Name: biomembrane fabrication by the solvent-assisted lipid bilayer (salb) method
Uploaded: 2015-12-01T13:00:00
Duration: 9 min 38 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Biomembrane Fabrication by the Solvent-assisted Lipid Bilayer SALB Method at JoVE.com

De auteurs willen erkennen steun van de National Research Foundation (NRF -NRFF2011-01 en NRF2015NRF-POC0001-19), de National Medical Research Council (NMRC / CBRG / 0005/2012), en de Nanyang Technological University te NJC

1. Vorming van Ondersteunde lipidebilaag op een Hydrofiel Solid Ondersteuning <ol><li> Bereid lipide-voorraadoplossingen van 10 mg / ml 1,2-dioleoyl- sn-glycero-3-fosfocholine (DOPC) en 1 mg / ml 1,2-dioleoyl- sn-glycero-3-phosphoethanolamine- N - (lissamine rhodamine B sulfonyl) (Rh-PE) door het oplossen van de respectievelijke lipide poeders (adequaat vooraf gewogen met een analytische massabalans) in isopropanol oplossing. </li><li> Verdun en meng de voorraadoplossingen in isopropanol om het gewenste lipide mengsel te bereiden op de eindconcentratie. Voor fluorescentie microscopie en FRAP experimenten dient 0,5 gew% Rh-PE worden opgenomen in het lipidemengsel. </li><li> Injecteer het lipide mengsel in isopropanol in het microfluïdische kanaal totdat deze gevuld is. </li><li> Incubeer het lipide mengsel op het glas gedurende 10 min. </li><li> Geleidelijk vervangen lipideoplossing met water of bufferoplossing met behulp van een peristaltische pomp bij een zeer lage stroomsnelheid(10-50 pl / min). Als alternatief, vervang de lipidemengsel door herhaalde pipetteren. </li><li> Spoel het kanaal grondig met overmaat buffer om het residuele isopropanol te verwijderen. </li></ol> 2. Vorming van-cholesterol verrijkt Ondersteunde Membranen Opmerking: de stevige ondergrond (SiO 2) ondersteunt blaasje fusie, maar het membraan samenstelling (hoge cholesterol) remt blaasje fusie omdat cholesterol verrijkt blaasjes hebben hoge buigstijfheid 30. <ol><li> Bereid een voorraadoplossing van 10 mg / ml lipide DOPC, 10 mg / ml cholesterol en 1 mg / ml Rh-PE door eerst de respectieve poeders in isopropanol. </li><li> Herhaal stap 1,2-1,6 met behulp van de voorraad oplossingen bereid in stap 2.1. </li></ol> 3. Membraan Fluidity Assay <ol><li> Dompel het glaasje in natriumdodecylsulfaat (SDS) oplossing (1%) gedurende 10 min. </li><li> Was de dia&#39;s grondig met gedemineraliseerd water en spoel with ethanol. </li><li> Föhn dia&#39;s met behulp van een zachte stroom van stikstof. </li><li> Maak de objectglaasjes zuurstofplasma gedurende 30 seconden bij maximum vermogen in radiofrequentie zuurstof plasmakamer. </li><li> Verwijder de beschermende film coating van de bodemloze commerciële microfluïdische kamer (figuur 1A) met behulp van een pincet en bevestig het glaasje op de kleverige kant van de kamer (Figuur 1B). </li><li> Monteer de connectoren en slangen in de inlaat en uitlaat posities van de kamer en plaats de microfluïdische kanaal op de microscooptafel (figuur 1C). </li><li> Vorm een fluorescent-gelabelde ondersteunde lipide dubbellaag in de microfluïdische kanalen [herhaal stap 1 met de gewenste lipidensamenstelling (bijvoorbeeld 0,5 mg / ml DOPC) met 0,5 wt% Rh-PE in organisch oplosmiddel]. </li><li> Zoek de bilaag vliegtuig met een 60X olie-immersie objectief (NA 1,49) om beelden vast te leggen. </li><li> Neem twee pre-bleekmiddel afbeeldingen, dan foto-bleken 301; m breed ronde plek met een 532 nm, 100 mW laserstraal. Voordat photobleaching, warmen de laser totdat de intensiteit stabiel is geworden. Direct na fotobleken, Een reeks beelden elke 1 sec gedurende 2 min teneinde het herstel van de fluorescentie-intensiteit zich ter gebleekte vlek. </li></ol> 4. Cholesterol kwantificering Assay <ol><li> Expose siliciumdioxide beklede kwartskristal sensorchip met zuurstofplasma gedurende 30 seconden bij maximum vermogen in radiofrequentie zuurstof plasmakamer. Verwijder de chip uit de kamer en onmiddellijk monteer de chip in de meetkamer. </li><li> Voordat experiment, eerst de frequentie en de afvoer van de sensor chip in de lucht om een ​​goede montage zorgen te verwerven. <ol><li> Voor de commerciële Q-Sense E1 of E4 QCM-D instrument, voert u de Q-Soft programma en klik op &quot;Acquisition&quot; en selecteer &quot;Setup Measurement&quot;. </li><li> In het nieuwe venster dat verschijnt, controleer dan de 3, 5, 7, 9, 11 en 13 boventonen en klik op zoeken en uitvoeren om de resonantiespectra controleren. Stel de temperatuur op 24 ° C. Indien één of meer resonantie frequenties niet eens met de verwachte waarden, check de chip montage en opnieuw uitvoeren van deze stap totdat een akkoord is bereikt. </li></ol></li><li> Start de peristaltische pomp en stroming bufferoplossing (10 mM Tris, 150 mM NaCl, pH 7,5) in de meetkamer met een stroomsnelheid van 100 pl / min. </li><li> In het programma, klik op &quot;Acquisition&quot; en selecteer &quot;Restart Measurement&quot; om de resonantiefrequentie en energie dissipatie signalen opnemen. Herhaal deze stap tot een stabiele basislijn wordt verkregen voor de frequentie en de dissipatie verschuivingen. Opmerking: voor de stappen hierna, maar aanvullende frequentie en dissipatie verschuivingen die kunnen worden geregistreerd als functie van de tijd. </li><li> Injecteer isopropanol (zonder lipiden) gedurende 10 min. </li><li> Injecteer het mengsel van DOPC lipiden / cholesterol in hetgewenste molverhouding met een totale lipide concentratie van 0,5 mg / ml in isopropanol gedurende 10 min. </li><li> Injecteer buffer gedurende 20 min bij een stroomsnelheid van 100 pl / min. </li><li> Injecteer 1 mM oplossing van methyl-β-cyclodextrine (MβCD) bereid in buffer (debiet 100 ul / min) totdat het signaal een stabiele waarde bereikt. </li><li> Meet de relatieve positieve frequentieverschuivingen die wordt veroorzaakt door de MβCD behandelingsstap en bereken de massa van cholesterol en DOPC lipiden door omzetting van de Af cho en Af DOPC waarden massawaarden met de Sauerbrey vergelijking [Δm = - (C / N) x Af, waarbij C = 17,7 ng / cm2, n: ondertoon]. </li><li> Bereken de molfractie van cholesterol in de SLB, rekening houdend met de molecuulgewichten van DOPC lipide (786,1 g / mol) en cholesterol (386,6 g / mol). </li></ol>

The authors have no competing financial interests to disclose.

In dit werk, wordt een oplosmiddel-uitwisseling protocol voorgesteld waarin lipiden alcohol (isopropanol, ethanol of n-propanol) worden geïncubeerd met een vaste drager en daarna de alcohol geleidelijk vervangen door een waterige bufferoplossing teneinde een reeks drijven van faseovergangen uiteindelijk produceren lamellaire fase lipidendubbellagen 24. Er wordt aangetoond dat de methode kan vervaardigen ondersteunde lipide dubbellagen op oppervlakken zoals goud, die hardnekkig het blaasje fusiemethode. Een optimale lipide concentratiebereik (0,1-0,5 mg / ml) werd bepaald voor complete vorming dubbellaag in standaard experimentele formats dusver getest. Bij lipide concentraties onder 0,1 mg / ml, discrete microscopische stukken bilagen gevormd. Anderzijds, bij concentraties boven 0,1 mg / ml en lager dan 0,5 mg / ml, is een volledige en gelijkmatige bilaag gevormd. Op lipide concentraties boven deze range, werd een vloeistof bilayer nog gevormd als verificatieed door FRAP analyse echter fluorescentiemicroscopie onthult de aanwezigheid van extra lipidestructuren bovenop de bilaag. Opvallend is dat de morfologie van deze bijkomende lipidestructuren, zoals bepaald met QCM-D analyse, afhankelijk van de alcohol die gebruikt werd tijdens de incubatiestap. In het geval van ethanol, de relatief hoge Δ f en Δ D verschuivingen lijken op de QCM-D signature verkregen voor een geadsorbeerde laag vesicle. Wanneer isopropanol of n-propanol werd gebruikt in de Δ f iets hoger dan de waarde verwacht voor een dubbellaag (laatste Δ f tussen -30 tot -40 Hz), terwijl Δ D was aanmerkelijk hoger. Dergelijke QCM-D reacties te verwachten voor uitgebreide lipidestructuren (bijv wormachtige micellen) buitenwaarts uitsteekt uit het membraanoppervlak (zoals zichtbaar door fluorescentiemicroscopie in sommige gevallen). De snelheid van de oplosmiddel uitwisseling is een andere belangrijke parameter die kritisch kan zijn, especially bij lagere lipide concentraties (bijvoorbeeld 0,1 mg / ml) gebruikt. Snelle omwisseling oplosmiddel bij lage lipide concentratie kan leiden tot de vorming van incomplete bilagen. In de standaard meetkamer gebruikt voor QCM-D metingen in dit document (Q-Sense E4 meetkamer), debiet van ongeveer 100 ui / min, waren geschikt voor zeer reproduceerbare volledige dubbellaagsformatie. Voor stroom cellen met andere geometrieën en volume, kan de optimale stroomsnelheid variëren en moet empirisch worden bepaald op basis van de hierin voorgestelde maatregelen. Naast ondersteunde lipide dubbellagen vormen op oppervlakken die hardnekkig vesikel fusie zijn, kan de SALB worden toegepast om de noodzaak van lipide vesicles die kunnen scheuren, waardoor de deur naar de vervaardiging van ondersteunde membranen met complexe samenstellingen omzeilen. Als illustratief voorbeeld samenstelling werden lipidemengsels met een grote fractie van cholesterol onderzocht. Cholesterol is een belangrijke component van Mammalian celmembranen, en zijn fractie kan benaderen 45-50 mol% van het membraan lipide samenstelling (bijvoorbeeld in erytrocyten). Derhalve moet ook een eenvoudig model van een lipide bilaag die een menselijke celmembraan omvatten cholesterol. Terwijl vesikel fusie kan worden om vloeibare lipide dubbellagen die slechts 10-15% cholesterol fabriceren, kan de werkwijze SALB vorming van vloeibare lipide dubbellagen met een hoog fracties cholesterol (tot 57 mol%, zoals gekwantificeerd door QCM-D metingen) 36. Wanneer echter het cholesterolgehalte verder werd verhoogd (tot 63 mol%) werden domeinen streep-vorm 37 waargenomen. De co-bestaande domeinen vloeistof denken aan die waargenomen in de β regio in het fasediagram van de cholesterol / fosfolipiden monolaag aan het lucht-water grensvlak. Over het algemeen wordt de SALB methode getoond om een ​​eenvoudige en efficiënte aanpak op ondersteunde lipide bilagen te vormen, met name in gevallen buiten het bereik van de conventionele vesikel fusie methode. Tot nu toe werden de QCM-D techniek en fluorescentiemicroscopie voornamelijk gebruikt om de ondersteunde lipide bilagen gevormd door SALB wijze karakteriseren. Kijken, een breed scala van oppervlakte-gevoelige analytische meettechnieken, zoals oppervlakte plasmon resonantie (SPR) 38, atomic force microscopie (AFM) 39,40, Fourier-transformatie infrarood spectroscopie 41, X-ray 42 en neutronen reflectiviteit 43 kan, worden gebruikt voor het verder karakteriseren en studie eenvoudige en complexe configuraties dubbellaag Bereid middels de werkwijze SALB. Deze nieuwe mogelijkheden opent de deur naar een groter aantal wetenschappers die kunstmatige celmembranen kunnen verkennen door gebruik te maken van een eenvoudige en robuuste experimentele protocol.

De vaste drager lipide bilaag 1 (SLB) is een veelzijdig platform dat de basiskenmerken van biomembranen behoudt zoals de dubbellaag dikte, tweedimensionale lipide diffusievermogen, en de mogelijkheid om membraangebonden biomoleculen gastheer. Vanwege de complexiteit van natuurlijke celmembranen, heeft deze eenvoudige platform getoond gefunctioneerd als efficiënt platform in vitro studies membraan processen zoals raft vorming 2, eiwitbinding 3, virussen en virusachtige deeltje bindende 4,5 en cell signaling 6. Gevormd in de nabijheid van een vaste drager, de SLB platform is compatibel met een reeks oppervlak-gevoelige meettechnieken als totale interne reflectie microscopie (TIRF), kwartskristalmicrobalans-dissipatie (QCM-D) en impedantiespectroscopie. Verschillende werkwijzen zijn ontwikkeld om verschillende soorten SLBs, waaronder luchtbel producereninstorting 7 en dip-pen nanolithografie 8 voor submicron-sized lipide vlekken, spin-coating 9 voor tweelaags stacks en Langmuir-Blodgett (LB) 10 en blaasje fusion (VF) 11 voor full-spanning, enkel lipidedubbellaag coatings. De VF werkwijze omvat de adsorptie van kleine unilamellaire vesicles een vaste drager en daaropvolgende spontane breuk en fusie met een continu lipide dubbellaag vormen. Echter, onder fysiologische omstandigheden, spontane breuk vesikel is voornamelijk bedoeld silicium gebaseerde materialen zoals siliciumdioxide, glas en mica. Bovendien is vesicle breuk niet spontaan blaasjes voor complexe lipide samenstellingen zoals die met hoge fracties van cholesterol of negatief geladen lipiden. Afhankelijk van het systeem kan vesicles scheuren worden geïnduceerd door verdere afstemming van de experimentele condities zoals temperatuur 12, 13 oplossing pH en zoutgehalte 14, osmotische shock 15 </sup&gt; of druk 16 of toevoeging van bivalente ionen, zoals Ca2 + 17. Alternatief kan het membraan-actieve peptide AH worden ingevoerd om een laag geadsorbeerd blaasjes destabiliseren, waardoor scheuren en vesikel bilaag vorming op een reeks oppervlakken 18-22. Bovendien vereist een succesvolle dubbellaagsformatie bereiding van een goed gecontroleerde populatie van kleine unilamellaire vesicles die tijdrovend en moeilijk te bereiken voor bepaalde membraan preparaten kunnen worden. Daarom, ondanks het hoge rendement optimaal gevallen (bijvoorbeeld na uitgebreide vries-dooi voorbehandeling van vesicles 23), de algemene toepassing van vesikel fusie wordt beperkt door de reikwijdte van geschikte substraten en membraan preparaten. Werkwijze 24-28-oplosmiddel ondersteunde lipide dubbellaag (SALB) is een alternatieve fabricagetechniek die lipide vesicles niet vereist. De werkwijze berust op de afzetting of lipide moleculen aan een vast oppervlak in aanwezigheid van een water mengbaar organisch oplosmiddel, gevolgd door geleidelijke uitwisseling van deze oplosmiddelen met een waterige bufferoplossing teneinde SLB vorming veroorzaken. Tijdens het oplosmiddel-uitwisselingsstap, het ternaire mengsel van lipiden, organisch oplosmiddel en water ondergaat een serie faseovergangen met toenemende water fractie, wat leidt tot de vorming van lamellaire fase structuren in de bulk oplossing en een SLB op het vaste substraat. Belangrijk is dat deze zelfassemblage route omzeilt de noodzaak van vesicles scheuren, gewoonlijk de beperkende stap voor de transformatie van geadsorbeerde vesicles in een SLB. Het protocol is toepasbaar op diverse oppervlakken zoals siliciumdioxide, aluminiumoxide, chroom, indium tinoxide, en goud. In dit document en de bijbehorende video, wordt de vergelijking van lipideafzetting de SALB en vesicle fusiemethoden gepresenteerd. Met name de invloed van de experimentele criteria zoals lipideconcentratie, Stroomsnelheid, en de keuze van water mengbaar organisch oplosmiddel, de kwaliteit van de bilaag gevormd door de SALB methode besproken. Analytische karakterisering van de vervaardigde SLBs wordt uitgevoerd door de QCM-D, fluorescentiemicroscopie en fluorescentieherstel na fotobleken (FRAP) technieken. QCM-D bewaking is een oppervlakte-gevoelige massa meettechniek die sinds het pionierswerk uitgevoerd door Keller en Kasemo 29, is uitgebreid gebruikt om kwantitatief onderzoek dubbellaagsformatie. Fluorescentie microscopie maakt controle van membraan homogeniteit en de visualisatie van membraandomeinen. De FRAP techniek is een standaard hulpmiddel om de laterale beweeglijkheid van lipide moleculen in een SLB, hetgeen een essentiële eigenschap van vloeibare membranen te bepalen. Het eerste deel van deze studie omvat QCM-D analyse van de SALB en vesikel fusie methoden toegepast dubbellaagsformatie op siliciumdioxide en goud proberen. In het tweede deel,de bereiding en karakterisering van ondersteunde membranen met verschillende soorten cholesterol concentraties met SALB methode gedemonstreerd en de resultaten vergeleken met die verkregen door het blaasje fusie methode.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1459">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:719px;">QCM-D silicon dioxide-coated substrates</td>
			<td style="width:356px;">QSense AB,&#160; Sweden</td>
			<td style="width:217px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">QCM-D gold-coated substrates</td>
			<td style="width:356px;">QSense AB,&#160; Sweden</td>
			<td style="width:217px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Q-Sense E4 module</td>
			<td>QSense AB,&#160; Sweden</td>
			<td style="width:217px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;">Plasma Cleaner, PDC-32G</td>
			<td>Harrick Plasma, Ithaca, NY</td>
			<td>PDC-001 (115V)&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:719px;">1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DOPC)</td>
			<td>Avanti Polar Lipids</td>
			<td>850375P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-(lissamine rhodamine B sulfonyl) (ammonium salt) (Rh-PE)</td>
			<td>Avanti Polar Lipids</td>
			<td>810150P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">cholesterol</td>
			<td>Avanti Polar Lipids</td>
			<td style="width:217px;">700000P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Methyl-&#946;-cyclodextrin</td>
			<td style="width:356px;">Sigma&#160;</td>
			<td style="width:217px;">C4555</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Isopropanol</td>
			<td style="width:356px;">Sigma&#160;</td>
			<td align="right">673773</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:719px;">Ethanol</td>
			<td style="width:356px;">Sigma&#160;</td>
			<td align="right" style="width:217px;">459844</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:719px;">n-propanol</td>
			<td style="width:356px;">Sigma&#160;</td>
			<td align="right">279544</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:719px;">Sticky-Slide I 0.1 Luer</td>
			<td style="width:356px;">IBIDI</td>
			<td align="right" style="width:217px;">81128</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:719px;">Male elbow 1/8&#8221;</td>
			<td style="width:356px;">Cole-Parmer</td>
			<td style="width:217px;">30505-70</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:719px;">Silicon tubing 1.6mm ID</td>
			<td style="width:356px;">IBIDI</td>
			<td align="right" style="width:217px;">10842</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:719px;">Glass coverslip No. 1.5H, 25 mm x 75 mm</td>
			<td style="width:356px;">IBIDI</td>
			<td align="right" style="width:217px;">10812</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:719px;">Reglo Digital M2-2/12 Peristaltic Pump</td>
			<td style="width:356px;">Ismatec</td>
			<td style="width:217px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:719px;">Sodium dodecyl sulfate</td>
			<td style="width:356px;">Sigma&#160;</td>
			<td align="right" style="width:217px;">71725</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

biomembrane fabrication by the solvent-assisted lipid bilayer (salb) method

Om celmembranen na te bootsen, de ondersteunde lipidedubbellaag (SLB) is een aantrekkelijk platform waarmee in vitro onderzoek van membraan-gerelateerde processen, terwijl het verlenen van biocompatibiliteit en biofunctionality aan vaste substraten. De spontane adsorptie en breuk van fosfolipide vesicula is de meest gebruikte methode om SLBs vormen. Echter, onder fysiologische omstandigheden, vesicle fusie (VF) is beperkt tot slechts een deel van lipidesamenstellingen en vaste dragers. We beschrijven hier een eenstaps algemene procedure genaamd de oplosmiddelvrije ondersteunde lipide dubbellaag (SALB) de vorming methode om SLBs die geen vesicles vormen vereist. De SALB werkwijze omvat de afzetting van lipide moleculen aan een vast oppervlak in de aanwezigheid van met water mengbare organische oplosmiddelen (bijvoorbeeld isopropanol) en daaropvolgende solvent-uitwisseling met waterige bufferoplossing teneinde SLB vorming veroorzaken. De continue oplosmiddel stap uitwisseling maakt de toepassing van deWerkwijze in een doorstroom configuratie geschikt voor bewaking dubbellaagsformatie en daaropvolgende wijzigingen via uiteenlopende oppervlakte-gevoelige biosensoren. De SALB werkwijze kan worden gebruikt om SLBs fabriceren op uiteenlopende hydrofiele vaste oppervlakken, zoals die welke hardnekkig vesikel fusie zijn. Bovendien maakt fabricage van SLBs samengesteld lipidesamenstellingen die niet kunnen worden bereid met de vesicle fusiemethode. Hierin vergelijken we de resultaten verkregen met de SALB en conventionele blaasjes fusiemethoden twee illustratieve hydrofiele oppervlakken, siliciumdioxide en goud. Om de experimentele omstandigheden voor de bereiding van hoogwaardige bilagen bereid via de SALB werkwijze te optimaliseren, is het effect van verschillende parameters, waaronder het type organisch oplosmiddel in de depositiestap de snelheid van uitwisseling van oplosmiddel en de lipide concentratie besproken met probleemoplossingstips . Vorming van ondersteunde membranen die hoge fracties van cholesterol is ook demonencentreerde de SALB methode, aandacht voor de technische mogelijkheden van de SALB techniek voor een breed scala van membraan configuraties.

Watch this Scientific Journal Video about Biomembrane Fabrication by the Solvent-assisted Lipid Bilayer SALB Method at JoVE.com

Biomembrane Fabrication by the Solvent-assisted Lipid Bilayer SALB Method

We presenteren een experimenteel protocol naar een ondersteunde lipidebilaag op vaste substraten te vormen zonder gebruik van lipide blaasjes. We tonen een eenstaps werkwijze op een lipide dubbellaag op siliciumdioxide en goud en ondersteunde membranen met cholesterol verrijkte domein voor verschillende biologische toepassingen te vormen.

Biomembraan Fabrication door de Solvent-geassisteerde lipidedubbellaag (SALB) Methode

In order to mimic cell membranes, the supported lipid bilayer (SLB) is an attractive platform which enables in vitro investigation of membrane-related ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Biomembrane Fabrication by the Solvent-assisted Lipid Bilayer (SALB) Method

Constant Pressure-controlled Extrusion Method for the Preparation of Nano-sized Lipid Vesicles

Constant Pressure-gecontroleerde Extrusie werkwijze voor de bereiding van Nano-sized lipide bolletjes

Liposomes are artificially prepared vesicles consisting of natural and synthetic phospholipids that are widely used as a cell membrane mimicking platform ...

Microfluidic Chip Fabrication and Method to Detect Influenza

Microfluïdische chip fabricage en methode om Influenza Detect

Fast  and effective diagnostics play an important role in controlling infectious  disease by enabling effective patient management and treatment. Here, we ...

Formation of Biomembrane Microarrays with a Squeegee-based Assembly Method

Vorming van biomembraan Microarrays met een zuigmond-gebaseerde Vergadering Methode

Lipid bilayer membranes form the plasma membranes of cells and define the boundaries of subcellular organelles. In nature, these membranes are ...

Lipid Bilayer Vesicle Generation Using Microfluidic Jetting

Lipidendubbellaag Vesicle Generation Met behulp Microfluidic Jetting

Bottom-up synthetic biology presents a novel approach for investigating and reconstituting biochemical systems and, potentially, minimal organisms. This ...

Polymeric Microneedle Array Fabrication by Photolithography

Polymere Microneedle Array Fabrication door Fotolithografie

This manuscript describes the fabrication of polymeric microneedle (MN) arrays by photolithography. It involves a simple mold-free process by using a ...

Solid Lipid Nanoparticles (SLNs) for Intracellular Targeting Applications

Solid Lipid Nanoparticles SLNs for Intracellular Targeting Applications

Solid lipidenanodeeltjes (SLN) voor intracellulaire targeting Toepassingen

Nanoparticle-based delivery vehicles have shown great promise for intracellular targeting applications, providing a mechanism to specifically alter ...

Automated Lipid Bilayer Membrane Formation Using a Polydimethylsiloxane Thin Film

Geautomatiseerde lipidebilaagmembraan Vorming Met behulp van een Polydimethylsiloxane Thin Film

An artificial lipid bilayer, or black lipid membrane (BLM), is a powerful tool for studying ion channels and protein interactions, as well as for ...

Ligand Nano-cluster Arrays in a Supported Lipid Bilayer

Ligand Nano-cluster Arrays in een ondersteunde lipide dubbellaag

Currently there is considerable interest in creating ordered arrays of adhesive protein islands in a sea of passivated surface for cell biological ...

A Simple and Scalable Fabrication Method for Organic Electronic Devices on Textiles

Een eenvoudige en schaalbare Fabrication Methode voor biologisch Electronic Devices on Textiles

Today, wearable electronics devices combine a large variety of functional, stretchable, and flexible technologies. However, in many cases, these devices ...

Fabrication of Decellularized Cartilage-derived Matrix Scaffolds

Fabricage van Decellularized kraakbeen afkomstige Matrix steigers

Osteochondral defects lack sufficient intrinsic repair capacity to regenerate functionally sound bone and cartilage tissue. To this extent, cartilage ...