है। Hydroxyethyl agarose के पिघलने धीरे-धीरे और कम गर्मी पर किया जाना चाहिए। उच्च गर्मी पर जल्दी पिघलती इष्टतम परिणामों से भी कम समय के लिए agarose क?...

एक भी तेल ब्लॉक में एक से अधिक व्यक्तियों से ऊतकों के नमूनों एम्बेड करने की क्षमता, उपचार और व्यक्तियों के बीच आसान पक्ष द्वारा साइड तुलना में सक्षम बनाता है स्लाइड्स के बीच परिवर्तनशीलता समाप्त, और सेक्शनिंग और नमूनों धुंधला की लागत और काम का बोझ कम कर देता है। ये बहु-ऊतक ब्लॉक आम तौर पर एक गैर सरणी लेआउट में एक से अधिक व्यक्तियों से ऊतक युक्त या तो ऊतक (टीएमए) या तेल ब्लॉक के रूप में उत्पादित कर रहे हैं। नमूना पहचान का रख-रखाव के लिए किसी भी बहु-ऊतक विश्लेषण की सफलता के लिए महत्वपूर्ण है। शोधकर्ताओं ने विश्लेषण की दक्षता में सुधार स्लाइड्स के बीच भिन्नता को कम करने, मूल्यवान ऊतक संसाधनों के संरक्षण, और समय और प्रयोगों 1 की लागत को कम करने के लिए अपने विकास के बाद से tmas उपयोग किया गया है। Tmas के सही ओरिएंटेशन ऊतक कोर 2-4, कोर समूह की विषम व्यवस्था 3, 5 (जैसे, विवाद के बीच खाली स्थान, पंक्तियों या स्तंभों सहित तरीकों की एक किस्म का उपयोग कर पूरा किया जा सकता हैउपचार बनाम एल), &quot;बीकन&quot; कोर 6, और टीएमए मैट्रिक्स 3 के बाहर स्थित नामित अभिविन्यास कोर। इन तरीकों tmas के लिए अच्छी तरह से काम हालांकि, सबसे ऊतक कोर समय के साथ समाप्त हो रहे हैं के रूप में पहचानकर्ता भ्रमित हो सकता है के रूप में अंतराल और रिक्त स्थान के साथ मूल्यवान टीएमए कोर अंतरिक्ष और tmas खपत करते हैं। वे पहचानकर्ता के रूप में वर्दी माइक्रोएरे कोर के कसकर आदेश दिया पैटर्न में विसंगतियों पर भरोसा करते हैं, क्योंकि इसके साथ ही, इन तरीकों में एक सरणी के प्रारूप के बिना बहु-ऊतक ब्लॉक में उपयोग के लिए उपयुक्त नहीं हैं। अधिकांश गैर arrayed बहु-ऊतक ब्लॉक इन aberrations के स्थलों के रूप में बाहर खड़े करता है कि संरचित सरणी ग्रिड प्रदर्शित नहीं करते, परिभाषा से, गैर वर्दी ऊतकों को समायोजित करना चाहिए। एक टीएमए, सबसे बड़ा नुकसान में से एक का उपयोग करने के कई फायदे हैं हालांकि हमेशा काफी हद तक विषम ऊतक 1 के प्रतिनिधि नहीं है जो कोर के छोटे आकार का है। गैर arrayed बहु-ऊतक ब्लॉक टी के कई प्रदानवह एक टीएमए के लाभ, लेकिन बड़े ऊतकों के नमूनों, या जानवरों के अध्ययन से पूरे अंगों होते हैं। एकल कोर का उपयोग ऊतक ब्याज की प्रोटीन के आधार पर पूरे ऊतक वर्गों के साथ सामंजस्य बदलती है और कई वृद्धि हुई क़बूल 7-11 के लिए कई कोर की आवश्यकता होती है। कारण जटिलता और कुछ बायोमार्कर phenotypes की विषम प्रकृति के कारण, tmas अभी भी अपर्याप्त हो सकता कोर की भी बड़ी संख्या (&gt; 10) का उपयोग कर और विश्लेषण 8 के लिए प्रोटीन के अलावा अन्य तरीकों की आवश्यकता हो सकती है। इसके अतिरिक्त, टीएमए निर्माण तकनीकी की मांग समय लगता है, है, और एक ऊतक arrayer करने के लिए प्रारंभिक लागत और में निवेश या पहुँच की आवश्यकता है। गैर तैनात बहु-ऊतक ब्लॉक में काफी कम समय और प्रयास के साथ किसी भी बुनियादी प्रयोगशाला में की गई और सरणियों की अनुमति है या लागत में कटौती और विश्लेषण को आसान बनाने के लिए एक साधन के रूप में अधिक से अधिक ऊतक की आवश्यकता होती है कि अध्ययन के लिए एक मान्य विकल्प है किया जा सकता है। गैर arrayed बहु-ऊतक ब्लॉक इसी प्रकार एक विश्वसनीय आवश्यकता होती है याientation मार्कर नमूना पहचान ट्रैक करने के लिए, हालांकि, इन मार्करों के विकास के लिए सीमित कर दिया गया है। ऊतक के उन्मुखीकरण का वर्णन साहित्य की ज्यादातर ऐसी स्याही 12 के साथ ऊतक गोदने के रूप में व्यक्तिगत ऊतक टुकड़े, एम्बेड करने के लिए सही शारीरिक उन्मुखीकरण पर केंद्रित है, पूर्व प्रसंस्करण से 13 अगर-जिलेटिन में ऊतकों पूर्व embedding, और डिग्री अधिक 14 या टांके 15 के साथ कुछ ऊतकों अंकन । कार्यात्मक हालांकि, इन तरीकों की वजह से अपनी सीमाओं को बहु-ऊतक ब्लॉक में मार्कर के रूप में आदर्श नहीं हैं। एक सिवनी जल्दी के माध्यम से sectioned किया जाएगा और हर खंड में दिखाई नहीं हो सकता। प्रसंस्करण और एम्बेडिंग के दौरान उचित अभिविन्यास में ऊतक रख सकते हैं अगर-जिलेटिन तकनीक का उपयोग कर प्री-embedding, लेकिन आयल ब्लॉक और स्लाइड में कई नमूने के बीच अंतर करने के लिए एक दृश्य संकेत प्रदान नहीं करता है। ऊतक पर notches या डाई विश्लेषण उलझा या महत्वपूर्ण रूपात्मक विवरण रोक देना हो सकता है। वैकल्पिक रूप से, ऊतक पहचानएक गैर arrayed बहु-ऊतक ब्लॉक में एक असममित व्यवस्था में ऊतक टुकड़े के embedding के माध्यम से बनाए रखा है, लेकिन इस 3 या उससे अधिक ऊतक के टुकड़े की आवश्यकता है और विश्लेषण के लिए ऊतकों के इष्टतम व्यवस्था के लिए अनुमति नहीं हो सकती किया जा सकता है। नमूना अभिविन्यास टैग (स्पॉट) स्पष्ट रूप से बहु-ऊतक ब्लॉक में ऊतकों की पहचान करने के लिए एक आसान और सस्ती पद्धति के रूप में विकसित किया है और मौजूदा अभिविन्यास तरीकों पर कई लाभ प्रदान करता है किया गया है। स्पॉट Hydroxyethyl agarose प्रसंस्करण जेल और ऊतक अंकन डाई, से बना है और आयल (चित्रा -2) के साथ घुसपैठ की एक छोटी सी, रंगीन, मूल है। स्पॉट कोर एक बहु-ऊतक आयल ब्लॉक में एक भी ऊतक करने के लिए अगले छोर पर एम्बेडेड और ब्लॉक में और हर वर्ग में एक चमकीले रंग की बिंदी के रूप में प्रकट होता है - स्पष्ट रूप से ब्लॉक और वर्गों की सही ओरिएंटेशन, यह दर्शाता है (चित्रा 1 ए डी) आसान ऊतक पहचान के लिए।

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>HistogelTM Specimen Processing Gel</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>HG-4000-012</td>
			<td><a href="http://www.thermoscientific.com/en/product/richard-allan-scientific-histogel-specimen-processing-gel.html">http://www.thermoscientific.com/en/product/richard-allan-scientific-histogel-specimen-processing-gel.html&#160;</a></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Marking Dye</td>
			<td>Triangle Biomedical Sciences, Inc.</td>
			<td>TMD-5</td>
			<td>Any tissue marking dye would most likely be sufficient.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Arraymold Kit A 2 mm (60 core)</td>
			<td>Arraymold</td>
			<td>20015A</td>
			<td>Any manual tissue arrayer would work similarly.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

spot the correct tissue every time in multi-tissue blocks

मल्टी ऊतक आयल ब्लॉक वृद्धि की दक्षता, प्रयोगात्मक एकरूपता, और कम समय और लागत के साथ उच्च throughput विश्लेषण प्रदान करते हैं। ऊतक बहु-ऊतक आयल ब्लॉकों का बहुमत बना है, लेकिन तेजी, शोधकर्ताओं की योजना बना और उपकरण में पर्याप्त निवेश के बिना ऊतक के लाभ के कई प्रदान कर सकते हैं जो एक से अधिक व्यक्तियों से बड़ा ऊतकों युक्त गैर arrayed ब्लॉकों का उपयोग कर रहे हैं। किसी भी बहु-ऊतक विश्लेषण का एक महत्वपूर्ण घटक के प्रत्येक व्यक्ति के ऊतकों की पहचान करने के लिए इस्तेमाल अभिविन्यास विधि है। विधियों उचित अभिविन्यास और बहु-ऊतक ब्लॉक में ऊतकों की पहचान बनाए रखने के लिए मौजूद हैं, सबसे एक सरणी के भीतर मूल्यवान अंतरिक्ष उपभोग कर सकते हैं, गैर arrayed ब्लॉक करने के लिए अच्छी तरह से अनुकूल नहीं हैं और / या मानक ऊतक विज्ञान प्रयोगशाला में उत्पादन के लिए मुश्किल हैं। नमूना अभिविन्यास टैग (स्पॉट) स्पष्ट रूप से तेल ब्लॉक और सभी ऊतक वर्गों के लिए में दिख रहा है कि एक साधारण, कम लागत अभिविन्यास उपकरण हैarrayed और गैर arrayed लेआउट में R विश्वसनीय नमूना पहचान। स्पॉट यह ऊतक के लिए किसी भी प्रत्यक्ष संशोधन की आवश्यकता नहीं है के रूप में गैर arrayed ब्लॉकों के लिए मौजूदा अभिविन्यास तरीकों पर लाभ प्रदान करता है और ऊतक के टुकड़े की व्यवस्था में लचीलापन के लिए अनुमति देता है।

स्पॉट सब आयल वर्गों में एक दौर, आयल ब्लॉक में चमकीले रंग डॉट (चित्रा 1 ए और 2 डी), के रूप में प्रकट होता है, और एच एंड ई या आईएचसी धुंधला प्रक्रिया के माध्यम से गिलास स्लाइड पर रहता है (आंकड़े 1 ?...

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SpOT the Correct Tissue Every Time in Multi-tissue Blocks

नमूना अभिविन्यास टैग (स्पॉट) के प्रयोजन के बहु-ऊतक आयल ब्लॉकों में अलग-अलग ऊतक पहचान करने में सहायता करने के लिए एक अभिविन्यास उपकरण के रूप में कार्य करने के लिए है। इन प्रोटोकॉल यह आम, कम लागत ऊतक विज्ञान सामग्री से आसानी से निर्माण और आयल ब्लॉक और वर्गों में एक विश्वसनीय दृश्य मार्कर के रूप में कार्य करता है कि कैसे प्रदर्शित करता है।

सही ऊतक मल्टी ऊतक ब्लॉक में हर समय हाजिर

Multi-tissue paraffin blocks provide high throughput analysis with increased efficiency, experimental uniformity, and reduced time and cost. Tissue ...

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Rodent surgery is often an important component in assessing the utility of engineered tissues. A wide variety of surgical procedures can be performed in ...

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In this study, we explore the interaction between the bovine cysteine protease inhibitor cystatin B and a catalytically inactive form of papain (Fig. 1), ...

Quantitation of &gamma;H2AX Foci in Tissue Samples

Quantitation of ÃƒÅ½Ã‚Â³H2AX Foci in Tissue Samples

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DNA double-strand breaks (DSBs) are particularly lethal and genotoxic lesions, that can arise either by endogenous (physiological or pathological) ...

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