Name: using confocal analysis of xenopus laevis to investigate modulators of wnt and shh morphogen gradients
Uploaded: 2015-12-14T13:00:00
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एक बीबीएसआरसी द्वारा वित्त पोषित किया गया यह काम (बी बी / H010297 / 1), खोज एवं बचाव के लिए एक बीबीएसआरसी कोटा छात्रवृत्ति, और swf करने के लिए एक एमआरसी छात्रवृत्ति एमईपी को अनुदान।

आचार बयान: पशु प्रयोगों एमईपी को एक ब्रिटेन के गृह मंत्रालय लाइसेंस के तहत किया गया था और बाहर ले गए प्रयोगों आने के अनुपालन में विश्वविद्यालय न्यूयॉर्क की आचार समिति द्वारा अनुमोदित किया गया था: दिशा?...

<ol>
	<li>Shen, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nodal+signaling:+developmental+roles+and+regulation.">Nodal signaling: developmental roles and regulation.</a> Development. 134 (6), 1023-1034 (2007).</li><li>Shimmi, O., Newfeld, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+insights+into+extracellular+and+post-translational+regulation+of+TGF-beta+family+signalling+pathways.">New insights into extracellular and post-translational regulation of TGF-beta family signalling pathways.</a> J Biochem. 154 (1), 11-19 (2013).</li><li>Pownall, M. E., Isaacs, H. 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On assumptions for hypothesis tests and multiple interpretations of decision rules.</a> Statistical Surveys. 4, 1-39 (2010).</li><li>Christian, J. L., McMahon, J. A., McMahon, A. P., Moon, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Xwnt-8,+a+Xenopus+Wnt-1+/int-1-related+gene+responsive+to+mesoderm-inducing+growth+factors,+may+play+a+role+in+ventral+mesodermal+patterning+during+embryogenesis.">Xwnt-8, a Xenopus Wnt-1 /int-1-related gene responsive to mesoderm-inducing growth factors, may play a role in ventral mesodermal patterning during embryogenesis.</a> Development. 111 (4), 1045-1055 (1991).</li><li>Du, S. J., Purcell, S. M., Christian, J. L., McGrew, L. L., Moon, R. 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H., Hagemann, A., Gonzalez-Gaitan, M., Smith, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualizing+long-range+movement+of+the+morphogen+Xnr2+in+the+Xenopus+embryo.">Visualizing long-range movement of the morphogen Xnr2 in the Xenopus embryo.</a> Current Biology. 14 (21), 1916-1923 (2004).</li><li>McDowell, N., Zorn, A. M., Crease, D. J., Gurdon, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activin+has+direct+long-range+signalling+activity+and+can+form+a+concentration+gradient+by+diffusion.">Activin has direct long-range signalling activity and can form a concentration gradient by diffusion.</a> Current Biology. 7 (9), 671-681 (1997).</li><li>Chen, Y., Schier, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+zebrafish+Nodal+signal+Squint+functions+as+a+morphogen.">The zebrafish Nodal signal Squint functions as a morphogen.</a> Nature. 411 (6837), 607-610 (2001).</li><li>Miller, J. R., Rowning, B. A., Larabell, C. A., Yang-Snyder, J. A., Bates, R. L., Moon, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+the+dorsal-ventral+axis+in+Xenopus+embryos+coincides+with+the+dorsal+enrichment+of+dishevelled+that+is+dependent+on+cortical+rotation.">Establishment of the dorsal-ventral axis in Xenopus embryos coincides with the dorsal enrichment of dishevelled that is dependent on cortical rotation.</a> Journal of Cell Biology. 146 (2), 427-437 (1999).</li><li>Schohl, A., Fagotto, F. B. e. t. a. -. c. a. t. e. n. i. n. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MAPK+and+Smad+signaling+during+early+Xenopus+development.">MAPK and Smad signaling during early Xenopus development.</a> Development. 129 (1), 37-52 (2002).</li><li>Muller, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+diffusivity+of+Nodal+and+Lefty+underlies+a+reaction-diffusion+patterning+system.">Differential diffusivity of Nodal and Lefty underlies a reaction-diffusion patterning system.</a> Science. 336, 721-724 (2012).</li><li>Yu, S. R., Burkhardt, M., Nowak, M., Ries, J., Petrasek, Z., Scholpp, S., Schwille, P., Brand, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fgf8+morphogen+gradient+forms+by+a+source-sink+mechanism+with+freely+diffusing+molecules.">Fgf8 morphogen gradient forms by a source-sink mechanism with freely diffusing molecules.</a> Nature. 461, 533-536 (2009).</li><li>Janda, C. Y., Waghray , D., Levin, A. M., Thomas, C., Garcia, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structural+basis+of+Wnt+recognition+by+Frizzled.">Structural basis of Wnt recognition by Frizzled.</a> Science. 337, 59-64 (2012).</li><li>Sive, H. L., Grainger, R. M., Harland, R. 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इस प्रोटोकॉल का एक अनिवार्य हिस्सा आम तौर पर, संसाधित स्रावित, और संलग्न एक फ्लोरोसेंट आधा भाग होने के बावजूद प्राप्त सेल में एक प्रतिक्रिया प्रकाश में लाना करने में सक्षम हैं कि जैविक रूप से सक्रिय ligand...

जल्दी भ्रूण के विकास के दौरान कोशिकाओं उत्तरोत्तर भेदभाव की विशिष्ट प्रजातियों का पालन करने के लिए प्रतिबद्ध हैं: इस totipotent (या pluripotent) एक प्रकार की कोशिका को जन्म देने के लिए चुना गया पूर्वज कोशिकाओं की आबादी की स्थापना के लिए धीरे-धीरे ही सीमित हो जाते हैं कोशिकाओं का एक समूह होता है। सेल सेल संकेतन भ्रूण के विकास के दौरान वंश विनिर्देश के नियमन के लिए केंद्रीय है। इन संकेतों के हेरफेर उपन्यास चिकित्सा उपचार का समर्थन करने के लिए विशेष रूप से भाग्य की ओर स्टेम कोशिकाओं को निर्देशित करने के लिए आवश्यक हो जाएगा। रास्ते संकेतन की एक अपेक्षाकृत छोटी संख्या TGF superfamily (nodals और BMPs) 1-2, FGFs 3, Wnts 4, और hedgehogs 5 का जवाब रास्ते सहित विकास के दौरान इस बात को दोहराया जाता है। ये स्रावित प्रोटीन जिससे जीन अभिव्यक्ति और / या सेल व्यवहार में फेरबदल संकेत पारगमन को सक्रिय करने की कोशिका झिल्ली पर उपस्थित रिसेप्टर्स बाँध। सेल साइन की तंग विनियमनAlling सेल वंश विनिर्देश और सामान्य विकास के लिए आवश्यक है। इन रास्ते के बीच परस्पर बात सेल भाग्य का निर्धारण करने में महत्वपूर्ण है, एक भी ligand खुद को अलग सांद्रता में अलग प्रतिक्रियाओं प्रकाश में लाना कर सकते हैं। Morphogen ढ़ाल प्रकार की कोशिकाओं कोशिकाओं 6 के एक क्षेत्र से प्राप्त कर सकते हैं कि किस तरह अलग समझाने के लिए एक सिद्धांत के रूप में 100 से अधिक साल पहले वर्णित किया गया। कोशिकाओं के एक समूह द्वारा उत्पादित अणुओं सिग्नलिंग स्रोत से अधिक दूरी के साथ एकाग्रता में कमी, एक निश्चित सीमा से अधिक फैलाना सकता है। संकेत करने के लिए संपर्क में कोशिकाओं अलग पदों पर कोशिकाओं संकेत के विभिन्न स्तरों के लिए अलग जवाब के साथ कोशिकाओं के क्षेत्र में अपनी स्थिति पर स्थानीय एकाग्रता का जवाब देंगे। Morphogens के अस्तित्व के लिए साक्ष्य जल्दी ड्रोसोफिला भ्रूण 7 और पंख डिस्क 8, साथ ही कशेरुकी अंग 9 और न्यूरल ट्यूब 10 के अध्ययन से आता है। के तरीके में करने की जरूरत हैस्थापित कर रहे हैं कि कैसे morphogen ढ़ाल vestigate और इन ढ़ाल को विनियमित करने में महत्वपूर्ण अन्य अणुओं की पहचान करने के लिए। विभिन्न आनुवंशिक पृष्ठभूमि के संदर्भ में इन विवो में अंतर्जात प्रोटीन कल्पना करने immunohistochemistry का उपयोग सुरुचिपूर्ण प्रयोगों morphogen ढ़ाल 11-12 जांच करने के लिए इस्तेमाल किया गया है। लेकिन, अच्छी एंटीबॉडी और विशिष्ट म्यूटेंट हमेशा उपलब्ध नहीं हैं, इसलिए हम एक वैकल्पिक, exogenous जीन उत्पादों की कोशिकाओं के एक क्षेत्र भर में ligands के वितरण को प्रभावित कर सकते हैं कि कैसे काटना करने के लिए सरल तरीका प्रदान करने के लिए, Xenopus में फ्लोरोसेंट ligands की overexpression प्रयोग कर के एक प्रोटोकॉल का वर्णन है। Xenopus laevis वे शुरुआती दौर में पहुंच रहे हैं तो उनके भ्रूण बाह्य विकास के रूप में प्रयोगों के इन प्रकार के कार्य करने के लिए एक उत्कृष्ट प्रणाली प्रदान करता है। वे (अभी भी लगभग 20 अपेक्षाकृत बड़े हैं के रूप में अपने बड़े आकार (व्यास में 1-1.5mm) microinjection और शल्य चिकित्सा हेरफेर को सरल और ब्लासटुला चरणों द्वारा कोशिकाओं की छवि के लिए आसान कर रहे हैं81;) भर में हूँ। Xenopus में overexpression पढ़ाई करने के लिए सरल कर रहे हैं: जल्दी भ्रूण में इंजेक्ट mRNA के विशेष कोशिकाओं को निशाना बनाया जा सकता है और कुशलता से अनुवाद किया है। fluorescently टैग किया Wnt8a / Wnt11b-हा-EGFP निर्माणों pCS2 Wnt8a हा 13, pCS2 Wnt11b हा 14 और EGFP का उपयोग कर उत्पन्न किया गया। हा पेप्टाइड यह जीन उत्पादों दोनों कार्य करने की अनुमति Wnt और EGFP प्रोटीन को अलग करने के लिए एक स्पेसर के रूप में कार्य करने के लिए सोचा है, क्योंकि एक अतिरिक्त आणविक टैग प्रदान करते हैं, लेकिन यह भी करने के लिए ही नहीं है, को शामिल करने के लिए महत्वपूर्ण है। श्श्श के दृश्य के लिए प्रयोग किया जाता है का निर्माण पहले से एक श्श्श-EGFP संलयन प्रोटीन 15 व्यक्त एक ट्रांसजेनिक माउस उत्पन्न करने के लिए इस्तेमाल किया गया था; इस कृपया एंडी मैकमोहन द्वारा प्रदान किया गया। महत्वपूर्ण बात है, सभी निर्माणों के लिए GFP टैग यह प्रसंस्करण के बाद बनाए रखा है कि इस तरह के संकेत अनुक्रम करने के लिए &#39;3 क्लोन है। यह अंतिम प्रोटीन संशोधन के लिए आवश्यक दृश्यों, ऐसे additio भी शामिल है कि यह सुनिश्चित करने के लिए भी जरूरी हैके रूप में लिपिड के एन सिंथेटिक mRNA का prodution के लिए अनुकूलित है जो pCS2 + अभिव्यक्ति वेक्टर में subcloned थे श्श्श और Wnt ligands.The cDNAs के लिए मामला है; यह एक SP6 प्रमोटर और polyadenylation संकेत (http://sitemaker.umich.edu/dlturner.vectors) भी शामिल है। यहाँ वर्णित काम स्राव और fluorescently के प्रसार की तुलना के लिए एक सरल प्रोटोकॉल Wnt और श्श्श ligands टैग किया टैग किया है। सिंथेटिक mRNA का परिभाषित मात्रा में इंजेक्शन के द्वारा, प्रोटोकॉल अलग प्रमोटरों का उपयोग कर विभिन्न वैक्टर से चर अभिव्यक्ति के साथ जुड़े किसी भी समस्याओं circumnavigates। इन तरीकों में हाल ही में श्श्श-EGFP और Wnt8a / Xenopus 16-17 में Wnt11b-हा-EGFP स्राव और प्रसार पर heparan सल्फेट endosulfatase Sulf1 के प्रभाव की जांच करने के लिए लागू किया गया है।

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Agarose</td>
			<td>Melford</td>
			<td>MB 1200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ammonium acetate</td>
			<td>Ambion</td>
			<td>From Megascript SP6 Kit AM 1330</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bicarbonate</td>
			<td>VWR International</td>
			<td>RC-091</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium nitrate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C13961</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cap analog (m7G(5&#39;))</td>
			<td>Applied Biosystems</td>
			<td>AM 8050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloroform</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C 2432</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#160;L-Cysteine hydrochloride monohydrate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C7880</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dNTPs</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>18427-013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>O3690</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>VWR International</td>
			<td>20821.33</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ficoll 400</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F 4375</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiji image J software</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Free download http://fiji.sc/Fiji</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gentamycin</td>
			<td>Melford</td>
			<td>G 0124</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glacial acetic acid</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>A/0400/PB17</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass cover slips, No.1.5&#160;</td>
			<td>Scientific Laboratory Supplies</td>
			<td>22X22-SGJ3015. 22X50-SGJ3030&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass needle puller</td>
			<td>Narishige</td>
			<td>Narishige PC -10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass pull needles</td>
			<td>Drummond Scientific</td>
			<td>3-000-203-G/X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human chronic gonadotropin (HCG)</td>
			<td>Intervet</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isopropanol</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>P/7500/PB17</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lithium chloride (LiCl)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>L-7026</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LSM710 and Zen software (2008-2010)</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Matlab software</td>
			<td>Mathworks</td>
			<td></td>
			<td>http://uk.mathworks.com/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Molecular grade water&#160;</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP 2819-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nail varnish&#160;</td>
			<td>Boots</td>
			<td>Bar code 3600530 373048</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spectrophotometer</td>
			<td>Lab.tech International</td>
			<td>ND-1000 / ND8000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish (55mm)</td>
			<td>VWR International</td>
			<td>391-0865</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenol-chloroform</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P3803</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Photoshop software</td>
			<td>Adobe</td>
			<td>N/A</td>
			<td>http://www.photoshop.com/products</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High fidelity DNA polymerase and buffers&#160;</td>
			<td>Biolabs</td>
			<td>M0530S&#160; Buffer - M0531S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium chloride (KCl)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>P/4280/53</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PVC insulation tape</td>
			<td>Onecall</td>
			<td>SH5006MPK</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gel extraction kit&#160;</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>S28704</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Restriction enzymes buffers</td>
			<td>Roche</td>
			<td colspan="2">SuRE/CUT Buffer Set 11082 035 001</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNAse-free DNAse</td>
			<td>Promega</td>
			<td>ME10A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Steel back single edge blades</td>
			<td>Personna</td>
			<td>66-0403-0000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride (NaCl)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>27810.364</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SP6 transcription kit</td>
			<td>Ambion</td>
			<td>AM1330</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass slides</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>SHE 2505</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris base</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>15504-020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tungsten needles</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>homemade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zen lite software</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Free download&#160; http://www.zeiss.co.uk/microscopy/en_gb/downloads/zen.html</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

using confocal analysis of xenopus laevis to investigate modulators of wnt and shh morphogen gradients

इस प्रोटोकॉल कोशिकाओं की एक क्षेत्र भर में वितरित ligands कल्पना करने के लिए एक विधि का वर्णन है। एक साथ जल्दी भ्रूण में उनकी कोशिकाओं के बड़े आकार के साथ, बहिर्जात प्रोटीन व्यक्त करने में आसानी, Xenopus GFP टैग ligands दृश्यमान करने के लिए एक उपयोगी मॉडल laevis बनाते हैं। सिंथेटिक mRNAs कुशलता से प्रारंभिक चरण Xenopus भ्रूण में इंजेक्शन के बाद अनुवाद कर रहे हैं, और इंजेक्शन के लिए एक एकल कोशिका को निशाना बनाया जा सकता है। ऐसी झिल्ली सीमित आरएफपी के रूप में एक वंश दरियाफ्त के साथ संयुक्त, overexpressed प्रोटीन पैदा कर रहे हैं कि इंजेक्शन सेल (और उसके वंश) आसानी से पीछा किया जा सकता। इस प्रोटोकॉल के उत्पादन के लिए एक विधि के fluorescently इंजेक्ट mRNA से Wnt और श्श्श ligands टैग किया वर्णन करता है। तरीकों मील शामिलबहिर्जनस्तरीय explants (पशु टोपी) और कई नमूने में ligand प्रसार के विश्लेषण के सीआरओ विच्छेदन। Confocal इमेजिंग का उपयोग करके, कोशिकाओं की एक क्षेत्र से अधिक ligand के स्राव और प्रसार के बारे में जानकारी प्राप्त की जा सकती है। Confocal छवियों के सांख्यिकीय विश्लेषण ligand ढ़ाल के आकार पर मात्रात्मक डेटा प्रदान करते हैं। इन विधियों morphogen ढ़ाल के आकार को नियंत्रित कर सकते हैं कि कारकों के प्रभाव का परीक्षण करना चाहते हैं, जो शोधकर्ताओं के लिए उपयोगी हो सकता है।

Fluorescently टैग प्रोटीन व्यक्त पशु टोपी explants की confocal विश्लेषण विभिन्न प्रयोगात्मक शर्तों के तहत ligand के वितरण दृश्यमान करने के लिए एक प्रभावी प्रणाली प्रदान करता है। एक उदाहरण में, GFP के वितरण श्श्श (चित्रा 1)</stron...

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Using Confocal Analysis of Xenopus laevis to Investigate Modulators of Wnt and Shh Morphogen Gradients

पांडुलिपि यहाँ Xenopus में fluorescently टैग ligands के स्राव और प्रसार का विश्लेषण करने के लिए तरीके का एक सरल सेट प्रदान करता है। इस ligand वितरण को संशोधित करने के लिए अन्य प्रोटीन की क्षमता का परीक्षण और morphogen ढ़ाल के विनियमन तंत्र में जानकारी दे सकता है कि प्रयोगों की अनुमति के लिए एक संदर्भ प्रदान करता है।

Confocal विश्लेषण का उपयोग करना<em&gt; Xenopus laevis</em&gt; Wnt और श्श्श Morphogen ढ़ाल के Modulators जांच

This protocol describes a method to visualise ligands distributed across a field of cells. The ease of expressing exogenous proteins, together with the ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Using Confocal Analysis of Xenopus laevis to Investigate Modulators of Wnt and Shh Morphogen Gradients

Understanding Early Organogenesis Using a Simplified In Situ Hybridization Protocol in Xenopus

Understanding Early Organogenesis Using a Simplified In Situ Hybridization Protocol in Xenopus

समझना एक सरलीकृत का प्रयोग अर्ली जीवोत्पत्ति<em&gt; बगल में</emमें&gt; संकरण प्रोटोकॉल<em&gt; Xenopus</em

Organogenesis is the study of how organs are specified and then acquire their specific shape and functions during development.  The Xenopuslaevis embryo ...

Manipulation and In Vitro Maturation of Xenopus laevis Oocytes, Followed by Intracytoplasmic Sperm Injection, to Study Embryonic Development

Manipulation and In Vitro Maturation of Xenopus laevis Oocytes, Followed by Intracytoplasmic Sperm Injection, to Study Embryonic Development

हेरफेर और<em&gt; इन विट्रो</emके&gt; परिपक्वता<em&gt; Xenopus laevis</emIntracytoplasmic शुक्राणु इंजेक्शन द्वारा पीछा&gt; Oocytes, भ्रूण के विकास का अध्ययन करने के लिए

Amphibian eggs have been widely used to study embryonic development. Early embryonic development is driven by maternally stored factors accumulated during ...

Functional Cloning Using a Xenopus Oocyte Expression System

Functional Cloning Using a Xenopus Oocyte Expression System

एक का उपयोग कर कार्यात्मक क्लोनिंग<em&gt; Xenopus</em&gt; Oocyte अभिव्यक्ति प्रणाली

Identification of genes responsible for embryonic induction poses a number of challenges; to name a few, secreted molecules of interest may be low in ...

Loss- and Gain-of-function Approach to Investigate Early Cell Fate Determinants in Preimplantation Mouse Embryos

नुकसान और लाभ के समारोह दृष्टिकोण Preimplantation माउस भ्रूण के प्रारंभिक दिनों में सेल भाग्य अवधारक जांच

 Gene silencing and overexpression techniques are instrumental for the identification of genes involved in embryonic development. Direct target gene ...

Technique to Target Microinjection to the Developing Xenopus Kidney

Technique to Target Microinjection to the Developing Xenopus Kidney

विकसित करने के लिए Microinjection लक्ष्य करने के लिए तकनीक<em&gt; Xenopus</em&gt; किडनी

The embryonic kidney of Xenopus&#160;laevis (frog), the pronephros, consists of a single nephron, and can be used as a model for kidney disease. Xenopus ...

Studying Wnt Signaling During Patterning of Conducting Airways

WNT सिगनल का अध्ययन का आयोजन एयरवेज के patterning के दौरान

Wnt signaling pathways play critical roles during development of the respiratory tract. Defining precise mechanisms of differentiation and morphogenesis ...

Building Finite Element Models to Investigate Zebrafish Jaw Biomechanics

सीमित तत्व मॉडल के निर्माण Zebrafish जबड़ा बायोमैकेनिक्स जांच

Skeletal morphogenesis occurs through tightly regulated cell behaviors during development; many cell types alter their behavior in response to mechanical ...

Visualization and Quantitative Analysis of Embryonic Angiogenesis in Xenopus tropicalis

Visualization and Quantitative Analysis of Embryonic Angiogenesis in Xenopus tropicalis

भ्रूणीय एंजियोजेनेसिस के विज़ुअलाइज़ेशन और क्वांटिटेटिव विश्लेषण<em&gt; ज़ीनोपस ट्रॉपिकलिस</em

Blood vessels supply oxygen and nutrients throughout the body, and the formation of the vascular network is under tight developmental control. The ...

Microinjection of DNA into Eyebuds in Xenopus laevis Embryos and Imaging of GFP Expressing Optic Axonal Arbors in Intact, Living Xenopus Tadpoles

Microinjection of DNA into Eyebuds in Xenopus laevis Embryos and Imaging of GFP Expressing Optic Axonal Arbors in Intact, Living Xenopus Tadpoles

Xenopus laevis भ्रूण में Eyebuds में डीएनए का माइक्रोइंजेक्शन और GFP के इमेजिंग ऑप्टिक Axonal Arbors में बरकरार, रहने वाले Xenopus Tadpoles

The primary visual projection of tadpoles of the aquatic frog Xenopus laevis serves as an excellent model system for studying mechanisms that regulate the ...

Fluorescent Calcium Imaging and Subsequent In Situ Hybridization for Neuronal Precursor Characterization in Xenopus laevis

Fluorescent Calcium Imaging and Subsequent In Situ Hybridization for Neuronal Precursor Characterization in Xenopus laevis

फ्लोरोसेंट कैल्शियम इमेजिंग और उसके बाद सिटू संकरण में ज़ेनोपस लेवेइस में न्यूरोनल अग्रदूत लक्षण वर्णन के लिए

Spontaneous intracellular calcium activity can be observed in a variety of cell types and is proposed to play critical roles in a variety of physiological ...