Name: performing permanent distal middle cerebral with common carotid artery occlusion in aged rats to study cortical ischemia with sustained disability
Uploaded: 2016-02-23T13:00:00
Duration: 9 min 11 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability at JoVE.com

We would like to thank Prof. I Mhairi Macrae and Dr. Debbie Dewar, University of Glasgow, who kindly hosted CW and DD for training in this procedure. The research leading to these results has received funding from the European Research Council under the European Union's Seventh Framework Programme (FP/2007-2013) / ERC Grant Agreement n. 309731 to LM. This work was also supported by a &#8220;Serendipity Grant&#8221; from The Dunhill Medical Trust to LM [grant number: SA21/0512].

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	<li>Pendlebury, S. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Underfunding+of+stroke+research:+a+Europe-wide+problem.">Underfunding of stroke research: a Europe-wide problem.</a> Stroke. 35, 2368-2371 (2004).</li><li>Doyle, S., Bennett, S., Fasoli, S. E., McKenna, K. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interventions+for+sensory+impairment+in+the+upper+limb+after+stroke.">Interventions for sensory impairment in the upper limb after stroke.</a> Cochrane Database Syst Rev. 6, CD006331 (2010).</li><li>Reep, R. 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P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+and+neurochemical+asymmetries+following+unilateral+trephination+of+the+rat+skull:+is+this+control+operation+always+appropriate?.">Behavioral and neurochemical asymmetries following unilateral trephination of the rat skull: is this control operation always appropriate?.</a> Physiol Behav. 55, 947-952 (1994).</li><li>Macrae, I. 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C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AChE-stained+horizontal+sections+of+the+rat+brain+in+stereotaxic+coordinates.">AChE-stained horizontal sections of the rat brain in stereotaxic coordinates.</a> J Neurosci Methods. 3, 129-149 (1980).</li><li>Faul, F., Erdfelder, E., Buchner, A., Lang, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Statistical+power+analyses+using+G*Power+3.1:+tests+for+correlation+and+regression+analyses.">Statistical power analyses using G*Power 3.1: tests for correlation and regression analyses.</a> Behav Res Methods. 41, 1149-1160 (2009).</li><li>Button, K. 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The authors have nothing to disclose.

MCAO bei Nagern ist eine Technik, die oft verwendet, um menschliche Schlaganfall zu modellieren. Dieses Modell hat ein paar Details im Protokoll zu vermerken. Erstens ist es wichtig, den Tierkörpertemperatur während des Experiments zu halten, da dies die Größe des Infarkts und die Anzahl der Todesfälle in einer Studie beeinflusst. Es kann möglich sein, Isofluran während der Übergangs Verschluss der rechten CCA und halten Ratten in einem erwärmten, ruhigen Umgebung einzustellen Überlebensrate zu erhöhen, durch die Einwirkung von Isofluran reduziert. Forscher sollten, ob eine kürzere Anästhesie Zeit überwiegt die Belastung von zusätzlichen Induktion betrachten. Das Gefäßsystem (zB MCA Verzweigung) der Ratten variiert innerhalb und zwischen Kohorten von Tieren 22. Es ist wichtig, dies zu berücksichtigen, wenn eine neue Studie beginnen. Verschiedene CCA Verschlusszeiten können (zB 30, 45, 60 und 90 min) ausgewertet werden. In dieser Studie eine Okklusion von 60 min verwendet. In anderen Untersuchungen haben wir gefunden, dass 45min Verschlüsse verursachen einen ähnlich großen kortikalen Infarkt aber mit Anhaltspunkten dafür, verbesserte Überlebensraten. Dementsprechend haben die Chirurgen mit einer kurzen Verschlusszeit starten (zB 30 min), um zu sehen, ob eine ausreichende Läsion Volumen (und / oder erforderlichen Verhaltensdefizite) erhalten werden und nur dann Okklusionszeiten gegebenenfalls zu erhöhen. Verhaltensdefizite bei erwachsenen Ratten nicht nachhaltig im Vergleich zu älteren Ratten mit identischen Okklusion Zeiten. MRI kann verwendet werden, zu beurteilen, ob (nach einer bestimmten Verschlusszeit) Läsion Volumina für die Studienziele geeignet sind. Eine kleine Läsion würde überspannen weniger als zehn 0,5 mm koronalen Scheiben (von 40). Eine mittelgroße Läsion würde zwischen zehn und zwanzig koronalen Scheiben überspannen. Eine große Läsion würde zwischen zwanzig und dreißig koronalen Scheiben überspannen. Eine sehr große Läsion würde mehr als dreißig der vierzig Scheiben überspannen. Nach unserer Erfahrung Ratten mit sehr großen Läsionen (mehr als dreißig Scheiben) und / oder den Nachweis einer Herniation across der Mittellinie haben in der Regel schlechte Prognose: kürzere Verschlusszeiten angesehen werden könnten. Die MRT ist auch nützlich, um die Infarkt Lage Beurteilung: einige sind mehr kaudal gelegen und einige sind mehr rostral gelegen. Seien Sie besonders vorsichtig, wenn Sie den Vagusnerv aus beiden Halsschlagadern zu trennen. Rasselgeräusche (Raspeln) kann nach einem Schlaganfall Operation auftreten und dies kann zu Nervenschäden bei einigen Tieren zurückzuführen sein könnte, obwohl die Ursache noch unklar ist: in unserer Erfahrung Prognose ist sehr schlecht für diese Tiere und es wird in der Regel empfohlen, sie auf humane Weise zu töten. Die Dauer Diathermie MCAO-Modell ergibt reproduzierbare kortikale Infarkte und akzeptabel postoperative Überlebensraten bei älteren Ratten. Die Technik hat jedoch erfordern invasive Chirurgie unter einem Stereomikroskop. Es ist wichtig, aseptischen Bedingungen aufrecht zu erhalten, wenn die Tiere gut von der Operation zu erholen sind. Es muss darauf geachtet werden, nicht den MCA zu beschädigen, während auszusetzen und die Arterie Koagulation,und Schäden an der kortikalen Oberfläche sollte sonst der belichtete Bereich der Hirnrinde minimiert werden kann Teil der Infarktbereich bilden. Es wird empfohlen, so viel Erfahrung wie möglich zu erhalten, das Verfahren zu etablieren und konsistente Infarkte und bestimmen Okklusion Zeiten zu erreichen, bevor eine Studie zu testen Kandidaten Therapien durchgeführt wird, zum Beispiel. Experimentatoren sollten alle Behandlungen innerhalb Operation Sitzungen ( &quot;Block Randomisierung&quot;) nach Möglichkeit zufällig. Es ist erwähnenswert, dass dieses Modell nicht MCA mit sich bringt Reperfusion (es sei denn, transiente MCA Ligation statt Diathermie verwendet wird). Die Sterblichkeit kann mit diesen großen kortikalen Infarkten bei älteren Ratten hoch sein, aber es sollte möglich sein, die Sterblichkeit zu verringern, indem kürzere Verschlusszeiten durch und durch Bestrahlung mit Vollnarkose, wo möglich zu minimieren (zB während Okklusion). Die Verwendung von 70% N 2 O und 30% O 2 als Träger kann geringere Isofluran ermöglichen, verwendet werden: Mit dieser reduzierten Exposition gegenüber isofluRane kann zu höheren Überlebensraten führen. Ein weiterer Punkt ist, dass Atherosklerose ein schrittweiser Prozess ist, während sie in diesem Protokoll wir es mit einer akuten CCA Okklusion simulieren. Allerdings simulieren die wesentliche Verringerung der Durchblutung und anhaltende Defizite Tandemverschlüsse, die in vielen Schlaganfall-Patienten auftreten. Permanent distalen MCAO ohne Tandem CCA Okklusion bei Ratten nicht Striche zu induzieren reproduzierbar 14: darüber hinaus ohne Tandem CCA Okklusion, wir haben festgestellt, erhebliche Spontanheilung kommt, dass langfristige Verhaltens Auswertung von Schlaganfall-Therapien über 8 Wochen ausschließt. Im Gegensatz dazu zeigen wir, dass distalen MCAO mit Tandem-CCA Okklusion langfristige Defizite bei älteren Ratten induziert. Im Ergebnis ist dieses Verfahren in Ratten verursacht Striche, die in Größe und Position auf die in den menschlichen Zustand gesehen ähnlich sind, mit einer anhaltenden Behinderung, die man verwenden kann das Testen von neuen Behandlungen und Aufklärung der re zu ermöglichenPaar Mechanismen nach einem ischämischen Schlaganfall.

Der Schlaganfall ist derzeit die dritthäufigste Todesursache weltweit und die häufigste Ursache für Behinderung ein. Der ischämische Schlaganfall, die 80% aller Schlaganfälle umfasst, führt oft zu Infarkten in der Hirnrinde führen zum Verlust der Empfindung (zB Propriozeption), in Motorik und in die Aufmerksamkeit auf der betroffenen Seite 2-4. Die Arteria cerebri media (MCA) ist die größte der Schiffe, die Versorgung aus dem Kreis der Willis zieht und stammt aus der A. carotis interna 5. Der MCA ist die Hirngefäßes am häufigsten bei ischämischem Schlaganfall betroffen, mit Schlaganfälle in diesem Gebiet für 65% aller ischämischen Schlaganfällen Bilanzierung 6,7. Die MCA versorgt beide kortikalen und subkortikalen Regionen und neurologische von MCA Schlaganfall verursachte Abweichungen von der exakten Lage des Verschlusses 7 variieren. Proximalen MCA Einschlüsse beeinflussen die tiefe Gebiet durch die lenticulostriatal Arterien und verursachen umfasst große Infarkte sowohl Cortical und subkortikalen Regionen. Im Gegensatz dazu mehr distale Verschlüsse, die ausschließlich kortikalen Regionen des Blutflusses entziehen tendenziell kleiner kortikale Infarkte zu erzeugen. In großen Bevölkerungsstudien, reichen menschlichen Schlaganfall Läsionen 5-14% der ipsilateralen Hemisphäre 8,9; maligne Hub macht 10% aller Schlaganfälle und gibt größeren Infarkten Anstieg, eine Hemikraniektomie erfordern Hirndruck zu reduzieren, und Patienten mit kleineren Läsionen sind eher 10 zu überleben. Wir zeigen ein reproduzierbares Modell, die Läsionen, die nehmen einen ähnlichen Anteil der Halbkugel, so viele Menschen Schläge erzeugt. Schlaganfall ist eine heterogene Erkrankung; 75% der ischämischen Schlaganfälle werden durch entweder lacunar Infarkte (von Behinderung von intrakraniellen kleine Gefäße) induziert; kardioembolischen Schlaganfall; oder große Arterie Atherosklerose, die für 30% aller Schlaganfälle ausmacht. Symptomatische Atherosklerose wird am häufigsten an der Stelle beobachtet, wo der gemeinsame carotid Arterie (CCA) verzweigt sich in die inneren und äußeren Halsschlagadern 11. Vorklinischen Modellen von Schlaganfall sollte ähnlich wie bei dem menschlichen Zustand wie möglich seine Pathophysiologie zu simulieren und sollte die Risikofaktoren für Schlaganfall integrieren. 92% der ischämischen Schlaganfall tritt bei Menschen im Alter von über 65, und andere Risikofaktoren sind Übergewicht, Bluthochdruck und Arteriosklerose, wie zuvor 12 diskutiert. Um besser diese Risikofaktoren darstellen, empfiehlt es sich, ein Modell zu verwenden, die einige der pathophysiologischen Eigenschaften der natürlichen Zustand kann teilen. In diesem Protokoll haben wir fortgeschrittenen Alters und behindert den Blutfluss durch den Halsschlagadern enthalten. Das klassische Modell der mittleren Hirnarterie (MCAO) ist die intraluminale Faden Modell der proximalen MCA-Okklusion, die den Blutfluss in den vorderen und mittleren Hirnarterien reduziert. Kurze Verschlusszeiten dieses Modell konzentriert sich die lEsion zum subkortikalen Region, während längere Verschlusszeiten bei großen Läsionen führen kann Bereiche sowohl der kortikalen und subkortikalen Bereichen Rekrutierung, bei älteren Ratten zu einer höheren Sterblichkeit führt. Im Vergleich beinhaltet das Modell von unserer Gruppe eine Kraniotomie und Öffnen der Dura durch Koagulation des Blutes und der Zerstörung eines kleinen Teils des MCA mit bipolarer Kauterisation Zange gefolgt ausführt. Diese Diathermie Modell ist aus der 1981 Papier von Tamura et al angepasst. 23 und die Verwendung der Kraniektomie kann intrakranielle Druck erhöht Grenze, die ein Merkmal der geschlossenen Schädel ist, und führt zu einer höheren Reproduzierbarkeit und eine geringere Sterblichkeit in unserer Praxis Kohorte im Vergleich zu einigen anderen Modellen 13. Um reproduzierbare Infarkte erzeugen und anhaltenden Behinderungs wir verschließen permanent das proximale CCA und verschließen vorübergehend das distale CCA nach Chen et al. 14 Wir verwenden nicht-invasive T2-gewichteten Magnetresonanztomographie (MRT) Das Ausmaß und die Lage von Hirninfarkt, und der Grad der Schwellung des Gehirns in der sensomotorischen Cortex zu bewerten.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Carprofen</td>
			<td>Norbrook</td>
			<td>Vm No; 02000/4229</td>
			<td>give 0.25 mg/kg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atropine Sulfate</td>
			<td>AmTech</td>
			<td>RXATRINJ-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alcohol swabs</td>
			<td>UHS</td>
			<td align="right">20021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lidocaine cream (Emla)</td>
			<td>AstraZeneca</td>
			<td>0012901</td>
			<td>Apply a pea sized drop to the shaved neck and temporal regions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Homeothermic Blanket System</td>
			<td>Harvard Instruments</td>
			<td>507222F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11019-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Abbott</td>
			<td>B506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silk sutures</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td align="right">723288</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cautery system</td>
			<td>Eschmann</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.25 mm Jeweler caurtery forceps</td>
			<td>Eschmann</td>
			<td align="right">8330349</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fine Dumont forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11251-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thumb driven saline drip system</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vacusafe aspirator system</td>
			<td>INTEGRA BIOSCIENCES</td>
			<td align="right">158320</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>16 mm coarse diamond coated Steel burrs</td>
			<td></td>
			<td>K801 104 016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Handheld dental drill</td>
			<td>NSK</td>
			<td>NSKVMAXVRE (Handpiece NSKEX6B)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas Spring Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>15000-03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microvascular scissors</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td align="right">501790</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 Vicryl sutures</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vascular clip and applicator</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operating microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Compact Anaesthesia System Isoflurane K/F Single Gas</td>
			<td>VetTech Solutions</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbon Steel Scalpel blades No. 10</td>
			<td>Swann-Morton</td>
			<td align="right">201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25g needles</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>NN-2525R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>syringes (1 ml and 5 ml)</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>SS+01T1 / SS*05SE1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline (Sodium Chloride 0.9%)</td>
			<td>Fresenius Kabi</td>
			<td>Pl 08828/0178</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cotton buds</td>
			<td>Johnson and Johnson</td>
			<td>5000207582502</td>
			<td>sterilize before use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>gauze</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>sterilize before use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical Imaging Package (Jim)</td>
			<td>Xinapse</td>
			<td></td>
			<td>Free software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Statistical Parametric Mapping Software (SPM8)</td>
			<td>UCL</td>
			<td></td>
			<td>Free software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Power Analysis Software (G*Power)</td>
			<td>Universit&#228;t D&#252;sseldorf</td>
			<td></td>
			<td>Free software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

performing permanent distal middle cerebral with common carotid artery occlusion in aged rats to study cortical ischemia with sustained disability

Schlaganfall tritt in der Regel bei älteren Menschen mit einer Reihe von Begleiterkrankungen einschließlich Halsschlagader (oder andere arterielle) Arteriosklerose, Bluthochdruck, Übergewicht und Diabetes. Dementsprechend wird, wenn Therapien für Schlaganfall bei Tieren Auswertung ist es wichtig, ein Modell mit hervorragenden Augenscheinvalidität auszuwählen. Der ischämische Schlaganfall ist für 80% aller Schlaganfälle, und die meisten von ihnen kommen in das Gebiet der mittleren Hirnarterie (MCA), häufig Infarkte zu induzieren, die die sensomotorischen Kortex beeinflussen, was zu anhaltenden Querschnittslähmung oder Lähmung auf der Gegenseite des Körpers. Wir zeigen in diesem Video ein Verfahren zur ischämischen Schlaganfall bei älteren Ratten produzieren, die anhaltenden sensomotorischen Behinderung und wesentliche kortikalen Infarkten führt. Genauer gesagt, veranlassen wir permanent distalen mittleren Hirnarterie (MCAO) bei älteren weiblichen Ratten durch Diathermie Pinzette ein kurzes Segment der Arterie zu verschließen. Die Halsschlagader auf der ipsilateralen Seite der Läsion wurde dann permanently verschlossen und die kontralaterale Halsschlagader wurde transient für 60 min okkludiert. Wir messen die Größe Infarkt Struktur T2-gewichteten Magnetresonanztomographie (MRT) bei 24 Stunden und 8 Wochen nach Schlaganfall. In dieser Studie betrug die mittlere Infarktvolumen 4,5% ± 2,0% (Standardabweichung) der ipsilateralen Hemisphäre bei 24 Stunden (zum Gehirn korrigiert Schwellung Gerriet der Gleichung, n = 5). Dieses Modell ist machbar und klinisch relevant, da sie die Induktion einer anhaltenden sensomotorischen Defiziten ermöglicht, die für die Aufklärung der pathophysiologischen Mechanismen und neuartige Behandlungsmethoden von Bedeutung ist.

Permanente MCAO wurde durch Ausführen Kraniotomie, gefolgt von Koagulation und Zerstörung der Arteria cerebri media durch Diathermie mit Permanent Okklusion der Arteria carotis communis ipsilesional und 60 min Okklusion der Arteria carotis communis kontraläsionalen kombiniert induziert. Eine schematische Darstellung der Einrichtung der Ausrüstung und der MCA verschlossen ist in Abbildung 1, und der Halsschlagadern in 2 (oben) gezeigt. Stroke Ergebnis wurde auf 40 x 0,5 mm Scheiben durch Messung der Infarktvolumen 24 Stunden und 8 Wochen nach einem Schlaganfall untersucht (von rostralen Ende der Riechkolben zu rostralen Ende des Rückenmarks), um die Region of Interest-Toolkit in einem medizinischen Bildanzeige-Paket. Eine repräsentative T2 gewichtet strukturelle MRT-Untersuchung ist für das gleiche Tier nach 24 Stunden und 8 Wochen (3A) gezeigt. Das Infarktvolumen wurde von den Bereichen des Rattenhirns zeigt eine hyperintensen Signal identifiziert; als T2 Gewichted Bilder zeigen Wasser oder Plasma als helle weiße Fläche. Es ist bekannt, dass es eine Erhöhung in Ödemen und Gehirn nach Schlaganfall Schwellung, und dies kann von einer T2-gewichteten Scan gemessen werden, die histologische Messung der Infarktvolumen 18 korreliert ist. Doch nach Schlaganfall vorhanden frühen Ödem (zB bei 24 Stunden) zu einer Überbewertung des endgültigen Läsionsvolumen (beispielsweise bei 8 Wochen) führen und damit auch wir gegenwärtig mittlere Infarktvolumen angepasst Gerriet der Formeln. 3B zeigt Durchschnittsdaten von das rohe (unbereinigt) Läsionsvolumen bei 24 Stunden als 62,8 mm 3 (± 25,4 mm 3 SD, obere Kurve); diese nimmt 9,8% der betroffenen Hemisphäre (± 4,2% SD, mittlere Grafik). Wenn für Gehirn korrigiert Schwellung Gerriets &#39;Formeln dieser Wert reduziert sich auf 4,5% (± 2,0% SD, untere Grafik) verwenden. Stroke Schwere wurde 15 mit dem Montoya Treppe Test gemessen. Kurz gesagt, einnimals wurden vortrainiert auf Zuckerpellets für 4 Wochen vor MCAO Schlaganfall Chirurgie und getestet für 8 Wochen nach Schlaganfall (Abbildung 4) abrufen eine anhaltende Defizit zu bestätigen. Die Ratten wurden in der Treppe Gerät für 10 min und die Anzahl der Pellets abgerufen wurde aufgezeichnet (von 21 Pellets) und dargestellt als Prozentsatz (Gruppenmittelwerte ± Standardfehler) gesetzt. Eine Regressionsanalyse wurde durchgeführt, um die Linie zu den Daten zu passen. Abbildung 5 zeigt die Fallzahlberechnung Infarktvolumen Daten (für mögliche Auswirkungen der Kandidat Therapien), analysiert einen Algorithmus in Power-Analyse-Software für ein T-Test unter Verwendung von &quot;Differenz zwischen zwei voneinander unabhängige Einrichtungen (zwei Gruppen)&quot; und mit der (nicht korrigiert ) Mittelwert und Standardabweichung von 3B. Die Angaben in Abbildung 5 und Tabelle 1 zeigen, dass 12 Ratten würden pro Gruppe benötigt werden, um eine Therapie zu erkennen, die inf reduziertARCT Volumen um 50% bei 24 Stunden, während 6 ein &quot;XY-Diagramm&quot; der Macht eine unterschiedliche Anzahl von Tieren erreicht werden. Tabelle 1 Probe Größenberechnungen für alle Zeitpunkte zusammenfasst. <img alt="Abbildung 3" src="/files/ftp_upload/53106/53106fig3.jpg" /> Abbildung 3. T2-gewichteten MRT-Struktur wird nach Schlaganfall Schwellung, die Größe des Infarkts und Gehirn zu messen. (A) Ein T2-gewichteten MR-Bild des gleichen Rattengehirn 24 Stunden und 8 Wochen nach der Induktion eines Schlaganfalls. Die weiße Fläche stellt die Läsion, enthält aber auch einige vasogenen Ödem, die von 8 Wochen auflöst. (B) Infarktvolumen wurden mit einem medizinischen Bilddarstellung Paket Region of Interest Toolkit gemessen und in einem Diagramm darstellen, den Mittelwert ± SD für die drei Zeitpunkten verwendet aufgetragen (n = 6). Raw Läsionsvolumen (nicht für Gehirn korrigiert aufgrund einer Schwellung edEMA), Prozentsatz Läsion betroffen Halbkugel (unkorrigierte für Schwellung) und Prozent Läsion der Hemisphäre für Gehirn korrigiert Schwellung Gerriets &#39;Formeln werden hier gezeigt. SD wurde anstatt SEM verwendet, um Stichprobengröße Berechnungen (siehe Abbildung 5) durchführen. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53106/53106fig3large.jpg" target="_blank">Bitte hier klicken, um eine größere Version dieser Figur zu sehen.</a> <img alt="Abbildung 4" src="/files/ftp_upload/53106/53106fig4.jpg" /> Abbildung 4. Die Treppe Test zeigt Beeinträchtigungen im Erfassen und Abrufen von Pellets. In diesem Hubmodell es gab sehr wenig spontane Heilung. Schlaganfall bei älteren Ratten beeinträchtigt anhaltend Geschicklichkeit und erreichte durch wöchentliche Tests unter Verwendung des &quot;Treppentest&quot; von Pellet gezeigt. Kleines Bild: Ein Bild von einer Ratte den Verhaltenstest durchführen. Die Grafik zeigt den Mittelwert (± Standard Fehler) Anzahl (von 21 abgerufen Pellets, ausgedrückt durch die betroffene Pfote pro Woche in Prozent). n = 5. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53106/53106fig4large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier eine größere Version dieser Figur zu sehen.</a> <img alt="Abbildung 5" src="/files/ftp_upload/53106/53106fig5.jpg" /> Abbildung 5. Probengröße Berechnungen Gruppennummern von Ratten zu bestimmen, erforderlich, um eine gewünschte therapeutische Wirkung zu erkennen. Dieser Screenshot, aufgenommen von Power-Analyse-Software, zeigt, dass 12 Ratten pro Gruppe erforderlich sind, um eine Therapie zu erkennen, die um 50% Infarktvolumen reduziert bei 24 Stunden. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53106/53106fig5large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Figur zu sehen.</a> <img alt="Abbildung 6" src="/files/ftp_upload/53106/53106fig6.jpg" /><br/&gt; Abbildung 6. Netz erreicht verschiedenen Gesamtzahl der Tiere verwendet wird. Ein &quot;XY-Plot für einen Bereich von Werten&quot; von Power-Analyse-Software die Leistung zeigt, die verschiedene für Experimente erhalten werden würde (gesamt) Zahl älterer Ratten, da die Parameter verwenden in Abbildung 5 dargestellt. in Tabelle 1 sind alle unsere Ergebnisse. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53106/53106fig6highres.jpg" target="_blank">Bitte hier klicken, um eine größere Version dieser Figur zu sehen.</a> <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0"><tbody><tr><td rowspan="2"> Zeit nach Schlaganfall: </td><td colspan="3"> Anzahl der Ratten pro Gruppe erforderlich, um eine Verringerung der Läsion Volumen zu erfassen: </td></tr><tr><td align="right"> 75% </td><td align="right"> 50% </td><td align="right"> 25% </td></tr><tr><td> 24 Stunden </td><td align="right"> 6 </td><td align="right"> 12 </td><td align="right"> 42 </td></tr><tr><td> 8 Wochen </td><td align="right"> 4 </td><td align="right"> 5 </td><td align="right"> 17 </td></tr></tbody></table> Tabelle 1. Die Berechnung der Stichprobenumfang pro Gruppe für hypothetische zukünftige Experimente. Berechnete Leistungsanalyse-Software (siehe Abbildungen 5 und 6). Tabelle zeigt die Anzahl der Ratten pro Gruppe für eine Zwei-Gruppen-Experiment benötigt, um ein 25%, 50% und 75% ige Reduktion der Läsion Volumen an jedem der Zeitpunkte in dieser Studie festzustellen.

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Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability

Hier präsentieren wir ein Protokoll permanent distalen mittleren Hirnarterie bei älteren weiblichen Ratten bei gleichzeitiger Verschluss der Halsschlagadern zu produzieren große kortikale Infarkte und anhaltende Defizite zu erzeugen. Wir zeigen die Bestätigung der Größe der Läsion mit strukturellen MRT bei 24 Stunden und 8 Wochen nach dem Schlaganfall.

Darstellende Permanent Distal cerebri mit Arteria carotis communis Occlusion bei alten Ratten zu studieren kortikale Ischämie mit anhaltenden Behinderungs

Stroke typically occurs in elderly people with a range of comorbidities including carotid (or other arterial) atherosclerosis, high blood pressure, ...

Research

JoVE Journal

Medicine

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There is accumulating evidence, that ischemic preconditioning - a non-damaging ischemic challenge to the brain - confers a transient protection to a ...

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The translational potential of pre-clinical stroke research depends on the accuracy of experimental modeling. Cerebral perfusion monitoring in animal ...

Permanent Cerebral Vessel Occlusion via Double Ligature and Transection

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Permanent Cerebral Gefäßverschluss<em&gt; Über</em&gt; Double Blattschraube und Durchtrennung

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Modeling Stroke in Mice: Permanent Coagulation of the Distal Middle Cerebral Artery

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