Name: performing permanent distal middle cerebral with common carotid artery occlusion in aged rats to study cortical ischemia with sustained disability
Uploaded: 2016-02-23T13:00:00
Duration: 9 min 11 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability at JoVE.com

We would like to thank Prof. I Mhairi Macrae and Dr. Debbie Dewar, University of Glasgow, who kindly hosted CW and DD for training in this procedure. The research leading to these results has received funding from the European Research Council under the European Union's Seventh Framework Programme (FP/2007-2013) / ERC Grant Agreement n. 309731 to LM. This work was also supported by a &#8220;Serendipity Grant&#8221; from The Dunhill Medical Trust to LM [grant number: SA21/0512].

<ol>
	<li>Pendlebury, S. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Underfunding+of+stroke+research:+a+Europe-wide+problem.">Underfunding of stroke research: a Europe-wide problem.</a> Stroke. 35, 2368-2371 (2004).</li><li>Doyle, S., Bennett, S., Fasoli, S. E., McKenna, K. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interventions+for+sensory+impairment+in+the+upper+limb+after+stroke.">Interventions for sensory impairment in the upper limb after stroke.</a> Cochrane Database Syst Rev. 6, CD006331 (2010).</li><li>Reep, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rodent+model+for+investigating+the+neurobiology+of+contralateral+neglect.">A rodent model for investigating the neurobiology of contralateral neglect.</a> Cogn Behav Neurol. 17, 191-194 (2004).</li><li>Carey, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+between+touch+impairment+and+brain+activation+after+lesions+of+subcortical+and+cortical+somatosensory+regions.">Relationship between touch impairment and brain activation after lesions of subcortical and cortical somatosensory regions.</a> Neurorehabil Neural Repair. 25, 443-457 (2011).</li><li>Mohr, J. P., Lazar, R. M., Marshall, R. S., Mohr, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ch.+24.">Ch. 24.</a> Stroke: Pathophysiology, Diagnosis and Management. , 384-424 (2011).</li><li>Sacco, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subarachnoid+and+intracerebral+hemorrhage:+Natural+history,+prognosis,+and+precursive+factors+in+the+Framingham+Study.">Subarachnoid and intracerebral hemorrhage: Natural history, prognosis, and precursive factors in the Framingham Study.</a> Neurology. 34, 847-847 (1984).</li><li>Hossmann, K. A., Heiss, W. D., Brainin, M., Heiss, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ch.+1.">Ch. 1.</a> Textbook of Stroke Medicine. , 1-27 (2009).</li><li>The National Institute of Neurological Disorders and Stroke rt-PA Stroke Study Group. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+Plasminogen+Activator+for+Acute+Ischemic+Stroke.">Tissue Plasminogen Activator for Acute Ischemic Stroke.</a> N Engl J Med. 333, 1581-1587 (1995).</li><li>Brott, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurements+of+Acute+Cerebral+Infarction:+Lesion+Size+by+Computed+Tomography.">Measurements of Acute Cerebral Infarction: Lesion Size by Computed Tomography.</a> Stroke. 20, 871-875 (1989).</li><li>L&#246;vblad, K. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ischemic+Lesion+Volumes+in+Acute+Stroke+by+Diffusion-Weighted+Magnetic+Resonance+Imaging+Correlate+with+Clinical+Outcome.">Ischemic Lesion Volumes in Acute Stroke by Diffusion-Weighted Magnetic Resonance Imaging Correlate with Clinical Outcome.</a> Ann Neurol. 42, 164-170 (1997).</li><li>Norrving, B., Brainin, M., Heiss, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ch.+2.">Ch. 2.</a> Textbook of Stroke Medicine. , 28-39 (2009).</li><li>Truelsen, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stroke+incidence+and+prevalence+in+Europe:+a+review+of+available+data.">Stroke incidence and prevalence in Europe: a review of available data.</a> Eur J Neurol. 13, 581-598 (2006).</li><li>Ord, E. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Positive+impact+of+pre-stroke+surgery+on+survival+following+transient+focal+ischemia+in+hypertensive+rats.">Positive impact of pre-stroke surgery on survival following transient focal ischemia in hypertensive rats.</a> J Neurosci Methods. 211, 305-308 (2012).</li><li>Chen, S. T., Hsu, C. Y., Hogan, E. L., Maricq, H., Balentine, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+model+of+focal+ischemic+stroke+in+the+rat:+reproducible+extensive+cortical+infarction.">A model of focal ischemic stroke in the rat: reproducible extensive cortical infarction.</a> Stroke. 17, 738-743 (1986).</li><li>Montoya, C. P., Campbell-Hope, L. J., Pemberton, K. D., Dunnett, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+'staircase+test':+a+measure+of+independent+forelimb+reaching+and+grasping+abilities+in+rats.">The 'staircase test': a measure of independent forelimb reaching and grasping abilities in rats.</a> J Neurosci Methods. 36, 219-228 (1991).</li><li>Adams, F. S., Schwarting, R. K., Huston, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+and+neurochemical+asymmetries+following+unilateral+trephination+of+the+rat+skull:+is+this+control+operation+always+appropriate?.">Behavioral and neurochemical asymmetries following unilateral trephination of the rat skull: is this control operation always appropriate?.</a> Physiol Behav. 55, 947-952 (1994).</li><li>Macrae, I. M., U, D. i. r. n. a. g. l. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ch.+5.">Ch. 5.</a> Rodent Models of Stroke, Neuromethods. 47, 41-53 (2010).</li><li>Gerriets, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+Quantification+of+Brain+Edema+and+the+Space-Occupying+Effect+in+Rat+Stroke+Models+Using+Magnetic+Resonance+Imaging.">Noninvasive Quantification of Brain Edema and the Space-Occupying Effect in Rat Stroke Models Using Magnetic Resonance Imaging.</a> Stroke. 35, 566-571 (2004).</li><li>Paxinos, G., Watson, C. R., Emson, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AChE-stained+horizontal+sections+of+the+rat+brain+in+stereotaxic+coordinates.">AChE-stained horizontal sections of the rat brain in stereotaxic coordinates.</a> J Neurosci Methods. 3, 129-149 (1980).</li><li>Faul, F., Erdfelder, E., Buchner, A., Lang, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Statistical+power+analyses+using+G*Power+3.1:+tests+for+correlation+and+regression+analyses.">Statistical power analyses using G*Power 3.1: tests for correlation and regression analyses.</a> Behav Res Methods. 41, 1149-1160 (2009).</li><li>Button, K. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Power+failure:+why+small+sample+size+undermines+the+reliability+of+neuroscience.">Power failure: why small sample size undermines the reliability of neuroscience.</a> Nature Reviews Neuroscience. 14, 365-376 (2013).</li><li>Fox, G., Gallacher, D., Shevde, S., Loftus, J., Swayne, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomic+variation+of+the+middle+cerebral+artery+in+the+Sprague-Dawley+rat.">Anatomic variation of the middle cerebral artery in the Sprague-Dawley rat.</a> Stroke. 24, 2087-2093 (1993).</li><li>Tamura, A., Graham, D. I., McColloch, J., Teasdale, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+cerebral+ischemia+in+the+rat:+1.+Description+of+technique+and+early+neuropathological+consequences+following+middle+cerebral+artery+occlusion.">Focal cerebral ischemia in the rat: 1. Description of technique and early neuropathological consequences following middle cerebral artery occlusion.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 1, 53-60 (1981).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

MCAO في القوارض هو أسلوب يستخدم كثيرا لنموذج السكتة الدماغية الإنسان. لا يكون هذا النموذج بعض التفاصيل أن نلاحظ في البروتوكول. أولا، لا بد من الحفاظ على درجة حرارة جسم الحيوان في كافة مراحل التجربة لأن ذلك يؤثر على حجم احتشاء وعدد من وفيات في الدراسة. قد يكون من الممكن وقف الأيزوفلورين خلال انسداد عابر الصحيح التقييم القطري المشترك والحفاظ على الفئران في بيئة هادئة استعد لزيادة معدلات البقاء على قيد الحياة عن طريق الحد من التعرض للالأيزوفلورين. يجب على الباحثين النظر في ما إذا كانت فترة التخدير أقصر يفوق الضغط الحث إضافية. الأوعية الدموية (على سبيل المثال، MCA المتفرعة) من الفئران تختلف داخل وبين أفواج من الحيوانات (22). من المهم أن تضع هذا في الاعتبار عند بداية دراسة جديدة. مختلف الأوقات انسداد التقييم القطري المشترك يمكن تقييم (على سبيل المثال، 30، 45، 60 و 90 دقيقة). في هذه الدراسة تم استخدام الوقت انسداد 60 دقيقة. في دراسات أخرى وجدنا أن 45انسداد دقيقة تسبب احتشاء القشرية الحجم مشابه ولكن مع الادلة من تحسين معدلات البقاء على قيد الحياة. وفقا لذلك، لديها الجراحين يبدأ مع فترة زمنية قصيرة انسداد (على سبيل المثال، 30 دقيقة) لمعرفة ما إذا كان يتم الحصول على كميات كافية الآفة (و / أو العجز السلوكية المطلوبة) وبعد ذلك فقط إلى زيادة مرات انسداد عند الضرورة. لا تستند العجز السلوكية في الفئران البالغين بالمقارنة مع الفئران المسنة مع أوقات انسداد متطابقة. التصوير بالرنين المغناطيسي يمكن استخدامها للحكم على ما إذا كانت (بعد وقت انسداد معين) مجلدات الآفة مناسبة لأهداف الدراسة. ومن شأن آفة صغيرة تمتد أقل من عشرة 0.5 مم شرائح الاكليلية (من أصل 40). ومن شأن حجم الآفة المتوسطة تمتد ما بين عشرة وعشرين شرائح الاكليلية. ومن شأن آفة كبيرة تمتد بين عشرين وثلاثين شرائح الاكليلية. ومن شأن آفة كبيرة جدا تمتد أكثر من ثلاثين من أربعين شرائح. في تجربتنا، والفئران مع آفات كبيرة جدا (أكثر من ثلاثين شرائح) و / أو أدلة من ACROS فتقالصورة خط الوسط وعادة ما يكون بسوء التشخيص: يمكن النظر مرة انسداد أقصر. التصوير بالرنين المغناطيسي هو أيضا مفيد لتقييم الموقع احتشاء: تقع بعض أكثر caudally وبعض وتقع أكثر rostrally. مزيد من الحذر عند فصل العصب المبهم من كل من الشرايين السباتية. Rales (صرير) قد تحدث بعد الجراحة السكتة الدماغية، وهذا يمكن أن يكون راجعا إلى تلف الأعصاب في بعض الحيوانات، على الرغم من أن السبب غير واضح حاليا: في تجربتنا، التكهن فقيرة جدا لهذه الحيوانات، وعادة ما يوصى بقتلهم إنسانية. ودائمة نتائج النموذج الإنفاذ الحراري MCAO في عوائق القشرية استنساخه ومقبولة معدلات البقاء على قيد الحياة بعد الجراحة في الفئران المسنة. هذه التقنية لا، ومع ذلك، تتطلب جراحة تحت مجهر تشريحي. فمن المهم للحفاظ على تقنية العقيم إذا الحيوانات على التعافي بشكل جيد من الجراحة. يجب الحرص على عدم الإضرار MCA في حين كشف والتخثر في الشريان،والأضرار التي لحقت سطح القشرية ينبغي التقليل إلا فإن المنطقة المكشوفة من القشرة قد تشكل جزءا من منطقة احتشاء. فمن المستحسن للحصول على أكبر قدر من الخبرة ممكن لتحديد الإجراء وتحقيق عوائق ثابتة وتحديد الأوقات انسداد قبل إجراء دراسة لاختبار علاجات مرشح، على سبيل المثال. يجب المجربون بطريقة عشوائية أي علاج داخل جلسات عملية جراحية ( &quot;كتلة العشوائي&quot;) حيثما أمكن ذلك. ومن الجدير بالذكر أن هذا النموذج لا تنطوي على MCA ضخه (ما لم يتم استخدام عابرة MCA ربط بدلا من الإنفاذ الحراري). وفيات يمكن أن تكون عالية في الفئران المسنة مع هذه عوائق القشرية كبيرة ولكن يجب أن يكون من الممكن للحد من وفيات باستخدام مرات انسداد أقصر والتقليل من التعرض للتخدير العام حيثما كان ذلك ممكنا (على سبيل المثال، خلال الانسداد). استخدام 70٪ N 2 O و 30٪ O 2 باعتبارها الناقل قد تسمح مستويات أقل من الأيزوفلورين لاستخدامها: هذا خفض التعرض للisofluRANE قد يؤدي إلى ارتفاع معدلات البقاء على قيد الحياة. وثمة نقطة أخرى للنظر هو أن تصلب الشرايين هو عملية تدريجية، في حين أن هذا البروتوكول ومحاكاة مع انسداد CCA الحاد. ومع ذلك، فإن انخفاض كبير في تدفق الدم والعجز مستمرة محاكاة انسداد جنبا إلى جنب التي تحدث في كثير من مرضى السكتة الدماغية. يحدث علاوة على ذلك، دون جنبا إلى جنب التقييم القطري المشترك انسداد، وجدنا الشفاء التلقائي الكبير الذي يحول دون تقييم سلوكي على المدى الطويل من علاجات السكتة الدماغية أكثر من 8 أسابيع: فشل دائم البعيدة MCAO دون جنبا إلى جنب التقييم القطري المشترك انسداد في الفئران للحث على السكتات الدماغية بتكاثر 14. في المقابل، وتبين لنا أن القاصي MCAO مع جنبا إلى جنب التقييم القطري المشترك انسداد يدفع العجز على المدى الطويل في الفئران المسنة. في الختام، هذا الإجراء في الفئران يسبب السكتات الدماغية التي تشبه في حجمها وموقعها لتلك التي ظهرت في حالة الإنسان، مع العجز المستدامة التي يمكن للمرء أن استخدام لتمكين اختبار علاجات جديدة وتوضيح إعادةآليات الزوج بعد السكتة الدماغية.

السكتة الدماغية هي حاليا ثالث السبب الأكثر شيوعا للوفاة في العالم والسبب الرئيسي للعجز 1. السكتة الدماغية، التي تضم 80٪ من مجمل السكتات الدماغية، وغالبا ما يؤدي إلى عوائق في القشرة تسبب فقدان في الإحساس (على سبيل المثال، استقبال الحس العميق)، في وظيفة الحركة والانتباه إلى الجانب المصاب 2-4. الشريان الدماغي الأوسط (مولودية الجزائر) هو أكبر من السفن التي توجه العرض من دائرة ويليس وينبع من الشريان السباتي الداخلي 5. قانون اللجان العسكرية هي السفينة الدماغية المتضررة الأكثر شيوعا في السكتة الدماغية، والسكتات الدماغية في هذه المنطقة يمثل 65٪ من السكتات الدماغية 6،7. لمولودية الجزائر تمد كلتا المنطقتين القشرية وتحت القشرية والتشوهات العصبية الناجمة عن السكتة الدماغية MCA تختلف حسب المكان المحدد من انسداد 7. انسداد القريبة MCA تؤثر على أراضي عميقة من خلال الشرايين lenticulostriatal وتسبب عوائق كبيرة تشمل كلا كورتيكال والمناطق تحت القشرية. في المقابل، انسداد أكثر البعيدة التي تحرم المناطق القشرية فقط من تدفق الدم تميل إلى إنتاج عوائق القشرية الصغيرة. في الدراسات السكانية الكبيرة، وتتراوح الآفات السكتة الدماغية الإنسان 5-14٪ من نصف الكرة المماثل 8،9. حسابات السكتة الدماغية الخبيثة لمدة 10٪ من السكتات الدماغية ويثير عوائق أكبر، الأمر الذي يتطلب استئصال شق القحف لتخفيف الضغط داخل الجمجمة، والمرضى الذين يعانون من آفات أصغر هم أكثر عرضة للبقاء على قيد الحياة 10. علينا أن نظهر نموذجا استنساخه التي تنتج الآفات التي تحتل نسبة مماثلة من نصف الكرة الأرضية إلى العديد من السكتات الدماغية الإنسان. السكتة الدماغية هي مرض غير متجانسة. وبفعل 75٪ من السكتات الدماغية الإقفارية من قبل أي عوائق الجوبي (من انسداد الأوعية الصغيرة داخل الجمجمة)؛ السكتة الدماغية cardioembolic. أو تصلب الشرايين الشريان كبير، وهو ما يمثل 30٪ من السكتات الدماغية. في معظم الأحيان لوحظ تصلب الشرايين أعراض عند نقطة حيث ج المشتركةالشريان arotid (CCA) فروع في الشرايين السباتية الداخلية والخارجية 11. وينبغي أن تكون نماذج ما قبل السريرية من السكتة الدماغية مماثلة لحالة الإنسان ممكن لمحاكاة الفيزيولوجيا المرضية وينبغي أن تتضمن عوامل خطر الاصابة بالجلطة الدماغية. 92٪ من السكتة الدماغية تحدث في الأشخاص الذين تزيد أعمارهم عن 65 عاما، وتشمل عوامل الخطر الأخرى السمنة، وارتفاع ضغط الدم، وتصلب الشرايين، كما نوقش سابقا 12. لتمثيل أفضل عوامل الخطر هذه، فمن المستحسن استخدام نموذج التي قد تشارك بعض الميزات المرضية للحالة الطبيعية. في هذا البروتوكول، أدرجنا سن متقدمة وتدفق الدم من خلال عرقلة الشرايين السباتية. نموذج كلاسيكي لانسداد الشريان الدماغي الأوسط (MCAO) هو النموذج خيوط داخل اللمعة انسداد MCA القريبة، مما يقلل من تدفق الدم في الشرايين الدماغية الأمامية والوسطى. مرات انسداد قصيرة باستخدام هذا النموذج تركز لesion إلى المنطقة تحت القشرية، في حين مرات انسداد أطول يمكن أن يؤدي إلى إصابات كبيرة تجنيد المناطق في كل من المناطق القشرية وتحت القشرية، مما أدى إلى ارتفاع معدل الوفيات في الفئران المسنة. في المقارنة، فإن النموذج المستخدم من قبل مجموعتنا القيام حج القحف وفتح الجافية تليها تخثر الدم وتدمير جزء صغير من MCA باستخدام ملقط الكي ثنائي القطب. ويتم تكييف هذا النموذج الإنفاذ الحراري من ورقة عام 1981 من قبل تامورا وآخرون. (23) واستخدام قطع القحف قد تحد من رفع الضغط داخل الجمجمة، والذي هو سمة من سمات الجمجمة المغلقة، وينتج عنه ارتفاع في استنساخ وانخفاض معدل وفيات في منطقتنا الفوج جراحة بالمقارنة مع بعض نماذج أخرى 13. لتوليد عوائق استنساخه والعجز المستمر نحن تسد بشكل دائم القريبة التقييم القطري المشترك وتسد عابر التقييم القطري المشترك القاصي وفقا تشن وآخرون (14). ونحن نستخدم غير الغازية التصوير بالرنين المغناطيسي T2 المرجحة (MRI) لتقييم مدى ومكان احتشاء الدماغ، ودرجة من تورم في الدماغ في القشرة الحسية.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Carprofen</td>
			<td>Norbrook</td>
			<td>Vm No; 02000/4229</td>
			<td>give 0.25 mg/kg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atropine Sulfate</td>
			<td>AmTech</td>
			<td>RXATRINJ-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alcohol swabs</td>
			<td>UHS</td>
			<td align="right">20021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lidocaine cream (Emla)</td>
			<td>AstraZeneca</td>
			<td>0012901</td>
			<td>Apply a pea sized drop to the shaved neck and temporal regions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Homeothermic Blanket System</td>
			<td>Harvard Instruments</td>
			<td>507222F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11019-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Abbott</td>
			<td>B506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silk sutures</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td align="right">723288</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cautery system</td>
			<td>Eschmann</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.25 mm Jeweler caurtery forceps</td>
			<td>Eschmann</td>
			<td align="right">8330349</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fine Dumont forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11251-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thumb driven saline drip system</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vacusafe aspirator system</td>
			<td>INTEGRA BIOSCIENCES</td>
			<td align="right">158320</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>16 mm coarse diamond coated Steel burrs</td>
			<td></td>
			<td>K801 104 016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Handheld dental drill</td>
			<td>NSK</td>
			<td>NSKVMAXVRE (Handpiece NSKEX6B)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas Spring Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>15000-03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microvascular scissors</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td align="right">501790</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 Vicryl sutures</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vascular clip and applicator</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operating microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Compact Anaesthesia System Isoflurane K/F Single Gas</td>
			<td>VetTech Solutions</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbon Steel Scalpel blades No. 10</td>
			<td>Swann-Morton</td>
			<td align="right">201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25g needles</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>NN-2525R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>syringes (1 ml and 5 ml)</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>SS+01T1 / SS*05SE1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline (Sodium Chloride 0.9%)</td>
			<td>Fresenius Kabi</td>
			<td>Pl 08828/0178</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cotton buds</td>
			<td>Johnson and Johnson</td>
			<td>5000207582502</td>
			<td>sterilize before use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>gauze</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>sterilize before use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical Imaging Package (Jim)</td>
			<td>Xinapse</td>
			<td></td>
			<td>Free software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Statistical Parametric Mapping Software (SPM8)</td>
			<td>UCL</td>
			<td></td>
			<td>Free software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Power Analysis Software (G*Power)</td>
			<td>Universit&#228;t D&#252;sseldorf</td>
			<td></td>
			<td>Free software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

performing permanent distal middle cerebral with common carotid artery occlusion in aged rats to study cortical ischemia with sustained disability

السكتة الدماغية يحدث عادة في كبار السن مع مجموعة من التواكب المرضي بما في ذلك الشريان السباتي (أو الشرايين الأخرى) تصلب الشرايين، وارتفاع ضغط الدم والبدانة ومرض السكري. وفقا لذلك، عند تقييم علاجات للسكتة الدماغية في الحيوانات، من المهم تحديد نموذج مع وجه ممتازة الصلاحية. حسابات السكتة الدماغية عن 80٪ من كل السكتات الدماغية، وغالبية هذه تحدث في أراضي الشريان الدماغي الأوسط (مولودية الجزائر)، وكثيرا ما حمل عوائق التي تؤثر على القشرة الحسية، مما تسبب في plegia المستمر أو شلل جزئي في الجانب المقابل من الجسم. علينا أن نظهر في هذا الفيديو طريقة لإنتاج السكتة الدماغية لدى الفئران المسنة، والذي يسبب مستمرة الإعاقة الحسية وعوائق القشرية كبيرة. على وجه التحديد، ونحن تحفز دائم البعيدة انسداد المتوسطة الدماغية الشريان (MCAO) في إناث الفئران المسنة باستخدام ملقط الإنفاذ الحراري لتسد قطعة صغيرة من هذا الشريان. كان الشريان السباتي على الجانب المماثل لآفة ثم pالمغطي ermanently والشريان السباتي المقابل المغطي عابر لمدة 60 دقيقة. نقيس حجم احتشاء باستخدام الهيكلي التصوير بالرنين المغناطيسي T2 المرجحة (MRI) في 24 ساعة و 8 أسابيع بعد السكتة الدماغية. في هذه الدراسة، كان حجم احتشاء متوسط ​​4.5٪ ± 2.0٪ (الانحراف المعياري) في نصف الكرة المماثل في 24 ساعة (تصحيح لتورم في الدماغ باستخدام معادلة Gerriet ون = 5). هذا النموذج هو ممكن عمليا وذات الصلة سريريا لأنه يتيح تحريض العجز الحسي مستدامة، وهو أمر مهم لتوضيح الآليات المرضية في جسم المريض والعلاجات الجديدة.

وكان المستحث MCAO دائمة حج القحف أداء، تليها تجلط الدم والدمار من الشريان الدماغي الأوسط من قبل الإنفاذ الحراري جنبا إلى جنب مع انسداد دائم في ipsilesional الشريان السباتي المشترك و 60 دقيقة انسداد contralesional الشريان السباتي المشترك. ويرد التخطيطي من الإعداد للمعدات والمغطي MCA في الشكل 1، والشرايين السباتية في الشكل 2 (أعلاه). وتم تقييم نتائج السكتة الدماغية 24 ساعة و 8 أسابيع بعد السكتة الدماغية عن طريق قياس حجم احتشاء على 40 × 0.5 مم شرائح (من نهاية منقاري من البصلة الشمية إلى نهاية منقاري من الحبل الشوكي) باستخدام المنطقة من أدوات الفائدة في حزمة عرض الصور الطبية. ويرد التصوير بالرنين المغناطيسي الهيكلي T2 التمثيلي المرجحة لنفس الحيوان في 24 ساعة و 8 أسابيع (الشكل 3A). تم التعرف على حجم احتشاء من مناطق الدماغ الفئران تظهر إشارة hyperintense. كما وزن T2تظهر الصور إد الماء أو البلازما كمنطقة بيضاء مشرقة. ومن المعروف أن هناك زيادة في ذمة واستسقاء المخ بعد السكتة الدماغية، ويمكن قياسها من مسح T2 المرجحة التي تم ربطها القياسات النسيجية من حجم احتشاء 18. ومع ذلك، وذمة الحالية في وقت مبكر بعد السكتة الدماغية (على سبيل المثال، في 24 ساعة) يمكن أن يؤدي إلى المبالغة في تقدير حجم الآفة النهائية (على سبيل المثال، في 8 أسابيع)، وبالتالي فإننا موجودة أيضا كميات احتشاء متوسط ​​تعديل باستخدام الصيغ Gerriet ل. ويبين الشكل 3B البيانات يعني من والخام (غير المعدلة) حجم الآفة في 24 ساعة كما 62.8 مم 3 (± 25.4 مم 3 SD، أعلى الرسم البياني). هذا وتحتل 9.8٪ في نصف الكرة الأرضية المتضررة (± 4.2٪ SD، الرسم البياني المتوسط). عندما تصحيح لتورم في الدماغ باستخدام الصيغ Gerriets &quot;يتم تخفيض هذه القيمة إلى 4.5٪ (± 2.0٪ SD، الرسم البياني السفلي). وقد تم قياس شدة السكتة الدماغية أيضا باستخدام مونتويا الدرج اختبار 15. في موجز،وقبل تدريب nimals لاسترداد الكريات السكر قبل 4 أسابيع لMCAO جراحة السكتة الدماغية، واختبار لمدة 8 أسابيع بعد السكتة الدماغية (الشكل 4) لتأكيد وجود عجز مستمر. وضعت الفئران في الجهاز الدرج لمدة 10 دقيقة وسجل عدد الكريات استرجاع (من أصل 21 الكريات) وعرض كنسبة مئوية (مجموعة تعني ± الأخطاء المعيارية). تم إجراء تحليل الانحدار لتناسب الخط إلى البيانات. ويبين الشكل 5 حساب حجم العينة باستخدام بيانات حجم احتشاء (للتأثيرات المحتملة للعلاجات مرشح)، وتحليلها باستخدام خوارزمية في برامج التحليل السلطة لاختبار t باستخدام &quot;الفرق بين وسيلتين المستقلة (مجموعتين)&quot; واستخدام (غير المصححة ) المتوسطات الحسابية والانحرافات المعيارية من الشكل 3B. المعلومات الواردة في الشكل (5) والجدول 1 تبين أن 12 الفئران ستكون هناك حاجة لكل مجموعة للكشف عن العلاج الذي خفض الوقود النووي المشعحجم ARCT بنسبة 50٪ في 24 ساعة، بينما الشكل 6 يظهر على &quot;XY مؤامرة&quot; السلطة تحقيقه باستخدام أعداد متفاوتة من الحيوانات. ويلخص الجدول 1 حسابات حجم العينة لجميع نقاط الوقت. <img alt="الشكل (3)" src="/files/ftp_upload/53106/53106fig3.jpg" /> ويستخدم الشكل 3. التصوير البنيوي بالرنين المغناطيسي T2 المرجحة لقياس حجم احتشاء وتورم في الدماغ بعد السكتة الدماغية. (A) صورة بالرنين المغناطيسي T2 المرجحة من نفس دماغ الفئران 24 ساعة و 8 أسابيع بعد تحريض من السكتة الدماغية. وتمثل المنطقة البيضاء الآفة، ولكنه يحتوي على بعض وذمة وعائية المنشأ ما تشفى من 8 أسابيع. تم قياس أحجام (ب) عائق باستخدام الصور الطبية حزمة العرض الخاصة بالمناطق الاهتمام الأدوات، وتآمر على الرسم البياني تمثل متوسط ​​± SD للنقطة 3 دوام المستخدمة (ن = 6). حجم الآفة الخام (لم يتم تصحيحها لتورم في الدماغ بسبب إدايما)، وتظهر نسبة الآفة من نصف الكرة الأرضية المتضررة (غير المصححة للتورم)، ونسبة الآفة من نصف الكرة تصحيح لتورم في الدماغ باستخدام الصيغ Gerriets &quot;هنا. وقد استخدم SD بدلا من SEM من أجل إجراء عمليات حسابية حجم العينة (انظر الشكل 5). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53106/53106fig3large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> <img alt="الشكل (4)" src="/files/ftp_upload/53106/53106fig4.jpg" /> الرقم 4. اختبار الدرج يظهر ضعف في استيعاب واسترجاع الكريات. وفي هذا النموذج السكتة الدماغية كان هناك القليل جدا من الشفاء التلقائي. السكتة الدماغية لدى الفئران المسنة يضعف باستمرار البراعة، كما هو موضح من قبل الاختبار الأسبوعي باستخدام &quot;اختبار سلم&quot; من بيليه الوصول. أقحم: صورة من الفئران إجراء الاختبار السلوكي. ويوضح الرسم البياني متوسط ​​(± موقفARD رقم الخطأ) من الكريات استرجاع (من أصل 21، كنسبة مئوية) في الأسبوع من قبل forepaw المتضررين. ن = 5. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53106/53106fig4large.jpg" target="_blank">يرجى النقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> <img alt="الرقم 5" src="/files/ftp_upload/53106/53106fig5.jpg" /> ويوضح هذه لقطة الشاشة، والتي اتخذت من برامج التحليل السلطة، الشكل 5. حسابات حجم العينة لتحديد أرقام مجموعة من الفئران المطلوبة للكشف عن التأثير العلاجي المطلوب أن 12 الفئران في كل مجموعة ستكون هناك حاجة للكشف عن العلاج الذي خفض حجم احتشاء بنسبة 50٪ في 24 ساعة. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53106/53106fig5large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> <img alt="الشكل (6)" src="/files/ftp_upload/53106/53106fig6.jpg" /><brحقق /&gt; الشكل 6. الطاقة التي تستخدم فيها أرقام إجمالية مختلفة من الحيوانات. &quot;مؤامرة XY لمجموعة من القيم&quot; من برامج التحليل السلطة يدل على القوة التي سيتم الحصول عليها لإجراء التجارب باستخدام مختلف (مجموع) وعدد من الفئران المسنة، نظرا للمعلمات هو مبين في الشكل (5). ويلخص الجدول 1 عن نتائجنا. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53106/53106fig6highres.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td rowspan="2"> الوقت بعد السكتة الدماغية: </td><td colspan="3"> عدد من الفئران في المجموعة المطلوبة للكشف عن انخفاض في حجم الآفة من: </td></tr><tr><td align="right"> 75٪ </td><td align="right"> 50٪ </td><td align="right"> 25٪ </td></tr><tr><td> 24 ساعة </td><td align="right"> 6 </td><td align="right"> 12 </td><td align="right"> 42 </td></tr><tr><td> 8 أسابيع </td><td align="right"> 4 </td><td align="right"> 5 </td><td align="right"> 17 </td></tr></tbody></table> الجدول 1. حسابات حجم العينة في كل مجموعة للتجارب افتراضية في المستقبل. حسابها باستخدام برنامج تحليل الطاقة (انظر الشكلين 5 و 6). ويبين الجدول رقم الفئران في المجموعة المطلوبة لإجراء تجربة المجموعتين للكشف عن 25٪، 50٪ و 75٪ تخفيض في حجم الآفة في كل من timepoints في هذه الدراسة.

Watch this Scientific Journal Video about Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability at JoVE.com

Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability

هنا نقدم بروتوكول لإنتاج دائم البعيدة انسداد الشريان الدماغي الأوسط في إناث الفئران المسنة مع انسداد في وقت واحد من الشرايين السباتية لتوليد عوائق القشرية الكبيرة والعجز المستمر. وتبين لنا تأكيدا لحجم الآفة باستخدام التصوير بالرنين المغناطيسي الهيكلي في 24 ساعة و 8 أسابيع بعد السكتة الدماغية.

أداء الدائم القاصي الأوسط الدماغي مع السباتي المشترك انسداد الشريان في الجرذان المسنين لدراسة القشرية نقص التروية ذوي الإعاقة المستديمة

Stroke typically occurs in elderly people with a range of comorbidities including carotid (or other arterial) atherosclerosis, high blood pressure, ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Modeling Stroke in Mice - Middle Cerebral Artery Occlusion with the Filament Model

السكتة الدماغية النمذجة في الفئران -- الشرق انسداد الشريان الدماغي مع نموذج الشعيرة

Stroke is among the most frequent causes of death and adult disability, especially in highly developed countries. However, treatment options to date are ...

Mouse Model of Middle Cerebral Artery Occlusion

نموذج الفأر من انسداد الشريان الدماغي الأوسط

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the ...

Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Mice

Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Mice

الشريان الدماغي الأوسط انسداد داخل اللمعة (MCAO) النموذجي للاصابة بالسكتة الدماغية مع توجيه الليزر دوبلر Flowmetry في الفئران

Stroke is the third leading cause of death and the leading cause of disability in the world, with an estimated cost of near $70 billion 
in the United ...

The Application Of Permanent Middle Cerebral Artery Ligation in the Mouse

تطبيق الربط الدائم الشريان المخي الأوسط في الماوس

Focal cerebral ischemia is among the most common type of stroke seen in patients. Due to the clinical significance there has been a prolonged effort to ...

Bilateral Common Carotid Artery Occlusion as an Adequate Preconditioning Stimulus to Induce Early Ischemic Tolerance to Focal Cerebral Ischemia

الثنائية انسداد الشريان السباتي المشترك باعتباره المحفز شروط مسبقة كافية للحث على التسامح الدماغية المبكرة إلى نقص التروية الدماغية البؤري

There is accumulating evidence, that ischemic preconditioning - a non-damaging ischemic challenge to the brain - confers a transient protection to a ...

Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Rat

Endothelin-1 المستحثة انسداد الشريان الدماغي الأوسط نموذج للالسكتة الدماغية مع التوجيه بالليزر Flowmetry دوبلر في الجرذ

Stroke is the number one cause of disability and third leading cause of death in the world, costing an estimated $70 billion in the United States in ...

Utilizing a Cranial Window to Visualize the Middle Cerebral Artery During Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion

الاستفادة من وجود نافذة القحف لتصور الشريان الدماغي الأوسط خلال Endothelin-1 انسداد الشريان الدماغي الأوسط المستحثة

Creation of a cranial window is a method that allows direct visualization of structures on the cortical surface of the brain1-3. This technique can be ...

Optimized System for Cerebral Perfusion Monitoring in the Rat Stroke Model of Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion

الأمثل نظام لرصد الإرواء الدماغي في نموذج الفئران من السكتة الدماغية داخل اللمعة انسداد الشريان الدماغي الأوسط

The translational potential of pre-clinical stroke research depends on the accuracy of experimental modeling. Cerebral perfusion monitoring in animal ...

Permanent Cerebral Vessel Occlusion via Double Ligature and Transection

Permanent Cerebral Vessel Occlusion via Double Ligature and Transection

الدائم انسداد الأوعية الدماغية<em&gt; عبر</em&gt; ضمد مزدوجة وعانى من قطع

Stroke is a leading cause of death, disability, and socioeconomic loss worldwide. The majority of all strokes result from an interruption in blood flow ...

Modeling Stroke in Mice: Permanent Coagulation of the Distal Middle Cerebral Artery

السكتة الدماغية النمذجة في الفئران: التخثر الدائم من الشريان الدماغي الأوسط القاصي

Stroke is the third most common cause of death and a main cause of acquired adult disability in developed countries. Only very limited therapeutical ...