Name: eye irritation test (eit) for hazard identification of eye irritating chemicals using reconstructed human cornea-like epithelial (rhce) tissue model
Uploaded: 2015-08-23T14:00:00
Duration: 10 min 13 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Eye Irritation Test EIT for Hazard Identification of Eye Irritating Chemicals using Reconstructed Human Cornea-like Epithelial RhCE Tissue Model at JoVE.com

Författarna vill tacka Dr John Harbell för hans vetenskapligt stöd och tid ägnas åt EIT projektet. Författarna vill också tacka Beiersdorf AG (Tyskland), IIVS (USA), Mary Kay Inc. (USA), Avon Products Inc. (USA), Procter &amp; Gamble / Cosmital (Schweiz), Laboratoire Pierre Fabre (Frankrike), Harlan Laboratories (United Kingdom), och LVMH Parfym (Frankrike) för att delta i multicenter International Pre-och valideringsundersökningar av ögonirritation Test 15.

<ol>
	<li>National Toxicology Program (NTP) Interagency Center for the Evaluation of Alternative Toxicological Methods (NICEATM). <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Request+for+Ocular+Irritancy+Test+Data+From+Human,+Rabbit,+and+In+Vitro+Studies+Using+Standardized+Testing+Methods.">Request for Ocular Irritancy Test Data From Human, Rabbit, and In Vitro Studies Using Standardized Testing Methods.</a> Federal Register. 72 (109), 31582-31583 (2007).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+(EC)+No+1907/2006+of+the+European+Parliament+and+of+the+Council+of+18+December+2006+concerning+the+Registration,+Evaluation,+Authorisation+and+Restriction+of+Chemicals+(REACH),+establishing+a+European+Chemicals+Agency,+amending+Directive+1999/45/EC+and+repealing+Council+Regulation+(EEC)+No+793/93+and+Commission+Regulation+(EC)+No+1488/94+as+well+as+Council+Directive+76/769/EEC+and+Commission+Directives+91/155/EEC,+93/67/EEC,+93/105/EC+and+2000/21/EC.">Regulation (EC) No 1907/2006 of the European Parliament and of the Council of 18 December 2006 concerning the Registration, Evaluation, Authorisation and Restriction of Chemicals (REACH), establishing a European Chemicals Agency, amending Directive 1999/45/EC and repealing Council Regulation (EEC) No 793/93 and Commission Regulation (EC) No 1488/94 as well as Council Directive 76/769/EEC and Commission Directives 91/155/EEC, 93/67/EEC, 93/105/EC and 2000/21/EC.</a> OJ. L396 (49), 1-849 (2006).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Globally Harmonized System of Classification and Labelling of Chemicals (GHS). , (2013).</li><li>Draize, J. H., Woodard, G., Calvery, H. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+the+Study+of+Irritation+and+Toxicity+of+Substances+Applied+Topically+to+the+Skin+and+Mucous+Membranes.">Methods for the Study of Irritation and Toxicity of Substances Applied Topically to the Skin and Mucous Membranes.</a> J Pharmacol Exp Ther November. 82, 377-390 (1944).</li><li>Adriaens, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retrospective+analysis+of+the+Draize+test+for+serious+eye+damage/eye+irritation:+importance+of+understanding+the+in+vivo+endpoints+under+UN+GHS/EU+CLP+for+the+development+and+evaluation+of+in+vitro+test+methods.">Retrospective analysis of the Draize test for serious eye damage/eye irritation: importance of understanding the in vivo endpoints under UN GHS/EU CLP for the development and evaluation of in vitro test methods.</a> Arch tox. 88, 701-723 (2014).</li><li>Balls, M., Botham, P. A., Bruner, L. H., Spielmann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+EC/HO+international+validation+study+on+alternatives+to+the+Draize+eye+irritation+test.">The EC/HO international validation study on alternatives to the Draize eye irritation test.</a> Toxicol in Vitro. 9, 871-929 (1995).</li><li>Curren, R. D., Harbell, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ocular+safety:+a+silent+(in+vitro)+success+story.">Ocular safety: a silent (in vitro) success story.</a> Altern Lab Anim. 30, 69-74 (2002).</li><li>Wilhelmus, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Draize+Eye+Test.">The Draize Eye Test.</a> Survey of Ophthalmology. 45, 493-515 (2001).</li><li>Curren, R. D., Harbell, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+alternatives+for+ocular+irritation.">In vitro alternatives for ocular irritation.</a> Environ health persp. 106, 485-492 (1998).</li><li>McCain, N. E., Binetti, R. R., Gettings, S. D., Jones, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+ocular+irritation+ranges+of+market-leading+cosmetic+and+personal-care+products+using+an+in+vitro+tissue+equivalent.">Assessment of ocular irritation ranges of market-leading cosmetic and personal-care products using an in vitro tissue equivalent.</a> Toxicologist. 66, 243 (2002).</li><li>Niranjan, P., Dang, A. H., January, B. G., Gomez, C., Harbell, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+the+EpiOcular+assay+for+preclinical+qualification+of+formulas+for+human+clinical+studies.">Use of the EpiOcular assay for preclinical qualification of formulas for human clinical studies.</a> Toxicologist. 96, 249 (2007).</li><li>Yin, X. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prediction+of+ocular+irritation+potential+of+surfactants-based+formulations+at+different+concentrations+using+the+EpiOcular+model.">Prediction of ocular irritation potential of surfactants-based formulations at different concentrations using the EpiOcular model.</a> Toxicologist. 108, 378 (2009).</li><li>Harbell, J., Curren, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+methods+for+the+prediction+of+ocular+and+dermal+toxicity.">In vitro methods for the prediction of ocular and dermal toxicity.</a> Handbook of Toxicology. , (2001).</li><li>Kaluzhny, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+the+EpiOcular(TM)+eye+irritation+test+for+hazard+identification+and+labelling+of+eye+irritating+chemicals+in+response+to+the+requirements+of+the+EU+cosmetics+directive+and+REACH+legislation.">Development of the EpiOcular(TM) eye irritation test for hazard identification and labelling of eye irritating chemicals in response to the requirements of the EU cosmetics directive and REACH legislation.</a> Altern Lab Anim. 39, 339-364 (2011).</li><li>Pfannenbecker, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cosmetics+Europe+Multi-Laboratory+Pre-Validation+of+the+EpiOcular+Reconstituted+Human+Tissue+Test+Method+for+the+Prediction+of+Eye+Irritation.">Cosmetics Europe Multi-Laboratory Pre-Validation of the EpiOcular Reconstituted Human Tissue Test Method for the Prediction of Eye Irritation.</a> Toxicol in vitro. , (2013).</li><li>MatTek Corporation. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> EpiOcular™ Eye Irritation Test (OCL-200-EIT) for the prediction of acute ocular irritation of chemicals for use with Reconstructed Human EpiOcular Model (OCL-200-EIT). Protocol#MK-24-007-0055. , (2014).</li><li>Kaluzhny, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EpiOcular+Eye+Irritation+Test+(EIT)+for+Hazard+Identification+and+Labeling+of+Eye+Irritating+Chemicals:+Protocol+Optimization+for+Solid+Materials+and+Extended+Shipment+Times.">EpiOcular Eye Irritation Test (EIT) for Hazard Identification and Labeling of Eye Irritating Chemicals: Protocol Optimization for Solid Materials and Extended Shipment Times.</a> Altern Lab Anim. 43 (2), 101-127 (2015).</li><li>Kolle, S. N., Kandarova, H., Wareing, B., van Ravenzwaay, B., Landsiedel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In-house+validation+of+the+EpiOcular(TM)+eye+irritation+test+and+its+combination+with+the+bovine+corneal+opacity+and+permeability+test+for+the+assessment+of+ocular+irritation.">In-house validation of the EpiOcular(TM) eye irritation test and its combination with the bovine corneal opacity and permeability test for the assessment of ocular irritation.</a> Altern Lab Anim. 39, 365-387 (2011).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reconstructed+Human+Cornea-like+Epithelium+(RhCE)+Test+Method+for+Identifying+Chemicals+Not+Requiring+Classification+and+Labelling+for+Eye+Irritation+or+Serious+Eye+Damage.+Draft+proposal+for+a+new+test+guideline..">Reconstructed Human Cornea-like Epithelium (RhCE) Test Method for Identifying Chemicals Not Requiring Classification and Labelling for Eye Irritation or Serious Eye Damage. Draft proposal for a new test guideline..</a> OECD Guideline for the Testing of Chemicals. , (2014).</li><li>Blazka, M. E., Harbell, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluating+the+ocular+irritation+potential+of+54+test+articles+using+the+EpiOcular+Human+tissue+Construct+Model.">Evaluating the ocular irritation potential of 54 test articles using the EpiOcular Human tissue Construct Model.</a> Toxicol. In Vitro. , (2003).</li><li>Kandarova, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+EpiDerm+Test+Protocol+for+the+Upcoming+ECVAM+Validation+Study+on+In+Vitro+Skin+Irritation+Tests+&#8212;+An+Assessment+of+the+Performance+of+the+Optimised+Test.">The EpiDerm Test Protocol for the Upcoming ECVAM Validation Study on In Vitro Skin Irritation Tests &#8212; An Assessment of the Performance of the Optimised Test.</a> Altern Lab Anim. 33, 351-367 (2005).</li></ol>

Publiceringsersättningar för den här artikeln betalades av MatTek Corporation.

Vi har presenterat det ögonirritationstest (Figur 1) som utvecklats för vävnadsmodell EpiOcular. EIT kan skilja okulära irriterande och frätande (GHS kategori 1 och 2 kombinerade) från material som inte kräver märkning (GHS ingen kategori) med hög grad av känslighet och specificitet 17. EIT som presenteras här inte diskriminera mellan GHS Kategori 1 från kategori 2 kemikalier. EIT validerades för klassificering och märkning av okulär irritationspotentialen hos ett brett spektrum av kemikalier, inklusive kosmetika och farmaceutiska substanser. I samband med andra in vitro-tester kommer EIT att fungera som en ersättning för in vivo kaninögonirritationstest. EIT använder två liknande men distinkta protokoll för flytande och fasta material, som varierar i längd av exponering och efter exponering inkubationsperioder (Figur 1). Ändpunkten används i ETIär vävnadsviabilitet, bestämdes genom MTT-analysen, som tidigare har använts i validerade humana epiteliala vävnadsmodeller 20,21. För att utföra denna analys, behövs ingen särskild utrustning förutom standardcellodlingsutrustning. På grund av den höga nivån av vävnad-till-vävnads reproducerbarhet, n = 2 vävnader i stället för den vanligtvis rekommenderade n = 3 används. Möjligheten att använda n = 2 vävnader är en viktig aspekt av protokollet, eftersom den tillåter en erfaren operatör för att behandla två vävnader samtidigt, vilket minimerar variationen i analysen som kan uppstå på grund av olika hantering av enskilda vävnader 14. Också genom att använda n = 2 vävnader per testartikeln, den irritations av 10 testsubstanser i samma aggregationstillstånd (flytande eller fast), tillsammans med de positiva och negativa kontroller, kan utvärderas med hjälp av ett kit (24 vävnader). Andra viktiga punkter som säkerställer tillförlitlig klassificering av material specifikationer för den positiva kontrollen SUbstance (vävnadsviabilitet ≤50.0%), reproducerbarhet mellan dubbla vävnader (skillnad &lt;20,0%), och negativ kontroll OD-avläsningar (&gt; 0,8 och &lt;2,5). När du utför EIT testet, är det viktigt att hålla fast vid det validerade protokollet och den föreslagna doseringen och skölj scheman (tabellerna 3 och 4), eftersom avvikelser från protokollet eller förändringar i inkubationsperioderna kan leda till förändrad utfall. På samma sätt kommer avvikelser från 3 timmar tid för MTT inkubation resultera i olika MTT avläsningar och kan påverka analysresultatet. Ibland kan en testkemikalie har optiska eller andra egenskaper som kan störa MTT vävnadsviabilitet analys eller orsaka reduktion av MTT. Till exempel kan en testkemikalie direkt minska MTT i blålila reaktionsprodukt, eller kan vara en färgad substans som absorberar ljus i samma storleksordning som MTT formazan (~ 570 nm). Men dessa testkemikalier prESENT ett problem endast om vid tidpunkten för MTT analysen, är fortfarande närvarande på (eller absorberas av) vävnaden en tillräcklig mängd av materialet. För att undvika denna störning är omfattande sköljförfaranden införlivas i EIT protokollet. Om sköljning inte bort TA och TA stör MTT minskning, måste ytterligare kontroller användas för att detektera och korrigera för det. I korthet, vid misstanke direkt MTT minskning av testkemikalien vill säga 50 ^ (eller 50 mg för fasta ämnen) av kemikalien i fråga inkuberades under 3 timmar med arbets MTT-lösning på SCC (NC, 50 l sterilt avjoniserat vatten, bör vara körs samtidigt). Om MTT-lösning blir blå-lila, är testföremålet förmodas ha reducerat MTT. I detta fall bör utföras en funktionskontroll med hjälp av fryst dödade vävnads kontroller för att utvärdera om testmaterialet bindning till vävnaden och leder till en falsk MTT minskning signal. Om det finns märkbar MTT-minskning i TA-exponerad, dödade vävnadskontroll(i förhållande till mängden i den obehandlade viabla vävnaden), den genomsnittliga vävnads livskraft testföremålet måste korrigeras genom att subtrahera medelvärdet livskraft de avlivade kontrollen. EIT felar på sidan av säkerhet, vilket framgår av den låga förekomsten av falska negativa klassificeringar 14,15,18. Viktigt ingen av GHS kategori 1-ämnen, som är frätande på ögat och som representerar den allvarligaste okulär fara, klassificerades som icke-irriterande i denna analys 14,15,18,19. Slutligen är en av de stora fördelarna med RHCE in vitro testmetod möjligheten att testa ren vätska och fasta material (vilket inte är möjligt med två-dimensionell, nedsänkta cellkulturer). EIT kommer att bidra avsevärt för att bestämma okulär irritationspotentialen hos ett brett spektrum av material enligt FN: s GHS-klassificering och märkning. Utbyte av djur för att bestämma oCular toxicitet har varit ett mål för toxikologisk forskning i många år. EIT testmetoden har slutfört en formell valideringsstudie som stöds av EURL ECVAM 2014 och EpiOcular EIT genomfördes i OECD: s riktlinjer för test som OECD TG 492 år 2015.

Konsumentprodukter såsom kosmetika, tvättmedel och rengöringsmedel innehåller en mängd olika kemikalier som kan framkalla allvarliga skador om de kommer i kontakt ögonen. Därför är testning av dessa medel för ögonirritation som krävs av USA: s och EU: s tillsynsmyndigheter att garantera konsumenternas säkerhet 1. En bedömning av ögonirritationspotentialen av blandningar och beredningar är också ett krav för att uppfylla REACH (Registration, Evaluation, Authorization och begränsning av kemikalier) lagstiftning för märkning av kosmetiska ingredienser enligt direktivet om EU: s kosmetika för transport av kemikalier, och för märkning av bekämpningsmedel och hushållsprodukter 2. För närvarande, tillsynsmyndigheter kräver okulär riskbedömning med hjälp av globalt harmoniserade systemet för klassificering och märkning av kemikalier (GHS) 3. GHS bygger huvudsakligen på Draize ögonirritation, den mest använda ögonirritation analys, i vilken främmande ämnen och mixtures införs direkt in i konjunktivalsäcken i kaninögat 4. Enligt GHS-klassificering, GHS kategori 1 (ämnen som är frätande) avser att testa kemikalier som orsakar svår initial skada på ögat vävnader eller allvarlig skada på ögat och vision som inte är fullt reversibla inom 21 dagar efter exponering 3,5. GHS kategori 2 avser att testa kemikalier som ger betydande förändringar i ögat som är fullt reversibla inom 21 dagar efter exponering. Test kemikalier som inte är frätande eller irriterande kallas GHS ingen kategori. För mer än 40 år, har Draize test på kaninögon kritiserats för sin brist på reproducerbarhet, överskattning av reaktioner hos människan, och användning av levande djur 5-8. Dessa farhågor har uppmuntrat många förslag till förfining, reduktion, och ersättning av den in vivo-test 9. Behovet av validerade alternativ till djurförsök stärktes ytterligaregenom antagandet av den sjunde ändringen av kosmetikadirektivet, som förbjöd användning av djur i säkerhetsutvärdering av kosmetiska produkter (2005) och ingredienser (2009) 2. Sedan 1996 har den rekonstruerade hornhinnan liknande vävnadsmodell använts i stor utsträckning av den kosmetiska industrin för att utvärdera irritationspotentialen av råvaror, ytaktiva baserade formuleringar, och förvärras blandningar som är avsedda för användning i eller i närheten av, ögat 10-13. Användning av vävnadsmodell RHCE möjliggör direkt topisk applicering av testmaterialet på vävnadsytan i dess nativa, outspädd form. På detta sätt kan icke-vattenlösliga formuleringar testas utan att späda dem med lösningsmedel. Som svar på EURL ECVAM: s (Europeiska unionens referenslaboratorium Europeiska centret för validering av alternativa metoder) begäran om en allmänt tillämplig, enkel och ekonomisk metod ögonirritation Test (EIT), som utnyttjar en single exponeringstid och kan skilja okulära irriterande och frätande från material som inte kräver märkning utvecklades (Figur 1) 14. Baserat på resultaten för 83 kemikalier (44 vätskor och 39 fasta ämnen), EIT uppnådde 95,5 / 68,2 / och 81,8% känslighet / specificitet och noggrannhet (SS &amp; A) för vätskor, 100,0 / 68,4 / och 84,6% SS &amp; A för fasta och 97,6 / 68,3 / och 83,1% för den totala SS &amp; A. År 2007, en multi-laboratorium pre-valideringsstudie sponsrad av Cosmetics Europe (tidigare Colipa) under överinseende av referenslaboratorium ECVAM bedömde relevansen och tillförlitligheten i ETI med målet att föra den till formell validering 15. I denna studie var 298 oberoende studier utförs i sju oberoende laboratorier. Studieresultat visade 99,7% avtal förutsägelse med låga variationskoefficienter över alla deltagande laboratorier 15. Som ett resultat under 2010 EIT protokollet trädde en formell EURL ECVAMvalideringsprogram. Valideringsstudien användes 104 kodade prov kemikalier, inklusive enskilda ämnen och kemiska blandningar, som in vivo-referensdata (Draize ögonirritation) fanns tillgängliga. Baserat på framgångarna med detta arbete var en OECD riktlinje utkast prov lämnas in 2014. Det förväntas att EIT kommer att bidra avsevärt till klassificering av okulär irritationspotentialen hos ett brett spektrum av material enligt FN: s GHS-klassificering och märkning.

eye irritation test (eit) for hazard identification of eye irritating chemicals using reconstructed human cornea-like epithelial (rhce) tissue model

För att uppfylla den sjunde ändringen av kosmetikadirektivet och EU: s Reach-lagstiftningen EU behövs validerade utan djurförsök alternativa metoder för säker och korrekt bedömning av okulär toxicitet hos människa. För att tillgodose detta behov har vi utvecklat en ögonirritationstest (EIT) som utnyttjar en tredimensionell rekonstruerad human hornhinna liknande epitel (RHCE) vävnadsmodell som bygger på normala mänskliga celler. EIT kan skilja okulära irriterande och frätande (GHS kategori 1 och 2 kombinerade) och de som inte kräver märkning (GHS ingen kategori). Testet utnyttjar två separata protokoll, en avsedd för flytande kemikalier, och en andra, liknande protokoll för fasta testartiklar. EIT prediktionsmodell använder en enda exponeringsperiod (30 min för vätskor, 6 h för fasta ämnen) och en enda vävnadsviabilitet bryt (60,0% enligt bestämning med MTT-analysen). Baserat på resultaten för 83 kemikalier (44 vätskor och 39 fasta ämnen) EIT uppnådde 95,5 / 68,2 / och 81,8% sensitivity / specificitet och noggrannhet (SS &amp; A) för vätskor, 100,0 / 68,4 / och 84,6% SS &amp; A för fasta och 97,6 / 68,3 / och 83,1% för den totala SS &amp; A. EIT kommer att bidra avsevärt till att klassificera den okulära irritationspotentialen hos ett brett spektrum av flytande och fasta kemikalier utan användning av djur för att uppfylla regulatoriska krav test. Den EpiOcular EIT metoden infördes 2015 i OECD: s testriktlinjer som TG 492.

Representativa EIT resultat utförda med 10 testföremål (TA) och negativa och positiva kontroller presenteras i tabell 6 och figur 3. Den genomsnittliga OD = 1,31 för NC motsvarar 100% vävnadsviabilitet, därför datorn (medelvärde OD = 0,41) hade relativ vävnadsviabilitet på 31,2%. När EIT protokollet utfördes i 15 giltiga oberoende experiment i 7 laboratorier med hjälp av flytande exponeringsprotokoll och 8 oberoende giltiga experiment i 4 laboratorier med fasta exponerings protokollet, den genomsnittliga vävnadsviabilitet för datorn med hjälp av flytande protokollet var 36,4 ± 4,0 % och 32,3 ± 6,4% för fasta ämnen protokollet. I samtliga fall var de positiva kontrollresultat under det avskurna värdet på 60,0% 15. Såsom visas i fig 3, TA1, TA2, TA4, TA7 och TA8 hade vävnadslivsduglighet&gt; 60,0% och därför klassificerades som &quot;NI&quot;. TA3, TA5, TA6, TA9 och TA10 hade vävnads viabilitet X04, 60,0% och därför klassificerades som &quot;I&quot;. Skillnaden av vävnadsviabilitet mellan dubbla vävnader var &lt;20,0% för alla terapiområden med undantag av TA2. Därför, resultat för alla test artiklar, med undantag av TA2, ansågs &quot;kvalificerad&quot;, eftersom de uppfyllde alla EIT acceptanskriterier (avsnitt 10.2). På grund av hög variabilitet mellan dubbla vävnader för TA2 i första försöket, var nödvändig för att erhålla kvalificerade EIT resultat ett andra försök. EIT testmetoden som beskrivs häri utnyttja vävnadsmodell RHCE användes för bedömningen av ögonirritation i flera multilaboratory valideringsstudier, inklusive formell validering av EURL ECVAM / Cosmetics Europe 15,17-19. I samtliga studier var EIT visat sig vara reproducerbara och kunde korrekt identifiera kemikalier (både ämnen och blandningar) som inte kräver klassificering och märkning av ögonirritation eller allvarlig ögonskada acligt FN: s GHS 15,17-19. EIT testmetoden uppfyllde kriterierna för validering Management Group (VMG) acceptans för ögonirritation känslighet, specificitet, och totala noggrannheten och för närvarande pågår formellt genomförande som en partiell ersättning för in vivo kanin Draize-test 19. <img alt="Figur 1" src="/files/ftp_upload/52979/52979fig1.jpg" /> Figur 1: Sammanfattning av EIT: s protokoll för flytande och fasta testartiklar Förkortningar: AM, analysmedium;. SCC, standardodlingsbetingelser; PBS, Dulbeccos fosfatbuffrade saltlösning; RT, rumstemperatur. <img alt="Figur 2" src="/files/ftp_upload/52979/52979fig2.jpg" /> Figur 2:. Den standardiserade konfiguration 96-brunnar för MTT vävnadsviabilitet testet Två 200 il portioner är transferred till de lämpliga brunnarna i en pre-märkt 96-brunnar. Förkortningar: NC, negativ kontroll; PC, positiv kontroll; TA1-TA20, testartiklar 1-20; Blank, extraktionsmedelslösningen. 96- MTT plattkonfiguration används med Excel utformat för att beräkna RHCE vävnadsviabilitet och EIT resultat. <img alt="Figur 3" src="/files/ftp_upload/52979/52979fig3.jpg" /> Figur 3: EIT resultat erhölls för 10 testföremål, NC och PC kontroller med hjälp av vävnadsmodell RHCE Grafen genereras från ett Excel-ark konstruerade så att, EIT resultat.. Test kemikalier som minskade vävnadsviabilitet ≤ 60,0% jämfört med NC klassificeras som irriterande (&quot;I&quot;, TA3, TA5, TA6, TA9 och TA10) och test kemikalier som hade vävnadsviabilitet&gt; 60,0% klassificeras som icke-Irriterande (&quot; NI &quot;, TA1, TA2, TA4, TA7 och TA8). <table border="0" cellpadding="0" cellspacing = &quot;0&quot;&gt; <tbody><tr><td colspan="7"> Starttid för EIT protokollarbetsmoment (en dags arbete för en operatör) </td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td colspan="4"> Varje rad motsvarar ett par av vävnader </td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> För steg: </td><td> 1 </td><td> 2 </td><td> 3 </td><td> 4 </td><td> 5 </td><td> 6 </td><td> 7 </td></tr><tr><td> Vätskor: </td><td> PBS </td><td> TA Exponering </td><td> Post- Blöt </td><td> Post- <td> MTT Reaktion </td><td> MTT Extraktion </td><td> Åtgärd </td></tr><tr><td></td><td> 30 min </td><td> 30 min </td><td> 12 min </td><td> 120 min </td><td> 180 min </td><td> 120 min </td><td> OD </td></tr><tr><td> NC </td><td> 09:00 </td><td> 09:30 </td><td> 10:00 </td><td> 10:12 </td><td> 00:12 </td><td> 15:12 </td><td> efter </td></tr><tr><td> PC </td><td> 09:01 </td><td> 09:31 </td><td> 10:01 </td><td> 10:13 </td><td> 00:13 </td><td> 15:13 </td><td> 17:30 </td></tr><tr><td> TA-1 </td><td> 09:02 </td><td> 09:32 </td><td> 10:02 </td><td> 10:14 </td><td> 00:14 </td><td> 15:14 </td><td></td></tr><tr><td> TA-2 &lt;/ strong&gt; </td><td> 09:03 </td><td> 09:33 </td><td> 10:03 </td><td> 10:15 </td><td> 00:15 </td><td> 15:15 </td><td></td></tr><tr><td> TA-3 </td><td> 09:04 </td><td> 09:34 </td><td> 10:04 </td><td> 10:16 </td><td> 00:16 </td><td> 15:16 </td><td></td></tr><tr><td> TA-4 </td><td> 09:05 </td><td> 09:35 </td><td> 10:05 </td><td> 10:17 </td><td> 00:17 </td><td> 15:17 </td><td></td></tr><tr><td> TA-5 </td><td> 09:06 </td><td> 09:36 </td><td> 10:06 </td><td> 10:18 </td><td> 00:18 </td><td> 15:18 </td><td></td></tr><tr><td> TA-6 </td><td> 09:07 </td><td> 09:37 </td><td> 10:07 </td><td> 10:19 </td><td> 00:19 </td><td> 15:19 </td><td></td></tr><tr><td> TA-7 </td><td> 09:08 </td><td> 09:38 </td><td> 10:08 </td><td> 10:20 </td><td> 00:20 </td><td> 15:20 </td><td></td></tr><tr><td><stro<html> ng&gt; TA-8 </td><td> 09:09 </td><td> 09:39 </td><td> 10:09 </td><td> 10:21 </td><td> 00:21 </td><td> 15:21 </td><td></td></tr><tr><td> TA-9 </td><td> 09:10 </td><td> 09:40 </td><td> 10:10 </td><td> 10:22 </td><td> 00:22 </td><td> 15:22 </td><td></td></tr><tr><td> TA-10 </td><td> 09:11 </td><td> 09:41 </td><td> 10:11 </td><td> 10:23 </td><td> 00:23 </td><td> 15:23 </td><td></td></tr></tbody></table> Tabell 3:. Prov tidsplan för testning av flytande testartiklar Protocol steg inklusive förvätning vävnaderna med DPBS, Tillämpning av testföremål (TAS), sköljning och efter blöt, Post-inkubationstid, MTT-analys, Utvinning av MTT, och Mätning av MTT OD presenteras i kolumnerna. Tider för de dubbla vävnaderna är organiserade i rader. Hela analystestning 10 resebyråerna och kontroller kan vara klar på en dag. e_content &quot;&gt; <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" height="439" width="582"><tbody><tr><td colspan="6"> Starttid för EIT: s protokollsteg (2 dagar arbetar för en operatör) </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td colspan="4"> Varje rad motsvarar ett par av vävnader </td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Dag 1 </td><td></td><td></td><td></td><td></td><td colspan="2"> Dag 2 (nästa dag) </td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> För steg: </td><td> 1 </strong&gt; </td><td> 2 </td><td> 3 </td><td> 4 </td><td> 5 </td><td> 6 </td><td> 7 </td></tr><tr><td> Fasta ämnen: </td><td> PBS </td><td> TA Exponering </td><td> Post- Blöt </td><td> Post- Incubaction </td><td> MTT Reaktion </td><td> MTT Extraktion </td><td> Åtgärd </td></tr><tr><td></td><td> 30 min </td><td> 6 h </td><td> 26 min </td><td> 18 h </td><td> 180 min </td><td> 120 min </td><td> OD </td></tr><tr><td> NC </td><td> 09:00 </td><td> 09:30 </td><td> 15:30 </td><td> 15:56 </td><td> 09:56 </td><td> 00:56 </td&gt; <td> efter </td></tr><tr><td> PC </td><td> 09:02 </td><td> 09:32 </td><td> 15:32 </td><td> 15:58 </td><td> 09:58 </td><td> 00:58 </td><td> 15:30 </td></tr><tr><td> TA-1 </td><td> 09:04 </td><td> 09:34 </td><td> 15:34 </td><td> 16:00 </td><td> 10:00 </td><td> 13:00 </td><td></td></tr><tr><td> TA-2 </td><td> 09:06 </td><td> 09:36 </td><td> 15:36 </td><td> 16:02 </td><td> 10:02 </td><td> 13:02 </td><td></td></tr><tr><td> TA-3 </td><td> 09:08 </td><td> 09:38 </td><td> 15:38 </td><td> 16:04 </td><td> 10:04 </td><td> 13:04 </td><td></td></tr><tr><td> TA-4 </td><td> 09:10 </td><td> 09:40 </td><td> 15:40 </td><td> 16:06 </td><td> 10:06 </td><td> 13:06 </td><td></td></tr><tr><td> TA-5 </td><td> 09:12 </td><td> 09:42 </td><td> 15:42 </td><td> 16:08 </td><td> 10:08 &lt;/ td&gt; <td> 13:08 </td><td></td></tr><tr><td> TA-6 </td><td> 09:14 </td><td> 09:44 </td><td> 15:44 </td><td> 16:10 </td><td> 10:10 </td><td> 13:10 </td><td></td></tr><tr><td> TA-7 </td><td> 09:16 </td><td> 09:46 </td><td> 15:46 </td><td> 16:12 </td><td> 10:12 </td><td> 13:12 </td><td></td></tr><tr><td> TA-8 </td><td> 09:18 </td><td> 09:48 </td><td> 15:48 </td><td> 16:14 </td><td> 10:14 </td><td> 13:14 </td><td></td></tr><tr><td> TA-9 </td><td> 09:20 </td><td> 09:50 </td><td> 15:50 </td><td> 16:16 </td><td> 10:16 </td><td> 13:16 </td><td></td></tr><tr><td> TA-10 </td><td> 09:22 </td><td> 09:52 </td><td> 15:52 </td><td> 16:18 </td><td> 10:18 </td><td> 13:18 </td><td></td></tr></tbody></table> Tabell 4: Prov tidsplan för testning av fasta testartiklar. Protokoll steg inklusive förvätning vävnaderna med DPBS, Tillämpning av testföremål, sköljning och efter blöt, Post-inkubationstid, MTT-analys, Utvinning av MTT, och Mätning av MTT OD presenteras i kolumnerna. Tider för de dubbla vävnaderna är organiserade i rader. Hela analysen testar 10 resebyråerna och kontroller genomförs under två dagar. <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0"><tbody><tr><td> Mängd </td><td> Reagens </td><td> Lagringsförhållanden </td><td> Källa </td><td> Beskrivning </td><td> Utgångsdatum </td></tr><tr><td> 1 injektionsflaska, 2 ml </td><td> MTT Koncentrat (MTT-100-CON) </td><td> Skyddad från ljus (-20 ° C) </td><td> MatTek </td><td> Fryst MTT koncentrat </td><td> 2 månader </td></tr><tr><td> 1 injektionsflaska, 8 ml </td><td> MTT utspädningsmedel </td><td> 2-8 &amp;# 186; C </td><td> MatTek </td><td> För utspädning MTT koncentrat före användning i MTT-analysen </td><td> 2 månader </td></tr><tr><td> 1 flaska, 60 ml </td><td> Isopropanol (CAS # 67-63-0) </td><td> RT </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> Extraktionsmedelslösningen </td><td> NA </td></tr></tbody></table> Tabell 5: MTT-100 Assay Kit Components. <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0"><tbody><tr><td> Kod N ° </td><td> Vävnad </td><td colspan="2"> Rådata </td><td colspan="2"> Blank korrigeringsdata </td><td rowspan="2"> medelvärdet av OD </td><td rowspan="2"> % Av lönsamheten </td></tr><tr><td></td><td> n </td><td> Aliq. 1 </td><td> Aliq. 2 </td><td> Aliq. 1 </td><td> Aliq. 2 </td></tr><tr><td> NC </td><td>1 </td><td> 1,316 </td><td> 1,352 </td><td> 1,316 </td><td> 1,352 </td><td> 1,334 </td><td> 101,6 </td></tr><tr><td></td><td> 2 </td><td> 1,277 </td><td> 1,309 </td><td> 1,277 </td><td> 1,309 </td><td> 1,293 </td><td> 98,4 </td></tr><tr><td> PC </td><td> 1 </td><td> 0,379 </td><td> 0,397 </td><td> 0,379 </td><td> 0,397 </td><td> 0,388 </td><td> 29,6 </td></tr><tr><td></td><td> 2 </td><td> 0,419 </td><td> 0,442 </td><td> 0,419 </td><td> 0,442 </td><td> 0,431 </td><td> 32,8 </td></tr><tr><td> TA1 </td><td> 1 </td><td> 1,213 </td><td> 1,244 </td><td> 1,213 </td><td> 1,244 </td><td> 1,229 </td><td> 93,5 </td></tr><tr><td></td><td> 2 </td><td> 1,355 </td><td> 1,355 </td><td> 1,355 </td><td> 1,355 </td><td> 1,355 </td><td> 103,2 </td></tr><tr><td> TA2 </td><td> 1 </td><td> 1.210 </td><td> 1,122 </td><td> 1.210 </td><td> 1,122 </td><td> 1,166 </td><td> 88,7 </td></tr><tr><td></td><td> 2 </td><td> 0,828 </td><td> 0,837 </td><td> 0,828 </td><td> 0,837 </td><td> 0,833 </td><td> 63,4 </td></tr><tr><td> TA3 </td><td> 1 </td><td> 0,167 </td><td> 0,168 </td><td> 0,167 </td><td> 0,168 </td><td> 0,167 </td><td> 12,7 </td></tr><tr><td></td><td> 2 </td><td> 0,138 </td><td> 0,136 </td><td> 0,138 </td><td> 0,136 </td><td> 0,137 </td><td> 10,4 </td></tr><tr><td> TA4 </td><td> 1 </td><td> 1,137 </td><td> 1,160 </td><td> 1,137 </td><td> 1,160 </td><td> 1,149 </td><td> 87,4 </td></tr><tr><td></td><td> 2 </td><td> 1,262 </td><td> 1,191 </td><td> 1,262 </td><td> 1,191 </td><td> 1,227 </td><td> 93,4 </td></tr><tr><td> TA5 </td><td> 1 </td><td> 0,610 </td><td> 0,621 </td><td> 0,610 </td><td> 0,621 </td><td> 0,616 </td><td> 46,9 </td></tr><tr><td></td><td> 2 </td><td> 0,480 </td><td> 0,484 </td><td> 0,480 </td><td> 0,484 </td><td> 0,482 </td><td> 36,7 </td></tr><tr><td> TA6 </td><td> 1 </td><td> 0,502 </td><td> 0,513 </td><td> 0,502 </td><td> 0,513 </td><td> 0,508 </td><td> 38,7 </td></tr><tr><td></td><td> 2 </td><td> 0,396 </td><td> 0,407 </td><td> 0,396 </td><td> 0,407 </td><td> 0,402 </td><td> 30,6 </td></tr><tr><td> TA7 </td><td> 1 </td><td> 1,048 </td><td> 1,050 </td><td> 1,048 </td><td> 1,050 </td><td> 1,049 </td><td> 79,9 </td></tr><tr><td></td><td> 2 </td><td> 1,149 </td><td> 1,150 </td><td> 1,149 </td><td> 1,150 </td><td> 1,150 </td><td> 87,5 </td></tr><tr><td> TA8 </td><td> 1 </td><td> 1,032 </td><td> 1,034 </td><td> 1,032 </td><td> 1,034 </td><td> 1,033 </td><td> 78,7 </td></tr><tr><td></td><td> 2 </td><td> 0,941 </td><td> 0,935 </td><td> 0,941 </td><td> 0,935 </td><td> 0,938 </td><td> 71,4 </td></tr><tr><td> TA9 </td&gt; <td> 1 </td><td> 0,022 </td><td> 0,022 </td><td> 0,022 </td><td> 0,022 </td><td> 0,022 </td><td> 1,7 </td></tr><tr><td></td><td> 2 </td><td> 0,144 </td><td> 0,149 </td><td> 0,144 </td><td> 0,149 </td><td> 0,147 </td><td> 11,2 </td></tr><tr><td> TA10 </td><td> 1 </td><td> 0,150 </td><td> 0,150 </td><td> 0,150 </td><td> 0,150 </td><td> 0,150 </td><td> 11,4 </td></tr><tr><td></td><td> 2 </td><td> 0,254 </td><td> 0,255 </td><td> 0,254 </td><td> 0,255 </td><td> 0,255 </td><td> 19,4 </td></tr></tbody></table><table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0"><tbody><tr><td></td><td> betyder </td><td> Dif. </td><td> medelvärde för </td><td> Dif. </td><td> Dif. / 2 </td><td colspan="2"> Klassificering </td></tr><tr><td></td><td> OD </td><td> OD </td><td> viabilitet [%] </td><td> av viabilitet </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> NC </td><td> 1,314 </td><td> 0,041 </td><td> 100,0 </td><td> 3,12 </td><td> 1,56 </td><td> NI </td><td> kvalificerad </td></tr><tr><td> PC </td><td> 0,410 </td><td> 0,043 </td><td> 31,2 </td><td> 3,23 </td><td> 1,62 </td><td> Jag </td><td> kvalificerad </td></tr><tr><td> TA1 </td><td> 1,292 </td><td> 0,127 </td><td> 98,3 </td><td> 9,63 </td><td> 4,81 </td><td> NI </td><td> kvalificerad </td></tr><tr><td> TA2 </td><td> 0,999 </td><td> 0,333 </td><td> 76,1 </td><td> 25,36 </td><td> 12,68 </td><td> NI </td><td> D&gt; 20 </td></tr><tr><td> TA3 </td><td> 0,152 </td><td> 0,030 </td><td> 11,6 </td><td> 2,32 </td><td> 1,16 </td><td> Jag </td><td> kvalificerad </td></tr><tr><td> TA4 </td><td> 1,188 </td><td> 0,078 </td><td> 90,4 </td><td> 5,94 </td><td> 2,97 </td><td> NI </td><td> kvalificerad </td></tr><tr><td> TA5 </td><td> 0,549 </td><td> 0,134 </td><td> 41,8 </td><td> 10,16 </td><td> 5,08 </td><td> Jag </td><td> kvalificerad </td></tr><tr><td> TA6 </td><td> 0,455 </td><td> 0,106 </td><td> 34,6 </td><td> 8,07 </td><td> 4,03 </td><td> Jag </td><td> kvalificerad </td></tr><tr><td> TA7 </td><td> 1,100 </td><td> 0,101 </td><td> 83,7 </td><td> 7,65 </td><td> 3,82 </td><td> NI </td><td> kvalificerad </td></tr><tr><td> TA8 </td><td> 0,986 </td><td> 0,095 </td><td> 75,0 </td><td> 7,23 </td><td> 3,62 </td><td> NI </td><td> kvalificerad </td></tr><tr><td> TA9 </td><td> 0,085 </td><td> 0,125 </td><td> 6,4 </td><td> 9,48 </td><td> 4,74 </td><td> Jag </td><td> kvalificerad </td></tr><tr><td> TA10 </td><td> 0,203 </td><td> 0,105 </td><td> 15,4 </td><td> 7,95 </td><td> 3,98 </td><td> Jag </td><td> kvalificerad </td></tr></tbody></table> Tabell 6:. EIT resultat som erhållits för 10 testartiklar, NC och PC styr Tabellerna är produced av ett Excel-ark som syftar till att beräkna vävnadsviabilitet och EIT resultat. Test kemikalier som minskade vävnadsviabilitet ≤ 60,0% jämfört med NC klassificeras som irriterande (&quot;I&quot;, TA3, TA5, TA6, TA9 och TA10) och test kemikalier som hade vävnadsviabilitet&gt; 60,0% klassificeras som icke-Irriterande (&quot; NI &quot;, TA1, TA2, TA4, TA7 och TA8).

Watch this Scientific Journal Video about Eye Irritation Test EIT for Hazard Identification of Eye Irritating Chemicals using Reconstructed Human Cornea-like Epithelial RhCE Tissue Model at JoVE.com

Eye Irritation Test EIT for Hazard Identification of Eye Irritating Chemicals using Reconstructed Human Cornea-like Epithelial RhCE Tissue Model

Vi har utvecklat en ögonirritationstest som utnyttjar en tredimensionell rekonstruerad human hornhinna liknande epitel (RHCE) vävnadsmodell. Testet kan skilja mellan ögonirriterande och frätande material (GHS kategori 1 och 2 kombinerade) och de som inte kräver märkning (GHS ingen kategori).

Ögonirritationstest (EIT) för Hazard Identifiering av Eye irriterande kemikalier med hjälp av rekonstruerad Human Cornea liknande Epithelial (RHCE) Tissue Modell

To comply with the Seventh Amendment to the EU Cosmetics Directive and EU REACH legislation, validated non-animal alternative methods for reliable and ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Eye Irritation Test (EIT) for Hazard Identification of Eye Irritating Chemicals using Reconstructed Human Cornea-like Epithelial (RhCE) Tissue Model

Evaluation of Polymeric Gene Delivery Nanoparticles by Nanoparticle Tracking Analysis and High-throughput Flow Cytometry

Utvärdering av polymera Gene Delivery nanopartiklar genom nanopartikel Tracking Analys och hög kapacitet flödescytometri

Non-viral gene delivery using polymeric nanoparticles has emerged as an attractive approach for gene therapy to treat genetic diseases1 and as a ...

Tissue Engineering of a Human 3D in vitro Tumor Test System

Tissue Engineering of a Human 3D in vitro Tumor Test System

Tissue Engineering av en Human 3D<em&gt; In vitro</em&gt; Tumör Test System

Cancer is one of the leading causes of death worldwide.  Current therapeutic strategies are predominantly developed in 2D culture  systems, which ...

Human Cartilage Tissue Fabrication Using Three-dimensional Inkjet Printing Technology

Human Brosk Tissue Fabrication Använda Tredimensionell Inkjet Printing Technology

Bioprinting, which is based on thermal inkjet printing, is one of the most attractive enabling technologies in the field of tissue engineering and ...

Combination of Microstereolithography and Electrospinning to Produce Membranes Equipped with Niches for Corneal Regeneration

Kombination av Microstereolithography och Electro att producera Membran Utrustad med Nischer för Corneal Regeneration

Corneal problems affect millions of people worldwide reducing their quality of life significantly. Corneal disease can be caused by illnesses such as ...

Assessing Leukocyte-endothelial Interactions Under Flow Conditions in an Ex Vivo Autoperfused Microflow Chamber Assay

Assessing Leukocyte-endothelial Interactions Under Flow Conditions in an Ex Vivo Autoperfused Microflow Chamber Assay

Bedöma leukocytbindande endotel interaktioner Under flödesförhållandena i ett<em&gt; Ex vivo</em&gt; Autoperfused mikroflödes Chamber analys

Leukocyte-endothelial interactions are early and critical events in acute and chronic inflammation and can, when dysregulated, mediate tissue injury ...

Production, Characterization and Potential Uses of a 3D Tissue-engineered Human Esophageal Mucosal Model

Produktion, karakterisering och potentiella användningsområdena för en 3D vävnadstekniska Human Esophageal Mucosal Modell

The incidence of both esophageal adenocarcinoma and its precursor, Barrett&#8217;s Metaplasia, are rising rapidly in the western world. Furthermore ...

Encapsulated Cell Technology for the Delivery of Biologics to the Mouse Eye

Inkapslade cellteknik för leverans av biologiska läkemedel till musöga

Many current therapeutics under development for diseases of the posterior pole of the eye are biologics. These drugs need to be administered frequently, ...

Growth of Human and Sheep Corneal Endothelial Cell Layers on Biomaterial Membranes

Tillväxt av human- och fårhornhinnans endotelcelllager på biomaterialmembran

Corneal endothelial cell cultures have a tendency to undergo epithelial-to-mesenchymal transition (EMT) after loss of cell-to-cell contact. EMT is ...

Cultivating a Three-dimensional Reconstructed Human Epidermis at a Large Scale

Odla en tredimensionell rekonstruerad mänsklig epidermis i stor skala

A three-dimensional human epidermis model reconstructed from neonatal primary keratinocytes is presented. Herein, a protocol for the cultivation process ...

Quantifying Fibrillar Collagen Organization with Curvelet Transform-Based Tools

Kvantifiera Fibrillar Collagen Organization med Curvelet Transform-baserade verktyg

Fibrillar collagens are prominent extracellular matrix (ECM) components, and their topology changes have been shown to be associated with the progression ...