Name: eye irritation test (eit) for hazard identification of eye irritating chemicals using reconstructed human cornea-like epithelial (rhce) tissue model
Uploaded: 2015-08-23T14:00:00
Duration: 10 min 13 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Eye Irritation Test EIT for Hazard Identification of Eye Irritating Chemicals using Reconstructed Human Cornea-like Epithelial RhCE Tissue Model at JoVE.com

فإن الكتاب أود أن أشكر الدكتور جون Harbell لدعمه العلمي والوقت المخصص للمشروع تمر اقتصاداتها بمرحلة انتقال. أيضا فإن الكتاب أود أن أشكر بيرسدورف AG (ألمانيا)، IIVS (الولايات المتحدة الأمريكية)، ماري كاي شركة (الولايات المتحدة)، آفون منتجات شركة (الولايات المتحدة الأمريكية)، وبروكتر أند غامبل / Cosmital (سويسرا)، مختبر بيار فابر (فرنسا)، مختبرات هارلان (المملكة المتحدة)، وLVMH برفوم (فرنسا) للمشاركة في موضوع الوسط الدولي قبل التحقق والتحقق دراسات عن تجارب تهيج العين 15.

<ol>
	<li>National Toxicology Program (NTP) Interagency Center for the Evaluation of Alternative Toxicological Methods (NICEATM). <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Request+for+Ocular+Irritancy+Test+Data+From+Human,+Rabbit,+and+In+Vitro+Studies+Using+Standardized+Testing+Methods.">Request for Ocular Irritancy Test Data From Human, Rabbit, and In Vitro Studies Using Standardized Testing Methods.</a> Federal Register. 72 (109), 31582-31583 (2007).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+(EC)+No+1907/2006+of+the+European+Parliament+and+of+the+Council+of+18+December+2006+concerning+the+Registration,+Evaluation,+Authorisation+and+Restriction+of+Chemicals+(REACH),+establishing+a+European+Chemicals+Agency,+amending+Directive+1999/45/EC+and+repealing+Council+Regulation+(EEC)+No+793/93+and+Commission+Regulation+(EC)+No+1488/94+as+well+as+Council+Directive+76/769/EEC+and+Commission+Directives+91/155/EEC,+93/67/EEC,+93/105/EC+and+2000/21/EC.">Regulation (EC) No 1907/2006 of the European Parliament and of the Council of 18 December 2006 concerning the Registration, Evaluation, Authorisation and Restriction of Chemicals (REACH), establishing a European Chemicals Agency, amending Directive 1999/45/EC and repealing Council Regulation (EEC) No 793/93 and Commission Regulation (EC) No 1488/94 as well as Council Directive 76/769/EEC and Commission Directives 91/155/EEC, 93/67/EEC, 93/105/EC and 2000/21/EC.</a> OJ. L396 (49), 1-849 (2006).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Globally Harmonized System of Classification and Labelling of Chemicals (GHS). , (2013).</li><li>Draize, J. H., Woodard, G., Calvery, H. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+the+Study+of+Irritation+and+Toxicity+of+Substances+Applied+Topically+to+the+Skin+and+Mucous+Membranes.">Methods for the Study of Irritation and Toxicity of Substances Applied Topically to the Skin and Mucous Membranes.</a> J Pharmacol Exp Ther November. 82, 377-390 (1944).</li><li>Adriaens, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retrospective+analysis+of+the+Draize+test+for+serious+eye+damage/eye+irritation:+importance+of+understanding+the+in+vivo+endpoints+under+UN+GHS/EU+CLP+for+the+development+and+evaluation+of+in+vitro+test+methods.">Retrospective analysis of the Draize test for serious eye damage/eye irritation: importance of understanding the in vivo endpoints under UN GHS/EU CLP for the development and evaluation of in vitro test methods.</a> Arch tox. 88, 701-723 (2014).</li><li>Balls, M., Botham, P. A., Bruner, L. H., Spielmann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+EC/HO+international+validation+study+on+alternatives+to+the+Draize+eye+irritation+test.">The EC/HO international validation study on alternatives to the Draize eye irritation test.</a> Toxicol in Vitro. 9, 871-929 (1995).</li><li>Curren, R. D., Harbell, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ocular+safety:+a+silent+(in+vitro)+success+story.">Ocular safety: a silent (in vitro) success story.</a> Altern Lab Anim. 30, 69-74 (2002).</li><li>Wilhelmus, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Draize+Eye+Test.">The Draize Eye Test.</a> Survey of Ophthalmology. 45, 493-515 (2001).</li><li>Curren, R. D., Harbell, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+alternatives+for+ocular+irritation.">In vitro alternatives for ocular irritation.</a> Environ health persp. 106, 485-492 (1998).</li><li>McCain, N. E., Binetti, R. R., Gettings, S. D., Jones, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+ocular+irritation+ranges+of+market-leading+cosmetic+and+personal-care+products+using+an+in+vitro+tissue+equivalent.">Assessment of ocular irritation ranges of market-leading cosmetic and personal-care products using an in vitro tissue equivalent.</a> Toxicologist. 66, 243 (2002).</li><li>Niranjan, P., Dang, A. H., January, B. G., Gomez, C., Harbell, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+the+EpiOcular+assay+for+preclinical+qualification+of+formulas+for+human+clinical+studies.">Use of the EpiOcular assay for preclinical qualification of formulas for human clinical studies.</a> Toxicologist. 96, 249 (2007).</li><li>Yin, X. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prediction+of+ocular+irritation+potential+of+surfactants-based+formulations+at+different+concentrations+using+the+EpiOcular+model.">Prediction of ocular irritation potential of surfactants-based formulations at different concentrations using the EpiOcular model.</a> Toxicologist. 108, 378 (2009).</li><li>Harbell, J., Curren, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+methods+for+the+prediction+of+ocular+and+dermal+toxicity.">In vitro methods for the prediction of ocular and dermal toxicity.</a> Handbook of Toxicology. , (2001).</li><li>Kaluzhny, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+the+EpiOcular(TM)+eye+irritation+test+for+hazard+identification+and+labelling+of+eye+irritating+chemicals+in+response+to+the+requirements+of+the+EU+cosmetics+directive+and+REACH+legislation.">Development of the EpiOcular(TM) eye irritation test for hazard identification and labelling of eye irritating chemicals in response to the requirements of the EU cosmetics directive and REACH legislation.</a> Altern Lab Anim. 39, 339-364 (2011).</li><li>Pfannenbecker, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cosmetics+Europe+Multi-Laboratory+Pre-Validation+of+the+EpiOcular+Reconstituted+Human+Tissue+Test+Method+for+the+Prediction+of+Eye+Irritation.">Cosmetics Europe Multi-Laboratory Pre-Validation of the EpiOcular Reconstituted Human Tissue Test Method for the Prediction of Eye Irritation.</a> Toxicol in vitro. , (2013).</li><li>MatTek Corporation. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> EpiOcular™ Eye Irritation Test (OCL-200-EIT) for the prediction of acute ocular irritation of chemicals for use with Reconstructed Human EpiOcular Model (OCL-200-EIT). Protocol#MK-24-007-0055. , (2014).</li><li>Kaluzhny, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EpiOcular+Eye+Irritation+Test+(EIT)+for+Hazard+Identification+and+Labeling+of+Eye+Irritating+Chemicals:+Protocol+Optimization+for+Solid+Materials+and+Extended+Shipment+Times.">EpiOcular Eye Irritation Test (EIT) for Hazard Identification and Labeling of Eye Irritating Chemicals: Protocol Optimization for Solid Materials and Extended Shipment Times.</a> Altern Lab Anim. 43 (2), 101-127 (2015).</li><li>Kolle, S. N., Kandarova, H., Wareing, B., van Ravenzwaay, B., Landsiedel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In-house+validation+of+the+EpiOcular(TM)+eye+irritation+test+and+its+combination+with+the+bovine+corneal+opacity+and+permeability+test+for+the+assessment+of+ocular+irritation.">In-house validation of the EpiOcular(TM) eye irritation test and its combination with the bovine corneal opacity and permeability test for the assessment of ocular irritation.</a> Altern Lab Anim. 39, 365-387 (2011).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reconstructed+Human+Cornea-like+Epithelium+(RhCE)+Test+Method+for+Identifying+Chemicals+Not+Requiring+Classification+and+Labelling+for+Eye+Irritation+or+Serious+Eye+Damage.+Draft+proposal+for+a+new+test+guideline..">Reconstructed Human Cornea-like Epithelium (RhCE) Test Method for Identifying Chemicals Not Requiring Classification and Labelling for Eye Irritation or Serious Eye Damage. Draft proposal for a new test guideline..</a> OECD Guideline for the Testing of Chemicals. , (2014).</li><li>Blazka, M. E., Harbell, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluating+the+ocular+irritation+potential+of+54+test+articles+using+the+EpiOcular+Human+tissue+Construct+Model.">Evaluating the ocular irritation potential of 54 test articles using the EpiOcular Human tissue Construct Model.</a> Toxicol. In Vitro. , (2003).</li><li>Kandarova, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+EpiDerm+Test+Protocol+for+the+Upcoming+ECVAM+Validation+Study+on+In+Vitro+Skin+Irritation+Tests+&#8212;+An+Assessment+of+the+Performance+of+the+Optimised+Test.">The EpiDerm Test Protocol for the Upcoming ECVAM Validation Study on In Vitro Skin Irritation Tests &#8212; An Assessment of the Performance of the Optimised Test.</a> Altern Lab Anim. 33, 351-367 (2005).</li></ol>

تم دفع رسوم النشر لهذه المادة من قبل شركة ماتيك.

لقد قدم تهيج اختبار العين (الشكل 1) التي وضعت لنموذج الأنسجة EpiOcular. وEIT غير قادرة على فصل المهيجات والمواد المسببة للتآكل العين (GHS فئات 1 و 2 معا) من المواد التي لا تتطلب وضع العلامات (GHS لا الفئة) مع درجة عالية من الحساسية والنوعية 17. وEIT كما وردت في هذه الوثيقة لا تميز بين GHS الفئة 1 من الفئة 2 الكيميائية. تم التحقق من صحة EIT لتصنيف ووضع العلامات على احتمال تهيج العين من مجموعة واسعة من المواد الكيميائية، بما في ذلك مستحضرات التجميل والأدوية المكونات. بالتزامن مع الآخر في اختبارات المختبر، فإن EIT بمثابة بديل للفي الجسم الحي الأرنب العين اختبار تهيج. يستخدم EIT بروتوكولين مماثلة ولكن متميزة للمواد السائلة والصلبة، والتي تختلف في طول التعرض وفترات الحضانة بعد التعرض لل(الشكل 1). نقطة النهاية المستخدمة في EITهي حيوية الأنسجة، والتي تحددها فحص MTT، والتي تم استخدامها سابقا في التحقق من صحة نماذج الأنسجة الظهارية الإنسان 20،21. لإجراء هذا الاختبار، ليس هناك حاجة إلى معدات خاصة بالإضافة إلى المعدات القياسية ثقافة الخلية. نظرا لمستوى عال من الأنسجة إلى أنسجة استنساخ، ن = 2 الأنسجة بدلا من عادة يوصى ن = تستخدم 3. القدرة على استخدام ن = 2 الأنسجة هو الجانب الحاسم من البروتوكول، لأنه يسمح للعامل من ذوي الخبرة لمعالجة اثنين من الأنسجة في وقت واحد، وبالتالي التقليل من تقلب الفحص التي يمكن أن تنشأ بسبب التعامل مختلفة من الأنسجة الفردية 14. أيضا، باستخدام ن = 2 الأنسجة في اختبار المادة، وتهيج من 10 مواد الاختبار من نفس الحالة الفيزيائية (سائلة أو صلبة)، جنبا إلى جنب مع الضوابط الإيجابية والسلبية، يمكن تقييمها باستخدام مجموعة واحدة (24 الأنسجة). النقاط الرئيسية الأخرى التي تضمن تصنيف موثوق بها من مواد هي المواصفات لمراقبة إيجابية سوbstance (قابلية الأنسجة ≤50.0٪)، واستنساخ بين أنسجة مكررة (الفرق &lt;20.0٪)، ومراقبة سلبية قراءات OD (&gt; 0.8 و &lt;2.5). عند إجراء اختبار تمر اقتصاداتها بمرحلة انتقال، من المهم أن تلتزم بروتوكول التحقق من صحة والجرعات المقترحة والشطف جداول (الجداول 3 و 4)، لأن الانحراف عن بروتوكول أو تغييرات في فترات الحضانة قد يؤدي إلى نتائج غيرت. وبالمثل، فإن الانحرافات من الوقت 3 ساعات لMTT الحضانة يؤدي إلى قراءات مختلفة MTT ويمكن أن تؤثر نتيجة الفحص. في بعض الأحيان، قد يكون مادة كيميائية اختبار الخصائص البصرية أو غيرها التي قد تتداخل مع الأنسجة MTT جدوى فحص أو سبب خفض MTT. على سبيل المثال، وهي مادة كيميائية اختبار قد يقلل بشكل مباشر MTT إلى الأزرق الأرجواني ناتج التفاعل، أو قد يكون عبارة عن مادة الملونة التي تمتص الضوء في نفس النطاق كما MTT formazan (~ 570 نانومتر). ومع ذلك، فإن هذه المواد الكيميائية اختبار العلاقات العامةESENT مشكلة فقط، إذا كان في ذلك الوقت من فحص MTT، كمية كافية من المواد لا تزال موجودة على (أو استيعابها من قبل) الأنسجة. لتجنب هذا التدخل، تدرج الإجراءات الشطف واسعة في بروتوكول تمر اقتصاداتها بمرحلة انتقال. إذا الشطف لا يزيل TA TA ويتداخل مع خفض MTT، يجب استخدام عناصر تحكم إضافية للكشف عن وصحيحة لذلك. باختصار، إذا كان يشتبه خفض MTT المباشر للمادة الكيميائية الاختبار، 50 ميكرولتر (أو 50 ملغ المواد الصلبة) من هذه المادة الكيميائية في السؤال هو المحتضنة لمدة 3 ساعات مع العمل الحل MTT في SCC (NC، 50 ميكرولتر من الماء منزوع الأيونات معقمة، يجب أن يكون تشغيل في نفس الوقت). إذا كان هذا الحل MTT إلى اللون الأزرق الأرجواني، يفترض المقال اختبار لقد قلل من MTT. في هذه الحالة فحص وظيفي باستخدام عناصر تحكم الأنسجة قتل تجميد ينبغي إجراء تقييم ما إذا كانت مادة الاختبار ملزما للأنسجة ويؤدي إلى تخفيض كاذبة إشارة MTT. إذا كان هناك انخفاض ملموس في MTT، ومراقبة الأنسجة TA مكشوفة قتل(نسبة لكمية في أنسجة قابلة للحياة غير المعالجة)، لا بد من تصحيح يعني بقاء الأنسجة من هذه المادة الاختبار عن طريق طرح الجدوى المتوسطة للسيطرة قتل. وEIT يخطئ على جانب السلامة، كما يدل على ذلك حدوث انخفاض التصنيفات السلبية الكاذبة 14،15،18. الأهم من ذلك، أيا من المواد الكيميائية GHS الفئة 1، والتي هي تآكل للعين والتي تمثل الخطر العين الأكثر خطورة، تم تصنيفها على أنها غير مزعجة في هذا الاختبار 14،15،18،19. وأخيرا، واحدة من المزايا الرئيسية للRHCE في طريقة الاختبار في المختبر هو إمكانية اختبار السائل أنيق والمواد الصلبة (وهو أمر غير ممكن مع ثنائي الأبعاد، مزارع الخلايا المغمورة). سوف EIT تسهم إسهاما كبيرا في تحديد احتمال تهيج العين من مجموعة واسعة من المواد وفقا لتصنيف ووسم منظومة الأمم المتحدة GHS. استبدال الحيوانات لتحديد سوكانت دائرية سمية هدف البحث السمية لسنوات عديدة. طريقة الاختبار تمر اقتصاداتها بمرحلة انتقال أكملت دراسة المصادقة الرسمية المعتمدة من قبل EURL ECVAM في عام 2014 ونفذ EpiOcular EIT في المبادئ التوجيهية اختبار OECD كما OECD TG 492 في عام 2015.

المنتجات الاستهلاكية مثل مستحضرات التجميل والمنظفات، والمنظفات المنزلية وتشمل مجموعة متنوعة من المواد الكيميائية التي يمكن أن تسبب أضرارا خطيرة إذا ما اتصل العينين. لذلك، لا بد من اختبار هذه العوامل لتهيج العين من قبل الهيئات التنظيمية الأمريكية والاتحاد الأوروبي لضمان سلامة المستهلك 1. تقييما لاحتمال تهيج العين من الخلطات والتركيبات هو أيضا شرط للامتثال REACH (التسجيل والتقييم والتفويض، وتقييد المواد الكيميائية) تشريع لوضع العلامات من مكونات مستحضرات التجميل تحت توجيه الاتحاد الأوروبي مستحضرات التجميل لنقل المواد الكيميائية، ولل وسم المبيدات الحشرية والمنتجات المنزلية 2. حاليا، تتطلب الهيئات التنظيمية تقييم المخاطر العين باستخدام النظام المنسق عالميا لتصنيف المواد الكيميائية ووسمها (GHS) 3. ويستند GHS أساسا على اختبار دريز تهيج العين، وتهيج العين الأكثر استخداما على نطاق واسع في فحص المواد التي الأجنبية وميليتم إدخال xtures مباشرة في كيس الملتحمة من العين أرنب 4. وفقا لتصنيف GHS، GHS الفئة 1 (المواد المسببة للتآكل العين) يشير لاختبار المواد الكيميائية التي تسبب الإصابة الأولية الشديدة للأنسجة العين أو أضرار خطيرة للعين والرؤية التي ليس عكسها تماما في غضون 21 يوما بعد التعرض 3،5. GHS الفئة 2 يشير إلى اختبار المواد الكيميائية التي تنتج تغييرات كبيرة في العين التي هي عكسها تماما في غضون 21 يوما من التعرض. ويشار إلى المواد الكيميائية الاختبار التي ليست المواد المسببة للتآكل أو المهيجات باسم GHS لا الفئة. لأكثر من 40 عاما، وقد انتقد اختبار أرنب العين دريز لافتقارها للاستنساخ، المبالغة في تقدير ردود فعل الإنسان، واستخدام الحيوانات الحية 5-8. وقد شجعت هذه المخاوف العديد من المقترحات لتحسينها، والحد، واستبدال اختبار في الجسم الحي 9. وتعززت الحاجة إلى بدائل غير حيوانية المصادق مزيدقبل اعتماد التعديل السابع لتوجيه مستحضرات التجميل، والتي حظرت استخدام الحيوانات في تقييم سلامة منتجات التجميل (في عام 2005) والمكونات (في عام 2009) 2. منذ عام 1996، وقد نموذج الأنسجة مثل القرنية أعيد استخدامها على نطاق واسع من قبل صناعة مستحضرات التجميل لتقييم إمكانات تهيج المواد الخام، ومستحضرات القائم السطحي، وتتفاقم الخلطات التي تم تصميمها للاستخدام في، أو في محيط، والعين 10-13. استخدام نموذج الأنسجة RHCE يسمح التطبيق الموضعي المباشر للمواد الاختبار على سطح الأنسجة في شكله مخفف الأصلي. وبهذه الطريقة، يمكن اختبار تركيبات قابلة للذوبان غير المياه دون تمييعها مع المذيبات. ردا على EURL ECVAM في (المركز الأوروبي مختبر الاتحاد الأوروبي المرجعي للتحقق من الطرق البديلة) طلب طريقة للتطبيق على نطاق واسع، واضحة، والاقتصادي وتهيج اختبار العين (EIT) الذي يستخدم سينغلوقد وضعت ه وقت التعرض وغير قادرة على فصل المهيجات العين والمواد المسببة للتآكل من المواد التي لا تتطلب وضع العلامات (الشكل 1) 14. وبناء على نتائج 83 المواد الكيميائية (44 السوائل و39 المواد الصلبة)، حقق EIT 95.5 / 68.2 / و 81.8٪ الحساسية / خصوصية ودقة (SS &amp; A) للسوائل، 100.0 / 68.4 / و84،6٪ SS &amp; A للمواد الصلبة، و97،6 / 68.3 / 83.1٪ وعن العام SS &amp; A. في عام 2007، ودراسة ما قبل المصادقة متعددة مختبر ترعاه مستحضرات التجميل أوروبا (COLIPA سابقا) تحت رعاية ECVAM EURL تقييم مدى ملاءمة وموثوقية EIT بهدف الوصول بها إلى المصادقة رسميا 15. في هذه الدراسة، تم تنفيذ 298 محاكمات مستقلة في سبعة مختبرات مستقلة. وأظهرت نتائج الدراسة اتفاق 99،7٪ في التنبؤ مع معاملات منخفضة من الاختلاف في جميع المختبرات المشاركة 15. ونتيجة لذلك، في عام 2010 دخل بروتوكول تمر اقتصاداتها بمرحلة انتقال لEURL ECVAM رسميةبرنامج التحقق من الصحة. استخدمت الدراسة التحقق من صحة 104 الكيماويات اختبار مشفرة، بما في ذلك المواد الفردية والخلائط الكيميائية، والتي كانت في الجسم الحي البيانات المرجعية (دريز البيانات تهيج العين) المتاحة. وبناء على نجاح هذا العمل، قدم مشروع اختبار OECD التوجيهي في عام 2014. ومن المتوقع أن EIT سوف تسهم إسهاما كبيرا في تصنيف احتمال تهيج العين من مجموعة واسعة من المواد وفقا لتصنيف ووسم منظومة الأمم المتحدة GHS.

eye irritation test (eit) for hazard identification of eye irritating chemicals using reconstructed human cornea-like epithelial (rhce) tissue model

ليتوافق مع التعديل السابع لقانون مستحضرات التجميل التوجيه والاتحاد الأوروبي REACH الاتحاد الأوروبي، وهناك حاجة إلى طرق بديلة غير حيوانية التحقق من صحة لتقييم موثوق ودقيق للسمية العين في الإنسان. لتلبية هذه الحاجة، قمنا بتطوير اختبار تهيج العين (EIT) الذي يستخدم الأبعاد أعيد بناؤها مثل القرنية الطلائية (RHCE) نموذج الأنسجة البشرية الثلاث التي تقوم على الخلايا البشرية العادية. وEIT غير قادرة على فصل المهيجات والمواد المسببة للتآكل العين (GHS فئات 1 و 2 معا) وتلك التي لا تتطلب وضع العلامات (GHS لا الفئة). اختبار يستخدم بروتوكولين منفصلين، أحدهما مصمم للمواد الكيميائية السائلة و، والبروتوكول الثاني مماثل لاختبار المواد الصلبة. يستخدم نموذج التنبؤ تمر اقتصاداتها بمرحلة انتقال فترة واحدة تعرض (30 دقيقة للسوائل، 6 ساعة للمواد الصلبة) وقابلية النسيج قطع واحد (60.0٪ كما يحددها فحص MTT). وبناء على نتائج 83 المواد الكيميائية (44 السوائل والمواد الصلبة 39) حقق EIT 95.5 / 68.2 / 81.8٪ والسناتورitivity / خصوصية ودقة (SS &amp; A) للسوائل، 100.0 / 68.4 / 84.6٪ وSS &amp; A للمواد الصلبة، و97.6 / 68.3 / 83.1٪ وعن العام SS &amp; A. سوف EIT تسهم إسهاما كبيرا في تصنيف إمكانيات تهيج العين من مجموعة واسعة من المواد الكيميائية السائلة والصلبة من دون استخدام الحيوانات لتلبية متطلبات الاختبار التنظيمية. تم تنفيذ طريقة EpiOcular EIT في عام 2015 إلى المبادئ التوجيهية اختبار OECD كما TG 492.

Watch this Scientific Journal Video about Eye Irritation Test EIT for Hazard Identification of Eye Irritating Chemicals using Reconstructed Human Cornea-like Epithelial RhCE Tissue Model at JoVE.com

Eye Irritation Test EIT for Hazard Identification of Eye Irritating Chemicals using Reconstructed Human Cornea-like Epithelial RhCE Tissue Model

لقد قمنا بتطوير اختبار تهيج العين التي تستخدم نموذج الأنسجة ثلاثي الأبعاد أعيد بناؤها مثل القرنية الطلائية البشري (RHCE). الاختبار هو قادرا على التمييز بين توتر العين والمواد المسببة للتآكل (GHS فئات 1 و 2 معا) وتلك التي لا تتطلب وضع العلامات (GHS لا الفئة).

العين تهيج اختبار (EIT) لتحديد مخاطر العين مهيج للمواد الكيميائية باستخدام يعيد الإنسان القرنية مثل الظهارية (RHCE) الأنسجة نموذج

To comply with the Seventh Amendment to the EU Cosmetics Directive and EU REACH legislation, validated non-animal alternative methods for reliable and ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Eye Irritation Test (EIT) for Hazard Identification of Eye Irritating Chemicals using Reconstructed Human Cornea-like Epithelial (RhCE) Tissue Model

Evaluation of Polymeric Gene Delivery Nanoparticles by Nanoparticle Tracking Analysis and High-throughput Flow Cytometry

تقييم توصيل الجينات البوليمرية الجسيمات النانوية من تحليل تتبع جسيمات متناهية الصغر وعالية الإنتاجية قياس التدفق الخلوي

Non-viral gene delivery using polymeric nanoparticles has emerged as an attractive approach for gene therapy to treat genetic diseases1 and as a ...

Tissue Engineering of a Human 3D in vitro Tumor Test System

Tissue Engineering of a Human 3D in vitro Tumor Test System

هندسة الأنسجة ل3D الإنسان<em&gt; في المختبر</em&gt; نظام ورم اختبار

Cancer is one of the leading causes of death worldwide.  Current therapeutic strategies are predominantly developed in 2D culture  systems, which ...

Human Cartilage Tissue Fabrication Using Three-dimensional Inkjet Printing Technology

الغضروف الإنسان الأنسجة التصنيع باستخدام ثلاثي الأبعاد تكنولوجيا الطباعة النافثة للحبر

Bioprinting, which is based on thermal inkjet printing, is one of the most attractive enabling technologies in the field of tissue engineering and ...

Combination of Microstereolithography and Electrospinning to Produce Membranes Equipped with Niches for Corneal Regeneration

مزيج من Microstereolithography وElectrospinning لإنتاج أغشية مجهزة الكوات لتجديد القرنية

Corneal problems affect millions of people worldwide reducing their quality of life significantly. Corneal disease can be caused by illnesses such as ...

Assessing Leukocyte-endothelial Interactions Under Flow Conditions in an Ex Vivo Autoperfused Microflow Chamber Assay

Assessing Leukocyte-endothelial Interactions Under Flow Conditions in an Ex Vivo Autoperfused Microflow Chamber Assay

تقييم التفاعلات الكريات البيض البطانية تحت ظروف التدفق في<em&gt; فيفو السابقين</em&gt; الفحص Autoperfused غرفة Microflow

Leukocyte-endothelial interactions are early and critical events in acute and chronic inflammation and can, when dysregulated, mediate tissue injury ...

Production, Characterization and Potential Uses of a 3D Tissue-engineered Human Esophageal Mucosal Model

إنتاج وتوصيف والمحتملة استخدامات الأنسجة المهندسة-3D الإنسان المريء المخاطي نموذج

The incidence of both esophageal adenocarcinoma and its precursor, Barrett&#8217;s Metaplasia, are rising rapidly in the western world. Furthermore ...

Encapsulated Cell Technology for the Delivery of Biologics to the Mouse Eye

تكنولوجيا الخلية المغلفة لتسليم البيولوجيا إلى العين الماوس

Many current therapeutics under development for diseases of the posterior pole of the eye are biologics. These drugs need to be administered frequently, ...

Growth of Human and Sheep Corneal Endothelial Cell Layers on Biomaterial Membranes

نمو الإنسان والأغنام القرنية خلايا الخلايا الانبذيلية على الأغشية الحيوية

Corneal endothelial cell cultures have a tendency to undergo epithelial-to-mesenchymal transition (EMT) after loss of cell-to-cell contact. EMT is ...

Cultivating a Three-dimensional Reconstructed Human Epidermis at a Large Scale

زراعة بشرة بشرية ثلاثية الأبعاد أعيد بناؤها على نطاق واسع

A three-dimensional human epidermis model reconstructed from neonatal primary keratinocytes is presented. Herein, a protocol for the cultivation process ...

Quantifying Fibrillar Collagen Organization with Curvelet Transform-Based Tools

قياس القياس فيبريلار منظمة الكولاجين مع Curvelet تحويل القائم على أدوات

Fibrillar collagens are prominent extracellular matrix (ECM) components, and their topology changes have been shown to be associated with the progression ...