Name: biomembrane fabrication by the solvent-assisted lipid bilayer (salb) method
Uploaded: 2015-12-01T13:00:00
Duration: 9 min 38 s
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लेखकों NJC करने के लिए नेशनल रिसर्च फाउंडेशन (एनआरएफ -NRFF2011-01 और NRF2015NRF-POC0001-19), राष्ट्रीय चिकित्सा अनुसंधान परिषद (NMRC / CBRG / / 2012 0005), और नानयांग प्रौद्योगिकी विश्वविद्यालय से समर्थन को स्वीकार करना चाहते हैं

एक हाइड्रोफिलिक ठोस समर्थन पर समर्थित लिपिड bilayer 1. गठन <ol><li> 10 मिलीग्राम / एमएल 1,2-dioleoyl- एस.एन. -glycero-3-phosphocholine के लिपिड शेयर समाधान तैयार (DOPC) और 1 मिलीग्राम / एमएल 1,2-dioleoyl- एस.एन. -glycero-3-phosphoethanolamine- एन - (lissamine rhodamine बी संबंधित लिपिड पाउडर भंग द्वारा Sulfonyl) (आरएच पीई) (उचित isopropanol के समाधान में एक विश्लेषणात्मक जन संतुलन) के साथ पहले से तौला। </li><li> पतला और अंतिम एकाग्रता में वांछित लिपिड मिश्रण तैयार करने के क्रम में isopropanol में स्टॉक समाधान मिश्रण। प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी और FRAP प्रयोगों के लिए, 0.5% wt आरएच पीई लिपिड मिश्रण में शामिल किया जाना चाहिए। </li><li> यह भर जाता है जब तक microfluidic चैनल में isopropanol में लिपिड मिश्रण इंजेक्षन। </li><li> लगभग 10 मिनट के लिए कांच की सतह पर लिपिड मिश्रण सेते हैं। </li><li> धीरे-धीरे एक बहुत कम प्रवाह दर पर एक क्रमिक वृत्तों में सिकुड़नेवाला पंप का उपयोग कर पानी या बफर समाधान के साथ लिपिड समाधान की जगह(10-50 μl / मिनट)। वैकल्पिक रूप से, बार-बार pipetting द्वारा लिपिड मिश्रण की जगह। </li><li> अवशिष्ट isopropanol हटाने के लिए आदेश में अतिरिक्त बफर के साथ अच्छी तरह से चैनल कुल्ला। </li></ol> कोलेस्ट्रॉल समृद्ध समर्थित झिल्ली के 2. गठन नोट: ठोस सतह (2 Sio) पुटिका संलयन का समर्थन करता है, लेकिन कोलेस्ट्रॉल समृद्ध पुटिकाओं उच्च कठोरता 30 झुकने है क्योंकि झिल्ली रचना (उच्च कोलेस्ट्रॉल) पुटिका संलयन को रोकता है। <ol><li> पहले isopropanol में संबंधित पाउडर भंग द्वारा 10 मिलीग्राम / एमएल DOPC लिपिड, 10 मिलीग्राम / एमएल कोलेस्ट्रॉल, और 1 मिलीग्राम / एमएल आरएच पीई युक्त एक शेयर समाधान तैयार है। </li><li> दोहराएँ कदम 2.1 में तैयार शेयर समाधान का उपयोग 1.2-1.6 कदम। </li></ol> 3. झिल्ली तरलता परख <ol><li> 10 मिनट के लिए सोडियम dodecyl सल्फेट (एसडीएस) समाधान (1%) में कांच स्लाइड विसर्जित कर दिया। </li><li> विआयनीकृत पानी से अच्छी तरह स्लाइड्स धो लें और बुद्धि कुल्लाज इथेनॉल। </li><li> झटका-सूखी नाइट्रोजन की एक सौम्य धारा का उपयोग कर स्लाइड। </li><li> ऑक्सीजन प्लाज्मा चैम्बर में अधिकतम रेडियोफ्रीक्वेंसी बिजली पर 30 सेकंड के लिए ऑक्सीजन प्लाज्मा के लिए स्लाइड बेनकाब। </li><li> अथाह वाणिज्यिक microfluidic कक्ष (चित्रा 1 ए) के सुरक्षात्मक फिल्म कोटिंग एक चिमटी का उपयोग कर निकालें और कक्ष (चित्रा 1 बी) के चिपचिपा पक्ष पर कांच स्लाइड देते हैं। </li><li> चैम्बर के इनलेट और आउटलेट की स्थिति में कनेक्टर्स और ट्यूबिंग इकट्ठा और खुर्दबीन मंच (चित्रा 1 सी) पर microfluidic चैनल जगह है। </li><li> Microfluidic चैनल में एक fluorescently लेबल समर्थित लिपिड दो परतों का निर्माण [वांछित लिपिड रचना का उपयोग कर दोहराने कदम 1 (उदाहरण के लिए, 0.5 मिलीग्राम / एमएल DOPC) 0.5% wt आरएच पीई कार्बनिक विलायक में सहित]। </li><li> छवियों पर कब्जा करने के क्रम में एक 60x तेल विसर्जन उद्देश्य (एनए 1.49) के साथ bilayer विमान का पता लगा। </li><li> दो पूर्व ब्लीच छवियों लो, तो एक 30 तस्वीर ब्लीच1, एक 532 एनएम, 100 मेगावाट लेजर बीम के साथ विस्तृत परिपत्र मौके हूँ। इसकी तीव्रता स्थिर हो गया है, जब तक photobleaching से पहले, लेजर गर्म। इसके तत्काल बाद photobleaching, प्रक्षालित मौके पर प्रतिदीप्ति तीव्रता में वसूली का पालन करने के क्रम में 2 मिनट के लिए हर 1 सेकंड छवियों की एक श्रृंखला पर कब्जा। </li></ol> 4. कोलेस्ट्रॉल की मात्रा परख <ol><li> ऑक्सीजन प्लाज्मा चैम्बर में अधिकतम रेडियोफ्रीक्वेंसी बिजली पर 30 सेकंड के लिए ऑक्सीजन प्लाज्मा सिलिकॉन डाइऑक्साइड लेपित क्वार्ट्ज क्रिस्टल सेंसर चिप को बेनकाब। चैम्बर से चिप निकालें और तुरंत माप कक्ष में चिप माउंट। </li><li> प्रयोग से पहले, पहले उचित बढ़ते सुनिश्चित करने के लिए हवा में सेंसर चिप की आवृत्ति और अपव्यय हासिल। <ol><li> वाणिज्यिक क्यू नब्ज ई 1 या इ 4 QCM-डी साधन के लिए, क्यू शीतल सॉफ्टवेयर प्रोग्राम चलाने के लिए और &quot;अधिग्रहण&quot; क्लिक करें और &quot;सेटअप मापन&quot; का चयन करें। </li><li> प्रतीत होता है, जो नई विंडो में, 3, 5, 7 की जांच, 9, 11 और 13 मकसद और फिर पता है और प्रतिध्वनि स्पेक्ट्रा की जाँच करने के क्रम में चलाएँ क्लिक करें। 24 में तापमान सेट सी। एक या एक से अधिक प्रतिध्वनि आवृत्तियों की उम्मीद मूल्यों के साथ सहमत नहीं हैं, तो बढ़ते चिप की जाँच करें और एक समझौते पर पहुँच गया है जब तक इस कदम को फिर से प्रदर्शन करते हैं। </li></ol></li><li> क्रमिक वृत्तों में सिकुड़नेवाला पंप शुरू और 100 μl / मिनट की एक प्रवाह दर पर माप के चेंबर में बफर समाधान (10 मिमी Tris, 150 मिमी NaCl, पीएच 7.5) प्रवाह। </li><li> सॉफ्टवेयर प्रोग्राम में, &quot;अधिग्रहण&quot; क्लिक करें और अनुनाद आवृत्ति और ऊर्जा का अपव्यय संकेतों को दर्ज करने के क्रम में &quot;पुनः प्रारंभ मापन&quot; का चयन करें। एक स्थिर आधारभूत आवृत्ति और अपव्यय बदलाव के लिए प्राप्त की है जब तक इस चरण को दोहराएँ। नोट: समय के एक समारोह के रूप में दर्ज किया जा सकता है, जो अतिरिक्त आवृत्ति और अपव्यय पारियों हो जाएगा इसके बाद चरणों के लिए। </li><li> 10 मिनट के लिए (लिपिड के बिना) isopropanol इंजेक्षन। </li><li> पर DOPC लिपिड / कोलेस्ट्रॉल का मिश्रण इंजेक्षन10 मिनट के लिए isopropanol में 0.5 मिलीग्राम / मिलीलीटर की कुल लिपिड एकाग्रता के साथ वांछित दाढ़ अनुपात। </li><li> 100 μl / मिनट के प्रवाह की दर पर 20 मिनट के लिए बफर इंजेक्षन। </li><li> बफर (दर 100 μl / मिनट प्रवाह) आवृत्ति संकेत एक स्थिर मूल्य तक पहुँच जाता है, जब तक में तैयार किया 1 मिमी मिथाइल-β-cyclodextrin (MβCD) का एक समाधान इंजेक्षन। </li><li> MβCD उपचार कदम के कारण होता है कि रिश्तेदार सकारात्मक आवृत्ति पारियों उपाय और [Δm = Sauerbrey समीकरण का उपयोग करके बड़े पैमाने पर मूल्यों के Δf चो और Δf DOPC मूल्यों परिवर्तित करके कोलेस्ट्रॉल और DOPC लिपिड के द्रव्यमान की गणना - (सी / एन) × Δf, जहां सी = 17.7 एनजी / 2 सेमी, N: जगा है]। </li><li> खाते में DOPC लिपिड (786.1 ग्राम / मोल) और कोलेस्ट्रॉल (386.6 ग्राम / मोल) की आणविक भार ले जा रही है, SLB में कोलेस्ट्रॉल की तिल अंश की गणना। </li></ol>

The authors have no competing financial interests to disclose.

इस काम में, एक विलायक विनिमय प्रोटोकॉल एक ठोस समर्थन के साथ incubated हैं शराब (isopropanol, इथेनॉल, या एन-propanol) में जो लिपिड में प्रस्तुत किया जाता है और फिर शराब एक श्रृंखला ड्राइव करने के क्रम में एक जलीय बफर समाधान के साथ धीरे-धीरे बदल दिया जाता है संक्रमण चरण के अंत में परतदार चरण लिपिड bilayers 24 का निर्माण किया। यह विधि ऐसे पुटिका संलयन विधि को असभ्य है, जो सोने के रूप में सतहों पर समर्थित लिपिड bilayers के निर्माण के लिए सक्षम बनाता है कि दिखाया गया है। एक इष्टतम लिपिड एकाग्रता रेंज (0.1-0.5 मिलीग्राम / एमएल) इस प्रकार अब तक का परीक्षण मानक प्रयोगात्मक प्रारूपों में पूरा बाईलेयर गठन के लिए निर्धारित किया गया है। Bilayers की 0.1 मिलीग्राम / एमएल, असतत, सूक्ष्म पैच नीचे लिपिड सांद्रता में गठन किया था। दूसरी ओर, 0.1 मिलीग्राम / एमएल ऊपर सांद्रता और कम से कम से कम 0.5 मिलीग्राम / एमएल, एक पूर्ण और वर्दी बाईलेयर का गठन किया है। इस सीमा से ऊपर लिपिड सांद्रता में, एक तरल पदार्थ की दोहरी परत अभी भी verifi के रूप में गठन किया गया थाFRAP विश्लेषण द्वारा एड, तथापि, प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी bilayer के शीर्ष पर अतिरिक्त लिपिड संरचनाओं की उपस्थिति का पता चलता है। QCM-डी विश्लेषण द्वारा निर्धारित के रूप में आश्चर्यजनक, इन अतिरिक्त लिपिड संरचनाओं की आकृति विज्ञान, ऊष्मायन चरण के दौरान इस्तेमाल किया गया था, जिसमें शराब पर निर्भर करता था। इथेनॉल के मामले में अपेक्षाकृत उच्च Δ एफ और Δ डी पारियों एक adsorbed पुटिका परत के लिए प्राप्त QCM-डी हस्ताक्षर जैसे लगते हैं। Isopropanol या एन-propanol बजाय इस्तेमाल किया गया था जब Δ डी appreciably अधिक था, जबकि Δ एफ, एक bilayer (-30 हर्ट्ज -40 के बीच अंतिम Δ एफ) के लिए उम्मीद मूल्य की तुलना में थोड़ा अधिक था। इस तरह के QCM-डी प्रतिक्रियाएं (कुछ मामलों में प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी द्वारा दिखाई के रूप में) झिल्ली सतह से बाहर की ओर फैला हुआ बढ़ाया लिपिड संरचनाओं (जैसे, कीड़ा की तरह मिसेलस) के लिए उम्मीद होगी। विलायक विनिमय की दर espec, महत्वपूर्ण हो सकता है, जो एक और महत्वपूर्ण पैरामीटर हैकम लिपिड सांद्रता (जैसे, 0.1 मिलीग्राम / एमएल) का इस्तेमाल किया जाता है ially जब। कम लिपिड एकाग्रता में रैपिड विलायक विनिमय अधूरा bilayers के गठन के लिए नेतृत्व कर सकते हैं। इस पत्र में QCM-डी माप (क्यू नब्ज इ 4 माप कक्ष), करीब 100 μl / मिनट के प्रवाह की दर के लिए इस्तेमाल मानक माप कक्ष में, अत्यधिक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य पूरा बाईलेयर गठन के लिए उपयुक्त थे। अन्य geometries और मात्रा के साथ प्रवाह कोशिकाओं के लिए, इष्टतम प्रवाह की दर अलग-अलग हो सकते हैं और अनुभव से इस के साथ साथ सुझाव कदम के आधार पर निर्धारित किया जाना चाहिए। पुटिका संलयन के लिए असभ्य हैं, जो सतहों पर समर्थित लिपिड bilayers फार्म के अलावा, SALB जिससे परिसर रचनाओं के साथ समर्थित झिल्ली का निर्माण करने के लिए दरवाजा खोलने, टूटना सकते हैं जो लिपिड पुटिकाओं के लिए की जरूरत को नाकाम करने के लिए नियोजित किया जा सकता है। एक उदाहरण उदाहरण संरचना के रूप में, कोलेस्ट्रॉल की एक उच्च अंश के साथ लिपिड मिश्रण की जांच की गई। कोलेस्ट्रॉल mamm का एक महत्वपूर्ण घटक हैAlian कोशिका झिल्ली, और उसके अंश (एरिथ्रोसाइट्स में, उदाहरण के लिए) झिल्ली लिपिड रचना की 45-50% mol रुख कर सकते हैं। इस प्रकार, एक मानव कोशिका झिल्ली का प्रतिनिधित्व एक लिपिड bilayer की भी एक साधारण मॉडल कोलेस्ट्रॉल को शामिल करना चाहिए। पुटिका संलयन केवल 10-15% कोलेस्ट्रॉल युक्त fluidic लिपिड bilayers निर्माण करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है, जबकि 36 (QCM-डी माप द्वारा मात्रा के रूप में, 57 मोल% तक), SALB विधि कोलेस्ट्रॉल के उच्च अंशों युक्त fluidic लिपिड bilayers के गठन के लिए सक्षम बनाता है। कोलेस्ट्रॉल के स्तर को आगे (63 मोल% तक) ऊपर उठाया गया था हालांकि, जब धारी आकार डोमेन के 37 मनाया गया। सह मौजूदा डोमेन के हवा-पानी इंटरफेस में कोलेस्ट्रॉल / फॉस्फोलिपिड monolayer के चरण आरेख में β क्षेत्र में मनाया उन की याद ताजा तरल थे। कुल मिलाकर, SALB विधि मैं विशेष रूप से, समर्थित लिपिड bilayers फार्म के लिए एक सरल और कुशल दृष्टिकोण होना दिखाया गया हैपारंपरिक पुटिका संलयन विधि के दायरे से परे एन के मामले हैं। इस प्रकार अब तक, QCM-डी तकनीक और प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी मुख्य रूप से SALB विधि द्वारा गठित समर्थित लिपिड bilayers चिह्नित करने के लिए इस्तेमाल किया गया। आगे देख रहे हैं, सतह plasmon अनुनाद (एसपीआर) 38, परमाणु शक्ति माइक्रोस्कोपी (AFM) 39,40 सहित सतह के प्रति संवेदनशील विश्लेषणात्मक माप तकनीक, का एक व्यापक रेंज, अवरक्त स्पेक्ट्रोस्कोपी 41 फूरियर बदलना, एक्स-रे 42 और न्यूट्रॉन परावर्तन 43, कर सकते हैं आगे विशेषताएँ और सरल और जटिल बाईलेयर विन्यास SALB विधि द्वारा तैयार अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया जाएगा। ये उभरते क्षमताओं को एक सरल और मजबूत प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल का लाभ लेने से कृत्रिम कोशिका झिल्ली तलाश कर सकते हैं, जो वैज्ञानिकों की एक बड़ी संख्या के लिए दरवाजा खुला।

ठोस समर्थित लिपिड bilayer 1 (SLB) इस तरह की दोहरी परत मोटाई, दो आयामी लिपिड diffusivity, और झिल्ली जुड़े biomolecules की मेजबानी करने की क्षमता के रूप में biomembranes की बुनियादी विशेषताओं को बरकरार रखता है, जो एक बहुमुखी मंच है। कारण प्राकृतिक कोशिका झिल्ली की जटिलता के कारण, इस सरल मंच 3, वायरस और वायरस की तरह कण 4,5 बाध्यकारी बाध्यकारी ऐसे बेड़ा गठन 2, प्रोटीन के रूप में झिल्ली से संबंधित प्रक्रियाओं के इन विट्रो अध्ययन के लिए एक कुशल मंच के रूप में कार्य करने के लिए दिखाया गया है , और सेल 6 संकेत। एक ठोस समर्थन करने के लिए करीब निकटता में स्थापित, SLB मंच ऐसे कुल आंतरिक प्रतिबिंब माइक्रोस्कोपी (TIRF), क्वार्ट्ज क्रिस्टल Microbalance-अपव्यय (QCM-डी), और प्रतिबाधा स्पेक्ट्रोस्कोपी के रूप में सतह के प्रति संवेदनशील माप तकनीक की एक सीमा के साथ संगत है। कई तरीकों एयर बबल सहित SLBs के विभिन्न प्रकार के निर्माण करने के लिए विकसित किया गया हैsubmicron आकार लिपिड स्पॉट ढहने 7 और डुबकी-कलम नैनोलिथोग्राफी 8, स्पिन कोटिंग बाईलेयर के ढेर और Langmuir-Blodgett (पौंड) 10 और पूर्ण फैले, एकल लिपिड bilayer कोटिंग्स के लिए पुटिका संलयन (एफ) 11 के लिए 9। वी एफ विधि एक सतत लिपिड दो परतों का निर्माण करने के लिए एक ठोस समर्थन और बाद में सहज टूटना और फ्यूजन करने के लिए छोटे unilamellar पुटिकाओं की सोखना के होते हैं। हालांकि, शारीरिक शर्तों के तहत, सहज पुटिका टूटना मुख्य रूप से ऐसे सिलिकॉन डाइऑक्साइड, ग्लास, और अभ्रक के रूप में सिलिकॉन आधारित सामग्री तक सीमित है। इसके अलावा, पुटिका टूटना ऐसे कोलेस्ट्रॉल या नकारात्मक आरोप लगाया लिपिड की उच्च अंशों युक्त उन के रूप में जटिल लिपिड रचनाओं की पुटिकाओं के लिए अनायास नहीं होती है। सिस्टम पर निर्भर करता है, पुटिका टूटना आगे इस तरह तापमान 12, समाधान पीएच 13, और लवणता 14, आसमाटिक सदमे के रूप में 15 प्रयोगात्मक शर्तों सिलाई द्वारा प्रेरित किया जा सकता है </sदबाव 16, या इस तरह के सीए 2 के रूप में द्विसंयोजक आयनों के अलावा अप&gt; या 17। वैकल्पिक रूप से, झिल्ली सक्रिय एएच पेप्टाइड की एक श्रृंखला पर पुटिका टूटना और bilayer गठन के लिए अग्रणी, adsorbed पुटिकाओं की एक परत को अस्थिर करने के क्रम में पेश किया जा सकता 18-22 सतहों। इसके अलावा, सफल बाईलेयर गठन समय लगता है और कुछ झिल्ली रचनाओं के लिए प्राप्त करने के लिए मुश्किल हो सकता है कि छोटे unilamellar पुटिकाओं की एक अच्छी तरह से नियंत्रित आबादी की तैयारी की आवश्यकता है। इसलिए, इष्टतम मामलों में अपनी उच्च दक्षता के बावजूद (जैसे, पुटिकाओं 23 के व्यापक फ्रीज पिघलना pretreatment के बाद), पुटिका संलयन के सामान्य आवेदन उपयुक्त substrates और झिल्ली रचनाओं के दायरे तक सीमित है। विलायक की सहायता लिपिड bilayer (SALB) विधि 24-28 लिपिड vesicles की आवश्यकता नहीं है, जो एक विकल्प के निर्माण तकनीक है। विधि बयान ओ पर आधारित हैSLB गठन को गति प्रदान करने के क्रम में एक जलीय बफर समाधान के साथ इस विलायक के क्रमिक विनिमय के बाद एक पानी मिश्रणीय कार्बनिक विलायक की उपस्थिति में एक ठोस सतह पर च लिपिड अणु। विलायक विनिमय कदम, लिपिड, कार्बनिक विलायक के त्रिगुट मिश्रण है, और पानी के दौरान थोक समाधान में परतदार चरण संरचनाओं के गठन और ठोस सब्सट्रेट पर एक SLB की ओर जाता है जो पानी के अंश को बढ़ाने के साथ एक श्रृंखला के चरण में बदलाव आए। महत्वपूर्ण बात है, यह आत्म विधानसभा मार्ग आम तौर पर एक SLB में adsorbed पुटिकाओं के परिवर्तन के लिए कदम सीमित है जो पुटिका टूटना, के लिए की जरूरत को नजरअंदाज। प्रोटोकॉल सिलिकॉन डाइऑक्साइड, एल्यूमीनियम ऑक्साइड, क्रोम, इंडियम टिन ऑक्साइड, और सोने सहित सतहों की एक विस्तृत विविधता के लिए लागू है। इस पत्र में और साथ वीडियो में, SALB और पुटिका संलयन तरीकों से लिपिड बयान की तुलना में प्रस्तुत किया है। विशेष रूप से, प्रयोगात्मक मापदंडों के प्रभाव, सहित लिपिड एकाग्रता, प्रवाह की दर, और SALB विधि द्वारा गठित दो परतों का निर्माण की गुणवत्ता पर पानी मिश्रणीय कार्बनिक विलायक के चुनाव, चर्चा कर रहे हैं। गढ़े SLBs का विश्लेषणात्मक लक्षण वर्णन (FRAP) तकनीक photobleaching के बाद QCM-डी, प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी, और प्रतिदीप्ति वसूली द्वारा किया जाता है। QCM-डी निगरानी केलर और Kasemo 29 द्वारा आयोजित अग्रणी काम के बाद से, बड़े पैमाने पर मात्रात्मक बाईलेयर गठन जांच करने के लिए इस्तेमाल किया गया है, जो एक सतह के प्रति संवेदनशील बड़े पैमाने पर माप तकनीक है। प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी झिल्ली एकरूपता का निरीक्षण करने के साथ ही झिल्ली डोमेन के दृश्य के लिए परमिट। FRAP तकनीक fluidic झिल्ली का एक आवश्यक संपत्ति है, जो एक SLB में लिपिड अणु के पार्श्व गतिशीलता निर्धारित करने के लिए एक मानक उपकरण है। इस अध्ययन के पहले भाग सिलिकॉन डाइऑक्साइड और सोने पर बाईलेयर गठन का प्रयास करने के लिए लागू SALB की QCM-डी विश्लेषण और पुटिका संलयन तरीकों शामिल है। दूसरे भाग में,तैयारी और SALB विधि के साथ कोलेस्ट्रॉल सांद्रता का एक सीमा से युक्त समर्थित झिल्ली के लक्षण वर्णन प्रदर्शन कर रहे हैं और परिणाम पुटिका संलयन विधि द्वारा प्राप्त उन लोगों के साथ तुलना कर रहे हैं।

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1459">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:719px;">QCM-D silicon dioxide-coated substrates</td>
			<td style="width:356px;">QSense AB,&#160; Sweden</td>
			<td style="width:217px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">QCM-D gold-coated substrates</td>
			<td style="width:356px;">QSense AB,&#160; Sweden</td>
			<td style="width:217px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Q-Sense E4 module</td>
			<td>QSense AB,&#160; Sweden</td>
			<td style="width:217px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;">Plasma Cleaner, PDC-32G</td>
			<td>Harrick Plasma, Ithaca, NY</td>
			<td>PDC-001 (115V)&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:719px;">1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DOPC)</td>
			<td>Avanti Polar Lipids</td>
			<td>850375P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-(lissamine rhodamine B sulfonyl) (ammonium salt) (Rh-PE)</td>
			<td>Avanti Polar Lipids</td>
			<td>810150P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">cholesterol</td>
			<td>Avanti Polar Lipids</td>
			<td style="width:217px;">700000P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Methyl-&#946;-cyclodextrin</td>
			<td style="width:356px;">Sigma&#160;</td>
			<td style="width:217px;">C4555</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Isopropanol</td>
			<td style="width:356px;">Sigma&#160;</td>
			<td align="right">673773</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:719px;">Ethanol</td>
			<td style="width:356px;">Sigma&#160;</td>
			<td align="right" style="width:217px;">459844</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:719px;">n-propanol</td>
			<td style="width:356px;">Sigma&#160;</td>
			<td align="right">279544</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:719px;">Sticky-Slide I 0.1 Luer</td>
			<td style="width:356px;">IBIDI</td>
			<td align="right" style="width:217px;">81128</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:719px;">Male elbow 1/8&#8221;</td>
			<td style="width:356px;">Cole-Parmer</td>
			<td style="width:217px;">30505-70</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:719px;">Silicon tubing 1.6mm ID</td>
			<td style="width:356px;">IBIDI</td>
			<td align="right" style="width:217px;">10842</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:719px;">Glass coverslip No. 1.5H, 25 mm x 75 mm</td>
			<td style="width:356px;">IBIDI</td>
			<td align="right" style="width:217px;">10812</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:719px;">Reglo Digital M2-2/12 Peristaltic Pump</td>
			<td style="width:356px;">Ismatec</td>
			<td style="width:217px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:719px;">Sodium dodecyl sulfate</td>
			<td style="width:356px;">Sigma&#160;</td>
			<td align="right" style="width:217px;">71725</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

biomembrane fabrication by the solvent-assisted lipid bilayer (salb) method

कोशिका झिल्ली की नकल करने के लिए, समर्थित लिपिड bilayer (SLB) ठोस substrates के लिए biocompatibility और biofunctionality प्रदान करते हुए झिल्ली से संबंधित प्रक्रियाओं के इन विट्रो जांच में सक्षम बनाता है जो एक आकर्षक मंच है। फॉस्फोलिपिड पुटिकाओं की सहज सोखना और टूटना SLBs फार्म के लिए सबसे अधिक इस्तेमाल किया विधि है। हालांकि, शारीरिक शर्तों के तहत, पुटिका संलयन (एफ) लिपिड रचनाओं और ठोस समर्थन का केवल एक उप तक सीमित है। यहाँ, हम पुटिकाओं की आवश्यकता नहीं है, जो SLBs फार्म के क्रम में विलायक की सहायता लिपिड bilayer (SALB) गठन विधि कहा जाता है एक एक कदम सामान्य प्रक्रिया का वर्णन है। SALB विधि SLB गठन को गति प्रदान करने के लिए पानी-मिश्रणीय कार्बनिक सॉल्वैंट्स (जैसे, isopropanol) और जलीय बफर समाधान के साथ बाद में विलायक विनिमय की उपस्थिति में एक ठोस सतह पर लिपिड अणु के बयान भी शामिल है। निरंतर विलायक विनिमय कदम के आवेदन सक्षम बनाता हैनिगरानी बाईलेयर गठन और सतह के प्रति संवेदनशील biosensors के एक विस्तृत रेंज का उपयोग बाद में परिवर्तन के लिए उपयुक्त एक प्रवाह के माध्यम से विन्यास में विधि। SALB विधि पुटिका संलयन के लिए असभ्य हैं, जो उन सहित हाइड्रोफिलिक ठोस सतहों की एक विस्तृत श्रृंखला पर SLBs निर्माण करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। इसके अलावा, यह पुटिका संलयन विधि का उपयोग कर तैयार नहीं किया जा सकता है, जो लिपिड रचनाओं की रचना SLBs के निर्माण में सक्षम बनाता है। इस के साथ साथ, हम दो उदाहरण हाइड्रोफिलिक सतहों, सिलिकॉन डाइऑक्साइड और सोने पर SALB और पारंपरिक पुटिका संलयन तरीकों के साथ प्राप्त परिणामों की तुलना करें। SALB विधि के माध्यम से उच्च गुणवत्ता तैयार bilayers की तैयारी के लिए प्रयोगात्मक शर्तों का अनुकूलन करने के लिए, बयान कदम में कार्बनिक विलायक के प्रकार, विलायक विनिमय की दर, और लिपिड एकाग्रता सहित विभिन्न मापदंडों के प्रभाव समस्या निवारण सुझावों के साथ साथ चर्चा की है । कोलेस्ट्रॉल के उच्च अंशों युक्त समर्थित झिल्ली का गठन भी राक्षसों हैझिल्ली विन्यास की एक विस्तृत श्रृंखला के लिए SALB तकनीक की तकनीकी क्षमताओं पर प्रकाश डाला, SALB विधि के साथ trated।

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Biomembrane Fabrication by the Solvent-assisted Lipid Bilayer SALB Method

हम लिपिड vesicles का उपयोग किए बिना ठोस substrates पर एक समर्थित लिपिड दो परतों का निर्माण करने के लिए एक प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल उपस्थित थे। हम विभिन्न जैविक अनुप्रयोगों के लिए कोलेस्ट्रॉल समृद्ध डोमेन के साथ एक लिपिड सिलिकॉन डाइऑक्साइड और सोने पर दो परतों का निर्माण करने के साथ ही समर्थित झिल्ली के लिए फार्म का एक एक कदम विधि का प्रदर्शन।

विलायक की सहायता लिपिड bilayer (SALB) विधि द्वारा Biomembrane निर्माण

In order to mimic cell membranes, the supported lipid bilayer (SLB) is an attractive platform which enables in vitro investigation of membrane-related ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Biomembrane Fabrication by the Solvent-assisted Lipid Bilayer (SALB) Method

Constant Pressure-controlled Extrusion Method for the Preparation of Nano-sized Lipid Vesicles

लगातार दबाव नियंत्रित नैनो आकार लिपिड vesicles की तैयारी के लिए बाहर निकालना विधि

Liposomes are artificially prepared vesicles consisting of natural and synthetic phospholipids that are widely used as a cell membrane mimicking platform ...

Microfluidic Chip Fabrication and Method to Detect Influenza

Microfluidic चिप निर्माण और इन्फ्लुएंजा विधि का पता लगाने के

Fast  and effective diagnostics play an important role in controlling infectious  disease by enabling effective patient management and treatment. Here, we ...

Formation of Biomembrane Microarrays with a Squeegee-based Assembly Method

एक squeegee आधारित विधानसभा विधि के साथ Biomembrane डीएनए की संरचना

Lipid bilayer membranes form the plasma membranes of cells and define the boundaries of subcellular organelles. In nature, these membranes are ...

Lipid Bilayer Vesicle Generation Using Microfluidic Jetting

Microfluidic Jetting का प्रयोग लिपिड bilayer पुटिका पीढ़ी

Bottom-up synthetic biology presents a novel approach for investigating and reconstituting biochemical systems and, potentially, minimal organisms. This ...

Polymeric Microneedle Array Fabrication by Photolithography

Photolithography द्वारा polymeric Microneedle एरे मनगढ़ंत

This manuscript describes the fabrication of polymeric microneedle (MN) arrays by photolithography. It involves a simple mold-free process by using a ...

Solid Lipid Nanoparticles (SLNs) for Intracellular Targeting Applications

Solid Lipid Nanoparticles SLNs for Intracellular Targeting Applications

ठोस लिपिड नैनोकणों (SLNs) Intracellular लक्ष्य निर्धारण के लिए एप्लीकेशन

Nanoparticle-based delivery vehicles have shown great promise for intracellular targeting applications, providing a mechanism to specifically alter ...

Automated Lipid Bilayer Membrane Formation Using a Polydimethylsiloxane Thin Film

स्वचालित लिपिड bilayer झिल्ली गठन के एक Polydimethylsiloxane पतला फिल्म का उपयोग

An artificial lipid bilayer, or black lipid membrane (BLM), is a powerful tool for studying ion channels and protein interactions, as well as for ...

Ligand Nano-cluster Arrays in a Supported Lipid Bilayer

एक समर्थित लिपिड bilayer में ligand नैनो-क्लस्टर सारणी

Currently there is considerable interest in creating ordered arrays of adhesive protein islands in a sea of passivated surface for cell biological ...

A Simple and Scalable Fabrication Method for Organic Electronic Devices on Textiles

कपड़ा पर कार्बनिक इलेक्ट्रॉनिक उपकरणों के लिए एक सरल और स्केलेबल निर्माण विधि

Today, wearable electronics devices combine a large variety of functional, stretchable, and flexible technologies. However, in many cases, these devices ...

Fabrication of Decellularized Cartilage-derived Matrix Scaffolds

विसेलुलर उपास्थि व्युत्पंन मैट्रिक्स पाड़ों का निर्माण

Osteochondral defects lack sufficient intrinsic repair capacity to regenerate functionally sound bone and cartilage tissue. To this extent, cartilage ...