Name: spot the correct tissue every time in multi-tissue blocks
Uploaded: 2015-05-31T14:00:00
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著者は、原稿の重要なレビューを提供するための博士ブレントハリスに感謝したいと思います。これらの研究は、NIH / NCI助成金P30-CA051008によって部分的にサポートされているロンバルディ総合がんセンター病理組織学および組織の共有リソースで行われました。内容はもっぱら著者の責任であり、必ずしも国立がん研究所や国立衛生研究所の公式見解を示すものではありません。

スポットの1建設<ol><li> 1分間または完全に溶解するまで15ミリリットルコニカルチューブまたは2ミリリットルマイクロチューブ、ボルテックスで1ミリリットルの組織マーキング色素にウシ血清アルブミン（BSA）50mgを追加します。 注：このプロトコルでは、生化学グレードBSAを使用しています。他のグレードと純度がテストされていないが、それはグレードと純度がスポットの成功に大...

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	<li>Jawhar, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+microarray:+a+rapidly+evolving+diagnostic+and+research+tool.">Tissue microarray: a rapidly evolving diagnostic and research tool.</a> Ann. Saudi. Med. 29 (2), 123-127 (2009).</li><li>Dhir, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+microarrays:+an+overview.">Tissue microarrays: an overview.</a> Methods Mol. Bio. 441, 91-103 (2008).</li><li>Parsons, M., Grabsch, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+to+make+tissue+microarrays.">How to make tissue microarrays.</a> Diagn. 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Histochem. 86 (5), 345-350 (2011).</li><li>Wampfler, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determining+the+optimal+numbers+of+cores+based+on+tissue+microarray+antibody+assessment+in+non-small+cell+lung+cancer.">Determining the optimal numbers of cores based on tissue microarray antibody assessment in non-small cell lung cancer.</a> J Cancer Sci. Ther. 3, 120-124 (2011).</li><li>Quagliata, L., Schlageter, M., Quintavalle, C., Tornillo, L., Terracciano, L. 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Morphol. 20 (4), 410-412 (2012).</li><li>Jones, M., Calabresdi, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Agar-gelatin+for+embedding+tissues+prior+to+paraffin+processing.">Agar-gelatin for embedding tissues prior to paraffin processing.</a> BioTechniques. 42, 569-570 (2007).</li><li>Carson, F., Hladik, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Histotechnology: A Self-Instructional Text. , (2009).</li><li>Suvarna, S., Layton, C., Bancroft, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Bancroft&#8217;s Theory and Practice of Histological Techniques. 7th ed. , (2013).</li></ol>

スポットの調製に成功したと活用は、いくつかの技術的な手順に慎重に遵守する必要があります。ヒドロキシエチルアガロースの溶融がゆっくりと弱火で行われるべきです。高熱で迅速に溶融して最適な結果よりも少ないため、アガロースのいくつかの破壊をもたらすことができます。処理のための片に色素を含んだプラグを切断すると、それぞれの作品の厚さが4.5ミリメートルより大きく?...

単一のパラフィンブロックに複数の個人から組織サンプルを埋め込む機能は、トリートメントや個人間で簡単に並べて比較を可能にするスライド間のばらつきを排除し、標本を切​​片と染色のコストと作業負荷を軽減します。これらの多組織ブロックは、典型的には、組織マイクロアレイ（TMA）または非アレイレイアウトにおける複数の個体からの組織を含むパラフィンブロックのいずれかとして製造されます。サンプルのアイデンティティの維持は任意の多組織解析の成功に不可欠です。研究者は、分析の効率を向上させるスライド間のばらつきを低減し、貴重な組織のリソースを節約し、実験1の時間とコストを削減するために、それらの開発以来のTMAを使用しています。のTMAの正しい姿勢は、組織コア2-4との間の空白、行や列、コアグループ3,5の非対称の配置（ 例えば、制御を含め、様々な方法を用いて達成することができます治療対 L）、「ビーコン」コア6、およびTMAマトリックス3の外側に配置された指定の向きコア。これらの方法はのTMAのためにうまく機能しているが、ほとんどは組織コアが時間をかけて排出されるように識別子が混乱になるかもしれとして隙間やスペースで貴重なTMAコア空間とのTMAを消費します。彼らは識別子として均一なマイクロアレイコアの緊密注文パターンの異常に依存しているためさらに、これらの方法は、アレイ形式なく、マルチ組織ブロックでの使用には適していません。ほとんどの非アレイマルチ組織ブロック不均一な組織に対応しなければならないと、定義により、これらの収差は、ランドマークとして目立つ構造のアレイグリッドを表示しません。 TMA、最大の欠点のいずれかを使用することには多くの利点があるが、常に大部分は不均一な組織1の代表ではないコアのサイズが小さいです。非アレイマルチ組織ブロックは、tの多くを提供します彼はTMAの利点が、より大きな組織サンプル、または動物試験から全体の臓器が含まれています。単一コアを使用して、組織マイクロアレイは、目的のタンパク質に基づいて全組織切片と一致しており、多くの変化が大きく一致7-11ための複数のコアを必要とします。による複雑さといくつかのバイオマーカー表現型の不均一性のために、コアのさえ大量に使用してのTMA（&gt; 10）はまだ不十分であることができ、分析の8のためのマイクロアレイ以外の方法が必要な場合があります。さらに、TMAの構築は、技術的に厳しい時間がかかり、初期コストと投資にまたは組織アレイヤーにアクセスする必要があります。非アレイマルチ組織ブロックが大幅に少ない時間と労力で任意の基本的な実験室で行われ、アレイが許可またはコストを削減し、分析を単純化する手段として、より多くの組織を必要とする研究のための有効な代替手段であることができます。 非アレイマルチ組織ブロックは、同様に信頼性を必要としますか、ientationマーカーがサンプル識別を追跡するために、しかし、これらのマーカーの開発が制限されています。組織の向きを説明する文献の多くは、このようなインク12で組織を刺青のような個々の組織片を、埋め込 ​​むための正しい生理向きに焦点を当てて、前処理13に寒天ゼラチンで組織を事前に埋め込 ​​み、およびノッチ14または縫合糸15で特定の組織をマーキング。機能が、これらの方法は、それらの制限によるマルチ組織ブロック内のマーカーとして理想的ではありません。縫合糸はすぐに通って区分され、各セクションに表示されない場合があります。寒天、ゼラチンを使用して事前に埋め込む技術は、加工及び埋め込み中に適切な方向に組織を維持することができるが、パラフィンブロック、スライドに複数のサンプルを区別するための視覚的な手掛かりを提供していません。組織のノッチまたは色素が分析を複雑にしたり、重要な形態学的な詳細を閉塞することができます。あるいは、組織アイデンティティ非アレイマルチ組織ブロックに非対称な配置で組織片の埋め込みによって維持が、これは3つ以上の組織片を必要とし、分析のための組織の最適な配置を可能にしない場合がありますすることができます。 試料オリエンテーションタグ（スポット）は、明らかに、マルチ組織ブロック内の組織を同定するための簡単​​で安価な方法として開発され、既存の配向方法に比べて多くの利点を提供していますされています。スポットは、ヒドロキシエチルアガロース処理ゲルおよび組織マーキング染料、から構成され、パラフィン（ 図2C）を浸透させ、小さな、カラフル、コアです。スポットコアは、マルチ組織のパラフィンブロック内の単一の組織の横端部に埋め込 ​​まれ、ブロック内の、すべてのセクション（ 図1A - D）で鮮やかな色のドットとして表示され、明らかにブロックとセクションの正しい方向を示します簡単に組織識別のため。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>HistogelTM Specimen Processing Gel</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>HG-4000-012</td>
			<td><a href="http://www.thermoscientific.com/en/product/richard-allan-scientific-histogel-specimen-processing-gel.html">http://www.thermoscientific.com/en/product/richard-allan-scientific-histogel-specimen-processing-gel.html&#160;</a></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Marking Dye</td>
			<td>Triangle Biomedical Sciences, Inc.</td>
			<td>TMD-5</td>
			<td>Any tissue marking dye would most likely be sufficient.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Arraymold Kit A 2 mm (60 core)</td>
			<td>Arraymold</td>
			<td>20015A</td>
			<td>Any manual tissue arrayer would work similarly.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

spot the correct tissue every time in multi-tissue blocks

マルチ組織のパラフィンブロックは、効率の向上、実験的均一性、および減少した時間とコストで高スループット分析を提供しています。組織マイクロアレイは、マルチ組織のパラフィンブロックの大部分を占めるが、ますます、研究者は、計画や設備の大幅な投資なし組織マイクロアレイの多くの利点を提供することができる複数の個人から大きな組織を含む非アレイブロックを使用しています。任意の多組織分析の重要な要素は、個々の組織を識別するために使用される配向法です。方法が適切な方向およびマルチ組織ブロック内の組織の識別を維持するために存在するが、大部分は、アレイ内の貴重なスペースを消費する可能性があり、非アレイブロックに適していない、および/または標準的な組織学の研究室で製造することが困難です。試料オリエンテーションタグ（スポット）は、パラフィンブロックとfoのすべての組織切片ではっきりと見ることが簡単で低コスト指向のツールです。配列と非アレイレイアウトでR信頼性の高い検体識別。スポットは、組織への直接の変更を必要としないように非アレイブロックのための既存の配向方法を上回る利点を提供し、組織片の配置の自由度を可能にします。

スポットは、すべてのパラフィン切片でパラフィンブロック（ 図1Aおよび2D）でのラウンド、鮮やかな色のドットとして表示され、H＆EまたはIHC染色手順を介してスライドガラス（ 図1B - 1Dおよび2D）に残ります。この明らかな視覚的な手がかり助剤は、それぞれの個々の組織片を識別し、組織学技師が顕微鏡でスライドからデー?...

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SpOT the Correct Tissue Every Time in Multi-tissue Blocks

試料オリエンテーションタグ（スポット）の目的は、マルチ組織のパラフィンブロック内の個々の組織の識別を支援するためのオリエンテーションツールとして機能することです。これらのプロトコルは、それが一般的な、低コストの組織学物質から容易に構築し、パラフィンブロックとセクションの信頼性の高い視覚的なマーカーとして機能する方法を示しています。

マルチ組織ブロック内のスポットの正しい組織毎回

Multi-tissue paraffin blocks provide high throughput analysis with increased efficiency, experimental uniformity, and reduced time and cost. Tissue ...

Research

JoVE Journal

Biology

Actin Co-Sedimentation Assay; for the Analysis of Protein Binding to F-Actin

アクチン共沈降アッセイ、F -アクチンへの結合タンパク質の解析のための

The actin cytoskeleton within the cell is a network of actin filaments that allows the movement of cells and cellular processes, and that generates ...

Implantation of Engineered Tissue in the Rat Heart

ラット心臓における培養組織の移植

Rodent surgery is often an important component in assessing the utility of engineered tissues. A wide variety of surgical procedures can be performed in ...

The Importance of Correct Protein Concentration for Kinetics and Affinity Determination in Structure-function Analysis 

速度論と構造機能解析のアフィニティ定量のための適切なタンパク質濃度の重要性

In this study, we explore the interaction between the bovine cysteine protease inhibitor cystatin B and a catalytically inactive form of papain (Fig. 1), ...

Quantitation of &gamma;H2AX Foci in Tissue Samples

Quantitation of ÃƒÅ½Ã‚Â³H2AX Foci in Tissue Samples

組織サンプルのγH2AX病巣の定量

DNA double-strand breaks (DSBs) are particularly lethal and genotoxic lesions, that can arise either by endogenous (physiological or pathological) ...

Time-lapse Microscopy of Early Embryogenesis in Caenorhabditis elegans

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の初期発生のタイムラプス顕微鏡線虫（Caenorhabditis elegans）

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マウス涙腺を操作する

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High-resolution Time-lapse Imaging and Automated Analysis of Microtubule Dynamics in Living Human Umbilical Vein Endothelial Cells

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生後マウスにおける聴覚ブラの解剖：中耳の骨の単離および組織学的解析

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