Name: eye irritation test (eit) for hazard identification of eye irritating chemicals using reconstructed human cornea-like epithelial (rhce) tissue model
Uploaded: 2015-08-23T14:00:00
Duration: 10 min 13 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Eye Irritation Test EIT for Hazard Identification of Eye Irritating Chemicals using Reconstructed Human Cornea-like Epithelial RhCE Tissue Model at JoVE.com

המחברים מבקשים להודות לד&quot;ר ג&#39;ון Harbell לתמיכתו המדעית והזמן שהוקדש לפרויקט EIT. המחברים גם רוצים להודות לBeiersdorf AG (גרמניה), IIVS (ארה&quot;ב), מרי קיי בע&quot;מ (ארה&quot;ב), אבון מוצרים בע&quot;מ (ארה&quot;ב), פרוקטר אנד גמבל / Cosmital (שוויץ), Laboratoire פייר פאבר (צרפת), הרלן מעבדות (בריטניה), וLVMH parfume (צרפת) להשתתפות בMulti-מרכז בינלאומי טרום אימות ואישור במחקרים של מבחן העין גירוי 15.

<ol>
	<li>National Toxicology Program (NTP) Interagency Center for the Evaluation of Alternative Toxicological Methods (NICEATM). <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Request+for+Ocular+Irritancy+Test+Data+From+Human,+Rabbit,+and+In+Vitro+Studies+Using+Standardized+Testing+Methods.">Request for Ocular Irritancy Test Data From Human, Rabbit, and In Vitro Studies Using Standardized Testing Methods.</a> Federal Register. 72 (109), 31582-31583 (2007).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+(EC)+No+1907/2006+of+the+European+Parliament+and+of+the+Council+of+18+December+2006+concerning+the+Registration,+Evaluation,+Authorisation+and+Restriction+of+Chemicals+(REACH),+establishing+a+European+Chemicals+Agency,+amending+Directive+1999/45/EC+and+repealing+Council+Regulation+(EEC)+No+793/93+and+Commission+Regulation+(EC)+No+1488/94+as+well+as+Council+Directive+76/769/EEC+and+Commission+Directives+91/155/EEC,+93/67/EEC,+93/105/EC+and+2000/21/EC.">Regulation (EC) No 1907/2006 of the European Parliament and of the Council of 18 December 2006 concerning the Registration, Evaluation, Authorisation and Restriction of Chemicals (REACH), establishing a European Chemicals Agency, amending Directive 1999/45/EC and repealing Council Regulation (EEC) No 793/93 and Commission Regulation (EC) No 1488/94 as well as Council Directive 76/769/EEC and Commission Directives 91/155/EEC, 93/67/EEC, 93/105/EC and 2000/21/EC.</a> OJ. L396 (49), 1-849 (2006).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Globally Harmonized System of Classification and Labelling of Chemicals (GHS). , (2013).</li><li>Draize, J. H., Woodard, G., Calvery, H. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+the+Study+of+Irritation+and+Toxicity+of+Substances+Applied+Topically+to+the+Skin+and+Mucous+Membranes.">Methods for the Study of Irritation and Toxicity of Substances Applied Topically to the Skin and Mucous Membranes.</a> J Pharmacol Exp Ther November. 82, 377-390 (1944).</li><li>Adriaens, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retrospective+analysis+of+the+Draize+test+for+serious+eye+damage/eye+irritation:+importance+of+understanding+the+in+vivo+endpoints+under+UN+GHS/EU+CLP+for+the+development+and+evaluation+of+in+vitro+test+methods.">Retrospective analysis of the Draize test for serious eye damage/eye irritation: importance of understanding the in vivo endpoints under UN GHS/EU CLP for the development and evaluation of in vitro test methods.</a> Arch tox. 88, 701-723 (2014).</li><li>Balls, M., Botham, P. A., Bruner, L. H., Spielmann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+EC/HO+international+validation+study+on+alternatives+to+the+Draize+eye+irritation+test.">The EC/HO international validation study on alternatives to the Draize eye irritation test.</a> Toxicol in Vitro. 9, 871-929 (1995).</li><li>Curren, R. D., Harbell, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ocular+safety:+a+silent+(in+vitro)+success+story.">Ocular safety: a silent (in vitro) success story.</a> Altern Lab Anim. 30, 69-74 (2002).</li><li>Wilhelmus, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Draize+Eye+Test.">The Draize Eye Test.</a> Survey of Ophthalmology. 45, 493-515 (2001).</li><li>Curren, R. D., Harbell, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+alternatives+for+ocular+irritation.">In vitro alternatives for ocular irritation.</a> Environ health persp. 106, 485-492 (1998).</li><li>McCain, N. E., Binetti, R. R., Gettings, S. D., Jones, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+ocular+irritation+ranges+of+market-leading+cosmetic+and+personal-care+products+using+an+in+vitro+tissue+equivalent.">Assessment of ocular irritation ranges of market-leading cosmetic and personal-care products using an in vitro tissue equivalent.</a> Toxicologist. 66, 243 (2002).</li><li>Niranjan, P., Dang, A. H., January, B. G., Gomez, C., Harbell, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+the+EpiOcular+assay+for+preclinical+qualification+of+formulas+for+human+clinical+studies.">Use of the EpiOcular assay for preclinical qualification of formulas for human clinical studies.</a> Toxicologist. 96, 249 (2007).</li><li>Yin, X. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prediction+of+ocular+irritation+potential+of+surfactants-based+formulations+at+different+concentrations+using+the+EpiOcular+model.">Prediction of ocular irritation potential of surfactants-based formulations at different concentrations using the EpiOcular model.</a> Toxicologist. 108, 378 (2009).</li><li>Harbell, J., Curren, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+methods+for+the+prediction+of+ocular+and+dermal+toxicity.">In vitro methods for the prediction of ocular and dermal toxicity.</a> Handbook of Toxicology. , (2001).</li><li>Kaluzhny, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+the+EpiOcular(TM)+eye+irritation+test+for+hazard+identification+and+labelling+of+eye+irritating+chemicals+in+response+to+the+requirements+of+the+EU+cosmetics+directive+and+REACH+legislation.">Development of the EpiOcular(TM) eye irritation test for hazard identification and labelling of eye irritating chemicals in response to the requirements of the EU cosmetics directive and REACH legislation.</a> Altern Lab Anim. 39, 339-364 (2011).</li><li>Pfannenbecker, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cosmetics+Europe+Multi-Laboratory+Pre-Validation+of+the+EpiOcular+Reconstituted+Human+Tissue+Test+Method+for+the+Prediction+of+Eye+Irritation.">Cosmetics Europe Multi-Laboratory Pre-Validation of the EpiOcular Reconstituted Human Tissue Test Method for the Prediction of Eye Irritation.</a> Toxicol in vitro. , (2013).</li><li>MatTek Corporation. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> EpiOcular™ Eye Irritation Test (OCL-200-EIT) for the prediction of acute ocular irritation of chemicals for use with Reconstructed Human EpiOcular Model (OCL-200-EIT). Protocol#MK-24-007-0055. , (2014).</li><li>Kaluzhny, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EpiOcular+Eye+Irritation+Test+(EIT)+for+Hazard+Identification+and+Labeling+of+Eye+Irritating+Chemicals:+Protocol+Optimization+for+Solid+Materials+and+Extended+Shipment+Times.">EpiOcular Eye Irritation Test (EIT) for Hazard Identification and Labeling of Eye Irritating Chemicals: Protocol Optimization for Solid Materials and Extended Shipment Times.</a> Altern Lab Anim. 43 (2), 101-127 (2015).</li><li>Kolle, S. N., Kandarova, H., Wareing, B., van Ravenzwaay, B., Landsiedel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In-house+validation+of+the+EpiOcular(TM)+eye+irritation+test+and+its+combination+with+the+bovine+corneal+opacity+and+permeability+test+for+the+assessment+of+ocular+irritation.">In-house validation of the EpiOcular(TM) eye irritation test and its combination with the bovine corneal opacity and permeability test for the assessment of ocular irritation.</a> Altern Lab Anim. 39, 365-387 (2011).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reconstructed+Human+Cornea-like+Epithelium+(RhCE)+Test+Method+for+Identifying+Chemicals+Not+Requiring+Classification+and+Labelling+for+Eye+Irritation+or+Serious+Eye+Damage.+Draft+proposal+for+a+new+test+guideline..">Reconstructed Human Cornea-like Epithelium (RhCE) Test Method for Identifying Chemicals Not Requiring Classification and Labelling for Eye Irritation or Serious Eye Damage. Draft proposal for a new test guideline..</a> OECD Guideline for the Testing of Chemicals. , (2014).</li><li>Blazka, M. E., Harbell, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluating+the+ocular+irritation+potential+of+54+test+articles+using+the+EpiOcular+Human+tissue+Construct+Model.">Evaluating the ocular irritation potential of 54 test articles using the EpiOcular Human tissue Construct Model.</a> Toxicol. In Vitro. , (2003).</li><li>Kandarova, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+EpiDerm+Test+Protocol+for+the+Upcoming+ECVAM+Validation+Study+on+In+Vitro+Skin+Irritation+Tests+&#8212;+An+Assessment+of+the+Performance+of+the+Optimised+Test.">The EpiDerm Test Protocol for the Upcoming ECVAM Validation Study on In Vitro Skin Irritation Tests &#8212; An Assessment of the Performance of the Optimised Test.</a> Altern Lab Anim. 33, 351-367 (2005).</li></ol>

עמלות פרסום לכתבה זו שולמו על ידי חברת MatTek.

יש לנו הצגתי את מבחן העין גירוי (איור 1) שפותח עבור דגם רקמת EpiOcular. EIT הוא מסוגל להפריד חומרים מגרים עיניות וחומרים מאכלים (קטגוריות GHS 1 ו -2 משולב) מחומרים שאינם דורשים תיוג (GHS אין קטגוריה) עם רמה גבוהה של רגישות וסגוליות 17. EIT כפי שהוצג במסמך זה אינו מפלה בין קטגוריה GHS 1 מקטגוריה 2 כימיקלים. EIT קבל תוקף לסיווג ותיוג של פוטנציאל גירוי העיני של מגוון רחב של כימיקלים, כולל מרכיבים קוסמטיים ותרופות. בשיתוף עם אחרים בבדיקות מבחנה, EIT ישמש כתחליף למבחן גירוי בעיני ארנב in vivo. EIT משתמש בשני פרוטוקולים דומים אך שונים לחומרים נוזליים ומוצקים, המשתנים באורך של חשיפה ותקופות שלאחר החשיפה דגירה (איור 1). נקודת הסיום בשימוש בEITהיא כדאיות רקמות, שנקבעה על ידי assay MTT, אשר שימש בעבר בדגמי תוקף אנושי אפיתל רקמת 20,21. כדי לבצע assay זה, אין צורך בציוד מיוחד מלבד ציוד תרבית תאים סטנדרטי. בשל הרמה הגבוהה של שחזור רקמות לרקמה, n = 2 רקמות במקום בדרך כלל מומלץ n = 3 משמשים. היכולת להשתמש n = 2 רקמות היא היבט קריטי של הפרוטוקול, שכן הוא מאפשר למפעיל מנוסה לעבד שתי רקמות בו זמנית, ובכך לצמצם את השונות של assay שיכול להתעורר כתוצאה מהטיפול של רקמות אדם שונה 14. כמו כן, על ידי השימוש בn = 2 רקמות למאמר בדיקה, IRRITANCY של 10 חומרי בדיקה של אותו מצב פיזי (נוזל או מוצק), יחד עם הבקרות החיוביות ושליליות, ניתן להעריך באמצעות ערכה אחת (24 רקמות). נקודות מפתח אחרות המבטיחות אמין סיווג של חומרי מפרטים לביקורת החיובית substance (כדאיות רקמות ≤50.0%), שחזור בין רקמות כפולות (הבדל &lt;20.0%), וקריאת OD בקרה שלילית (&gt; 0.8 ו&lt; 2.5). בעת ביצוע בדיקת EIT, חשוב לדבוק בפרוטוקול תוקף ולמינון הציע ולוחות זמני שטיפה (לוחות 3 ו -4), מאז סטייה מהפרוטוקול או השינויים בתקופות הדגירה עלולה לגרום לתוצאה שונה. כמו כן, סטיות מרגע 3 שעות לדגירת MTT יגרמו קריאות MTT שונות ועשויות להשפיע על תוצאת assay. מדי פעם, כימי בדיקה יכולה להיות אופטיות או אחרות תכונות שעלולים להפריע לassay כדאיות רקמות MTT או הפחתת גורם MTT. לדוגמא, כימי בדיקה עשויים להפחית באופן ישיר למוצר MTT תגובה כחול-סגול, או עשוי להיות חומר בצבע שסופג אור באותו הטווח כמו formazan MTT (~ 570 ננומטר). עם זאת, כימיקלים מבחן אלה יהיו יחסי ציבורesent בעיה היחיד, אם בזמן של assay MTT, כמות מספקת של החומר עדיין קיימת ב( או נספג על ידי) הרקמה. כדי למנוע הפרעה זו, נהלי שטיפה נרחבים ישולבו פרוטוקול EIT. אם שטיפה אינו מסיר את ת&quot;א ות&quot;א מפריעה להפחתת MTT, יש להשתמש בבקרות נוספות כדי לזהות ונכון עבורו. בקצרה, אם הפחתת MTT הישירה של חומר כימי בדיקת חשד, 50 μl (או 50 מ&quot;ג למוצקים) של הכימיקל בשאלה טופחו במשך 3 שעות עם פתרון MTT עובד בSCC (NC, 50 μl של מים ללא יונים סטרילי, צריך להיות לרוץ במקביל). אם פתרון MTT הופך לכחול-סגול, מאמר המבחן הוא בחזקת צמצמו את MTT. במקרה זה בדיקה פונקציונלית באמצעות פקדי רקמות נהרגו הקפאה צריכה להתבצע כדי להעריך אם חומר הבדיקה מחייב לרקמות ומובילות להפחתת אות MTT שווא. אם יש ירידה ניכרו בMTT החשוף-ת&quot;א שליטת הרקמה נהרגה,(ביחס לכמות ברקמת קיימא מטופל), כדאיות הרקמות הממוצעת של מאמר המבחן חייבת להיות מתוקנת על ידי הפחתת הכדאיות הממוצעת של השליטה נהרגה. EIT טועה בצד של בטיחות, כפי שהודגם על ידי השכיחות הנמוכה של סיווגים שליליים כוזבים 14,15,18. חשוב לציין, שאף אחד מהכימיקלים GHS קטגוריה 1, שהנם מאכל לעין ואשר מייצג את המפגע העיני החמור ביותר, סווגו כלא מעצבן בassay זה 14,15,18,19. לבסוף, אחד היתרונות הגדולים של RHCE בשיטת בדיקת מבחנה היא האפשרות של בדיקת נוזל מסודר וחומרים מוצקים (דבר שאינו אפשרי עם תרבויות דו-ממדיים, שקועות תא). EIT יתרום באופן משמעותי בקביעת פוטנציאל הגירוי העיני של מגוון רחב של חומרים על פי שיטת הסיווג ותיוג של האו&quot;ם GHS. ההחלפה של בעלי חיים כדי לקבוע oרעילות cular הייתה מטרה של מחקר טוקסיקולוגי במשך שנים רבות. שיטת בדיקת EIT השלימה מחקר אימות פורמלי נתמך על ידי EURL ECVAM בשנת 2014 וEIT EpiOcular יושם להנחיות מבחן ה- OECD כOECD TG 492 בשנת 2015.

מוצרים צריך, כגון מוצרי קוסמטיקה, חומרי ניקוי, חומרי ניקוי ביתיים וכוללים מגוון רחב של חומרים כימיים העלולים לגרום לניזק רציני אם הם לפנות לעיניים. לכן, בדיקה של סוכנים אלה לגירוי בעיניים נדרשת על ידי הרשויות הרגולטוריות בארה&quot;ב ובאיחוד האירופי כדי להבטיח את בטיחות צרכן 1. הערכת פוטנציאל הגירוי בעיניים של תערובות וניסוחים גם דרישה לעמידה בREACH (רישום, הערכה, אישור, והגבלה של כימיקלים) חקיקה לתיוג של מרכיבים קוסמטיים תחת קוסמטיקת הנחיית האיחוד האירופי להובלת כימיקלים, ול התיוג של חומרי הדברה ומוצרים ביתיים 2. נכון לעכשיו, סוכנויות רגולציה דורשות הערכת סיכונים עינית באמצעות השיטה המתואמת הגלובלי של סיווג ותיוג של כימיקלים (GHS) 3. GHS מתבסס בעיקר על מבחן הגירוי בעיני דרייז, assay הגירוי בעיניים הנפוץ ביותר שבו חומרים זרים ומילxtures הציג ישירות לתוך שק הלחמית של העין ארנב 4. על פי סיווג GHS, קטגוריה GHS 1 (חומרים מאכלים עיני) מתייחסת לבדיקת כימיקלים שגורמים לפגיעה ראשונית חמורה לרקמות העין או הנזק חמור לעין והראייה שאינה הפיך במלואו בתוך 21 ימים לאחר חשיפת 3.5. GHS קטגוריה 2 מתייחסת לבדיקת כימיקלים שמייצרים שינויים משמעותיים בעיניים כי הם הפיכים לחלוטין בתוך 21 ימים מחשיפה. כימיקלים מבחן שאינם מאכלים או חומרים מגרים מכונים קטגוריה GHS לא. במשך יותר מ -40 שנים, בדיקת עיני ארנב דרייז זכתה לביקורת על החוסר של שחזור, הערכת יתר של תגובות אנושיות, והשימוש בבעלי החיים 5-8. חששות אלה עודדו את הצעות רבות לעידון, צמצום, והחלפת in vivo המבחן 9. הצורך בחלופות שאינן בעלי חיים תוקף התחזק עוד יותרעל ידי אימוץ התיקון השביעי לקוסמטיקת ההוראה, שאסר על השימוש בבעלי החיים בהערכת הבטיחות של מוצרי קוסמטיקה (בשנת 2005) ומרכיבים (בשנת 2009) 2. מאז 1996, מודל הרקמה כמו קרנית-שוחזר כבר בשימוש נרחב על ידי תעשיית הקוסמטיקה להעריך את פוטנציאל הגירוי של חומרי גלם, ניסוחים מבוססי פעילי שטח, ונוסף תערובות המיועדות לשימוש ב, או בקרבת, עין 10-13. שימוש במודל רקמת RHCE מאפשר יישום מקומי ישיר של החומר למבחן על פני השטח הרקמה בצורה מקורית, החייה. בדרך זו, ניתן לבדוק ניסוחים מסיסים שאינם מים מבלי לדלל אותם עם ממסים. בתגובה לשל ECVAM EURL (המעבדה ההפניה איחוד האירופי מרכז האירופי לתיקוף השיטות חלופיות) בקשה לשיטה נרחבת ישימה, פשוטה, וכלכלית מבחן גירוי בעיניים (EIT) אשר מנצל Singlזמן חשיפת דואר, והוא מסוגל להפריד בין חומרים מגרים ומאכלים עיני מחומרים שאינם דורשים תיוג פותח (איור 1) 14. על סמך התוצאות עבור 83 כימיקלים (44 נוזלים ו -39 מוצקים), EIT השיג 95.5 / 68.2 / ו81.8% רגישות / סגוליות ודיוק (SS ו) לנוזלים, 100.0 / 68.4 / ו84.6% SS ולמוצקים, ו97.6 / 68.3 / 83.1% ולאס-אס וכולל. בשינה 2007, בחסות הקוסמטיקה אירופה (לשעבר Colipa) בחסות ECVAM EURL מחקר מראש אימות רבת-מעבדה העריך את הרלוונטיות ואמינות של EIT במטרה להביא אותו לאימות פורמאלית 15. במחקר זה, 298 ניסויים עצמאיים בוצעו בשבע מעבדות עצמאיות. תוצאות המחקר הראו הסכם 99.7% בתחזית עם מקדמים נמוכים של וריאציה בכל המעבדות משתתפות 15. כתוצאה מכך, בשנת 2010 הפרוטוקול EIT נכנס EURL ECVAM רשמיתכנית אימות. מחקר האימות מנוצל 104 כימיקלים מבחן מקודדים, כוללים חומרים אישיים ותערובות כימיות, אשר נתונים התייחסות in vivo (נתונים גירוי בעיני דרייז) היו זמינים. בהתבסס על ההצלחה של עבודה זו, קו מנחה טיוטת מבחן OECD הוגש בשנת 2014. זה צפוי כי EIT יתרום באופן משמעותי לסיווג פוטנציאל לגירוי עיני של מגוון רחב של חומרים על פי שיטת הסיווג ותיוג של האו&quot;ם GHS.

eye irritation test (eit) for hazard identification of eye irritating chemicals using reconstructed human cornea-like epithelial (rhce) tissue model

כדי לעמוד בתיקון השביעי לחקיקת הוראת הקוסמטיקה והאיחוד האירופי REACH של האיחוד האירופי, שיטות חלופיות שאינם בעלי חיים תוקף להערכה אמינה ומדויקת של רעילות עינית באדם יש צורך. כדי לענות על צורך זה, פיתחנו מבחן גירוי בעיניים (EIT) אשר מנצל מודל תלת ממדים משוחזר אדם אפיתל כמו קרנית (RHCE) רקמה המבוסס על תאים אנושיים רגילים. EIT הוא מסוגל להפריד חומרים מגרים עיניות וחומרים מאכלים (קטגוריות GHS 1 ו -2 משולב) ואלה שאינם דורשים תיוג (GHS אין קטגוריה). המבחן מנצל שני פרוטוקולים נפרדים, אחד מיועד לכימיקלים נוזליים ופרוטוקול שני, דומה למאמרי מבחן מוצקים. מודל חיזוי EIT משתמש תקופת יחידה חשיפה (30 דקות לנוזלים, 6 שעות למוצקים) וכדאיות רקמות חתך בודד (60.0% כפי שנקבע על ידי assay MTT). על סמך התוצאות עבור 83 כימיקלים (44 נוזלים ומוצקים 39) EIT השיג 95.5 / 68.2 / 81.8 וsens%itivity / סגוליות ודיוק (SS ו) לנוזלים, 100.0 / 68.4 / 84.6% ואס-אס ולמוצקים, ו97.6 / 68.3 / 83.1% ולאס-אס וכולל. EIT יתרום באופן משמעותי לסיווג הפוטנציאל לגירוי העיני של מגוון רחב של כימיקלים נוזליים ומוצקים, ללא שימוש בבעלי החיים כדי לעמוד בדרישות רגולציה בדיקות. שיטת EpiOcular EIT יושמה בשנת 2015 להנחיות מבחן ה- OECD כTG 492.

Watch this Scientific Journal Video about Eye Irritation Test EIT for Hazard Identification of Eye Irritating Chemicals using Reconstructed Human Cornea-like Epithelial RhCE Tissue Model at JoVE.com

Eye Irritation Test EIT for Hazard Identification of Eye Irritating Chemicals using Reconstructed Human Cornea-like Epithelial RhCE Tissue Model

פיתחנו מבחן גירוי בעיניים אשר מנצל מודל רקמת האפיתל שלושה כמו קרנית-ממדי משוחזר אנושי (RHCE). המבחן הוא מסוגל להבחין בין גירוי העיני וחומרים מאכלים (קטגוריות GHS 1 ו -2 משולבים) ואלה שאינם דורשים תיוג (GHS אין קטגוריה).

גירוי מבחן העין (EIT) לסיכוני זיהוי כימיקלים עיניים מעצבנים באמצעות אפיתל דגם רקמות כמו-קרנית משוחזר אדם (RHCE)

To comply with the Seventh Amendment to the EU Cosmetics Directive and EU REACH legislation, validated non-animal alternative methods for reliable and ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Eye Irritation Test (EIT) for Hazard Identification of Eye Irritating Chemicals using Reconstructed Human Cornea-like Epithelial (RhCE) Tissue Model

Evaluation of Polymeric Gene Delivery Nanoparticles by Nanoparticle Tracking Analysis and High-throughput Flow Cytometry

הערכת משלוח גן פולימרית חלקיקים על ידי Nanoparticle מעקב ניתוח וזרימת cytometry תפוקה גבוהה

Non-viral gene delivery using polymeric nanoparticles has emerged as an attractive approach for gene therapy to treat genetic diseases1 and as a ...

Tissue Engineering of a Human 3D in vitro Tumor Test System

Tissue Engineering of a Human 3D in vitro Tumor Test System

הנדסת רקמות של 3D אדם<em&gt; במבחנה</emמערכת מבחן גידול&gt;

Cancer is one of the leading causes of death worldwide.  Current therapeutic strategies are predominantly developed in 2D culture  systems, which ...

Human Cartilage Tissue Fabrication Using Three-dimensional Inkjet Printing Technology

ייצור רקמת סחוס אנושי באמצעות שלושה ממדי הזרקת דיו טכנולוגיית הדפסה

Bioprinting, which is based on thermal inkjet printing, is one of the most attractive enabling technologies in the field of tissue engineering and ...

Combination of Microstereolithography and Electrospinning to Produce Membranes Equipped with Niches for Corneal Regeneration

שילוב של Microstereolithography וElectrospinning כדי לייצר ממברנות מצויד בגומחות להתחדשות קרנית

Corneal problems affect millions of people worldwide reducing their quality of life significantly. Corneal disease can be caused by illnesses such as ...

Assessing Leukocyte-endothelial Interactions Under Flow Conditions in an Ex Vivo Autoperfused Microflow Chamber Assay

Assessing Leukocyte-endothelial Interactions Under Flow Conditions in an Ex Vivo Autoperfused Microflow Chamber Assay

הערכת אינטראקציות יקוציט-האנדותל תחת תנאי זרימה ב<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Assay Autoperfused Microflow הקאמרי

Leukocyte-endothelial interactions are early and critical events in acute and chronic inflammation and can, when dysregulated, mediate tissue injury ...

Production, Characterization and Potential Uses of a 3D Tissue-engineered Human Esophageal Mucosal Model

ייצור, אפיון ופוטנציאל שימושים של הוושט רירי דגם אדם מהונדס-רקמות 3D

The incidence of both esophageal adenocarcinoma and its precursor, Barrett&#8217;s Metaplasia, are rising rapidly in the western world. Furthermore ...

Encapsulated Cell Technology for the Delivery of Biologics to the Mouse Eye

טכנולוגיית תאים באנקפסולציה להעברת מוצרים ביולוגיים לעין העכבר

Many current therapeutics under development for diseases of the posterior pole of the eye are biologics. These drugs need to be administered frequently, ...

Growth of Human and Sheep Corneal Endothelial Cell Layers on Biomaterial Membranes

צמיחת הקרנית של האדם והכבשים שכבות של תאי-על ביומטריה

Corneal endothelial cell cultures have a tendency to undergo epithelial-to-mesenchymal transition (EMT) after loss of cell-to-cell contact. EMT is ...

Cultivating a Three-dimensional Reconstructed Human Epidermis at a Large Scale

טיפוח אפידרמיס אנושי תלת מימדי משוחזר בקנה מידה גדול

A three-dimensional human epidermis model reconstructed from neonatal primary keratinocytes is presented. Herein, a protocol for the cultivation process ...

Quantifying Fibrillar Collagen Organization with Curvelet Transform-Based Tools

כימות ארגון קולגן פיברילאר עם כלים מבוססי המרה של Curvelet

Fibrillar collagens are prominent extracellular matrix (ECM) components, and their topology changes have been shown to be associated with the progression ...