Name: instillation and fixation methods useful in mouse lung cancer research
Uploaded: 2015-08-31T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Instillation and Fixation Methods Useful in Mouse Lung Cancer Research at JoVE.com

يصف بروتوكول التالية النظام الذي يعمل بشكل جيد في 20-35 ز الفئران. طريقة يمكن بسهولة للتكيف مع الفئران أكبر أو أصغر ببساطة عن طريق تغيير حجم القسطرة. وتمت الموافقة على جميع البروتوكولات الحيوانية من لجنة رعاية واستخدام الحيوان جامعة جونز هوبكنز. <p class="jove_title" style=";text-ali...

<ol>
	<li>Brown, R. H., Walters, D. M., Greenberg, R. S., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+of+endotracheal+intubation+and+pulmonary+functional+assessment+for+repeated+studies+in+mice.">A method of endotracheal intubation and pulmonary functional assessment for repeated studies in mice.</a> J Appl Physiol. 87, 2362-2365 (1999).</li><li>Walters, D. M., Wills-Karp, M., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+cellular+profile+and+lung+function+with+repeated+bronchoalveolar+lavage+in+individual+mice.">Assessment of cellular profile and lung function with repeated bronchoalveolar lavage in individual mice.</a> Physiol Genomics. 2, 29-36 (2000).</li><li>Hamacher, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microscopic+wire+guide-based+orotracheal+mouse+intubation:+description,+evaluation+and+comparison+with+transillumination.">Microscopic wire guide-based orotracheal mouse intubation: description, evaluation and comparison with transillumination.</a> Laboratory animals. 42, 222-230 (2008).</li><li>Spoelstra, E. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+and+simple+method+for+endotracheal+intubation+of+mice.">A novel and simple method for endotracheal intubation of mice.</a> Laboratory. 41, 128-135 (2007).</li><li>Zhao, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+technique+for+retrograde+intubation+in+mice.">A technique for retrograde intubation in mice.</a> Lab animal. 35, 39-42 (2006).</li><li>Rivera, B., Miller, S., Brown, E., Price, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+method+for+endotracheal+intubation+of+mice+and+rats+used+in+imaging+studies.">A novel method for endotracheal intubation of mice and rats used in imaging studies.</a> Contemporary topics in laboratory animal science / American Association for Laboratory Animal Science. 44, 52-55 (2005).</li><li>Vergari, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+method+of+orotracheal+intubation+in+mice.">A new method of orotracheal intubation in mice.</a> European review for medical and pharmacological sciences. 8, 103-106 (2004).</li><li>Vergari, A., Polito, A., Musumeci, M., Palazzesi, S., Marano, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Video-assisted+orotracheal+intubation+in+mice.">Video-assisted orotracheal intubation in mice.</a> Laboratory animals. 37, 204-206 (2003).</li><li>Hastings, R. H., Summers-Torres, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+Laryngoscopy+in+Mice.">Direct Laryngoscopy in Mice.</a> Contemporary topics in laboratory animal science / American Association for Laboratory Animal Science. 38, 33-35 (1999).</li><li>Hsia, C. C., Hyde, D. M., Ochs, M., Weibel, E. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+official+research+policy+statement+of+the+American+Thoracic+Society/European+Respiratory+Society:+standards+for+quantitative+assessment+of+lung+structure.">An official research policy statement of the American Thoracic Society/European Respiratory Society: standards for quantitative assessment of lung structure.</a> Am J Respir Crit Care Med. 181, 394-418 (2010).</li><li>Foster, W. M., Walters, D. M., Longphre, M., Macri, K., Miller, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methodology+for+the+measurement+of+mucociliary+function+in+the+mouse+by+scintigraphy.">Methodology for the measurement of mucociliary function in the mouse by scintigraphy.</a> J Appl Physiol. 90, 1111-1117 (2001).</li><li>Cai, Y., Kimura, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+intratracheal+intubation+to+study+the+pathology+and+physiology+of+mouse+lung.">Noninvasive intratracheal intubation to study the pathology and physiology of mouse lung.</a> Journal of visualized experiments : JoVE. , e50601 (2013).</li><li>Das, S., Macdonald, K., Chang, H. Y., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+method+of+mouse+lung+intubation.">A simple method of mouse lung intubation.</a> Journal of visualized experiments : JoVE. , (2013).</li><li>MacDonald, K. D., Chang, H. Y., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+simple+method+of+mouse+lung+intubation.">An improved simple method of mouse lung intubation.</a> J Appl Physiol. 106, 984-987 (2009).</li><li>Lum, H., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+10%+formalin+fixation+on+fixed+lung+volume+and+lung+tissue+shrinkage.">Effects of 10% formalin fixation on fixed lung volume and lung tissue shrinkage.</a> American Reveiw of Respiratory Diseases. 132, 1078-1083 (1985).</li><li>Bishai, J., Fields, M. J., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+Mouse+Lung+Volumes+Inflated+with+Air+and+Instilled+Fixatives.">Comparison of Mouse Lung Volumes Inflated with Air and Instilled Fixatives.</a> Proc Am Thorac Soc. 3, A549 (2006).</li><li>Mitzner, W., Brown, R., Lee, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+measurement+of+lung+volumes+in+mice.">In vivo measurement of lung volumes in mice.</a> Physiol Genomics. 4, 215-221 (2001).</li></ol>

الإجراءات المذكورة هنا لديها العديد من المزايا. أولا المعدات المطلوبة بسيطة وغير مكلفة. ثانيا، التنبيب يمكن أن يتم بسرعة مع أخطاء قليلة. ثالثا، القدرة على إصلاح الرئتين عند ضغط ثابت، ومن ثم قياس حجم الرئة ثابتة تسمح الكمي السليم للهياكل أو الخلايا في الرئة 10. </p...

لعدد من الأسباب، سرطان الرئة لم يتم دراستها على نطاق واسع في الماوس. وأحد أسباب ذلك هو أن الوصول إلى الرئة من الصعب جدا في الجسم الحي، وليس عادة يتم التحليل الكمي من الرئتين الثابتة. تم تصميم الطرق الموضحة في هذه الورقة لتصحيح هذا الوضع. الأهداف هنا هي لوصف أساليب بسيطة من شأنها أن تساعد إلى حد كبير في إعداد وتحليل الماوس الرئتين مع سرطان الرئة أو أمراض أخرى. في حين أن أيا من هذه الطرق هي جديدة تماما، لم تكن قد قدمت معا وسائل مستقل في الطريقة المبسطة كما هو موضح هنا. كان هناك عدد من المخطوطات التي وصفتها وسائل لالتنبيب من الرئة الماوس في المقام الأول لغرض القيام ظائف الرئة تكرار أو غسل القصبات في الفئران الفردية في الدراسات الطولية. منذ أن الورقة الأصلية، كانت هناك العديد من الصحف الاخرى التي وصفت أساليب مختلفة لمذكرات التفاهمالبريد التنبيب 1 -9. وفي حين أن جميع هذه الأساليب يمكن أن تستخدم بنجاح، وعادة ما تتطلب قدرا كبيرا من التدريب، وغالبا ما تكون لا تخلو من نسبة الفشل غير بديهي. وبالإضافة إلى ذلك، من أجل إجراء قياسات وظائف الرئة، تحتاج قنية لتناسب القصبة الهوائية بإحكام بما فيه الكفاية بحيث لا يوجد أي تسرب الهواء. ومع ذلك، الاستخدام العملي آخر لالتنبيب هو تقديم وكلاء محددة (الخلايا السرطانية أو إهانات أخرى) أو العقاقير العلاجية مباشرة إلى الرئة. لا يتطلب هذا الإجراء قنية الضيقة ولا أي معدات متطورة وظائف الرئة. ميزة جديدة لهذا الأسلوب هو موضح هنا ينطوي على إجراء العمليات الجراحية البسيطة التي تسمح للتنبيب دون أي إمكانية للقنية دخول المريء. هذا النهج بسيط يمكن التنبيب ناجحة مع التدريب أو الخبرة قليل نسبيا. ما يصل الى 30 الفئران / ساعة يمكن علاجها باستخدام هذا النهج مع نسبة الفشل تقترب من الصفر. مرة واحدة رانه الفئران تكون جاهزة للضحى، ثم يمكن إزالة الرئتين المصابين أو سرطانية لنسيجية وتحليل الباثولوجي. ومع ذلك، من أجل تحديد أي المتغيرات نسيجية بشكل صحيح للمقارنة مع غيرها من الرئتين، من الضروري توحيد إجراءات تثبيت وتحديد بشكل صحيح حجم الرئة الثابتة 10. وتصف هذه الورقة بالتفصيل الإجراءات البسيطة التي تسمح إجراءات التثبيت موحدة وكذلك وسيلة لقياس حجم الرئة الثابتة. حجم هو المقياس الأساسي في تحديد مقدار الأنسجة، لأنه بدون مثل هذا القرار الحجم، الكثافة النسبية فقط ويمكن قياس 10. مرة واحدة ومن المعروف أن حجم الرئة، ومع ذلك، يمكن بعد ذلك كميا القياسات المطلقة للخلايا والقياسات الهيكلية الأخرى في الرئة.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Laboratory Balance</td>
			<td>Ohaus</td>
			<td>Adventurer Pro Model AV 313&#160;</td>
			<td>Other balances can be used if they have a range of 1 - 300g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20 g Luer intravenous catheter</td>
			<td>Insylte</td>
			<td></td>
			<td>Several other possible vendors, e.g., Jelco Optiva</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>500 mL laboratory bottle</td>
			<td>Various</td>
			<td></td>
			<td>Several other possible vendors</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

instillation and fixation methods useful in mouse lung cancer research

القدرة على غرس وكلاء الحية، الخلايا، أو المواد الكيميائية مباشرة في الرئة دون جرح أو قتل الفئران هي أداة هامة في أبحاث السرطان الرئة. على الرغم من أن هناك عددا من الطرق التي تم نشرها تبين كيفية تدخله الفئران لقياس وظائف الرئة، لا شيء هم دون مشاكل المحتملة لتقطير القصبة الهوائية السريع في أفواج كبيرة من الفئران. في هذه الورقة، ووصف طريقة بسيطة وسريعة تمكن محقق للقيام بمثل هذه instillations بطريقة فعالة. هذه الطريقة لا تتطلب أي أدوات خاصة أو إضاءة ويمكن تعلم مع الممارسة قليلة جدا. أنه ينطوي التخدير الماوس، مما يجعل شق صغير في الرقبة لتصور القصبة الهوائية، ومن ثم ادخال قسطرة وريدية مباشرة. إغلاق شق صغير بسرعة مع لاصق الأنسجة، ويسمح للفئران لاسترداد. يمكن للطالب المهرة أو فني تفعل instillations بمعدل من 2 دقيقة / الماوس. مرة واحدة روقال انه تم تأسيس السرطان، وكثيرا ما يكون هناك حاجة لتحليل نسيجية الكمي للرئتين. علم الأمراض تقليديا عادة لا تهتم لتوحيد التضخم الرئة أثناء التثبيت، وغالبا ما تستند التحليلات على نظام تسجيل النقاط التي يمكن أن تكون ذاتية تماما. في حين أن هذا قد يكون وقت كاف بما فيه الكفاية لتقديرات الإجمالية لحجم الورم في الرئة، أي الكمي stereological السليم للبنية الرئة أو خلايا يتطلب إجراء التثبيت استنساخه واللاحق قياس حجم الرئة. نحن هنا وصف إجراءات بسيطة يمكن الاعتماد عليها لتحديد كلا الرئتين تحت ضغط ومن ثم قياس دقيق لحجم الرئة الثابتة. والشرط الوحيد هو توازن المخبرية التي هي دقيقة على مجموعة من 1 ملغ-300 غرام. الإجراءات المعروضة هنا وبالتالي يمكن أن تحسن بشكل كبير من القدرة على خلق وعلاجه، وتحليل سرطان الرئة في الفئران.

الإجراء يصف في البروتوكول الأول لا في حد ذاته يؤدي إلى أية نتائج المعمم. فهو يصف سوى وسيلة موثوقة جدا لغرس المواد مباشرة إلى القصبة الهوائية. الشكل 7 يبين مثال على الرئة التي تم غرسها الأزرق التريبان مع الطريقة الموصوفة هنا. هناك توزيع واسع النطاق للصباغة، عل...

Watch this Scientific Journal Video about Instillation and Fixation Methods Useful in Mouse Lung Cancer Research at JoVE.com

Instillation and Fixation Methods Useful in Mouse Lung Cancer Research

والهدف من هذه الورقة هو وصف أساليب بسيطة من شأنها أن تساعد إلى حد كبير في إعداد وتحليل الماوس الرئتين مع سرطان الرئة أو أمراض أخرى. نقدم 3 بروتوكولات ببساطة وبشكل موثوق تنفيذ instillations الرئة، والتثبيت، وقياسات حجم الرئة.

تقطير والتثبيت طرق مفيدة في الرئة ماوس لأبحاث السرطان

The ability to instill live agents, cells, or chemicals directly into the lung without injuring or killing the mice is an important tool in lung cancer ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Multi-photon Imaging of Tumor Cell Invasion in an Orthotopic Mouse Model of Oral Squamous Cell Carcinoma

متعدد الفوتون التصوير من غزو خلايا الورم في الفأر نموذج مثلي الفم سرطان الخلايا الحرشفية

Loco-regional invasion of head and neck cancer is linked to metastatic risk and presents a difficult challenge in designing and implementing patient ...

Multi-modal Imaging of Angiogenesis in a Nude Rat Model of Breast Cancer Bone Metastasis Using Magnetic Resonance Imaging, Volumetric Computed Tomography and Ultrasound

ومتعددة الوسائط التصوير من الأوعية الدموية في نموذج الفئران عاري من سرطان الثدي الإنبثاث العظام باستخدام التصوير بالرنين المغناطيسي، الحجمي التصوير المقطعي والموجات فوق الصوتية

Angiogenesis is an essential feature of cancer growth and metastasis formation. In bone metastasis, angiogenic factors are pivotal for tumor cell ...

A Simple Method of Mouse Lung Intubation

طريقة بسيطة لتركيب الانبوبة الرئة ماوس

A  simple procedure to intubate mice for pulmonary function measurements would  have several advantages in longitudinal studies with limited numbers or  ...

Noninvasive Intratracheal Intubation to Study the Pathology and Physiology of Mouse Lung

موسع داخل الرغامى التنبيب لدراسة علم الأمراض وعلم وظائف الأعضاء من الرئة ماوس

The use of a model that mimics the condition of lung diseases in humans is critical for studying the pathophysiology and/or etiology of a particular ...

Diagnostic Ultrasound Imaging of Mouse Diaphragm Function

التشخيص بالموجات فوق الصوتية التصوير من ماوس الحجاب الحاجز وظيفة

Function analysis of rodent respiratory skeletal muscles, particularly the diaphragm, is commonly performed by isolating muscle strips using invasive ...

The Bovine Lung in Biomedical Research: Visually Guided Bronchoscopy, Intrabronchial Inoculation and In Vivo Sampling Techniques

The Bovine Lung in Biomedical Research: Visually Guided Bronchoscopy, Intrabronchial Inoculation and In Vivo Sampling Techniques

والبقري الرئة في البحوث الطبية الحيوية: إذ تسترشد بصريا القصبات، داخل القصبة التلقيح و<em&gt; في فيفو</em&gt; تقنيات أخذ العينات

There is an ongoing search for alternative animal models in research of respiratory medicine. Depending on the goal of the research, large animals as ...

Intubation-mediated Intratracheal (IMIT) Instillation: A Noninvasive, Lung-specific Delivery System

Intubation-mediated Intratracheal IMIT Instillation: A Noninvasive, Lung-specific Delivery System

بوساطة التنبيب داخل الرغامى (IMIT) تقطير: وموسع والرئة محدد نظام تسليم

Respiratory disease studies typically involve the use of murine models as surrogate systems. However, there are significant physiologic differences ...

Studying Pancreatic Cancer Stem Cell Characteristics for Developing New Treatment Strategies

دراسة سرطان البنكرياس الجذعية خصائص الخلايا لتطوير استراتيجيات علاجية جديدة

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) contains a subset of exclusively tumorigenic cancer stem cells (CSCs) which have been shown to drive tumor ...

Working with Human Tissues for Translational Cancer Research

العمل مع الأنسجة البشرية لبالحركة أبحاث السرطان

Medical research for human benefit is greatly impeded by the necessity for human tissues and subjects. However, upon obtaining consent for human ...

Evaluation of Lung Metastasis in Mouse Mammary Tumor Models by Quantitative Real-time PCR

تقييم الرئة الانبثاث في ماوس الثديية ورم المجموعات بواسطة الكمي في الوقت الحقيقي PCR

Metastatic disease is the spread of malignant tumor cells from the primary cancer site to a distant organ and is the primary cause of cancer associated ...