Name: the mouse round-window approach for ototoxic agent delivery: a rapid and reliable technique for inducing cochlear cell degeneration
Uploaded: 2015-11-26T13:00:00
Duration: 12 min 21 s
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This work was supported by National Institutes of Health (NIH) Grant number: NIH P50DC00422 (H.L.); NIH R01DC12058 (H.L.). This work also benefitted from the South Carolina Clinical and Translational Research Institution (SCTR) Clinical and Translational Science Award (NIH/NCRR UL1RR029882). The funders had no role in study design, data collection, and/or analysis. The authors would like to thank Lonnie E. Brown Jr. for his artistic and graphic contributions.

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D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Round+window+membrane+intracochlear+drug+delivery+enhanced+by+induced+advection.">Round window membrane intracochlear drug delivery enhanced by induced advection.</a> Journal of controlled release : official journal of the Controlled Release Society. 174, 171-176 (2014).</li><li>Tadros, S. F., D'Souza, M., Zhu, X., Frisina, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+expression+changes+for+antioxidants+pathways+in+the+mouse+cochlea:+relations+to+age-related+hearing+deficits.">Gene expression changes for antioxidants pathways in the mouse cochlea: relations to age-related hearing deficits.</a> PloS one. 9, e90279 (2014).</li><li>Lang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sox2+up-regulation+and+glial+cell+proliferation+following+degeneration+of+spiral+ganglion+neurons+in+the+adult+mouse+inner+ear.">Sox2 up-regulation and glial cell proliferation following degeneration of spiral ganglion neurons in the adult mouse inner ear.</a> Journal of the Association for Research in Otolaryngology : JARO. 12, 151-171 (2011).</li></ol>

कोई वित्तीय हितों की होड़। लेखकों के पास खुलासे के लिए कुछ भी नहीं है।

ऊपर वर्णित प्रोटोकॉल और प्रतिनिधि परिणाम दोनों लिंग सहित एक CBA / CAJ माउस मॉडल में प्राप्त किया गया। यह जन्मजात तनाव में अच्छी तरह से अनुसंधान सुनवाई में एक &quot;अच्छा सुनवाई&quot; मानक और &quot;सामान्य बुढ़ापे&quot; मॉडल के रूप में स्थापित है। अन्य स्तनधारी मॉडल में इस प्रोटोकॉल के उपयोग की 16-23 विवरण इस पाठ के दायरे से बाहर है। पाठक RWN आवेदन तकनीक स्तनधारी भीतरी कान का अध्ययन करने के लिए कई लाभ प्रदान करता है, तथापि, ध्यान देना चाहिए। इनमें से सबसे उल्लेखनीय यह नाजुक शारीरिक संरचना के प्रत्यक्ष व्यवधान और कान का कैप्सूल की दीवारों के भीतर मौजूद है कि जैव रासायनिक ढ़ाल से बचा जाता है। ऐसे cochleostomy और आसव पंप का आरोपण प्रक्रिया के रूप में सीधे स्थायी सीमा पारियों के लिए अग्रणी भीतरी कान संरचनाओं का उल्लंघन करने के लिए प्रवृत्ति है; परिणामों का विश्लेषण करते समय ध्यान में रखा जाना चाहिए कि एक तथ्य है। आक्रामक metho से कर्णावत पार्श्व दीवार संरचनाओं के विघटनडी एस भी ऐसे जिसका विशिष्ट क्षेत्र प्रभाव के उस स्थान तक ही सीमित है। इस तरह के पार मध्य कर्ण इंजेक्शन और Parenteral इंजेक्शन के रूप में 15,24 वैकल्पिक गैर इनवेसिव दृष्टिकोण अविश्वसनीय परिणामों और से ग्रस्त हो गया है furosemide या heptanol, के रूप में ototoxic एजेंटों के उपयोग को सीमित कर सकता / या पशु मॉडल के लिए प्रणालीगत विषाक्तता। यह आवेदन विधि के ऊपर चर्चा की और अधिक आक्रामक तरीके आ कि स्थिरता का एक स्तर को प्राप्त करने, इन कमियों से दोनों से बचने के लिए साबित कर दी है। इस तकनीक के अन्य लाभ पशु मॉडल और व्यवहार्यता के एक नंबर करने के लिए अपने व्यापक प्रयोज्यता एक मौजूदा प्रयोगशाला बुनियादी ढांचे में शामिल करने के लिए किया जाता है शामिल हैं। बाद के बारे में कोई विशेष अभिकर्मकों या रसायनों चुना ototoxic एजेंटों, निश्चेतक, और दर्दनाशक दवाओं से अलग आवश्यक हैं। Ototoxic एजेंट आमतौर पर विचार के लिए समय की लंबी अवधि के लिए पिछले करने के लिए समाधान (5 एमएल) का एक बड़ा पर्याप्त मात्रा में एक निश्चित एकाग्रता में उपयोग किया और मिश्रित कर रहे हैंप्रत्येक आवेदन आईएनजी (चूहों में) के बारे में 10 μl का उपयोग करता है। इस प्रकार, आपूर्ति और उपकरणों की प्रारंभिक खरीद के बाद, जांचकर्ताओं समय लेने समाधान तैयारी या सामग्री की लगातार प्रतिस्थापन से अपेक्षाकृत स्वतंत्र हैं। इस तकनीक को भी perilymphatic आसव पंप या cochleostomies का आरोपण से जुड़े प्रक्रियाओं की तुलना में जब महत्वपूर्ण हो सकता है, जो ऑपरेटिव समय में कटौती ले सकते हैं। तकनीकी दक्षता का एक स्तर तक पहुँचने पर, बंद करने के लिए प्रारंभिक चीरा से हमारे औसत समापन समय ototoxic एजेंट के लिए वांछित जोखिम की लंबाई पर निर्भर करता है जो आम तौर पर 20 मिनट से 1.5 घंटे की थी। तीन या चार सर्जरी आसानी से वृद्धि की दक्षता और सफल परिणाम प्राप्त करने के लिए वृद्धि की क्षमता के लिए अनुमति देता है, एक ही दिन में पूरा किया जा सकता है। ऊपर वर्णित है, इस तकनीक को भी आसानी से चूहे, चूहे, गिनी सूअरों और gerbils सहित कृंतक मॉडल की एक किस्म के लिए लागू किया जा सकता है। इस विधि की सीमाओं पर केंद्रित कर रहे हैंमामूली तेजी से सीखने की अवस्था में यह गुरु की जरूरत है और तकनीकी दक्षता तक पहुँच जाता है, परिणाम की उम्मीद कम किया है। नीचे अधिक से अधिक विस्तार से चर्चा की जाएगी के रूप में, शल्य दृष्टिकोण या शल्य चिकित्सा क्षेत्र की अपर्याप्त दृश्य के दौरान छोटी त्रुटियों लगभग हमेशा एक गरीब परिणाम को बढ़ावा मिलेगा। ऐसे एजेंट गिराए दौर खिड़की झिल्ली या मध्य द्रव के लिए एजेंट का एक उप मिलीमीटर मोटी हवा बुलबुला अवरुद्ध उपयोग के रूप में एक नौसिखिया पहचान करने के लिए विफल हो सकता है कि सूक्ष्म निष्कर्ष, सराहना करते हैं और उन्हें दूर करने के लिए आवश्यक psychomotor कौशल विकसित करने के लिए समय ले लो। हालांकि, इन बाधाओं को आसानी से दूर किया है और ऊपर उल्लिखित आक्रामक तरीके की तुलना में कुछ जांचकर्ताओं के लिए एक कम चुनौतीपूर्ण तकनीकी चुनौती का गठन कर रहे हैं प्रक्रिया के बार-बार के प्रदर्शन के साथ। अंत में, इस तकनीक कर्णावत चोट केवल शल्य प्रदर्शन के दौरान समय में एक भी बिंदु पर प्रेरित किया जा सकता है कि रिश्तेदार सीमा के साथ जुड़ा हुआ है। यह कुछ हद तक दूर किया जा सकता, Heydt एट अल द्वारा वर्णित किया गया था के रूप में एजेंट में भिगो absorbable जिलेटिन स्पंज के साथ RWN भरने के द्वारा। 10 absorbable जिलेटिन स्पंज समय के साथ resorb होगा, लेकिन अकेले एक जलीय समाधान के आवेदन के माध्यम से प्राप्त किया है की तुलना में अब जोखिम अवधि के लिए अनुमति दे सकता है। इस तकनीक का पूरा लाभ का एहसास है और किसी भी नुकसान से बचने के लिए एक अन्वेषक के लिए आदेश में, यह इस तकनीक के दो महत्वपूर्ण तत्वों को पहचान करने के लिए महत्वपूर्ण है: 1) लगातार मध्य कान अंतरिक्ष और RWN के दृश्य बनाए रखने; और 2) क्षमता मध्य द्रव और / या रक्त के मुक्त शल्य चिकित्सा क्षेत्र में रखने के लिए। इनमें से पूर्व प्राप्त करने में, एक उचित सिर-धारक के महत्व पर बल से अधिक नहीं हो सकता है। पशु के सिर का सुरक्षित निर्धारण खुर्दबीन के नीचे एक स्थिर दृश्य सुनिश्चित करता है; सूक्ष्म इंस्ट्रूमेंटेशन काफी वृद्धि के तहत संरचनाओं की स्थिति में परिवर्तन जब जो के महत्व को आसानी से स्पष्ट हो जाता है। एक अच्छा जजानवर के व्याख्यान चबूतरे वाला दुम धुरी के बारे में बारी बारी से कर सकते हैं कि EAD धारक भी साइट के अन्वेषक की लाइन में महत्वपूर्ण गतिशील परिवर्तन की सुविधा। अक्सर, इस धुरी के बारे में रोटेशन के कुछ मिलीमीटर RWN के दृश्य और केवल कान का कैप्सूल हड्डी के दृश्य के बीच का अंतर हो सकता है। लगातार दृश्य को बदलने की क्षमता भी ठीक से आला की और गहराई से निकाल दिया जाता है मध्य द्रव सुनिश्चित करने के लिए सर्वोपरि है भी हमारे अनुभव, रक्त, संक्षेपण, या मध्य द्रव में भाग 5. के रूप में चर्चा ototoxic एजेंट पूरी तरह से अनुप्रयोगों के बीच निकाल दिया जाता है कि कि मध्य कान अंतरिक्ष पूरे प्रयोग के मामले में हस्तक्षेप करने की क्षमता है में प्रवेश करती है। Ototoxic एजेंट की छोटी राशि आसानी से बाहरी तरल पदार्थ की भी थोड़ी मात्रा के साथ संपर्क में आने से पतला किया जा सकता दौर खिड़की (~ 10 μl) के लिए आवेदन किया है, क्योंकि यह आश्चर्य की बात नहीं है। इस कारण से, सूक्ष्म शल्य विच्छेदन, मध्य कर्ण बुल्ला और सावधान preservat के टुकड़ों uncappingstapedial धमनी के आयन एक सफल प्रायोगिक परिणामों के लिए समान हैं। ऊपर महत्वपूर्ण कदम मनाया जाता है और उम्मीद परिणामों अभी भी हासिल नहीं कर रहे हैं, तो समस्या निवारण शुरू करना चाहिए। हमारे अनुभव में, यह दो प्रक्रियात्मक तत्वों का परीक्षण विविधताओं के प्रदर्शन के लिए उपयोगी है। पहले ototoxic एजेंट दौर विंडो में मंगाया जाता है जिसके साथ आवृत्ति को संशोधित करने के लिए है। इस्तेमाल किया जा रहा एजेंट पर निर्भर करता है, कुल निवेश का समय पूरा बाती और एजेंट हर 10 मिनट के बाद के प्रतिस्थापन के साथ, 30 मिनट और 1 घंटे के बीच है। छोटी अवधि के लिए उजागर करते हैं, तो समग्र निवेश बढ़ाने एजेंट अधिक समय दौर खिड़की झिल्ली भर में फैलाना करने की अनुमति हो सकती है। अतिरिक्त जोखिम और भरपाई भी ऊपर चर्चा के रूप में रक्त, संक्षेपण, या मध्य द्वारा ototoxic एजेंट के अवांछित कमजोर पड़ने से बचने के लिए मदद मिल सकती है। इस दृष्टिकोण का उपयोग करते समय यह अनजाने का खतरा बढ़ जाता है के रूप में सावधानी, तथापि, बनाए रखा जाना चाहिएLy stapedial धमनी घायल हो गए और / या RWN करने के लिए मध्य द्रव शुरू। इस तकनीक को यह कर्णावत शरीर विज्ञान और pathophysiology की जांच करने के लिए क्या प्रदान करता है में महत्वपूर्ण है। यह न्यूनतम इनवेसिव तकनीक नाजुक जैव रासायनिक प्रक्रियाओं का विस्तृत अध्ययन की अनुमति देता है और कर्णावत पुनर्योजी क्षमता का आकलन करने के उद्देश्य से हमारे अनुसंधान को आगे बढ़ाने में समान हो गया है। 12,24 यह शल्य दृष्टिकोण और जोखिम भी अन्य शाखा तकनीक की एक किस्म भर में reproduced है, और सफल परिणाम इस का उपयोग विधि कर्णावत स्टेम सेल आरोपण के अध्ययन में बताया गया है। 14 एक बड़ा सौदा हालांकि, जांचकर्ताओं के लिए उपलब्ध व्यापक साधन के साथ-साथ इस तकनीक का, इस ज्ञान का अंतर कम करने में सहायता करेंगे, कोक्लीअ के बारे में अनजान बनी हुई है।

जांचकर्ता श्रवण प्रणाली के सामान्य कार्य के साथ ही सुनवाई हानि के pathophysiology अध्ययन करने के लिए पशु मॉडल की एक विस्तृत सरणी का इस्तेमाल किया है। इन मॉडलों को भी विभिन्न वैकृत प्रक्रियाओं के खिलाफ हस्तक्षेप अध्ययन के संचालन के लिए अत्यधिक उपयोगी होते हैं और मानव विषयों में translational अनुप्रयोगों के लिए नींव के रूप में सेवा करते हैं। कोक्लीअ और उसके संबंधित श्रवण रास्ते से जुड़े ज्यादातर अनुसंधान के लिए, क्षति या विघटन के कुछ डिग्री व्यवस्था करने के लिए पेश किया जाना चाहिए। अक्सर, नुकसान जानबूझकर जांचकर्ताओं सामान्य कार्य पर कि घाव, साथ ही यह से उबरने के लिए कर्णावत क्षमता के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए अनुमति देता है, एक विशिष्ट घाव पैदा करने के उद्देश्य से है। नुकसान को शुरू करने के लिए एक विशेष जानवर मॉडल और / या तकनीक (एस) का चयन करते हैं, कारकों की एक संख्या सबसे अच्छा संभव परिणाम प्राप्त करने के लिए विचार किया जाना चाहिए। एक तकनीक का प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष प्रभाव हो सकता है, जबकि विभिन्न पशु मॉडल, हस्तक्षेप करने के लिए अलग तरह से प्रतिक्रिया हो सकती हैवांछित परिणाम के लिए पूरी तरह से हानिकारक। ज्यादातर मामलों में, आदर्श भीतरी कान क्षति प्रोटोकॉल तेजी, प्रणालीगत विषाक्तता से बचने और मज़बूती से क्षति का उत्पादन, एक सटीक और सुसंगत घाव बनाने के लिए, और, कार्यात्मक सेलुलर और आणविक परिवर्तन के आगे के अध्ययन के लिए अनुमति देने के लिए survivable होगा। आदर्श रूप में, इन तरीकों में भी संभव सबसे बड़ी हद तक कोक्लीअ के नाजुक माइक्रोआर्किटेक्चर और विद्युत ढ़ाल रक्षा करेगा। तिथि करने के लिए, जांचकर्ताओं भीतरी कान चोट प्रेरित करने के लिए तकनीकों का एक नंबर स्थापित करने में सफल रहा है। इनमें से अधिकांश या तो प्रणालीबद्ध या शल्य दृष्टिकोण के माध्यम से एक ototoxic एजेंट को कोक्लीअ को उजागर करना पड़ेगा। तकनीक perilymphatic छिड़काव के साथ पैरेंट्रल इंजेक्शन, इंट्रा-पेरिटोनियल इंजेक्शन, ट्रांस-मध्य कर्ण इंजेक्शन, अन्त: कर्णोदकीय थैली इंजेक्शन, और cochleostomy शामिल हैं। इन तकनीकों में इस तरह के furosemide, जेंटामाइसिन, ouabain, और heptanol रूप ototoxic एजेंटों की एक किस्म को पेश करने के लिए इस्तेमाल किया गया है। 1-5विशिष्ट कर्णावत घावों बनाने में सफल है, जबकि ऊपर की तकनीक भी सीमाओं को स्वीकार किया है। प्रणालीगत इंजेक्शन जानवर को अत्यधिक विषाक्त हो सकता है और अनायास ही कर्णावत अपमान और असंगत परिणामों के साथ जुड़ा हो सकता है। उत्तरार्द्ध कमी भी ट्रांस-मध्य कर्ण इंजेक्शन के साथ संबद्ध किया गया है। ऐसे cochleostomy और perilymphatic छिड़काव के रूप में तकनीक, तेजी से और अत्यंत विश्वसनीय घावों उत्प्रेरण के लिए सक्षम है, जबकि भीतरी कान की संरचना और कार्य करने के लिए सीधे आक्रामक हैं। शल्य दृष्टिकोण के कई लोग भी तकनीकी कठिनाई का एक उच्च डिग्री के साथ जुड़े रहे हैं और इस तरह के एक micropump Infuser के रूप में पशु में विदेशी वस्तुओं, छोड़ने की आवश्यकता हो सकती है। 2-4,6-8 कोई भी तकनीक कमियों से मुक्त है, और जांचकर्ताओं का चयन करना होगा तरीकों को ध्यान से उनकी प्रयोगात्मक जरूरतों को फिट करने के लिए। यहाँ, हम विस्तार में, वयस्क चूहों में ototoxic एजेंटों की सामयिक वितरण के लिए, गोल खिड़की आला (RWN) आवेदन तकनीक का वर्णन है। फाईएक एवियन मॉडल में संवेदी बाल सेल अध: पतन पर जेंटामाइसिन के प्रभाव का अध्ययन करते हुए आरएसटी 1998 में अल HUSMANN एट द्वारा वर्णित है, इस तकनीक से जुड़े विषाक्तता से परहेज करते हुए, प्रणालीगत जेंटामाइसिन आवेदन की तुलना में काफी अधिक विश्वसनीय घावों के उत्पादन में सक्षम होना पाया गया। 9 तब से, एक हमारी प्रयोगशाला सहित अन्य जांचकर्ताओं की संख्या, महान सफलता के लिए इस तकनीक का उपयोग किया है। 2004 में, Heydt एट अल। एक माउस मॉडल करने के लिए इसे अनुकूलित और जेंटामाइसिन की सांद्रता बदलती में भिगो absorbable जिलेटिन स्पंज के साथ RWN भरने से घाव आकार को नियंत्रित करने के लिए एक बढ़ाया क्षमता का वर्णन किया। 10 एट अल।, 2010 में, बीटा-Bungarotoxin की ototoxic प्रभाव का अध्ययन Palmgren, एक शक्तिशाली ताइवान के जहर में तत्व वयस्क चूहों के RWN करने के लिए यह एक जलीय प्रपत्र को लागू करने से, टोकरा बंधी। 11 इसके अलावा, हमारी प्रयोगशाला से पिछले अध्ययनों में से एक नंबर furosemid की ototoxic प्रभाव का अध्ययन करने के लिए गोल खिड़की दृष्टिकोण का उपयोग किया हैई, ouabain, और heptanol। इन अध्ययनों के 5,6,12-15 परिणाम कर्णावत तरल पदार्थ और सामान्य सुनवाई पर आयन homeostasis के महत्व का प्रदर्शन किया है, सर्पिल नाड़ीग्रन्थि और कर्णावत पार्श्व दीवार में सेल proliferative क्षमता की खोज की है, और के बारे में हमारी समझ को आगे बढ़ाया उम्र से संबंधित सुनवाई हानि। निम्नलिखित दृष्टिकोण शल्य चिकित्सा द्वारा एक postauricular चीरा और बोनी मध्य कर्ण बुल्ला की आंशिक unroofing के माध्यम से मध्य कान तक पहुँचने शामिल है। यह एक चयनित ototoxic एजेंट सीधे लागू किया जा सकता है जो करने के लिए RWN और झिल्ली के उत्कृष्ट प्रदर्शन के लिए अनुमति देता है। तरल एजेंट तो RWN के कप की तरह खोखला में पूल (या धीरे-धीरे RWN में पैक एक संतृप्त absorbable जिलेटिन स्पंज वाहक से नालियों) और कर्णावत बरोठा की perilymphatic अंतरिक्ष में गोल खिड़की झिल्ली के माध्यम से diffuses। कोई प्रत्यक्ष cochleostomy इस दृष्टिकोण में किया जाता है। इस तकनीक का लाभ भीतरी कान माइक्रोआर्किटेक्चर, परिहार के संरक्षण में शामिलइंट्रा-पशु नियंत्रण कान के प्रणालीगत विषाक्तता, भत्ता की, प्रभाव के शीघ्र शुरू होने, कुछ कर्णावत प्रकार की कोशिकाओं में चयनात्मक अध: पतन (जैसे।, प्रकार मैं ouabain जोखिम और कर्णावत प्रकार heptanol के उपचार से प्रेरित द्वितीय fibrocytes साथ नाड़ीग्रन्थि न्यूरॉन्स सर्पिल), और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य / विश्वसनीय परिणाम है। इस तकनीक चूहों, गिनी सूअरों, और gerbils सहित अन्य कृंतक प्रजातियों के बीच कुछ परिवर्तन के साथ लागू किया जा सकता है। कमियां एक खड़ी तकनीकी सीखने की अवस्था और समय में एक ही बात करने के लिए विवश है कि ototoxic अपमान के रिश्तेदार सीमा में शामिल हैं।

&#160;
<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td rowspan="2">1-Heptanol 98%</td>
			<td rowspan="2">Sigma-Aldrich</td>
			<td>H2805&#160;</td>
			<td rowspan="2"><a>PubChem Substance ID 24895536</a></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>250ML</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketaset Injectable&#160;</td>
			<td rowspan="2">Patterson Veterinary</td>
			<td>07-803-6637&#160;</td>
			<td>Concentrate 100mg/ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>(Ketamine HCl)</td>
			<td>10ml</td>
			<td>Schedule CIII controlled substance</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anased Injectable</td>
			<td rowspan="2">Lloyd Laboratories</td>
			<td>NADA# 139-236</td>
			<td rowspan="2">Concentrate 20mg/ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>(Xylazine)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenex Injectable&#160;</td>
			<td rowspan="2">Patterson Veterinary</td>
			<td>07-850-2280&#160;</td>
			<td>Concentrate 0.3mg/ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>(Buprenorphine HCl)</td>
			<td>5 ampules per box</td>
			<td>Schedule CIII controlled substance</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine Skin Prep Solution</td>
			<td rowspan="2">Medline</td>
			<td><a href="http://www.medline.com/sku/item/MDPMDS093941;ecomsessionid=1UZWKxhkYkuy9vK2NXBaBA__">MDS093941&#160;</a></td>
			<td rowspan="2">1 Quart screw top bottle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>(Povidone-Iodine)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.9% Sterile Saline</td>
			<td>Variable</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For mixing solutions and injections</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="4">Table of Equipment, Surgical Instruments, and Specific Techniques</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Material Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalogue Number</td>
			<td>Comments (optional)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operating Microscope</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td>32192</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Controlled Acoustics Environment Sound Booth</td>
			<td>Industrial Acoustics Company</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">Surgical Head Holder</td>
			<td>Custom Made &#8211;&#160;</td>
			<td rowspan="2">Please see Figure 3</td>
			<td rowspan="2"></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical University of South Carolina</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="3">Neck Soft-Tissue Retractor (Wire Speculum, Titanium) 1.75inch</td>
			<td rowspan="3">World Precision Instruments</td>
			<td rowspan="3">555801L</td>
			<td>Maximum spread 20mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Embedded in disposable putty to affix dynamically to head holder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>90N Dental Belt Driven Hand Drill&#160;</td>
			<td>Emesco</td>
			<td>N/A (Vintage Item)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel Handle Size6</td>
			<td>Bard-Parker</td>
			<td>MEDC-011990</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">#15c Stainless Steel Surgical Scalpel Blade&#160;</td>
			<td>Bard-Parker</td>
			<td rowspan="2">SKU: 097-7215</td>
			<td rowspan="2">50 Blades/Box</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Via ACE Surgical Supply Code</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight Tip Jewelers Forceps&#160;</td>
			<td>Bernell</td>
			<td>MIL17304</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris Scissors Curved</td>
			<td>Medline</td>
			<td><a href="https://www.medline.com/sku/item/MDPDYND04026;ecomsessionid=ozXzkfIx-tj0MIi8FkGQ0A__">DYND04026&#160;</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris Scissors Straight</td>
			<td>Medline</td>
			<td><a href="http://www.medline.com/sku/item/MDPDYND04025;ecomsessionid=+43JREOby+Mfz6IIgoSg5A__">DYND04025&#160;</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stevens Tenotomy Scissors Straight</td>
			<td>Medline</td>
			<td><a href="http://www.medline.com/sku/item/MDPMDG3222111">MDG3222111&#160;</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rosen Ear Needle Straight Shaft, Lightly Curved Tip</td>
			<td>MytaMed</td>
			<td>Item# 6.56.00</td>
			<td>Figure 1 demonstrates angled shaft picks. This was later substituted for the Rosen picks</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rosen Ear Needle Straight Shaft, Strongly Curved Tip</td>
			<td>MytaMed</td>
			<td>Item# 6.56.01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">Kimwipes Delicate Task Wipers&#160;</td>
			<td rowspan="2">Kimtech Science</td>
			<td rowspan="2">CODE 34155&#160;</td>
			<td rowspan="2">White, Size 4.4x8.4 Inch. Cut to triangles and rolled into fine tip wicks.</td>
		</tr>
		<tr>
		</tr>
		<tr>
			<td>House Ear Curette, 6&#8221; shaft, light angle</td>
			<td>Medline</td>
			<td><a href="https://www.medline.com/sku/item/MDPMDG0396486">MDG0396486&#160;</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gelfoam (absorbable gelatin sponge) Size 100</td>
			<td>Medline</td>
			<td><a href="https://www.medline.com/sku/item/MDPIIS34201">IIS34201&#160;</a></td>
			<td>Substitutions may be made</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton pellets #3 4mm</td>
			<td>Richmond</td>
			<td>Manufacturer Code 100108</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ElectroSurgical Unit 100 E M/M</td>
			<td>Elmed</td>
			<td>List No. 52-5770</td>
			<td>Bipolar and Monopolar Capable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1cc U-100 Insulin Syringe 28G, 0.5&#8221; length needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>Product Number: 329410</td>
			<td>Optional for delivery of Ototoxic agent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>23G, blunt tip, 1&#8221; length needle</td>
			<td>Kendall</td>
			<td>Product Code 8881202397</td>
			<td>For controlled delivery of Ototoxic agent with less risk of damaging stapedial artery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Mask</td>
			<td>U-line</td>
			<td>S-10478</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Exam Grade Nitrile Surgical Gloves</td>
			<td>U-line</td>
			<td><a href="http://www.uline.com/Product/Detail/S-12549/Nitrile-Gloves/Nitrile-Exam-Gloves-Powder-Free">S-12549</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precision Hair Clippers</td>
			<td>Wahl</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Multiple models may be substituted</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5-0 Nylon black monofilament suture on PC-1&#160;13mm 3/8 circle needle</td>
			<td>Ethilon</td>
			<td>1855G</td>
			<td>Substitutions may be made.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">Instant Sealing Sterilization Pouch</td>
			<td rowspan="2">Fisher</td>
			<td rowspan="2">01-812054</td>
			<td rowspan="2"></td>
		</tr>
		<tr>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="3">Dry Sterilizer</td>
			<td rowspan="3">ROBOZ</td>
			<td rowspan="3">Germinator TM 500</td>
			<td rowspan="3"></td>
		</tr>
		<tr>
		</tr>
		<tr>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the mouse round-window approach for ototoxic agent delivery: a rapid and reliable technique for inducing cochlear cell degeneration

Investigators have utilized a wide array of animal models and investigative techniques to study the mammalian auditory system. Much of the basic research involving the cochlea and its associated neural pathways entails exposure of model cochleae to a variety of ototoxic agents. This allows investigators to study the effects of targeted damage to cochlear structures, and in some cases, the self-repair or regeneration of those structures. Various techniques exist for delivery of ototoxic agents to the cochlea. When selecting a particular technique, investigators must consider a number of factors, including the induction of inadvertent systemic toxicity, the amount of cochlear damage produced by the surgical procedure itself, the type of lesion desired, animal survivability, and reproducibility/reliability of results. Currently established techniques include parenteral injection, intra-peritoneal injection, trans-tympanic injection, endolymphatic sac injection, and cochleostomy with perilymphatic perfusion. Each of these methods has been successfully utilized and is well described in the literature; yet, each has various shortcomings. Here, we present a technique for topical application of ototoxic agents directly to the round window niche. This technique is non-invasive to inner ear structures, produces rapid onset of reliably targeted lesions, avoids systemic toxicity, and allows for an intra-animal control (the contra-lateral ear). Results stemming from this approach have helped deeper understanding of auditory pathophysiology, cochlear cell degeneration, and regenerative capacity in response to an acute injury. Future investigations may use this method to conduct interventional studies involving gene therapy and stem cell transplantation to combat hearing loss.

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The Mouse Round-window Approach for Ototoxic Agent Delivery: A Rapid and Reliable Technique for Inducing Cochlear Cell Degeneration

Various methods exist for introducing ototoxic agents to the cochleae of animal models. Presented is a surgical protocol for delivery of ototoxic agents to the round window niche. The procedure is reliable, creates targeted intra-cochlear lesions, and avoids mechanical damage to the microarchitecture. Examination of cochlear self-repair/regeneration is possible.

कर्णावत सेल अध: पतन उत्प्रेरण के लिए एक तेजी से और विश्वसनीय तकनीक: ototoxic एजेंट प्रसव के लिए माउस राउंड खिड़की दृष्टिकोण

Investigators have utilized a wide array of animal models and investigative techniques to study the mammalian auditory system. Much of the basic research ...

Research

JoVE Journal

Medicine

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ट्राएर मनोवैज्ञानिक तनाव उत्प्रेरण के लिए सामाजिक तनाव टेस्ट प्रोटोकॉल

This article demonstrates a psychological stress protocol for use in a laboratory setting.  Protocols that allow researchers to study the biological ...

The &alpha;-test: Rapid Cell-free CD4 Enumeration Using Whole Saliva

The ÃƒÅ½Ã‚Â±-test: Rapid Cell-free CD4 Enumeration Using Whole Saliva

α परीक्षण: रैपिड सेल मुक्त सीडी 4 पूरे लार का प्रयोग गणन

There is an urgent need for affordable CD4 enumeration to monitor HIV disease. CD4 enumeration is out of reach in resource-limited regions due to the time ...

High Throughput Characterization of Adult Stem Cells Engineered for Delivery of Therapeutic Factors for Neuroprotective Strategies

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Mesenchymal stem cells (MSCs) derived from bone marrow are a powerful cellular resource and have been used in numerous studies as potential candidates to ...

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