Name: accurate and phenol free dna sexing of day 30 porcine embryos by pcr
Uploaded: 2016-02-14T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Accurate and Phenol Free DNA Sexing of Day 30 Porcine Embryos by PCR at JoVE.com

Los autores desean agradecer la colaboración y las contribuciones financieras de la siguiente agencia de financiación de la investigación: Alberta ganado y la carne Agencia Ltd, CRC carne de cerdo, carne de cerdo Alberta, Hypor Hendrix Genetics Company y CRSNG CRSNG.

De acuerdo con el Consejo Canadiense para el manejo de estos animales y con la aprobación de la Política Animal de la Facultad y el Comité de Bienestar - Ganadería de la Universidad de Alberta, las cerdas gestantes fueron sacrificados por personal capacitado aproximadamente a día se recogieron 30 del embarazo y embriones. Utilice guantes de examen en todo momento durante los procedimientos. 1. Recogida y almacenamiento de la muestra <ol><li> La eutanasia cerda usando un perno cautivo seguido por desangram...

<ol>
	<li>Seidel, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Economics+of+selecting+for+sex:+the+most+important+genetic+trait.">Economics of selecting for sex: the most important genetic trait.</a> Theriogenology. 59, 585-598 (2003).</li><li>Guti&#233;rrez-Ad&#225;n, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+consequences+of+sexual+dimorphism+during+pre-implantation+embryonic+development.">Development consequences of sexual dimorphism during pre-implantation embryonic development.</a> Reprod. Domest. Anim. 41, 54-62 (2006).</li><li>Rosenfeld, C. S., Roberts, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maternal+diet+and+other+factors+affecting+offspring+sex+ratio:+a+review.">Maternal diet and other factors affecting offspring sex ratio: a review.</a> Biol Reprod. 71, 1063-1070 (2004).</li><li>Gorecki, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex+ratio+in+litters+of+domestic+pigs+(Sus+scrofa+f.+domestica+Linnaeus,+1758).">Sex ratio in litters of domestic pigs (Sus scrofa f. domestica Linnaeus, 1758).</a> Biol. Lett. 40, 111-118 (2003).</li><li>Chen, Z. Y., Dziuk, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+initial+length+of+uterus+per+embryo+and+gestation+stage+on+prenatal+survival,+development,+and+sex+ratio+in+the+pig.">Influence of initial length of uterus per embryo and gestation stage on prenatal survival, development, and sex ratio in the pig.</a> J. Anim. Sci. 71, 1895-1901 (1993).</li><li>Vinsky, M. D., Novak, S., Dixon, W. T., Dyck, M. K., Foxcroft, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nutritional+restriction+in+lactating+primiparous+sows+selectively+affects+female+embryo+survival+and+overall+litter.">Nutritional restriction in lactating primiparous sows selectively affects female embryo survival and overall litter.</a> Reprod. Fertil. Dev. 18, 347-355 (2006).</li><li>Cassar, G., King, W. A., King, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+sex+on+early+growth+of+pig+conceptuses.">Influence of sex on early growth of pig conceptuses.</a> J. Reprod. Fertil. 101, 317-320 (1994).</li><li>Zudova, D., Rezacova, O., Kubickova, S., Rubes, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aneuploidy+detection+in+porcine+embryos+using+fluorescence+in+situ+hybridization.">Aneuploidy detection in porcine embryos using fluorescence in situ hybridization.</a> Cytogenet Genome Res. 102, 179-183 (2003).</li><li>Hornak, M., Oracova, E., Hulinska, P., Urbankova, L., Rubes, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aneuploidy+detection+in+pigs+using+comparative+genomic+hybridization:+from+the+oocytes+to+blastocysts.">Aneuploidy detection in pigs using comparative genomic hybridization: from the oocytes to blastocysts.</a> PLoS One. 7, (2012).</li><li>Handyside, A. H., Pattinson, J. K., Penketh, R. J., Delhanty, J. D., Winston, R. M., Tuddenham, E. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biopsy+of+human+preimplantation+embryos+and+sexing+by+DNA+amplification.">Biopsy of human preimplantation embryos and sexing by DNA amplification.</a> Lancet. 1, 347-349 (1989).</li><li>Wilton, L. J., Shaw, J. M., Trounson, A. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Successful+single-cell+biopsy+and+cryopreservation+of+preimplantation+mouse+embryos.">Successful single-cell biopsy and cryopreservation of preimplantation mouse embryos.</a> Feri. Steril. 51, 513-517 (1989).</li><li>Peura, J. M., Turunen, M., Janne, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+reliable+sex+determination+assay+for+bovine+preimplantation+embryos+using+the+polymerase+chain+reaction.">A reliable sex determination assay for bovine preimplantation embryos using the polymerase chain reaction.</a> Theriogenology. 35, 547-555 (1991).</li><li>Rao, K. B., Pawshe, C. H., Totey, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex+determination+of+in+vitro+developed+buffalo+(Buhalus+buhalis.)+embryos+by+DNA+amplification.">Sex determination of in vitro developed buffalo (Buhalus buhalis.) embryos by DNA amplification.</a> Mol. Reprod. Dev. 36, 291-296 (1993).</li><li>Herr, C. M., Matthaei, K. I., Petrzak, U., Reed, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rapid+Y-chromosome-detecting+ovine+embryo+sexing+assay.">A rapid Y-chromosome-detecting ovine embryo sexing assay.</a> Theriogenology. 33, 245 (1990).</li><li>Fajfar-Whetstone, C. J., LaneRayburn, A., Schook, L. B., Wheeler, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex+determination+of+porcine+during+preimplantation+embryos+via+y-chromosome+specific+DNA+sequences.">Sex determination of porcine during preimplantation embryos via y-chromosome specific DNA sequences.</a> Animal Biotechnology. 4, 183-193 (1993).</li><li>Pomp, D., Good, B. A., Geisert, R. D., Corbin, C. J., Conley, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex+identification+in+mammals+with+polymerase+chain+reaction+and+its+use+to+examine+sex+effects+on+diameter+of+day-10+or+-11+pig+embryos.">Sex identification in mammals with polymerase chain reaction and its use to examine sex effects on diameter of day-10 or -11 pig embryos.</a> J. Anim. Sci. 73, 1408-1415 (1995).</li><li>Aasen, E., Medrano, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amplification+of+the+ZFY+and+ZFX+genes+for+sex+identification+in+humans,+cattle,+sheep+and+goats.">Amplification of the ZFY and ZFX genes for sex identification in humans, cattle, sheep and goats.</a> Biotechnology (N Y). 8, 1279-1281 (1990).</li><li>Oliver, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Restricted+feed+intake+in+lactating+primiparous+sows.+II.+Effects+on+subsequent+litter+sex+ratio+and+embryonic+gene+expression.">Restricted feed intake in lactating primiparous sows. II. Effects on subsequent litter sex ratio and embryonic gene expression.</a> Reprod Fertil. Dev. 23, 899-911 (2011).</li><li>Truett, G. E., Heeger, P., Mynatt, R. L., Truett, A. A., Walker, J. A., Warman, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+PCR-quality+mouse+genomic+DNA+with+hot+sodium+hydroxide+and+tris+(HotSHOT).">Preparation of PCR-quality mouse genomic DNA with hot sodium hydroxide and tris (HotSHOT).</a> Biotechniques. 29, 52-54 (2000).</li><li>Meeker, N. D., Hutchinson, S. A., Ho, L., Trede, N. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Method+for+isolation+of+PCR-ready+genomic+DNA+from+zebrafish+embryos.">Method for isolation of PCR-ready genomic DNA from zebrafish embryos.</a> Biotechniques. 43, 610-614 (2007).</li><li>Almeida, F. C. R. L., Machado, G. S., Borges, A. L. C. C., Rosa, B. O., Fontes, D. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Consequences+of+different+dietary+energy+sources+during+folliculardevelopment+on+subsequent+fertility+of+cyclic+gilts.">Consequences of different dietary energy sources during folliculardevelopment on subsequent fertility of cyclic gilts.</a> Animal. 8, 293-299 (2014).</li><li>Foxcroft, G. R., Dixon, W. T., Dyck, M. K., Novak, S., Harding, J. C. S., Almeida, F. C. R. L., Rodriguez-Martinez, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prenatal+programming+of+postnatal+development+in+the+pig.">Prenatal programming of postnatal development in the pig.</a> Control of Pig Reproduction VIII. , 212-213 (2009).</li></ol>

La mayoría de los protocolos existentes en relación con la asignación del sexo porcina ADN embriones sólo son adecuados para la etapa temprana etapa de pre-implantación 15,16. Hemos desarrollado con éxito un protocolo adecuado para la selección de embriones porcinos durante el final de la gestación. Sobre la base de estudios con etapas similares de desarrollo de embriones a partir de estudios previos 6,18, el presente protocolo se considera que es más seguro y de bajo costo. <p class="...

El cerdo doméstico se ha convertido en un tema de investigación fundamental en el desarrollo, la genética y la nutrición en ambos sectores humana y el ganado. El potencial de los cerdos como modelos para la investigación biomédica humana se puede atribuir a sus similitudes fisiológicas. En la ganadería, la manipulación de la proporción de sexos puede aumentar la eficacia de selección y mejoramiento genético programas 1. El sexado de embriones individuales es una herramienta fundamental utilizada en muchas investigaciones experimentales, incluyendo pero no limitado a genotipo, la epigenética y X inactivación del dimorfismo sexual durante el desarrollo embrionario temprano 2. Los estudios en ratones sugieren que la dieta materna y otros factores pueden dar lugar a un desequilibrio de género 3. En los cerdos, las causas de la proporción de sexos desequilibrio incluyen raza paterna 4, 5 capacidad uterina, y el estado metabólico de la cerda 6. Dado que las diferencias observadas en los embriones y camadas pueden ser influenciados por SExual dimorfismo, los investigadores deben ser conscientes de embrión de sexo y relaciones sexuales antes de sacar conclusiones con respecto a su investigación. El desarrollo de herramientas y protocolos eficaces para el sexado de embriones de cerdo en el día 30 del desarrollo será discutido aquí. Varios métodos de asignación del sexo se han desarrollado para los estudios genéticos en organismos modelo y el ganado. Sobre todo en la ganadería, la identificación de los embriones tempranos masculinos y femeninos es una práctica muy común para mejorar la selección genética para programas de mejoramiento. Los primeros embriones de cerdo en el cariotipo utilizando Giemsa 7 o la intensa fluorescencia 8,9 técnicas se han utilizado para la asignación del sexo. Sin embargo, estos métodos son mucho tiempo y no es adecuado para el cribado de un gran número de embriones con rapidez y precisión. El método de tipificación sexo más eficaz es la amplificación de ADN usando un calor de la polimerasa de ADN estable y un par de cebadores. sexado de ADN por el método de PCR es más específica, rápida y sensible, orequiriendo ólo una mínima cantidad de materiales celulares. La primera determinación del sexo del embrión basados ​​en la PCR se realizó en los seres humanos 10, y más tarde en los ratones 11, ganado, búfalos 12 13 y ovejas 14 embriones antes de la implantación. En el cerdo, se estableció el método de tipificación de ADN sexo más temprana para los embriones antes de la implantación a través de un único par de cebadores de ADN específico del cromosoma Y 15. Sin embargo, se seleccionaron los cebadores de PCR más comunes para la determinación del sexo del cromosoma Y del gen SRY específica macho 16 y la región discriminativo no sexual de un gen dedo de zinc ubicada en ambos X e Y cromosoma 17. Posteriormente, estos cebadores se han aplicado para determinar el sexo de los embriones del día 30 en este estudio con una mayor especificidad de los cebadores para detectar sólo el cromosoma X de un gen zinc-finger. El ADN genómico a partir de embriones antes de la implantación de la especie porcina se puede extraer mediante la exposición de un blastocisto intacta para amortiguar con proteinase K 16 o tomando una biopsia de unas pocas células de la escisión temprana individuo embriones de 15 años y utilizarlos para la PCR directa. Sin embargo, la liberación de ADN a partir de sangre porcina, cabello, tejidos o una gran conceptus en unos pocos centímetros de tamaño no se hace efectiva utilizando el método de la proteinasa K. Métodos de extracción de ADN para estos materiales se han establecido utilizando ya sea el tiempo que consumen los protocolos de fenol / cloroformo 6 o kits 18 basados ​​caro columna. Con el fin de evitar el uso de productos químicos potencialmente tóxicos, hay una tendencia a desarrollar métodos de extracción de ADN de bajo costo, fácil y sin fenol. Este tipo de protocolo para el aislamiento de ADN genómico PCR calidad de ratón 19 y de pez cebra 20 tejidos se ha establecido el uso de hidróxido de sodio caliente y Tris (HotSHOT). Este estudio proporciona un protocolo para la obtención de ADN con pares de cebadores dúplex modificados y rediseñados para HotSHOT sexo PCR escribiendo directamente a partir de lisados ​​de células de embriones porcinos día 30 conalta precisión.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1184">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:331px;">KAPA HiFi HotStart Ready Mix PCR kit&#160;</td>
			<td style="width:203px;">KAPABiosystems</td>
			<td style="width:189px;">KR0370</td>
			<td style="width:463px;">other Hot Start Taq polymerase can be used after optimization</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:331px;">SYBR Safe DNA Gel Stain</td>
			<td style="width:203px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:189px;">S33102</td>
			<td>Ethidium bromide can be substituted for SYBR Safe</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:331px;">Pig female and male genomic DNA</td>
			<td style="width:203px;">Zyagen</td>
			<td style="width:189px;">GP-160-F1 &#38; GP-160-M5</td>
			<td>Postive controls from the tissues of known sex DNA can be used.</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:331px;">Typhoon FLA 9500 laser scanner</td>
			<td style="width:203px;">GE Healthcare Life Sciences</td>
			<td style="width:189px;">28-9969-43</td>
			<td>other imaging system can be used</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:331px;">Free Soft Nitrile Examination Gloves</td>
			<td style="width:203px;">WWR</td>
			<td>89038-270</td>
			<td>any other examination glove can be used</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:331px;">Sodium hydroxide, solid&#160;</td>
			<td style="width:203px;">Fisher</td>
			<td style="width:189px;">BP 359 -212</td>
			<td>Molecular Biology Grade</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:331px;">Eppendorff DNA LoBind Tubes, 1.5 ml, PCR clean</td>
			<td style="width:203px;">Eppendorff</td>
			<td style="width:189px;">0030 108.051</td>
			<td>heat resistant</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:331px;">ThermoStat plus</td>
			<td style="width:203px;">Eppendorff</td>
			<td style="width:189px;">22670204</td>
			<td>Use as a incubator for 95C, don&#39;t need to use the heater</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:331px;">Toothpick</td>
			<td>Bunzl Plc</td>
			<td style="width:189px;">75200815</td>
			<td style="width:463px;">Any round wooden toothpicks can be used - quality wood</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:27px;width:331px;">Microcentrifuge 5417R/5417C</td>
			<td style="width:203px;">Eppendorff</td>
			<td style="width:189px;">22621807</td>
			<td>This model was discontinued. But another newer model can be used</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Microspatula</td>
			<td style="width:203px;">Fisher</td>
			<td style="width:189px;">SDI28540115</td>
			<td>Autoclaved before use each time.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

accurate and phenol free dna sexing of day 30 porcine embryos by pcr

La investigación en la programación prenatal en el cerdo ha demostrado que el sexo del embrión o feto en desarrollo puede influir en el resultado del desarrollo. Por lo tanto, la capacidad de determinar el sexo de un embrión es necesario en muchos experimentos particularmente en relación con el desarrollo temprano. El presente protocolo demuestra una preparación barata, rápida y no tóxica de ADN genómico de cerdo para el uso con la PCR. Día 30 embriones deberán ser recogidos con humanidad de acuerdo con las directrices establecidas por la Política Institucional Animal y comités de bienestar para el presente protocolo. La preparación de todo el embrión para esta técnica de sexado basado en la PCR implica simplemente moliendo la de embriones congelados hasta un polvo fino usando un mortero previamente enfriado y mano de mortero. DNA PCR calidad se libera de una pequeña cantidad de polvo de embriones mediante la aplicación de una incubación caliente en un reactivo de lisis alcalina. A continuación, la solución de ADN se mezcla con tampón de neutralización y se utilizó directamente para PCR. Dos pares de cebadores se generan a DETECt sexo específico región determinante del cromosoma Y- (SRY) y la región ZFX del cromosoma X con alta precisión y especificidad. El mismo protocolo se puede aplicar a otros embriones alargados (Día 10 a Día 14) antes que el día 30. Además, este protocolo se puede llevar con placas de 96 brotado cuando detección de un gran número de embriones, por lo que es factible para la automatización y la alta la asignación del sexo rendimiento.

Un resultado representativo de la determinación del sexo de 345 DNA lisados ​​de cribado por PCR se muestra en la Figura 7 y se resume en la Tabla 1. Como puede verse en la figura 7, la temperatura de cebadores de recocido a 65 ° C es la condición óptima en este protocolo de PCR generando intensidad similar y tamaños ...

Watch this Scientific Journal Video about Accurate and Phenol Free DNA Sexing of Day 30 Porcine Embryos by PCR at JoVE.com

Accurate and Phenol Free DNA Sexing of Day 30 Porcine Embryos by PCR

This protocol describes an accurate, inexpensive, rapid and non-toxic method to determine the sex of Day 30 porcine embryo using PCR method after grinding an embryo into powder without phenol chloroform extraction and DNA column purification.

Exacta y fenol ADN Determinación del sexo libre del día 30 de los embriones de porcinos por PCR

Research into prenatal programming in the pig has shown that the sex of the developing embryo or fetus can influence the developmental outcome. Therefore, ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Genome-wide Snapshot of Chromatin Regulators and States in Xenopus Embryos by ChIP-Seq

Genome-wide Snapshot of Chromatin Regulators and States in Xenopus Embryos by ChIP-Seq

Instantánea de todo el genoma de los Reguladores de la cromatina y los Estados en<em&gt; Xenopus</em&gt; Los embriones por chip-Sec

The recruitment of chromatin regulators and the assignment of chromatin states to specific genomic loci are pivotal to cell fate decisions and tissue and ...

Investigación

Biología del Desarrollo

Application of the DNA-Specific Stain Methyl Green in the Fluorescent Labeling of Embryos

Aplicación del ADN específico de la mancha verde de metilo en el etiquetado fluorescente de embriones

Methyl green has long been known as a histological stain with a specific affinity for DNA, although its fluorescent properties have remained unexplored ...

Methods for Precisely Localized Transfer of Cells or DNA into Early Postimplantation Mouse Embryos

Los métodos para la transferencia Precisamente localizada de células o ADN en Early postimplantación embriones de ratón

Manipulation and culture of early mouse embryos is a powerful yet largely under-utilized technology enhancing the value of this model system. Conversely, ...

Isolation and Characterization of Single Cells from Zebrafish Embryos

Aislamiento y caracterización de células individuales a partir de embriones de pez cebra

The zebrafish (Danio rerio) is a powerful model organism to study vertebrate development. Though many aspects of zebrafish embryonic development have been ...

Generation of Parabiotic Zebrafish Embryos by Surgical Fusion of Developing Blastulae

Generación de Parabiotic embriones de pez cebra por fusión quirúrgica de Desarrollar blástulas

Surgical parabiosis of two animals of different genetic backgrounds creates a unique scenario to study cell-intrinsic versus cell-extrinsic roles for ...

Induction of Hypoxia in Living Frog and Zebrafish Embryos

Inducción de la hipoxia en los sapos vivos y los embriones de pez cebra

Here, we introduce a novel system for hypoxia induction, which we developed to study the effects of hypoxia in aquatic organisms such as frog and ...

Integration Free Derivation of Human Induced Pluripotent Stem Cells Using Laminin 521 Matrix

Integración Derivación Gratuita de Células Madre Pluripotentes Inducidas Humanas Usando Laminin 521 Matrix

Xeno-free and fully defined conditions are key parameters for robust and reproducible generation of homogenous human induced pluripotent stem (hiPS) ...

Fetal Mouse Cardiovascular Imaging Using a High-frequency Ultrasound (30/45MHZ) System

Fetal Mouse Cardiovascular Imaging Using a High-frequency Ultrasound 30/45MHZ System

Proyección de imagen usando un sistema del ultrasonido de alta frecuencia (30 / 45MHZ) Cardiovascular fetal ratón

Congenital heart defects (CHDs) are the most common cause of childhood morbidity and early mortality. Prenatal detection&#160;of the underlying molecular ...

Microinjection of DNA into Eyebuds in Xenopus laevis Embryos and Imaging of GFP Expressing Optic Axonal Arbors in Intact, Living Xenopus Tadpoles

Microinjection of DNA into Eyebuds in Xenopus laevis Embryos and Imaging of GFP Expressing Optic Axonal Arbors in Intact, Living Xenopus Tadpoles

Microinyección de ADN en los oculares en embriones de Xenopus laevis e imágenes de gFP que expresan los árboles axonales ópticos en los renacuajos de Xenopus vivos

The primary visual projection of tadpoles of the aquatic frog Xenopus laevis serves as an excellent model system for studying mechanisms that regulate the ...

In Situ Detection of Ribonucleoprotein Complex Assembly in the C. elegans Germline using Proximity Ligation Assay

In Situ Detection of Ribonucleoprotein Complex Assembly in the C. elegans Germline using Proximity Ligation Assay

Detección en situ del conjunto del complejo de ribonucleoproteína en la línea germinal de C. elegans utilizando el ensayo de ligadura de proximidad

Understanding when and where protein-protein interactions (PPIs) occur is critical to understanding protein function in the cell and how broader processes ...