Name: minced tissue in compressed collagen: a cell-containing biotransplant for single-staged reconstructive repair
Uploaded: 2016-02-24T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Minced Tissue in Compressed Collagen: A Cell-containing Biotransplant for Single-staged Reconstructive Repair at JoVE.com

The authors thank the Swedish Society for Medical Research, the Promobilia Foundation, the Crown Princess Lovisa Foundation, the Freemason Foundation for Children&#8217;s Welfare, the Swedish Society of Medicine, the Solstickan Foundation, Karolinska Institutet, and the Stockholm City Council for financial support.

सभी पशु प्रोटोकॉल पर पशु स्टॉकहोम काउंटी समिति द्वारा पूर्व-अनुमोदित किया गया और सभी प्रक्रियाओं पशु का उपयोग, साथ ही प्रासंगिक संघीय विधियों के लिए नियमों को पुष्टि। 1. पशु प्रक्रियाओं <ol><l...

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	<li>Rheinwald, J. G., Green, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Serial+cultivation+of+strains+of+human+epidermal+keratinocytes:+the+formation+of+keratinizing+colonies+from+single+cells.">Serial cultivation of strains of human epidermal keratinocytes: the formation of keratinizing colonies from single cells.</a> Cell. 6, 331-343 (1975).</li><li>Fossum, M., Nordenskjold, A., Kratz, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineering+of+multilayered+urinary+tissue+in+vitro.">Engineering of multilayered urinary tissue in vitro.</a> Tissue Engineering. 10, 175-180 (2004).</li><li>Salmikangas, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Manufacturing,+characterization+and+control+of+cell-based+medicinal+products:+challenging+paradigms+toward+commercial+use.">Manufacturing, characterization and control of cell-based medicinal products: challenging paradigms toward commercial use.</a> Regen Med. 10, 65-78 (2015).</li><li>Fossum, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minced+skin+for+tissue+engineering+of+epithelialized+subcutaneous+tunnels.">Minced skin for tissue engineering of epithelialized subcutaneous tunnels.</a> Tissue Engineering. 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Part C, Methods. 19, 688-696 (2013).</li><li>Engelhardt, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+collagen-poly(lactic+acid-co-varepsilon-caprolactone)+hybrid+scaffold+for+bladder+tissue+regeneration.">A collagen-poly(lactic acid-co-varepsilon-caprolactone) hybrid scaffold for bladder tissue regeneration.</a> Biomaterials. 32, 3969-3976 (2011).</li><li>Brown, R. A., Wiseman, M., Chuo, C. B., Cheema, U., Nazhat, S. 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G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Constructs+of+electrospun+PLGA,+compressed+collagen+and+minced+urothelium+for+minimally+manipulated+autologous+bladder+tissue+expansion.">Constructs of electrospun PLGA, compressed collagen and minced urothelium for minimally manipulated autologous bladder tissue expansion.</a> Biomaterials. 35, 5741-5748 (2014).</li><li>Orabi, H., AbouShwareb, T., Zhang, Y., Yoo, J. J., Atala, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-seeded+tubularized+scaffolds+for+reconstruction+of+long+urethral+defects:+a+preclinical+study.">Cell-seeded tubularized scaffolds for reconstruction of long urethral defects: a preclinical study.</a> Eur Urol. 63, 531-538 (2013).</li><li>Blais, M., Parenteau-Bareil, R., Cadau, S., Berthod, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Concise+review:+tissue-engineered+skin+and+nerve+regeneration+in+burn+treatment.">Concise review: tissue-engineered skin and nerve regeneration in burn treatment.</a> Stem Cells Transl Med. 2, 545-551 (2013).</li><li>Serpooshan, V., Muja, N., Marelli, B., Nazhat, S. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibroblast+contractility+and+growth+in+plastic+compressed+collagen+gel+scaffolds+with+microstructures+correlated+with+hydraulic+permeability.">Fibroblast contractility and growth in plastic compressed collagen gel scaffolds with microstructures correlated with hydraulic permeability.</a> J Biomed Mater Res A. 96, 609-620 (2011).</li></ol>

इस अध्ययन के लिए एक आसान करने के लिए उपयोग दृष्टिकोण शल्य चिकित्सा की मेज पर ऑटोलॉगस प्रत्यारोपण के लिए ऊतक के साथ मूत्राशय दीवार पैच उत्पादन करने के लिए प्रस्तुत करता है। पैच मध्य और के साथ और प्लास्ट...

त्वचा और मूत्रजननांगी पथ को प्रत्यारोपण पर अधिकांश ऊतक इंजीनियरिंग की पढ़ाई स्वस्थ ऊतकों और विशेष रूप से सुसज्जित सेल संवर्धन सुविधाएं 1,2 में सेल विस्तार से ऑटोलॉगस सेल फसल शामिल हैं। सेल विस्तार के बाद, कोशिकाओं को आमतौर पर बाद में उपयोग के लिए जमा हो जाती है जब रोगी ऑटोग्राफ़्ट प्राप्त करने के लिए तैयार किया जाता है। नाइट्रोजन फ्रीजर -150 डिग्री सेल्सियस या कम से कम तापमान पर लंबी अवधि के भंडारण की अनुमति है। ठंड की प्रक्रिया सावधान और व्यवस्था की कोशिकाओं नहीं खोने के लिए नियंत्रित किया जाना चाहिए। कोशिका मृत्यु से एक जोखिम विगलन प्रक्रिया है, जो कोशिका झिल्ली का टूटना करने के लिए नेतृत्व कर सकते हैं दौरान intracellular पानी के क्रिस्टलीकरण है। सेल ठंड आमतौर पर कोशिकाओं, भ्रूण गोजातीय सीरम, और डाइमिथाइल sulfoxide के एक उच्च एकाग्रता का उपयोग कर, धीमी और नियंत्रित ठंडा (-1 डिग्री सेल्सियस प्रति मिनट) द्वारा किया जाता है। विगलन के बाद, कोशिकाओं ठंड माध्यम हटाने और सेल संस्कृति प्लास्टिक या एक पर संवर्धन द्वारा फिर से संसाधित करने की आवश्यकताप्रत्यारोपण से पहले मरीज को वापस biomaterial। उपरोक्त सभी चरणों के समय लेने वाली है, श्रमसाध्य हैं, और महंगा 3। इसके अलावा, रोगी प्रत्यारोपण के लिए इरादा कोशिकाओं के सभी इन विट्रो प्रसंस्करण उच्च विनियमित कर रहे हैं और अच्छी तरह से प्रशिक्षित और मान्यता प्राप्त प्रयोगशालाओं कर्मियों और 4 की आवश्यकता है। सब सब में, एक सुरक्षित और विश्वसनीय निर्माण की प्रक्रिया की खरीद करने के लिए, केवल तकनीकी रूप से उन्नत तकनीक केन्द्रों में से एक बहुत छोटी संख्या में स्थापित किया जा सकता है और सामान्य शल्य चिकित्सा विकारों में एक व्यापक उपयोग की संदिग्ध है। आदेश प्रयोगशाला वातावरण में कोशिका संवर्धन की सीमाओं को पार करने के लिए, विवो में सेल के विस्तार के लिए कीमा बनाया हुआ ऊतक रोपाई की अवधारणा एक बायोरिएक्टर के रूप में शरीर में ही उपयोग करके शुरू की है। इन प्रयोजनों के लिए, autografts रियायत के आकार है कि मैं के अंग के अंतिम पुनर्निर्माण के लिए आवश्यक है के अनुसार एक 3 डी मोल्ड पर प्रत्यारोपित किया जाएगा5-7 nterest। मूल रूप से, कीमा बनाया हुआ उपकला रोपाई का विचार 1958 में नम्र द्वारा प्रस्तुत किया गया था, जब वह बताया कि कैसे उपकला एक घाव के किनारों से बढ़ता है। उन्होंने दिखा दिया है कि त्वचा का एक छोटा सा टुकड़ा (चित्रा 1) 8 सीधा दिशाओं में दो बार टुकड़ा काटने से 100% से सेल के विस्तार के लिए अपनी क्षमता को अपना मार्जिन बढ़ाने के लिए और इस तरह होगा। सिद्धांत त्वचा प्रत्यारोपण के लिए 9 meshed आंशिक मोटाई त्वचा grafts के उपयोग के द्वारा समर्थित किया गया है और त्वचा में उपचार मॉडल 10 घाव। <img alt="आकृति 1" src="/files/ftp_upload/53061/53061fig1.jpg" width="600" /> चित्रा 1:। नम्र सिद्धांत नम्र के सिद्धांत के अनुसार, उपकला एक घाव के किनारों से बढ़ता है। क्षेत्र नख़रेबाज़ प्रौद्योगिकी द्वारा उजागर वृद्धि करके, कीमा बनाया हुआ ऊतक कई स्थानों से घाव epithelializes। वर्तमान अध्ययन hypo पर आधारित हैथीसिस है कि एक ही सिद्धांत एक फफूंदी के आसपास कीमा बनाया हुआ उपकला रखकर चमड़े के नीचे ऊतक को लागू किया जा सकता है। उपकला कोशिकाओं के क्रम में एक निरंतर neoepithelium कि आंतरिक शरीर से घाव क्षेत्र विदेशी शरीर (मोल्ड) शामिल हैं और अलग करती है के लिए फार्म में कीमा बनाया हुआ प्रत्यारोपण (पुनर्निर्माण) से लामबंद होता है, घाव को कवर क्षेत्रों (विस्थापित) और विभाजन (विस्तार) ( चित्रा 2)। <img alt="चित्र 2" src="/files/ftp_upload/53061/53061fig2.jpg" /> चित्रा 2:। नम्र के सिद्धांत के अनुसार इन विवो intracorporal ऊतक के विस्तार के लिए कीमा बनाया हुआ उपकला के साथ एक 3 डी मोल्ड के कार्टून चमड़े के नीचे ऊतक को एक सांचे पर रखा और फिर प्रतिरोपित कीमा बनाया हुआ ऊतक का उपयोग करके, परिकल्पना है कि उपकला कोशिकाओं से विस्थापित है कीमा बनाया हुआ ऊतक के किनारों, पुनर्निर्माण, और इतने विस्तार के रूप में एक सतत neoepithelium कि घाव क्षेत्र शामिल हैं और भीतर के शरीर से विदेशी शरीर (मोल्ड) को अलग रूप में। हालांकि पिछले vivo अध्ययन में आशाजनक परिणाम दिखाने के लिए, और अधिक सुधार autografts मजबूत करके प्राप्त किया जा सकता है, ताकि पुनर्जीवित उपकला यांत्रिक आघात बेहतर 7 सामना कर सकता है। एक 3 डी ढंग से मोल्ड करने के लिए पोषक तत्वों और अपशिष्ट उत्पादों के आसान प्रसार, संभावना और शल्य चिकित्सा से निपटने की सुगमता: इन उद्देश्यों के लिए है, एक सफल biomaterial के लिए महत्वपूर्ण और चीज की तरह के रूप में पहचान की गई। निष्कर्ष बनाया गया था कि इन जरूरतों कीमा बनाया हुआ ऊतक के लिए एक समग्र biomaterial जोड़कर मुलाकात हो सकती है। वर्तमान में कीमा बनाया हुआ ऊतक से बना एक पाड़ विकसित करने के उद्देश्य अध्ययन प्लास्टिक संकुचित कोलेजन एक biodegradable कपड़े की एक मजबूत कोर युक्त। इन तरीकों से, व्यवहार्य कोशिकाओं कीमा बनाया हुआ ऊतक कणों से विस्थापित और मूल उपकला (त्वचा या urothelium) की रूपात्मक सुविधाओं विशेषता के साथ पैदा कर सकता है। प्लास्टिक संपीड़न का उपयोग, पाड़ को कम थाके बारे में 420 माइक्रोन कीमा कणों के रूप में करने के लिए 1 सेमी से आकार में डी ऊपरी परत कोलेजन में रखा गया था। कोर कपड़े किसी भी बहुलक हो लेकिन कोलेजन को कवर परतों 11 के साथ लगाना करने के क्रम में एक हाइड्रोफिलिक सतह के साथ संशोधित किए जाने की जरूरत सकता है। विधि पाली (ε-caprolactone) मिलकर (पीसीएल) दो प्लास्टिक संकुचित कोलेजन जैल के भीतर एक बुना हुआ जाल को शामिल कीमा बनाया हुआ मूत्राशय म्यूकोसा या सूअरों से कीमा बनाया हुआ त्वचा संवर्धन के लिए एक पाड़ के रूप में प्रयोग द्वारा एक बढ़ाया पाड़ अखंडता प्रदान की है। निर्माण के लिए इन विट्रो में 6 सप्ताह के लिए सेल संस्कृति की स्थिति में बनाए रखा गया था, एक स्तरीकृत, बहुपरती urothelium या एक अच्छी तरह से समेकित संकर निर्माण के शीर्ष पर स्क्वैमस त्वचा उपकला के सफल गठन का प्रदर्शन है। निर्माण को संभालने के लिए आसान था और मूत्राशय वृद्धि उद्देश्यों या त्वचा के दोषों के कवर के लिए जगह में sutured किया जा सकता है। ऊतक पाड़ के सभी भागों एफडीए को मंजूरी दे दी है और तकनीकऊतक कटाई, नख़रेबाज़, प्लास्टिक संपीड़न, और एक एकल मंचन हस्तक्षेप के रूप में रोगी को वापस रोपाई द्वारा एकल चरण प्रक्रियाओं के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। प्रक्रिया किसी भी सामान्य शल्य चिकित्सा इकाई में ऊतक के विस्तार और बाँझ शर्तों के तहत पुनर्निर्माण के लिए किया जा सकता है।

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Silicone catheter 10-French</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Preparing the animal for surgery , Section 1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM 10X</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>31885-023</td>
			<td>Plastic compression section 4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24 well plates</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>08-772-1</td>
			<td>Plastic compression section 4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3&#39;3,&#39;5-Triiodothyronine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>IRMM469</td>
			<td>&#160; In vitro culture; Section 5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4% PFA</td>
			<td>Labmed Solutions</td>
			<td>200-001-8</td>
			<td>Immunocytochemistry; Section 6</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70% ethanol</td>
			<td>Histolab</td>
			<td></td>
			<td>Immunocytochemistry; Section 6</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ABC Elite kit: Biotin -Streptavidin detection kit</td>
			<td>Vector</td>
			<td>PK6102</td>
			<td>Immunocytochemistry; Section 6</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Absolute ethanol</td>
			<td>Histolab</td>
			<td>1399.01</td>
			<td>Immunocytochemistry; Section 6</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adenine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A8626</td>
			<td>&#160; In vitro culture; Section 5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atropine 25 &#956;g/kg&#160;</td>
			<td>Temgesic, RB Pharmaceuticals, Great Britain</td>
			<td></td>
			<td>Preparing the animal for surgery , Section 1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Azaperone 2&#8201;mg/kg&#160;</td>
			<td>Stresnil, Janssen-Cilag, Pharma, Austria</td>
			<td></td>
			<td>Preparing the animal for surgery , Section 1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biosafety Level 2 hood&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Plastic compression; Section 4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blocking solution:&#160; Normal serum from the same species as the secondary secondary antibody was generated in.</td>
			<td>Vector</td>
			<td>The blocking solution depends of the&#160; origin of&#160; first antibody</td>
			<td>Immunocytochemistry; Section 6</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine 45 &#956;g/kg</td>
			<td>Atropin, Mylan Inc, Canonsburg, PA</td>
			<td></td>
			<td>Preparing the animal for surgery , Section 1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carprofen 3&#8201;mg/kg&#160;&#160;&#160;</td>
			<td>Rimadyl, Orion Pharma, Sweden</td>
			<td></td>
			<td>Preparing the animal for surgery , Section 1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chlorhexidine gluconate&#160;</td>
			<td>Hibiscrub 40&#8201;mg/mL, Regent Medical, England</td>
			<td></td>
			<td>Preparing the animal for surgery , Section 1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cholera toxin&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C8052</td>
			<td>&#160; In vitro culture; Section 5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coplin jar: staining jar for boiling</td>
			<td>Histolab</td>
			<td>6150</td>
			<td>Immunocytochemistry; Section 6</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless mold&#160; (33x22x10 mm) custom made</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Plastic compression; Section 4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>3188-5023</td>
			<td>Plastic compression section 4. Keep on ice&#160; when using it in plastic compression</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epidermal growth factor</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>E9644</td>
			<td>&#160; In vitro culture; Section 5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethilon (non-absorbable monofilament for skin sutures)</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td></td>
			<td>Surgery, Section 1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10437-036</td>
			<td>Plastic compression section 4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps (Adison with tooth)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Preparing the animal for surgery , Section 1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze (Gazin Mullkompresse)&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Preparing the animal for surgery , Section 1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ham&#180;s F12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>31765-027</td>
			<td>Plastic compression section 4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin</td>
			<td>Histolab</td>
			<td>1820</td>
			<td>Immunocytochemistry; Section 6</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Humidity chamber</td>
			<td>DALAB</td>
			<td></td>
			<td>Immunocytochemistry; Section 6</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrocortisone</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>H0888</td>
			<td>&#160; In vitro culture; Section 5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrogen peroxide Solution 30%</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>H1009</td>
			<td>Immunocytochemistry; Section 6</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>I3536</td>
			<td>&#160; In vitro culture; Section 5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane&#160;</td>
			<td>Isoflurane, Baxter, Deerfield, IL</td>
			<td></td>
			<td>Preparing the animal for surgery , Section 1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lidocaine 5 mg/ml</td>
			<td>Xylocaine, AstraZeneca, Sweden</td>
			<td></td>
			<td>Preparing the animal for surgery , Section 1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lucose 25&#8201;mg/mL&#160;</td>
			<td>Baxter, Deerfield, IL</td>
			<td></td>
			<td>Preparing the animal for surgery , Section 1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Marker pen pap pen</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Z377821-1EA</td>
			<td>Immunocytochemistry; Section 6</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medetomidine 25 &#956;g/kg&#160;</td>
			<td>Domitor, Orion Pharma, Sweden</td>
			<td></td>
			<td>Preparing the animal for surgery , Section 1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mincing device</td>
			<td>Applied Tissue Technologies LLC</td>
			<td></td>
			<td>&#160;Minced tissue preparation, section 2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Monocryl (absorbable monofilament)</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td></td>
			<td>Surgery, Section 1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S7653</td>
			<td>Immunocytochemistry; Section 6</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaOH 1N</td>
			<td>Merck Millipore</td>
			<td>106462</td>
			<td>Plastic compression section 4 and cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nylon mesh, 110 uM thick pore size 0.04 sqmm</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Plastic compression; Section 4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oculentum simplex APL: ointment for eye protection</td>
			<td>APL</td>
			<td>Vnr 336164</td>
			<td>Surgery, Section 1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14190-094</td>
			<td>Plastic compression section 4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140-122</td>
			<td>Plastic compression section 4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenobarbiturate 15&#8201;mg/kg&#160;</td>
			<td>Pentobarbital, APL, Sweden</td>
			<td></td>
			<td>Preparing the animal for surgery , Section 1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PLGA Knitted fabric</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Plastic compression; Section 4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat-tail collagen</td>
			<td>First LINK, Ltd, UK</td>
			<td>60-30-810</td>
			<td>Plastic compression section 4, keep on ice</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel blade - 15</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Preparing the animal for surgery , Section 1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shaving shears</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Preparing the animal for surgery , Section 1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless stell mesh, 400 uM thick pore size&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Plastic compression; Section 4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Steril gloves</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Preparing the animal for surgery , Section 1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile gowns</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Preparing the animal for surgery , Section 1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile drapes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterilium</td>
			<td>Bode Chemie HAMBURG</td>
			<td></td>
			<td>Preparing the animal for surgery , Section 1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture Thread Ethilon</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Preparing the animal for surgery , Section 1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TE-solution (antigen unmasking solution) consist of 10 mM Tris and 1 mM EDTA, pH 9.0</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>10 mM Tris/1 mM EDTA,&#160; adjust pH to&#160; 9.0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tiletamine hypochloride 2,5&#8201;mg/kg</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Preparing the animal for surgery , Section 1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transferrin&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T8158</td>
			<td>&#160; In vitro culture; Section 5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trizma Base, H2NC&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T6066</td>
			<td>Immunocytochemistry; Section 6</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vector VIP kit: Enzyme&#160; peroxidase substrate&#160; kit</td>
			<td>Vector</td>
			<td>SK4600</td>
			<td>Immunocytochemistry; Section 6</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vicryl (absorbable braded)</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td></td>
			<td>Surgery, Section 1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris buffer pH 7.6 (washing buffer)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>TE solution: Make 10X&#160; (0,5M Tris, 1,5M NaCl) by mixing: 60,6 g Tris (Trizma Base, H2NC(CH2OH)3, M=121.14 g/mol), add 800 ml&#160; distilled water adjust the pH till 7.6, add 87,7 g NaCl and fill to 1000 ml with&#160; distilled water. Dilute to 1X with distilled water.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>X-tra solv (solvent)</td>
			<td>DALAB</td>
			<td>41-5213-810</td>
			<td>Immunocytochemistry; Section 6. Use under fume hood</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zolazepam hypochloride</td>
			<td>Zoletil, Virbac, France</td>
			<td></td>
			<td>Preparing the animal for surgery , Section 1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Depilatory wax strips</td>
			<td>Veet</td>
			<td></td>
			<td>Preparing the animal for surgery , Section 1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pentobarbital sodium</td>
			<td>Lundbeck</td>
			<td></td>
			<td>Termination, Section 3</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

minced tissue in compressed collagen: a cell-containing biotransplant for single-staged reconstructive repair

Conventional techniques for cell expansion and transplantation of autologous cells for tissue engineering purposes can take place in specially equipped human cell culture facilities. These methods include isolation of cells in single cell suspension and several laborious and time-consuming events before transplantation back to the patient. Previous studies suggest that the body itself could be used as a bioreactor for cell expansion and regeneration of tissue in order to minimize ex vivo manipulations of tissues and cells before transplanting to the patient. The aim of this study was to demonstrate a method for tissue harvesting, isolation of continuous epithelium, mincing of the epithelium into small pieces and incorporating them into a three-layered biomaterial. The three-layered biomaterial then served as a delivery vehicle, to allow surgical handling, exchange of nutrition across the transplant, and a controlled degradation. The biomaterial consisted of two outer layers of collagen and a core of a mechanically stable and slowly degradable polymer. The minced epithelium was incorporated into one of the collagen layers before transplantation. By mincing the epithelial tissue into small pieces, the pieces could be spread and thereby the propagation of cells was stimulated. After the initial take of the transplants, cell expansion and reorganization would take place and extracellular matrix mature to allow ingrowth of capillaries and nerves and further maturation of the extracellular matrix. The technique minimizes ex vivo manipulations and allow cell harvesting, preparation of autograft, and transplantation to the patient as a simple one-stage intervention. In the future, tissue expansion could be initiated around a 3D mold inside the body itself, according to the specific needs of the patient. Additionally, the technique could be performed in an ordinary surgical setting without the need for sophisticated cell culturing facilities.

इस अध्ययन से पता चलता है कि कैसे एक विधि कोलेजन और कीमा बनाया हुआ ऊतक की प्लास्टिक संपीड़न का उपयोग प्रत्यारोपण के लिए एक biomaterial उत्पादन करने के लिए प्रस्तुत करता है। मूत्राशय म्यूकोसा और त्व?...

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Minced Tissue in Compressed Collagen: A Cell-containing Biotransplant for Single-staged Reconstructive Repair

ऊतक इंजीनियरिंग अक्सर आदेश ऊतक उत्थान के लिए autografts बनाने के लिए इन विट्रो विस्तार में भी शामिल है। इस अध्ययन में ऊतक विस्तार, उत्थान, और इन विवो में पुनर्निर्माण के लिए एक विधि के लिए शरीर के बाहर की कोशिकाओं और जैविक सामग्री के प्रसंस्करण कम करने के लिए विकसित किया गया था।

संकुचित कोलेजन में कीमा बनाया हुआ ऊतक: एकल मंचन पुनर्निर्माण मरम्मत के लिए एक सेल युक्त Biotransplant

Conventional techniques for cell expansion and transplantation of autologous cells for tissue engineering purposes can take place in specially equipped ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Electric Field-controlled Directed Migration of Neural Progenitor Cells in 2D and 3D Environments

इलेक्ट्रिक फील्ड नियंत्रित 2 डी और 3 डी वातावरण में तंत्रिका कोशिकाओं पूर्वज निर्देशित प्रवासन

Endogenous electric fields (EFs) occur naturally in vivo and play a critical role during tissue/organ development and regeneration, including that of the ...

Fabrication and Application of Rose Bengal-chitosan Films in Laser Tissue Repair

निर्माण और गुलाब बंगाल chitosan फिल्म्स की लेजर ऊतकों की मरम्मत में आवेदन

Photochemical tissue bonding (PTB) is a sutureless technique for tissue repair, which is achieved by applying a solution of rose bengal (RB) between two ...

An Improved Method for the Preparation of Type I Collagen From Skin

त्वचा से टाइप I कोलेजन की तैयारी के लिए एक बेहतर तरीका

Soluble type 1 collagen (COL1) is used extensively as an adhesive substrate for cell cultures and as a cellular scaffold for regenerative applications. ...

Imaging Denatured Collagen Strands In vivo and Ex vivo via Photo-triggered Hybridization of Caged Collagen Mimetic Peptides

Imaging Denatured Collagen Strands In vivo and Ex vivo via Photo-triggered Hybridization of Caged Collagen Mimetic Peptides

विकृत कोलेजन किस्में इमेजिंग<em&gt; में विवो</em&gt; और<em&gt; पूर्व vivo</em&gt; कैद कोलेजन अनुकरण करनेवाला पेप्टाइड्स के फोटो ट्रिगर संकरण के माध्यम से

Collagen is a major structural component of the extracellular matrix that supports tissue formation and maintenance. Although collagen remodeling is an ...

Analysis of Cell Migration within a Three-dimensional Collagen Matrix

एक तीन आयामी मैट्रिक्स कोलेजन के भीतर सेल प्रवास का विश्लेषण

The ability to migrate is a hallmark of various cell types and plays a crucial role in several physiological processes, including&#160;embryonic ...

Generation of a Three-dimensional Full Thickness Skin Equivalent and Automated Wounding

एक तीन आयामी पूर्ण मोटाई त्वचा की पीढ़ी के बराबर है और स्वचालित लोग घायल हो गए

In vitro models are a cost effective and ethical alternative to study cutaneous wound healing processes. Moreover, by using human cells, these models ...

Engineering 3D Cellularized Collagen Gels for Vascular Tissue Regeneration

संवहनी ऊतक उत्थान के लिए इंजीनियरिंग 3 डी Cellularized कोलेजन जैल

Synthetic materials are known to initiate clinical complications such as inflammation, stenosis, and infections when implanted as vascular substitutes. ...

Engineered 3D Silk-collagen-based Model of Polarized Neural Tissue

फूट डालना तंत्रिका ऊतक के इंजीनियर 3 डी सिल्क कोलेजन आधारित मॉडल

Despite huge efforts to decipher the anatomy, composition and function of the brain, it remains the least understood organ of the human body. To gain a ...

Layer-by-layer Collagen Deposition in Microfluidic Devices for Microtissue Stabilization

Microtissue स्थिरीकरण के लिए microfluidic उपकरणों में परत-दर-परत कोलेजन बयान

Although microfluidics provides exquisite control of the cellular microenvironment, culturing cells within microfluidic devices can be challenging. 3D ...

Applications of In Vivo Functional Testing of the Rat Tibialis Anterior for Evaluating Tissue Engineered Skeletal Muscle Repair

Applications of In Vivo Functional Testing of the Rat Tibialis Anterior for Evaluating Tissue Engineered Skeletal Muscle Repair

के आवेदन<em&gt; Vivo</em&gt; ऊतक मूल्यांकन के लिए चूहा tibialis पूर्वकाल के कार्यात्मक परीक्षण इंजीनियर कंकाल की मांसपेशी की मरम्मत

Despite the regenerative capacity of skeletal muscle, permanent functional and/or cosmetic deficits (e.g., volumetric muscle loss (VML) resulting from ...