Name: performing permanent distal middle cerebral with common carotid artery occlusion in aged rats to study cortical ischemia with sustained disability
Uploaded: 2016-02-23T13:00:00
Duration: 9 min 11 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability at JoVE.com

We would like to thank Prof. I Mhairi Macrae and Dr. Debbie Dewar, University of Glasgow, who kindly hosted CW and DD for training in this procedure. The research leading to these results has received funding from the European Research Council under the European Union's Seventh Framework Programme (FP/2007-2013) / ERC Grant Agreement n. 309731 to LM. This work was also supported by a &#8220;Serendipity Grant&#8221; from The Dunhill Medical Trust to LM [grant number: SA21/0512].

<ol>
	<li>Pendlebury, S. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Underfunding+of+stroke+research:+a+Europe-wide+problem.">Underfunding of stroke research: a Europe-wide problem.</a> Stroke. 35, 2368-2371 (2004).</li><li>Doyle, S., Bennett, S., Fasoli, S. E., McKenna, K. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interventions+for+sensory+impairment+in+the+upper+limb+after+stroke.">Interventions for sensory impairment in the upper limb after stroke.</a> Cochrane Database Syst Rev. 6, CD006331 (2010).</li><li>Reep, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rodent+model+for+investigating+the+neurobiology+of+contralateral+neglect.">A rodent model for investigating the neurobiology of contralateral neglect.</a> Cogn Behav Neurol. 17, 191-194 (2004).</li><li>Carey, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+between+touch+impairment+and+brain+activation+after+lesions+of+subcortical+and+cortical+somatosensory+regions.">Relationship between touch impairment and brain activation after lesions of subcortical and cortical somatosensory regions.</a> Neurorehabil Neural Repair. 25, 443-457 (2011).</li><li>Mohr, J. P., Lazar, R. M., Marshall, R. S., Mohr, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ch.+24.">Ch. 24.</a> Stroke: Pathophysiology, Diagnosis and Management. , 384-424 (2011).</li><li>Sacco, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subarachnoid+and+intracerebral+hemorrhage:+Natural+history,+prognosis,+and+precursive+factors+in+the+Framingham+Study.">Subarachnoid and intracerebral hemorrhage: Natural history, prognosis, and precursive factors in the Framingham Study.</a> Neurology. 34, 847-847 (1984).</li><li>Hossmann, K. A., Heiss, W. D., Brainin, M., Heiss, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ch.+1.">Ch. 1.</a> Textbook of Stroke Medicine. , 1-27 (2009).</li><li>The National Institute of Neurological Disorders and Stroke rt-PA Stroke Study Group. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+Plasminogen+Activator+for+Acute+Ischemic+Stroke.">Tissue Plasminogen Activator for Acute Ischemic Stroke.</a> N Engl J Med. 333, 1581-1587 (1995).</li><li>Brott, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurements+of+Acute+Cerebral+Infarction:+Lesion+Size+by+Computed+Tomography.">Measurements of Acute Cerebral Infarction: Lesion Size by Computed Tomography.</a> Stroke. 20, 871-875 (1989).</li><li>L&#246;vblad, K. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ischemic+Lesion+Volumes+in+Acute+Stroke+by+Diffusion-Weighted+Magnetic+Resonance+Imaging+Correlate+with+Clinical+Outcome.">Ischemic Lesion Volumes in Acute Stroke by Diffusion-Weighted Magnetic Resonance Imaging Correlate with Clinical Outcome.</a> Ann Neurol. 42, 164-170 (1997).</li><li>Norrving, B., Brainin, M., Heiss, W. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ch.+2.">Ch. 2.</a> Textbook of Stroke Medicine. , 28-39 (2009).</li><li>Truelsen, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stroke+incidence+and+prevalence+in+Europe:+a+review+of+available+data.">Stroke incidence and prevalence in Europe: a review of available data.</a> Eur J Neurol. 13, 581-598 (2006).</li><li>Ord, E. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Positive+impact+of+pre-stroke+surgery+on+survival+following+transient+focal+ischemia+in+hypertensive+rats.">Positive impact of pre-stroke surgery on survival following transient focal ischemia in hypertensive rats.</a> J Neurosci Methods. 211, 305-308 (2012).</li><li>Chen, S. T., Hsu, C. Y., Hogan, E. L., Maricq, H., Balentine, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+model+of+focal+ischemic+stroke+in+the+rat:+reproducible+extensive+cortical+infarction.">A model of focal ischemic stroke in the rat: reproducible extensive cortical infarction.</a> Stroke. 17, 738-743 (1986).</li><li>Montoya, C. P., Campbell-Hope, L. J., Pemberton, K. D., Dunnett, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+'staircase+test':+a+measure+of+independent+forelimb+reaching+and+grasping+abilities+in+rats.">The 'staircase test': a measure of independent forelimb reaching and grasping abilities in rats.</a> J Neurosci Methods. 36, 219-228 (1991).</li><li>Adams, F. S., Schwarting, R. K., Huston, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+and+neurochemical+asymmetries+following+unilateral+trephination+of+the+rat+skull:+is+this+control+operation+always+appropriate?.">Behavioral and neurochemical asymmetries following unilateral trephination of the rat skull: is this control operation always appropriate?.</a> Physiol Behav. 55, 947-952 (1994).</li><li>Macrae, I. M., U, D. i. r. n. a. g. l. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ch.+5.">Ch. 5.</a> Rodent Models of Stroke, Neuromethods. 47, 41-53 (2010).</li><li>Gerriets, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+Quantification+of+Brain+Edema+and+the+Space-Occupying+Effect+in+Rat+Stroke+Models+Using+Magnetic+Resonance+Imaging.">Noninvasive Quantification of Brain Edema and the Space-Occupying Effect in Rat Stroke Models Using Magnetic Resonance Imaging.</a> Stroke. 35, 566-571 (2004).</li><li>Paxinos, G., Watson, C. R., Emson, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AChE-stained+horizontal+sections+of+the+rat+brain+in+stereotaxic+coordinates.">AChE-stained horizontal sections of the rat brain in stereotaxic coordinates.</a> J Neurosci Methods. 3, 129-149 (1980).</li><li>Faul, F., Erdfelder, E., Buchner, A., Lang, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Statistical+power+analyses+using+G*Power+3.1:+tests+for+correlation+and+regression+analyses.">Statistical power analyses using G*Power 3.1: tests for correlation and regression analyses.</a> Behav Res Methods. 41, 1149-1160 (2009).</li><li>Button, K. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Power+failure:+why+small+sample+size+undermines+the+reliability+of+neuroscience.">Power failure: why small sample size undermines the reliability of neuroscience.</a> Nature Reviews Neuroscience. 14, 365-376 (2013).</li><li>Fox, G., Gallacher, D., Shevde, S., Loftus, J., Swayne, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomic+variation+of+the+middle+cerebral+artery+in+the+Sprague-Dawley+rat.">Anatomic variation of the middle cerebral artery in the Sprague-Dawley rat.</a> Stroke. 24, 2087-2093 (1993).</li><li>Tamura, A., Graham, D. I., McColloch, J., Teasdale, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+cerebral+ischemia+in+the+rat:+1.+Description+of+technique+and+early+neuropathological+consequences+following+middle+cerebral+artery+occlusion.">Focal cerebral ischemia in the rat: 1. Description of technique and early neuropathological consequences following middle cerebral artery occlusion.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 1, 53-60 (1981).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

MCAO chez les rongeurs est une technique souvent utilisée pour modéliser la course humaine. Ce modèle ne possède quelques détails à noter dans le protocole. Premièrement, il est essentiel de maintenir la température du corps de l&#39;animal pendant toute l&#39;expérience car il influe sur la taille de l&#39;infarctus et le nombre des animaux morts dans une étude. Il peut être possible de mettre fin à l&#39;isoflurane pendant l&#39;occlusion temporaire du droit CCA et de garder les rats dans un environnement calme réchauffé à augmenter les taux de survie en réduisant l&#39;exposition à l&#39;isoflurane. Les chercheurs devraient examiner si une période plus courte anesthésie emporte sur le stress de l&#39;induction supplémentaire. Le système vasculaire (par exemple, MCA ramification) des rats varie à l&#39;intérieur et entre les cohortes d&#39;animaux 22. Il est important de garder cela à l&#39;esprit lorsque l&#39;on commence une nouvelle étude. Différents moments d&#39;occlusion CCA peuvent être évaluées (par exemple, 30, 45, 60 et 90 min). Dans cette étude, un temps d&#39;occlusion de 60 min est utilisé. Dans d&#39;autres études, nous avons constaté que 45occlusions min provoquent un infarctus cortical de taille similaire mais avec des preuves anecdotiques de l&#39;amélioration des taux de survie. En conséquence, ont les chirurgiens commencent par un court temps d&#39;occlusion (par exemple, 30 min) pour voir si le volume des lésions adéquates (et / ou des déficits comportementaux nécessaires) sont obtenues et ensuite seulement à augmenter les temps d&#39;occlusion si nécessaire. déficits comportementaux ne sont pas maintenus chez les rats adultes par rapport à des rats âgés avec des temps d&#39;occlusion identiques. IRM peut être utilisée pour juger si (après un temps d&#39;occlusion notamment) volume des lésions sont appropriés pour les objectifs de l&#39;étude. Une petite lésion serait couvrir moins de dix 0,5 mm coupes coronales (sur 40). Une lésion de taille moyenne serait étendre entre dix et vingt coupes coronales. Une grande lésion serait étendre entre vingt et trente coupes coronales. Une très grande lésion serait couvrir plus de trente des quarante tranches. Dans notre expérience, les rats avec de très grandes lésions (plus de trente tranches) et / ou la preuve d&#39;Acros de hernies la ligne médiane ont généralement mauvais pronostic: la réduction des temps d&#39;occlusion pourraient être envisagées. IRM est également utile pour l&#39;évaluation de la localisation de l&#39;infarctus: certains sont plus caudale situé et certains sont plus rostrale situé. Prendre des précautions supplémentaires lors de la séparation du nerf vague des deux artères carotides communes. Râles (rauque) peut se produire après la chirurgie de la course, ce qui pourrait être dû à des lésions nerveuses chez certains animaux, bien que la cause est actuellement dans le flou: d&#39;après notre expérience, le pronostic est très mauvais pour ces animaux et il est généralement recommandé d&#39;humanité les tuer. Les résultats permanents modèles diathermie MCAO en infarctus corticaux reproductibles et les taux de survie post-opératoires acceptables chez les rats âgés. La technique ne nécessite cependant la chirurgie invasive sous un stéréomicroscope. Il est important de maintenir une technique aseptique si les animaux sont bien récupérer de la chirurgie. Il faut prendre soin de ne pas endommager la MCA et de coagulation tout en exposant l&#39;artère,et des dommages à la surface corticale doit être minimisée sinon la surface exposée du cortex peut faire partie de la zone de l&#39;infarctus. Il est recommandé d&#39;obtenir autant d&#39;expérience que possible d&#39;établir la procédure et de parvenir à des infarctus cohérentes et déterminer les temps d&#39;occlusion avant une étude est effectuée pour tester des thérapies candidats, par exemple. Expérimentateurs doivent tirer au hasard des traitements au sein de sessions de chirurgie ( &quot;randomisation de bloc&quot;) lorsque cela est possible. Il est à noter que ce modèle ne comporte pas MCA reperfusion (sauf transitoire ligature MCA est utilisé au lieu de diathermie). La mortalité peut être élevé chez les rats âgés atteints de ces grands infarctus corticaux mais il devrait être possible de réduire la mortalité en utilisant la réduction des temps d&#39;occlusion et en réduisant au minimum l&#39;exposition à l&#39;anesthésie générale si possible (par exemple, lors de l&#39;occlusion). L&#39;utilisation de 70% de N 2 O et 30% de O 2 en tant que support peut permettre à des niveaux inférieurs de l&#39;isoflurane à utiliser: cette exposition réduite aux isoflurane peut entraîner des taux de survie plus élevés. Un autre point à considérer est que l&#39;athérosclérose est un processus graduel, alors que dans ce protocole, nous simulons avec occlusion aiguë CCA. Cependant, la réduction substantielle de la circulation sanguine et les déficits soutenus simuler occlusions en tandem survenant dans de nombreux patients atteints d&#39;un accident vasculaire cérébral. Permanent distale MCAO sans tandem CCA occlusion chez les rats ne parvient pas à induire des coups reproductible 14: d&#39;ailleurs, sans tandem CCA occlusion, nous avons trouvé une guérison spontanée considérable se produit qui empêche l&#39;évaluation du comportement à long terme des thérapies de course de plus de 8 semaines. En revanche, nous montrons que distale MCAO en tandem CCA occlusion induit des déficits à long terme chez les rats âgés. En conclusion, cette procédure chez le rat provoque coups qui sont semblables en taille et l&#39;emplacement à ceux observés dans la condition humaine, avec une incapacité soutenue que l&#39;on peut utiliser pour permettre les essais de nouveaux traitements et l&#39;élucidation de remécanismes de paires après un AVC ischémique.

L&#39;AVC est actuellement la troisième cause la plus fréquente de décès dans le monde et la première cause d&#39;invalidité 1. Accident vasculaire cérébral ischémique, qui comprend 80% de tous les AVC, se traduit souvent par infarctus dans le cortex causant la perte de sensation (par exemple, la proprioception), de la fonction motrice et l&#39;attention sur le côté affecté 2-4. L&#39;artère cérébrale moyenne (MCA) est le plus grand des navires qui attire l&#39;offre du cercle de Willis et provient de l&#39;artère carotide interne 5. Le MCA est le vaisseau cérébral le plus souvent affecté dans un accident ischémique cérébral, avec des coups dans ce territoire qui représente 65% de tous les AVC ischémiques 6,7. Le MCA fournit deux régions corticales et sous-corticales et des anomalies neurologiques causés par MCA AVC varient selon l&#39;emplacement exact de l&#39;occlusion 7. occlusions proximale MCA affectent le territoire profonde à travers les artères lenticulostriatal et causent de grandes infarctus englobant à la fois cortical et régions sous-corticales. En revanche, les occlusions plus distales qui privent les régions corticales uniquement du flux sanguin ont tendance à produire plus petits infarctus cortical. Dans les grandes études de population, les lésions de course humains vont de 5 à 14% de l&#39;hémisphère ipsilatéral 8,9; représente course maligne pour 10% des accidents vasculaires cérébraux et donne lieu à de plus grandes infarctus, nécessitant une hémicrâniectomie pour réduire la pression intracrânienne, et les patients avec des lésions plus petites sont plus susceptibles de survivre 10. Nous démontrons un modèle reproductible qui produit des lésions qui occupent une proportion similaire de l&#39;hémisphère autant de coups droits. L&#39;AVC est une maladie hétérogène; 75% des accidents vasculaires cérébraux ischémiques sont induites soit par des infarctus lacunaires (de l&#39;obstruction des petits vaisseaux intracrâniens); AVC cardio-embolique; ou grande athérosclérose de l&#39;artère, qui représente 30% des accidents vasculaires cérébraux. athérosclérose symptomatique est plus fréquemment observé à l&#39;endroit où le c communeartère arotid (CCA) aux artères carotides internes et externes 11. modèles pré-cliniques de course doivent être aussi proche de la condition humaine que possible de simuler sa physiopathologie et intégrer les facteurs de risque d&#39;accident vasculaire cérébral. 92% des AVC ischémique se produit chez les personnes âgées de plus de 65 ans, et d&#39;autres facteurs de risque sont l&#39;obésité, l&#39;hypertension artérielle et l&#39;athérosclérose, tel que discuté précédemment 12. Pour mieux représenter ces facteurs de risque, il est recommandé d&#39;utiliser un modèle qui peut partager certaines des caractéristiques physiopathologiques de l&#39;état naturel. Dans ce protocole, nous avons inclus un âge avancé et le flux sanguin obstrué à travers les artères carotides. Le modèle classique de l&#39;occlusion de l&#39;artère cérébrale moyenne (MCAO) est le modèle de filament intraluminale proximale occlusion MCA, ce qui réduit le flux sanguin dans la partie antérieure et les artères cérébrales moyennes. temps d&#39;occlusion courts en utilisant ce modèle se concentre la lEsion à la région sous-corticale, tandis que de plus longs temps d&#39;occlusion peuvent entraîner d&#39;importantes lésions recrutement zones des deux aires corticales et sous-corticales, ce qui entraîne un taux de mortalité plus élevé chez les rats âgés. A titre de comparaison, le modèle utilisé par notre groupe consiste à effectuer une craniotomie et l&#39;ouverture de la dure-mère, suivi par la coagulation du sang et la destruction d&#39;une petite portion de la MCA en utilisant une pince de cautérisation bipolaire. Ce modèle de diathermie est adapté du papier 1981 par Tamura et al. 23 et l&#39;utilisation de la craniectomie peut limiter augmentation de la pression intracrânienne, qui est une caractéristique du crâne fermé, et les résultats de reproductibilité élevé et un taux de mortalité plus faible dans notre cohorte de chirurgie par rapport à d&#39;autres modèles 13. Pour générer infarctus reproductibles et l&#39;invalidité soutenue nous boucher définitivement le proximale CCA et l&#39;occlusion transitoire le CCA distale selon Chen et al. 14 Nous utilisons l&#39;imagerie par résonance magnétique pondérée en T2 non-invasive (IRM) Pour évaluer l&#39;étendue et la localisation de l&#39;infarctus cérébral, et le degré de gonflement du cerveau dans le cortex sensori-moteur.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Carprofen</td>
			<td>Norbrook</td>
			<td>Vm No; 02000/4229</td>
			<td>give 0.25 mg/kg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atropine Sulfate</td>
			<td>AmTech</td>
			<td>RXATRINJ-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alcohol swabs</td>
			<td>UHS</td>
			<td align="right">20021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lidocaine cream (Emla)</td>
			<td>AstraZeneca</td>
			<td>0012901</td>
			<td>Apply a pea sized drop to the shaved neck and temporal regions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Homeothermic Blanket System</td>
			<td>Harvard Instruments</td>
			<td>507222F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11019-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Abbott</td>
			<td>B506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silk sutures</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td align="right">723288</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cautery system</td>
			<td>Eschmann</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.25 mm Jeweler caurtery forceps</td>
			<td>Eschmann</td>
			<td align="right">8330349</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fine Dumont forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11251-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thumb driven saline drip system</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vacusafe aspirator system</td>
			<td>INTEGRA BIOSCIENCES</td>
			<td align="right">158320</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>16 mm coarse diamond coated Steel burrs</td>
			<td></td>
			<td>K801 104 016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Handheld dental drill</td>
			<td>NSK</td>
			<td>NSKVMAXVRE (Handpiece NSKEX6B)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas Spring Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>15000-03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microvascular scissors</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td align="right">501790</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 Vicryl sutures</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vascular clip and applicator</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operating microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Compact Anaesthesia System Isoflurane K/F Single Gas</td>
			<td>VetTech Solutions</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbon Steel Scalpel blades No. 10</td>
			<td>Swann-Morton</td>
			<td align="right">201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25g needles</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>NN-2525R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>syringes (1 ml and 5 ml)</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>SS+01T1 / SS*05SE1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline (Sodium Chloride 0.9%)</td>
			<td>Fresenius Kabi</td>
			<td>Pl 08828/0178</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cotton buds</td>
			<td>Johnson and Johnson</td>
			<td>5000207582502</td>
			<td>sterilize before use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>gauze</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>sterilize before use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical Imaging Package (Jim)</td>
			<td>Xinapse</td>
			<td></td>
			<td>Free software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Statistical Parametric Mapping Software (SPM8)</td>
			<td>UCL</td>
			<td></td>
			<td>Free software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Power Analysis Software (G*Power)</td>
			<td>Universit&#228;t D&#252;sseldorf</td>
			<td></td>
			<td>Free software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

performing permanent distal middle cerebral with common carotid artery occlusion in aged rats to study cortical ischemia with sustained disability

Accident vasculaire cérébral se produit généralement chez les personnes âgées avec une gamme de comorbidités dont la carotide (ou autre artérielle) l&#39;athérosclérose, l&#39;hypertension artérielle, l&#39;obésité et le diabète. En conséquence, lors de l&#39;évaluation des thérapies pour les AVC chez les animaux, il est important de choisir un modèle avec une excellente validité apparente. représente un AVC ischémique de 80% de tous les AVC, et la majorité d&#39;entre eux se produisent sur le territoire de l&#39;artère cérébrale moyenne (MCA), induisant souvent infarctus qui affectent le cortex sensori-moteur, provoquant plégie persistante ou parésie sur le côté opposé du corps. Nous démontrons dans cette vidéo un procédé pour produire un accident ischémique cérébral chez les rats âgés, ce qui provoque un handicap sensori soutenue et infarctus corticaux substantielles. Plus précisément, nous provoquons une occlusion permanente distale de l&#39;artère cérébrale moyenne (MCAO) chez les rats femelles âgées à l&#39;aide des pinces de diathermie pour obturer un court segment de cette artère. L&#39;artère carotide du côté homolatéral à la lésion était alors permanently occlus et l&#39;artère carotide controlatérale a été transitoirement occlus pendant 60 min. Nous mesurons la taille de l&#39;infarctus en utilisant l&#39;imagerie par résonance magnétique pondérée en T2 structurelle (IRM) à 24 h et 8 semaines après un AVC. Dans cette étude, le volume infarctus moyen était de 4,5% ± 2,0% (écart-type) de l&#39;hémisphère ipsilatéral à 24 h (corrigée de l&#39;enflure du cerveau en utilisant l&#39;équation de Gerriet, n = 5). Ce modèle est faisable et cliniquement pertinente car elle permet l&#39;induction des déficits sensori-moteurs soutenus, ce qui est important pour l&#39;élucidation des mécanismes physiopathologiques et de nouveaux traitements.

MCAO permanente a été induite par craniotomie exécution, suivi de la coagulation et de la destruction de l&#39;artère cérébrale moyenne par diathermie combinée à une occlusion permanente de l&#39;ipsilésionnelle artère carotide commune et 60 min occlusion de l&#39;contralésionnel artère carotide commune. Un schéma de l&#39;installation de l&#39;équipement et occlusion MCA est représenté sur la Figure 1, et des artères carotides de la figure 2 (ci-dessus). résultat de la course a été évaluée 24 heures et 8 semaines après un AVC en mesurant le volume de l&#39;infarctus de 40 x 0,5 mm tranches (de l&#39;extrémité rostrale du bulbe olfactif à la fin rostrale de la moelle épinière) à l&#39;aide de la région de boîte à outils d&#39;intérêt dans un boîtier d&#39;affichage d&#39;images médicales. Une IRM structurelle représentant T2 pondérée est indiqué pour le même animal à 24 h et 8 semaines (figure 3A). Le volume de l&#39;infarctus a été identifié par les zones du cerveau de rat montrant un signal hyperintense; que le poids de T2images ed montrent l&#39;eau ou du plasma comme une zone blanche et brillante. On sait qu&#39;il ya une augmentation des oedèmes et de l&#39;enflure du cerveau après un AVC, et cela peut être mesurée à partir d&#39;une analyse pondérée en T2 qui a été corrélée à des mesures histologiques de volume de l&#39;infarctus 18. Cependant, oedème présente tôt après un AVC (par exemple, à 24 h) peut conduire à une surestimation du volume de la lésion final (par exemple, à 8 semaines) et, par conséquent, nous avons également présents volumes infarctus moyenne ajustée en utilisant les formules de Gerriet. La figure 3B montre les données moyennes de la première (non ajustés) volume de la lésion à 24 h en 62,8 mm 3 (± 25,4 mm 3 SD, graphique du haut); cette occupe 9,8% de l&#39;hémisphère affecté (± 4,2% SD, graphique du milieu). Après correction pour tenir un gonflement du cerveau en utilisant les formules de Gerriets Cette valeur est réduite à 4,5% (± 2,0% SD, graphique inférieur). La gravité de l&#39;AVC a également été mesurée en utilisant le test de l&#39;escalier Montoya 15. En bref, unNIMAUX ont été pré-formés pour récupérer des pastilles de sucre pour 4 semaines avant MCAO la chirurgie de la course, et testés pendant 8 semaines après un AVC (Figure 4) pour confirmer un déficit durable. Les rats ont été placés dans l&#39;appareil d&#39;escalier pendant 10 minutes et le nombre de pastilles récupérées ont été enregistrés (sur 21 pastilles) et affichées sous forme de pourcentage (groupe signifie ± erreur-type). Une analyse de régression a été réalisée pour être compatibles avec la ligne de données. La figure 5 illustre le calcul de la taille de l&#39;échantillon à l&#39;aide de données de volume de l&#39;infarctus (pour les effets potentiels des traitements candidats), analysée à l&#39;aide d&#39;un algorithme dans un logiciel d&#39;analyse de puissance pour un t-test en utilisant &quot;la différence entre les deux moyens indépendants (deux groupes)&quot; et en utilisant le (non corrigé ) les moyens et les écarts-types de la figure 3B. Les informations sur la figure 5 et le tableau 1 montrent que 12 rats serait nécessaire par groupe pour détecter une thérapie qui réduit infvolume de CRAT de 50% à 24 h, tandis que la figure 6 montre un «complot XY&quot; de la puissance obtenue en utilisant un nombre variable d&#39;animaux. Le tableau 1 résume exemples de calcul de taille pour tous les points de temps. <img alt="Figure 3" src="/files/ftp_upload/53106/53106fig3.jpg" /> Figure 3. IRM pondérée en T2 structurel est utilisé pour mesurer la taille de l&#39;infarctus et l&#39;enflure du cerveau après un AVC. (A) Une image par résonance magnétique pondérée en T2 du même cerveau de rat 24 h et 8 semaines après l&#39;induction de l&#39;accident vasculaire cérébral. La zone blanche représente la lésion, mais contient également un certain oedème vasogène qui résout de 8 semaines. Volumes (B) d&#39;infarctus ont été mesurées en utilisant une image médicale emballage formant présentoir Region of Interest Toolkit, et sont reportés sur un graphique représentant la moyenne ± écart-type pour les points temporels utilisés 3 (n = 6). volume de la lésion Raw (non corrigée de l&#39;enflure du cerveau due à edEMA), le pourcentage de lésion hémisphère affecté (non corrigé pour le gonflement), et le pourcentage de lésion hémisphère corrigée pour un gonflement du cerveau en utilisant les formules de Gerriets sont présentés ici. SD a été utilisé plutôt que SEM afin d&#39;effectuer des calculs de taille de l&#39;échantillon (voir figure 5). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53106/53106fig3large.jpg" target="_blank">S&#39;il vous plaît cliquez ici pour voir une version plus grande de cette figure.</a> <img alt="Figure 4" src="/files/ftp_upload/53106/53106fig4.jpg" /> Figure 4. Le test de l&#39;escalier présente une déficience en saisir et récupérer des granulés. Dans ce modèle de course il y avait très peu de récupération spontanée. Accident vasculaire cérébral chez les rats âgés entrave persistante dextérité, montré par des essais la semaine en utilisant le &quot;test de l&#39;escalier&quot; de culot atteindre. Encadré: Une image d&#39;un rat d&#39;effectuer le test comportemental. Le graphique montre la moyenne (± supportard erreur) le nombre de boulettes récupérées (sur 21, exprimée en pourcentage) par semaine par la patte affectée. n = 5. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53106/53106fig4large.jpg" target="_blank">S&#39;il vous plaît cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figure.</a> <img alt="Figure 5" src="/files/ftp_upload/53106/53106fig5.jpg" /> Figure 5. calcul de la taille de l&#39;échantillon pour déterminer le nombre de groupes de rats nécessaires pour détecter un effet thérapeutique souhaité. Cette capture d&#39;écran, prise à partir du logiciel d&#39;analyse de puissance, montre que 12 rats par groupe seraient nécessaires pour détecter une thérapie qui réduit le volume de l&#39;infarctus de 50% à 24 h. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53106/53106fig5large.jpg" target="_blank">S&#39;il vous plaît cliquer ici pour voir une version plus grande de cette figure.</a> <img alt="Figure 6" src="/files/ftp_upload/53106/53106fig6.jpg" /><br/&gt; Figure 6. Puissance obtenue en utilisant divers nombre total d&#39;animaux. Un «complot XY pour une plage de valeurs&quot; de logiciel d&#39;analyse de puissance montre la puissance que l&#39;on obtiendrait pour des expériences à l&#39;aide de (total) différents nombres de rats âgés, compte tenu des paramètres montre la figure 5. Le tableau 1 résume l&#39;ensemble de nos résultats. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53106/53106fig6highres.jpg" target="_blank">S&#39;il vous plaît cliquez ici pour voir une version plus grande de cette figure.</a> <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0"><tbody><tr><td rowspan="2"> Temps après un AVC: </td><td colspan="3"> Nombre de rats par groupe nécessaire pour détecter une réduction du volume de la lésion de: </td></tr><tr><td align="right"> 75% </td><td align="right"> 50% </td><td align="right"> 25% </td></tr><tr><td> 24 h </td><td align="right"> 6 </td><td align="right"> 12 </td><td align="right"> 42 </td></tr><tr><td> 8 semaines </td><td align="right"> 4 </td><td align="right"> 5 </td><td align="right"> 17 </td></tr></tbody></table> Tableau 1. Les calculs de la taille des échantillons par groupe pour des expériences futures hypothétiques. Calculé en utilisant un logiciel d&#39;analyse de puissance (voir figures 5 et 6). Le tableau indique le nombre de rats par groupe requis pour une expérience de deux groupes afin de détecter une réduction de 25% 50% et 75% en volume de la lésion à chacun des points dans le temps dans cette étude.

Watch this Scientific Journal Video about Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability at JoVE.com

Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability

Nous présentons ici un protocole pour produire une occlusion permanente distale de l&#39;artère cérébrale moyenne chez les rats femelles âgées avec occlusion simultanée des artères carotides de produire de grandes infarctus corticaux et des déficits subis. Nous montrons la confirmation de la taille de la lésion en utilisant l&#39;IRM structurelle à 24 h et 8 semaines après un AVC.

Exécution distale permanente Moyen cérébrale avec l&#39;artère carotide commune occlusion chez les rats âgés pour étudier corticale ischémie avec une incapacité prolongée

Stroke typically occurs in elderly people with a range of comorbidities including carotid (or other arterial) atherosclerosis, high blood pressure, ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Modeling Stroke in Mice - Middle Cerebral Artery Occlusion with the Filament Model

Course de modélisation chez la souris - Moyen-occlusion artérielle cérébrale avec le modèle filamentaire

Stroke is among the most frequent causes of death and adult disability, especially in highly developed countries. However, treatment options to date are ...

Recherche

Médecine

Mouse Model of Middle Cerebral Artery Occlusion

Modèle murin d&#39;occlusion artère cérébrale moyenne

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the ...

Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Mice

Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Mice

Intraluminale Occlusion Artère cérébrale moyenne (MCAO) Modèle pour l&#39;AVC ischémique avec guidage laser Doppler chez la souris

Stroke is the third leading cause of death and the leading cause of disability in the world, with an estimated cost of near $70 billion 
in the United ...

The Application Of Permanent Middle Cerebral Artery Ligation in the Mouse

L&#39;application de la ligature permanente artère cérébrale moyenne chez la souris

Focal cerebral ischemia is among the most common type of stroke seen in patients. Due to the clinical significance there has been a prolonged effort to ...

Bilateral Common Carotid Artery Occlusion as an Adequate Preconditioning Stimulus to Induce Early Ischemic Tolerance to Focal Cerebral Ischemia

Occlusion bilatérale de l&#39;artère carotide commune comme un stimulus suffisant pour provoquer le préconditionnement précoce Tolérance ischémique à une ischémie cérébrale focale

There is accumulating evidence, that ischemic preconditioning - a non-damaging ischemic challenge to the brain - confers a transient protection to a ...

Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Rat

L&#39;endothéline-1 induite Moyen Modèle occlusion de l&#39;artère cérébrale pour AVC ischémique avec guidage laser Doppler chez le rat

Stroke is the number one cause of disability and third leading cause of death in the world, costing an estimated $70 billion in the United States in ...

Utilizing a Cranial Window to Visualize the Middle Cerebral Artery During Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion

L&#39;utilisation d&#39;une fenêtre crânien à la Visualisez l&#39;artère cérébrale moyenne pendant l&#39;endothéline-1 induite par l&#39;occlusion Artère cérébrale moyenne

Creation of a cranial window is a method that allows direct visualization of structures on the cortical surface of the brain1-3. This technique can be ...

Optimized System for Cerebral Perfusion Monitoring in the Rat Stroke Model of Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion

Système optimisé pour la surveillance de la perfusion cérébrale chez le rat des maladies du intraluminale occlusion de l&#39;artère cérébrale moyenne

The translational potential of pre-clinical stroke research depends on the accuracy of experimental modeling. Cerebral perfusion monitoring in animal ...

Permanent Cerebral Vessel Occlusion via Double Ligature and Transection

Permanent Cerebral Vessel Occlusion via Double Ligature and Transection

Permanent occlusion des vaisseaux cérébraux<em&gt; Via</em&gt; Double ligature et Transection

Stroke is a leading cause of death, disability, and socioeconomic loss worldwide. The majority of all strokes result from an interruption in blood flow ...

Modeling Stroke in Mice: Permanent Coagulation of the Distal Middle Cerebral Artery

Modélisation des maladies chez les souris: Coagulation permanente de l&#39;artère cérébrale moyenne distale

Stroke is the third most common cause of death and a main cause of acquired adult disability in developed countries. Only very limited therapeutical ...