Name: whole retinal explants from chicken embryos for electroporation and chemical reagent treatments
Uploaded: 2015-09-30T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Whole Retinal Explants from Chicken Embryos for Electroporation and Chemical Reagent Treatments at JoVE.com

The work was supported by Barncancerfonden (PR2013-0104), Swedish Research Council (12187-18-3), &#246;gonfonden, Kronprinsessan Margaretas arbetsn&#228;mnd f&#246;r synskadade, Synfr&#228;mjandets forskningsfond and St Eriks &#246;gonsjukhus forskningsstipendier.

Ce protocole est effectuée en conformité avec les recommandations dans le «Guide pour le soin et l&#39;utilisation des animaux de laboratoire de l&#39;Association pour la recherche en vision et en ophtalmologie&quot;. 1. Manipulation des oeufs et de la collecte des yeux <ol><li> Rangez les oeufs Leghorn blanche à 12-14 ° C pendant plus de 1 semaine. Si possible, utilisez un refroidisseur de vin réfrigéré pour stocker les œufs fécondés. Remarque: Des températures plus él...

<ol>
	<li>Muramatsu, T., Mizutani, Y., Ohmori, Y., Okumura, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+three+nonviral+transfection+methods+for+foreign+gene+expression+in+early+chicken+embryos+in+ovo.">Comparison of three nonviral transfection methods for foreign gene expression in early chicken embryos in ovo.</a> Biochem Biophys Res Commu. 230, 376-380 (1997).</li><li>Nakamura, H., Funahashi, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Introduction+of+DNA+into+chick+embryos+by+in+ovo+electroporation.">Introduction of DNA into chick embryos by in ovo electroporation.</a> Method. 24, 43-48 (2001).</li><li>Kohl, A., Hadas, Y., Klar, A., Sela-Donenfeld, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axonal+patterns+and+targets+of+dA1+interneurons+in+the+chick+hindbrain.">Axonal patterns and targets of dA1 interneurons in the chick hindbrain.</a> J Neurosc. 32, 5757-5771 (2012).</li><li>Islam, M. M., Doh, S. T., Cai, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+ovo+electroporation+in+embryonic+chick+retina.">In ovo electroporation in embryonic chick retina.</a> J Vis Exp. , (2012).</li><li>Sparrow, J. R., Hicks, D., Barnstable, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+commitment+and+differentiation+in+explants+of+embryonic+rat+neural+retina.+Comparison+with+the+developmental+potential+of+dissociated+retina.">Cell commitment and differentiation in explants of embryonic rat neural retina. Comparison with the developmental potential of dissociated retina.</a> Brain res Dev brain re. 51, 69-84 (1990).</li><li>Tomita, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mammalian+hairy+and+Enhancer+of+split+homolog+1+regulates+differentiation+of+retinal+neurons+and+is+essential+for+eye+morphogenesis.">Mammalian hairy and Enhancer of split homolog 1 regulates differentiation of retinal neurons and is essential for eye morphogenesis.</a> Neuro. 16, 723-734 (1996).</li><li>Matsuda, T., Cepko, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electroporation+and+RNA+interference+in+the+rodent+retina+in+vivo+and+in+vitro.">Electroporation and RNA interference in the rodent retina in vivo and in vitro.</a> Proc Nat Acad Sci US. 101, 16-22 (2004).</li><li>Donovan, S. L., Dyer, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+and+square+wave+electroporation+of+retinal+explant+cultures.">Preparation and square wave electroporation of retinal explant cultures.</a> Nature protocol. 1, 2710-2718 (2006).</li><li>Thangaraj, G., Greif, A., Layer, P. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simple+explant+culture+of+the+embryonic+chicken+retina+with+long-term+preservation+of+photoreceptors.">Simple explant culture of the embryonic chicken retina with long-term preservation of photoreceptors.</a> Exp eye re. 93, 556-564 (2011).</li><li>Shirazi Fard, S., All-Ericsson, C., Hallbook, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+heterogenic+final+cell+cycle+of+chicken+retinal+Lim1+horizontal+cells+is+not+regulated+by+the+DNA+damage+response+pathway.">The heterogenic final cell cycle of chicken retinal Lim1 horizontal cells is not regulated by the DNA damage response pathway.</a> Cell Cycl. 13, 408-417 (2014).</li><li>Shirazi Fard, S., Thyselius, M., All-Ericsson, C., Hallbook, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+terminal+basal+mitosis+of+chicken+retinal+Lim1+horizontal+cells+is+not+sensitive+to+cisplatin-induced+cell+cycle+arrest.">The terminal basal mitosis of chicken retinal Lim1 horizontal cells is not sensitive to cisplatin-induced cell cycle arrest.</a> Cell Cycl. 13, 3698-3706 (2014).</li><li>Hamburger, V., Hamilton, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+series+of+normal+stages+in+the+development+of+the+chick+embryo.">A series of normal stages in the development of the chick embryo.</a> J. Morphol. 88, 49-92 (1951).</li><li>Gavet, O., Pines, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+cyclin+B1-Cdk1+synchronizes+events+in+the+nucleus+and+the+cytoplasm+at+mitosis.">Activation of cyclin B1-Cdk1 synchronizes events in the nucleus and the cytoplasm at mitosis.</a> J Cell Bio. 189, 247-259 (2010).</li><li>Sauer, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitosis+in+the+neural+tube.">Mitosis in the neural tube.</a> J Comp Neurol. 62, 377-405 (1935).</li><li>Baye, L. M., Link, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interkinetic+nuclear+migration+and+the+selection+of+neurogenic+cell+divisions+during+vertebrate+retinogenesis.">Interkinetic nuclear migration and the selection of neurogenic cell divisions during vertebrate retinogenesis.</a> J Neurosc. 27, 10143-10152 (2007).</li></ol>

Dans ce travail, un protocole détaillé pour la dissection, l&#39;électroporation ou traitement chimique, et la culture des explants rétiniens entiers à partir d&#39;embryons de poulet est présenté. Ce protocole est simple, rapide et permet à la fois un taux de réussite élevé et reproductible résultats. L&#39;électroporation des explants de rétine entière produit de grandes zones de cellules qui expriment le produit d&#39;assemblage de gène d&#39;intérêt. ...

La rétine est une partie du système nerveux central et il est, avec sa relative simplicité et de l&#39;architecture cellulaire bien caractérisée, un modèle populaire pour étudier le développement du système nerveux central. L&#39;oeil de l&#39;embryon de poulet est relativement grande en comparaison avec le reste de l&#39;embryon. Il est donc facilement accessible in ovo à des manipulations expérimentales, telles que des injections ou l&#39;électroporation, et sert un excellent outil pour acquérir des connaissances sur cellules rétiniennes et la biologie du développement in vivo. Malgré ces avantages majeurs, la survie des embryons peut être faible lorsque les expériences sont envahissantes comme avec électroporations, des injections répétées, ou des manipulations expérimentales combinées. L&#39;électroporation de plasmides d&#39;ADN dans l&#39;embryon de poulet in ovo est une technique importante et bien établie 1. Il permet pour l&#39;étiquetage des neurones, le traçage du destin cellulaire ainsi que voies neuronales dans la NERV centraleous système et il permet l&#39;expression ectopique des gènes à analyser la fonction des protéines in vivo. La technique a été utilisée pour les études de tube neural 2, Rhombencéphale 3, 4 et de la rétine. Électroporation de la rétine embryonnaire in ovo a quelques difficultés expérimentales qui sont liés à la situation in vivo. La position de l&#39;oeil, en raison du pliage du crâne de l&#39;embryon, est relativement proche du cœur. Cette proximité augmente le risque d&#39;un arrêt cardiaque suivant l&#39;électroporation, et le risque augmente avec l&#39;âge de l&#39;embryon. En outre, pour accéder à l&#39;œil, il est nécessaire d&#39;ouvrir les membranes embryonnaires, ce qui augmente le risque de saignement, des malformations et après la viabilité réduite. Lors de l&#39;essai et l&#39;optimisation d&#39;un nouveau plasmide d&#39;ADN souvent sans un résultat phénotypique connu, ces limitations peuvent diminuer l&#39;efficacité et la puissance de la méthode, même pour un expérimentateur expérimenté. Tel que présenté dans ce protocole, la culture de la wexplant trou rétinien, définie comme la rétine neurale ensemble avec l&#39;épithélium pigmentaire enlevée, est un procédé efficace qui complète l&#39;approche en ovo. Injections intraoculaires de réactifs chimiques sont relativement faciles à réaliser in ovo. Cependant, la concentration efficace et précise des réactifs injectés au sein de la rétine neurale peut être difficile de contrôler entièrement. Le volume injecté peut varier en raison de fuites et l&#39;emplacement exact de l&#39;injection peut affecter à la fois la distribution du réactif dans l&#39;oeil et de la diffusion à travers le corps vitré. La variabilité aura des implications majeures pour l&#39;interprétation des résultats lorsque ie, une courbe dose-réponse pour un inhibiteur de l&#39;enzyme est déterminée; en particulier si l&#39;effet est faible et la fenêtre temporelle de l&#39;effet est étroite. En outre, un seul œil peut être utilisé à partir de chaque embryon lors de l&#39;exécution dans des expériences in ovo en raison des effets potentiels systémiques par le biais du flux sanguinsur l&#39;oeil controlatéral. Age appariement est important lorsque l&#39;on étudie le développement et la variabilité individuelle entre traités et les embryons de contrôle peut conduire à la variabilité expérimentale supplémentaire. Pour ces raisons, un procédé ex ovo basé sur des explants de rétine embryons de poulet a été développé, dans lequel la rétine neurale peut être exposé à un uniforme et contrôlée condition expérimentale in vitro. Le présent protocole a été développé sur la base de protocoles antérieurs 5-9. Explants de rétine à partir de l&#39;étape (st) 20 (jours embryonnaires [E] 3) à ST31 (E7) d&#39;embryons de poulet ont été disséquées, cultivées et soumises à une électroporation avec une concentration d&#39;ADN de plasmide défini ou exposées à un milieu contenant une concentration définie d&#39;un réactif chimique. Le protocole présenté ici a été mis en œuvre avec succès dans des publications récentes, utilisant plusieurs réactifs chimiques différents, y compris les régulateurs de la voie de dommages à l&#39;ADN, comme KU55933, SB 218078, et NSC 109555 ditosylate, et le cycle cellulaire, tel que Cdk1 / 2 10,11 inhibiteur III.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="859">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1xPBS (tablet)</td>
			<td>Life technologies</td>
			<td>18912-014</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10xDPBS</td>
			<td>Life technologies</td>
			<td>14080-048</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 mm Petri dish</td>
			<td>VWR</td>
			<td>734-0006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 &#956;L pipette tips</td>
			<td>VWR</td>
			<td>613-0798</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 mL disposable plastic cuvette</td>
			<td>Thomas Scientific</td>
			<td>8495V01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24-well plate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D7039</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>35 mm Petri dish</td>
			<td>VWR</td>
			<td>391-1998</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70% ethanol</td>
			<td>Solveco</td>
			<td>1054</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cdk1/2 inhibitor III</td>
			<td>217714</td>
			<td>Calbiochem</td>
			<td>300nM in 0.01% DMSO</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture incubator</td>
			<td>Thermo Forma</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>41966-029</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrodes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Platina, custom made</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electro square porator ECM 830</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>F12 Nutrient mix</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>31331-028</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>16140-071</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>AgnThos</td>
			<td>0108-5-PS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Freezing medium NEG50</td>
			<td>Cellab, Sweden</td>
			<td>6502</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GFP expressing DNA plasmid (pZGs)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Humidified incubator</td>
			<td>Grumbach Brutgeraete GmbH, Asslar, Germany</td>
			<td>8204</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>I9278-5ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-glutamine</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>25030024</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mounting medium ProLong Gold with DAPI</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>P36935</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraffin film</td>
			<td>VWR</td>
			<td>291-1214P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>16005-1KG-R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peel-A-Way embedding mold&#160;</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>E6032</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin streptomycin</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>15140-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PhosphoHistone 3 (PH3)&#160;</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>06-570</td>
			<td>Dilution 1/4000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Platinum electrodes (custom made from &#34;rondelles&#34;)</td>
			<td>Sargenta</td>
			<td>390-R (rondeller)</td>
			<td>Dia: 4mm, 0.1 mm thickness</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Platimun electrodes&#160;</td>
			<td>Sonidel</td>
			<td>CUY700P4L</td>
			<td>Dia: 4 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyethylene pasteur pipette</td>
			<td>VWR</td>
			<td>612-2853</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rotator shaker</td>
			<td>VWR</td>
			<td>444-2900</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small spoon</td>
			<td>VWR</td>
			<td>231-2151</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>VWR</td>
			<td>443815S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>White Leghorn eggs</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Local supplier</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wine cooler</td>
			<td>WineMaster 24, Caso, Berlin Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

whole retinal explants from chicken embryos for electroporation and chemical reagent treatments

La rétine est un bon modèle pour le système nerveux central en développement. La grande taille de l&#39;œil et surtout l&#39;accessibilité pour les manipulations expérimentales in ovo / in vivo rend le poulet rétine embryonnaire un modèle expérimental polyvalent et très efficace. Bien que la rétine de poulet est facile à cibler in ovo par injections intra-oculaires ou l&#39;électroporation, la concentration efficace et précise des réactifs au sein de la rétine peut être difficile de contrôler entièrement. Cela peut être dû à des variations de site d&#39;injection exact, les fuites à partir de l&#39;œil ou de diffusion irrégulière de ces substances. En outre, la fréquence de malformations et de mortalité après manipulations invasives telles que l&#39;électroporation est plutôt élevé. Ce protocole décrit un ex ovo technique pour la culture des explants de rétine entière à partir d&#39;embryons de poulet et fournit un procédé pour contrôler l&#39;exposition de la rétine à des réactifs. Le protocol décrit comment disséquer, expérimentalement manipuler et explants rétiniens culture entiers à partir d&#39;embryons de poulet. Les explants peuvent être cultivées pendant environ 24 heures et être soumis à différentes manipulations telles que l&#39;électroporation. Les principaux avantages sont que l&#39;expérience ne dépend pas de la survie de l&#39;embryon et que la concentration du réactif introduit on peut faire varier et contrôlé afin de déterminer et optimiser la concentration efficace. En outre, la technique est rapide, pas cher et, avec son taux de réussite expérimentale haute, il assure reproductible résultats. Il convient de souligner qu&#39;il sert un excellent complément aux expériences réalisées in ovo.

Ce protocole décrit la préparation (figure 1A-F) et mise en culture des explants de rétine entière à partir d&#39;embryons de poulet. Ce protocole a été utilisé avec succès pour explants entiers de la rétine à partir d&#39;embryons de ST20 (E3) à ST31 (E7). Électroporation de plasmides d&#39;ADN dans des explants rétiniens entiers permet l&#39;étiquetage et la traçabilité des cellules souches rétiniennes ou sur-expression de différents produits de gènes. ...

Watch this Scientific Journal Video about Whole Retinal Explants from Chicken Embryos for Electroporation and Chemical Reagent Treatments at JoVE.com

Whole Retinal Explants from Chicken Embryos for Electroporation and Chemical Reagent Treatments

Ce protocole décrit un procédé pour disséquer, expérimentalement et manipuler des explants de rétine entière de la culture d&#39;embryons de poulet. Les cultures d&#39;explants sont utiles lorsque le taux de réussite élevé, l&#39;efficacité et la reproductibilité sont nécessaires pour tester les effets de plasmides pour l&#39;électroporation et / ou des substances réactives, à savoir, les inhibiteurs enzymatiques.

Explants rétiniens entières de poulet embryons pour Traitements électroporation et réactif chimique

The retina is a good model for the developing central nervous system. The large size of the eye and most importantly the accessibility for experimental ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Culture of Embryonic Mouse Cochlear Explants and Gene Transfer by Electroporation

Culture de souris embryonnaires cochléaires explants et Gene Transfer par électroporation

Auditory hair cells located within the mouse organ of Corti detect and transmit sound information to the central nervous system. The mechanosensory hair ...

Recherche

Biologie du développement

Dual Labeling of Neural Crest Cells and Blood Vessels Within Chicken Embryos Using ChickGFP Neural Tube Grafting and Carbocyanine Dye DiI Injection

Dual Labeling of Neural Crest Cells and Blood Vessels Within Chicken Embryos Using ChickGFP Neural Tube Grafting and Carbocyanine Dye DiI Injection

Double étiquetage des cellules de la crête neurale et des vaisseaux sanguins dans des embryons de poulet à l’aide de la greffe de tube neuralChick GFP et de l’injection de diI de colorant de carbocyanine

All developing organs need to be connected to both the nervous system (for sensory and motor control) as well as the vascular system (for gas exchange, ...

Gene Transfer into the Chicken Auditory Organ by In Ovo Micro-electroporation

Gene Transfer into the Chicken Auditory Organ by In Ovo Micro-electroporation

Transfert de gènes dans l&#39;organe de poulet Auditory par<em&gt; Dans Ovo</em&gt; Micro-électroporation

Chicken embryos are ideal model systems for studying embryonic development as manipulations of gene function can be conducted with relative ease in ovo. ...

Culture of Adult Transgenic Zebrafish Retinal Explants for Live-cell Imaging by Multiphoton Microscopy

Culture des adultes Zebrafish Retinal explants Transgenic pour des cellules vivantes par imagerie multiphotonique Microscopie

An endogenous regeneration program is initiated by M&#252;ller glia in the adult zebrafish (Danio rerio) retina following neuronal damage and death. The ...

In Ovo Electroporation in the Chicken Auditory Brainstem

In Ovo Electroporation in the Chicken Auditory Brainstem

Dans Ovo Electroporation dans le Brainstem

Electroporation is a method that introduces genes of interest into biologically relevant organisms like the chicken embryo. It is long established that ...

Visualizing the Node and Notochordal Plate In Gastrulating Mouse Embryos Using Scanning Electron Microscopy and Whole Mount Immunofluorescence

Visualiser le nœud et la notochorde plaque en Gastrulating des embryons de souris à l’aide de la microscopie électronique à balayage et toute monture Immunofluorescence

The post-implantation mouse embryo undergoes major shape changes after the initiation of gastrulation and morphogenesis. A hallmark of morphogenesis is ...

Fast and Efficient Expression of Multiple Proteins in Avian Embryos Using mRNA Electroporation

Expression rapide et efficace des protéines multiples dans les embryons aviaires à l'aide de l'électroporation de l'ARNm

We report that mRNA electroporation permits fluorescent proteins to label cells in living quail embryos more quickly and broadly than DNA electroporation. ...

Isolation and Differentiation of Primary Myoblasts from Mouse Skeletal Muscle Explants

Isolement et différenciation des myoblastes primaires des explantations de muscle squelettique de souris

Primary myoblasts are undifferentiated proliferating precursors of skeletal muscle. They can be cultured and studied as muscle precursors or induced to ...

A Layered Mounting Method for Extended Time-Lapse Confocal Microscopy of Whole Zebrafish Embryos

Une méthode de montage en couches pour la microscopie confocale de temps-lapse prolongée des embryons entiers de poisson zèbre

Dynamics of development can be followed by confocal time-lapse microscopy of live transgenic zebrafish embryos expressing fluorescence in specific tissues ...

Whole Mount Immunohistochemistry in Zebrafish Embryos and Larvae

Immunohistochimie du mont entier dans les embryons et larves de poissons-zèbres

Immunohistochemistry is a widely used technique to explore protein expression and localization during both normal developmental and disease states. ...