Name: whisker-signaled eyeblink classical conditioning in head-fixed mice
Uploaded: 2016-03-30T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Whisker-signaled Eyeblink Classical Conditioning in Head-fixed Mice at JoVE.com

Questo lavoro è stato finanziato dal Dipartimento della Difesa (W81XWH-13-01-0243) e il National Institutes of Health (R37 AG008796). Ringraziamo Alan Baker nel negozio di macchina della Northwestern University per costruire l&#39;apparato cilindro di testa fissa. Ringraziamo il Dott Shoai Hattori per la sua guida in MATLAB e Solidworks. Ringraziamo il Dr. John Power per il software LabView che controllava l&#39;esperimento.

Tutte le procedure che coinvolgono i topi sono stati eseguiti in conformità con i protocolli approvati dalla Institutional Animal Care della Northwestern University e del Comitato Usa sulla base di linee guida emanate dal National Institute of Health. 1. Il cilindro (Figura 2A) <ol><li> Costruire il cilindro come descritto da Chettih et al. E Heiney et al. Da un cilindro lungo di schiuma 14-15. Tagliare una lunghezza di 10 cm di cilindro e praticare un foro at...

<ol>
	<li>Clark, R. E., Squire, L. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Classical+conditioning+and+brain+systems:+the+role+of+awareness.">Classical conditioning and brain systems: the role of awareness.</a> Science. 280 (5360), 77-81 (1998).</li><li>Thompson, R. F., Kim, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Memory+systems+in+the+brain+and+localization+of+a+memory.">Memory systems in the brain and localization of a memory.</a> PNAS. 93 (24), 13438-13444 (1996).</li><li>Solomon, P. R., Vander Schaaf, E. R., Thompson, R. F., Weisz, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hippocampus+and+trace+conditioning+of+the+rabbit's+classically+conditioned+nictitating+membrane+response.">Hippocampus and trace conditioning of the rabbit's classically conditioned nictitating membrane response.</a> Behav Neurosci. 100 (5), 729-744 (1986).</li><li>Moyer, J. R., Deyo, R. A., Disterhoft, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hippocampectomy+disrupts+trace+eye-blink+conditioning+in+rabbits.">Hippocampectomy disrupts trace eye-blink conditioning in rabbits.</a> Behav Neurosci. 104 (2), 243-252 (1990).</li><li>Weiss, C., Bouwmeester, H., Power, J. M., Disterhoft, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hippocampal+lesions+prevent+trace+eyeblink+conditioning+in+the+freely+moving+rat.">Hippocampal lesions prevent trace eyeblink conditioning in the freely moving rat.</a> Behav Brain Res. 99 (2), 123-132 (1999).</li><li>Weiss, C., Disterhoft, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploring+prefrontal+cortical+memory+mechanisms+with+eyeblink+conditioning.">Exploring prefrontal cortical memory mechanisms with eyeblink conditioning.</a> Behav Neurosci. 125 (3), 318-326 (2011).</li><li>Aiba, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deficient+cerebellar+long-term+depression+and+impaired+motor+learning+in+mGluR1+mutant+mice.">Deficient cerebellar long-term depression and impaired motor learning in mGluR1 mutant mice.</a> Cell. 79 (2), 377-388 (1994).</li><li>Skelton, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bilateral+cerebellar+lesions+disrupt+conditioned+eyelid+responses+in+unrestrained+rats.">Bilateral cerebellar lesions disrupt conditioned eyelid responses in unrestrained rats.</a> Behav Neurosci. 102 (4), 586-590 (1988).</li><li>Takehara, K., Kawahara, S., Takatsuki, K., Kirino, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time-limited+role+of+the+hippocampus+in+the+memory+for+trace+eyeblink+conditioning+in+mice.">Time-limited role of the hippocampus in the memory for trace eyeblink conditioning in mice.</a> Brain Res. 951 (2), 183-190 (2002).</li><li>Weiss, C., Disterhoft, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evoking+blinks+with+natural+stimulation+and+detecting+them+with+a+noninvasive+optical+device:+A+simple,+inexpensive+method+for+use+with+freely+moving+animals.">Evoking blinks with natural stimulation and detecting them with a noninvasive optical device: A simple, inexpensive method for use with freely moving animals.</a> J Neurosci Meth. 173, 108-113 (2008).</li><li>Royer, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+timing,+rate+and+bursts+of+hippocampal+place+cells+by+dendritic+and+somatic+inhibition.">Control of timing, rate and bursts of hippocampal place cells by dendritic and somatic inhibition.</a> Nature. 15 (5), 769-775 (2012).</li><li>Goldey, G. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Removable+cranial+windows+for+long-term+imaging+in+awake+mice.">Removable cranial windows for long-term imaging in awake mice.</a> Nature Protoc. 9 (11), 2515-2538 (2014).</li><li>Lovett-Barron, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dendritic+inhibition+in+the+hippocampus+supports+fear+learning.">Dendritic inhibition in the hippocampus supports fear learning.</a> Science. 343 (6173), 857-863 (2014).</li><li>Chettih, S. N., McDougle, S. D., Ruffolo, L. I., Medina, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adaptive+timing+of+motor+output+in+the+mouse:+the+role+of+movement+oscillations+in+eyelid+conditioning.">Adaptive timing of motor output in the mouse: the role of movement oscillations in eyelid conditioning.</a> Front in Integ Neurosci. 5 (72), (2011).</li><li>Heiney, S. A., Wohl, M. P., Chettih, S. N., Ruffolo, L. I., Medina, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebellar-Dependent+Expression+of+Motor+Learning+during+Eyeblink+Conditioning+in+Head-Fixed+Mice.">Cerebellar-Dependent Expression of Motor Learning during Eyeblink Conditioning in Head-Fixed Mice.</a> J Neurosci. 34 (45), 14845-14853 (2014).</li><li>Siegel, J. 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F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vibrissa-signaled+eyeblink+conditioning+induces+somatosensory+cortical+plasticity.">Vibrissa-signaled eyeblink conditioning induces somatosensory cortical plasticity.</a> J Neurosci. 26 (22), 6062-6068 (2006).</li><li>Galvez, R., Weible, A. P., Disterhoft, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cortical+barrel+lesions+impair+whisker-CS+trace+eyeblink+conditioning.">Cortical barrel lesions impair whisker-CS trace eyeblink conditioning.</a> Learn &amp; Memory. 14 (1), 94-100 (2007).</li><li>Johnson, K. R., Zheng, Q. Y., Erway, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Major+Gene+Affecting+Age-Related+Hearing+Loss+Is+Common+to+at+Least+Ten+Inbred+Strains+of+Mice.">A Major Gene Affecting Age-Related Hearing Loss Is Common to at Least Ten Inbred Strains of Mice.</a> Genomics. 70 (2), 171-180 (2000).</li><li>Tseng, W., Guan, R., Disterhoft, J. F., Weiss, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trace+eyeblink+conditioning+is+hippocampally+dependent+in+mice.">Trace eyeblink conditioning is hippocampally dependent in mice.</a> Hippocampus. 14 (1), 58-65 (2004).</li><li>Joachimsthaler, B., Brugger, D., Skodras, A., Schwarz, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spine+loss+in+primary+somatosensory+cortex+during+trace+eyeblink+conditioning.">Spine loss in primary somatosensory cortex during trace eyeblink conditioning.</a> J Neurosci. 35 (9), 3772-3781 (2015).</li><li>Boele, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebellar+and+extracerebellar+involvement+in+mouse+eyeblink+conditioning:+the+ACDC+model.">Cerebellar and extracerebellar involvement in mouse eyeblink conditioning: the ACDC model.</a> Front in Cell Neurosci. 3 (19), (2010).</li><li>Koekkoek, S. K. E., Den Ouden, W. L., Perry, G., Highstein, S. M., De Zeeuw, C. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+kinetic+and+frequency-domain+properties+of+eyelid+responses+in+mice+with+magnetic+distance+measurement+technique.">Monitoring kinetic and frequency-domain properties of eyelid responses in mice with magnetic distance measurement technique.</a> J Neurophysiol. 88 (4), 2124-2133 (2002).</li><li>Ward, R. L., Flores, L. C., Disterhoft, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Infragranular+barrel+cortex+activity+is+enhanced+with+learning.">Infragranular barrel cortex activity is enhanced with learning.</a> J Neurophysiol. 108 (5), 1278-1287 (2012).</li></ol>

Classical eyeblink condizionata è una forma di apprendimento associativo che è uno strumento utile per comprendere i substrati neurali alla base dell&#39;apprendimento e della memoria. I metodi precedenti utilizzati per il condizionamento eyeblink in roditori come topi coinvolti una camera che ha permesso per l&#39;animale di muoversi liberamente. Una preparazione testa fissa per il condizionamento eyeblink nei topi, con l&#39;apparecchiatura descritta da Chettih et al. E Heiney et al. E più recente...

condizionata Eyeblink è una forma di condizionamento pavloviano e un sistema modello per studiare i meccanismi neurali di apprendimento associativo e della memoria. E &#39;stata studiata in varie specie, compreso l&#39;uomo, conigli, gatti, ratti e topi. Il paradigma prevede la presentazione di due stimoli appaiati: un neutrale stimolo condizionato (CS, ad esempio, un tono, un lampo di luce, o la stimolazione baffo), e uno stimolo incondizionato saliente (USA, ad esempio, un soffio d&#39;aria per l&#39;occhio, o scossa periorbitale). Gli Stati Uniti suscita un incondizionato, riflessiva risposta eyeblink (vale a dire, UR). Alla fine, dopo varie presentazioni del abbinato CS-USA, il soggetto impara ad associare il CS con gli Stati Uniti. Questo apprendimento si manifesta sotto forma di una risposta condizionata (CR), un eyeblink suscitato dalla sola CS che precede la presentazione degli USA. condizionata Eyeblink sotto forma di traccia include un intervallo libero da stimoli di pochi hmillisecondi undred che separa il CS e gli Stati Uniti (Figura 1). Trace condizionata è una forma di apprendimento dichiarativa in quanto richiede la consapevolezza delle contingenze stimolo 1. Il divario temporale richiede l&#39;animale a mantenere un neurale &#39;traccia&#39; del CS in regioni del cervello anteriore, come l&#39;ippocampo in modo che gli Stati Uniti ed il CS di diventare associato 1-6. Insieme con le regioni prosencefalo, tracce di condizionamento dipende anche il cervelletto 7. condizionata Eyeblink è, quindi, un paradigma utile per la ricerca dei molteplici aspetti di memoria, compresi l&#39;acquisizione, il consolidamento e recupero. Durante condizionata eyeblink, un gruppo di controllo di animali è presentato con stimoli spaiati in ordine casuale per verificare pseudoconditioning o sensibilizzati risposte al CS che possono essere causati dalla presentazione Stati Uniti da soli, piuttosto che una associazione CS-US imparato. Un appara comunemente usatoTus per l&#39;indagine di condizionamento eyeblink nei roditori è una camera in cui i roditori sono autorizzati a muoversi liberamente durante il processo di formazione 8-10. Con questo tipo di apparecchiatura, un tether è normalmente collegato a un casco che è apposto cranio del roditore. Il tether consente l&#39;erogazione degli Stati Uniti (e talvolta CS) e per trasmettere la risposta dell&#39;animale a tali stimoli (cioè, la risposta eyeblink) 10. Il tether stesso può essere modificato in base al tipo di stimoli consegnato e come viene registrata la risposta eyeblink. La ragione per usare &quot;liberamente in movimento&quot; topi legati per un condizionamento eyeblink è che i topi lotta contro la moderazione. Anche se altre specie possono essere più suscettibili di moderazione, il principale vantaggio di utilizzare topi negli esperimenti di condizionamento eyeblink è che la maggior parte dei disponibili ceppi mutanti geneticamente modificati sono ceppi di topi. Oltre alla lotta, res completiTraint di topi si traduce in difficoltà acuta. Una preparazione topo testa fissa che minimizza lo stress aumenterebbe le informazioni fisiologiche che possono essere ottenute durante il condizionamento eyeblink. Ad esempio, questo sistema permetterebbe di imaging di neuroni corticali con 2-photon microscopia a 11. Preparati Testa-fisso sono stati utilizzati in precedenti esperimenti di imaging ottico della corteccia attraverso protesi craniche rimovibili, in vivo registrazioni elettrofisiologiche del cervello dei roditori con array tetrodo, Calcio Imaging a due fotoni, e anche come piattaforma per il condizionamento eyeblink nei topi 11 -16. Nel sistema testa fissa, stimolazione affidabile e registrazioni sono assicurati senza completa ritegno del mouse (Figura 2). Un casco come quello utilizzato nel sistema liberamente mobile viene apposto cranio del mouse. Durante l&#39;allenamento, la testata viene apposto un connettore che è collegato a barre suun tapis roulant cilindrica per stabilizzare la testa del roditore (Figura 2A). Il tapis roulant cilindrica permette il mouse per riposare comodamente, ma se il mouse lo desidera, permette anche l&#39;esecuzione o camminare. Con l&#39;uso di questo sistema, i topi possono essere formati con una vibrazione baffo come CS ed una scossa elettrica periorbitale mite come gli Stati Uniti (Figura 1). Gli Stati Uniti è espresso attraverso i fili chirurgicamente posizionati sotto la pelle laterali per l&#39;occhio. Il CS è espresso tramite un pettine che è collegato a un 2-layer rettangolare flessione attuatore (Figura 2B). Il pettine e attuatore piegatura vengono poi attaccati ad una base magnetica che viene spostato nella posizione corretta durante la formazione ed è regolata per la consegna ottimale per ogni singolo animale. Il pettine è posizionato a cavalcare i baffi selezionati. Durante l&#39;erogazione del CS, un segnale viene inviato all&#39;attuatore flessione che sposta il pettine e porta alla vibrazione delle basette 17. 16,18,19. La stimolazione baffo motivo è stato scelto per il CS in questo paradigma sperimentale è la dipendenza degli animali murini sul loro vibrisse per l&#39;input informazioni somatosensoriali durante l&#39;esplorazione. Stimolazione baffo ha dimostrato di essere un affidabile ed efficace CS 20. Inoltre, dato il substrato ben consolidata e organizzato corticale del sistema vibrisse (vale a dire, la corteccia barile), la stimolazione baffo come il CS fornisce uno strumento elegante per mappare i cambiamenti corticali e la plasticità connessi con l&#39;apprendimento eyeblink condizionata 20,21. Un sistema di testa fissa consente la precisa stimolazione di baffi selezionati per confrontare le risposte tra i neuroni e neuroni ricevono input da baffi non-stimolata stimolati. Infine, molti ceppi di topi mostrano perdita dell&#39;udito legata all&#39;età come relativamente giovani adulti <sup&gt; 22, e la chiusura delle palpebre durante un batter condizionata altera un CS visivo (anche se un CS visiva fa migliorare i problemi con startle risposte 16). stimolazione baffo non è influenzata da una di queste complicazioni. Presentato qui sono modifiche uniche e importanti su altri preparati testa-fisso per eyeblink condizionata, compresi i metodi di CS e US consegna, e l&#39;acquisizione della risposta eyeblink. L&#39;affidabilità di questo apparecchio e il paradigma di formazione nel condizionamento eyeblink è dimostrato imparando curve da topi condizionata e una curva di apprendimento relativamente piatta da animali di controllo pseudoconditioned (Figura 7a).

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1351">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:436px;">Exervo TeraNova Foam Roller 36&#34; x 6&#34;&#160;</td>
			<td style="width:357px;">Amazon</td>
			<td style="width:181px;">B002ONUM0E</td>
			<td style="width:377px;">For cylinder</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:436px;">Plexiglas</td>
			<td style="width:357px;"></td>
			<td></td>
			<td>Custom-made; 1 cm thick</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:436px;">Metal Rods (12.7mm diameter)</td>
			<td style="width:357px;"></td>
			<td></td>
			<td>Custom-made</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:436px;">4-40 machine screw (.25 in long)</td>
			<td style="width:357px;">Amazon Supply</td>
			<td>&#160;B00F33Q8QO</td>
			<td>For cylinder</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:436px;">Classic Design Hair Comb</td>
			<td style="width:357px;">Conair</td>
			<td style="width:181px;">93505WG-320</td>
			<td>For whisker stimulation</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">2-Layer Rectangular Bending Actuator</td>
			<td style="width:357px;">Piezo Systems</td>
			<td>T220-A4-303X&#160;</td>
			<td>For whisker stimulation</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Solder and Flux Kit</td>
			<td style="width:357px;">Piezo Systems</td>
			<td>MSF-003-NI</td>
			<td>For whisker stimulation</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Magnetic Base</td>
			<td style="width:357px;">Thor Labs</td>
			<td style="width:181px;">MB175</td>
			<td>For whisker stimulation</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Threaded rod for magnetic base</td>
			<td style="width:357px;"></td>
			<td style="width:181px;"></td>
			<td>Custom-made</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:436px;">Strips based on 221 series nylon strip connectors from Electronic Connector Corp.</td>
			<td style="width:357px;"></td>
			<td style="width:181px;"></td>
			<td>Custom-made, based on Weiss and Disterhoft, 2008</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">TO-220 Style Transistor</td>
			<td style="width:357px;">Amazon Supply</td>
			<td>B0002ZPZYO&#160;</td>
			<td>For connector; for the wings</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Relia-Tac Sockets</td>
			<td style="width:357px;">Electronic Connector Corp.</td>
			<td style="width:181px;">220-S02</td>
			<td>For connector</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Relia-Tac Pins</td>
			<td style="width:357px;">Electronic Connector Corp.</td>
			<td style="width:181px;">220-P02</td>
			<td>For headpiece</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">0-80 stainless steel machine screw (1 in. long)</td>
			<td>Amazon Supply</td>
			<td>B000FN68EE</td>
			<td>Locking Screw</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">0-80 stainless steel machine screw hex nut (5/32 in. thick)</td>
			<td>Amazon Supply</td>
			<td>B000N2TK7Y</td>
			<td>Locking Screw Head</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Loctite Super Glue-Liquid</td>
			<td>Loctite</td>
			<td>1365896</td>
			<td>Cyanoacrylic glue; for the locking screw</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Quick Setting Epoxy</td>
			<td style="width:357px;">Ace Hardware</td>
			<td>18613</td>
			<td>For connector and whisker stimulation system</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Ethernet Cable Wires</td>
			<td style="width:357px;"></td>
			<td></td>
			<td>Ethernet cable can be taken apart to use the individual wires for the connector</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:436px;">Polyimide coated stainless steel wires (2 in. long, .005 in. diameter)</td>
			<td style="width:357px;">PlasticsOne</td>
			<td>005sw/2.0 37365 S-S&#160;</td>
			<td>For headpiece, EMG and shock wires</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Stainless steel uncoated wire (.005 in. diameter)</td>
			<td style="width:357px;">AM Systems</td>
			<td>792800</td>
			<td>For headpiece, ground wires</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Tenma Variable Autotransformer</td>
			<td style="width:357px;">Tenma</td>
			<td>72-110</td>
			<td>For the whisker stimulation; rheostat to adjust current to the bending actuator</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Amplifier</td>
			<td style="width:357px;">A-M Systems</td>
			<td>1700</td>
			<td>Amplifier for filtering and amplifying EMG signals</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">WPI A385R stimulus isolator</td>
			<td style="width:357px;">World Precision Instruments</td>
			<td>31405</td>
			<td>For the electrical shock</td>
		</tr>
		<tr height="18">
			<td height="18" style="height:18px;width:436px;">Isothesia (Isoflurane)</td>
			<td style="width:357px;">Henry Schein: Animal Health</td>
			<td style="width:181px;">50031</td>
			<td>For surgery; anesthesia</td>
		</tr>
		<tr height="18">
			<td height="18" style="height:18px;width:436px;">Buprenex Injectable CIII</td>
			<td style="width:357px;">Reckett Benckiser Pharmaceuticals Inc</td>
			<td style="width:181px;">NDC 12496-0757-1</td>
			<td>For surgery; analgesic</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Akwa Tears: Lubricant Ophthalmic Ointment&#160;</td>
			<td style="width:357px;">Akorn</td>
			<td style="width:181px;">NDC 17478-062-35</td>
			<td>Artificial tear ointment to prevent dry eyes while under anesthesia</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Povidine-Iodine Prep Pads</td>
			<td style="width:357px;">PDI</td>
			<td>NDC 10819-3883-1</td>
			<td>For surgery; antiseptic</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Alcohol Prep Pads</td>
			<td style="width:357px;"></td>
			<td style="width:181px;"></td>
			<td>May be purchased from any standard pharmacy</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Stainless steel surgical scalpel handles (no.3)</td>
			<td style="width:357px;">Integra Miltex&#160;</td>
			<td>4-7.</td>
			<td>For surgery</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Stainless steel surgical scalpel blades</td>
			<td style="width:357px;">Integra Miltex</td>
			<td style="width:181px;">4-310 or 4-315</td>
			<td>For surgery; number 10 or 15 scalpel blade</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">3% Hydrogen Peroxide</td>
			<td style="width:357px;"></td>
			<td style="width:181px;"></td>
			<td>May be purchased from any standard pharmacy</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Micro Clip</td>
			<td style="width:357px;">Roboz</td>
			<td style="width:181px;">RS-5459</td>
			<td>For surgery, to hold back skin</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">00-90 stainless steel machine screw (0.0625 in. long)&#160;</td>
			<td style="width:357px;">Amazon Supply</td>
			<td>B002SG89X4&#160;</td>
			<td>For surgery, to wrap ground wire around</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Professional Rotary Tool</td>
			<td style="width:357px;">Walnut Hollow</td>
			<td>29637</td>
			<td>Hand drill for surgery, to drill holes in skull</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Inverted Cone Burr</td>
			<td style="width:357px;">Roboz</td>
			<td>RS-6282C-34</td>
			<td>Inverted cone burr size 34; for surgery, to drill holes in skull</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Engraving Cutter Drill Bit</td>
			<td style="width:357px;">Dremel</td>
			<td>106</td>
			<td>Engraving cutter; 1.6 mm bit; for surgery, to drill holes in skull</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">C&#38;B Metabond-Quick! Cement System &#34;B&#34; Quick Base</td>
			<td style="width:357px;">Parkell</td>
			<td style="width:181px;">S398</td>
			<td>For surgery; adhesive luting cement system; important to prevent headpiece avulsion</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">C&#38;B Metabond-Quick! Cement System Clear L-Powder</td>
			<td style="width:357px;">Parkell</td>
			<td style="width:181px;">S399</td>
			<td>For surgery; adhesive luting cement system; important to prevent headpiece avulsion</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:436px;">C&#38;B Metabond-Quick! Cement System &#34;C&#34; Universal TBB Catalyst 0.7 ml</td>
			<td style="width:357px;">Parkell</td>
			<td style="width:181px;">S371</td>
			<td>For surgery; adhesive luting cement system; important to prevent headpiece avulsion</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:436px;">C&#38;B Metabond-Quick! Cement System Ceramic Mixing Dish with temperature strip</td>
			<td style="width:357px;">Parkell</td>
			<td style="width:181px;">S387</td>
			<td>For surgery; adhesive luting cement system; important to prevent headpiece avulsion</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:436px;">Swiss Tweezers, style #5</td>
			<td style="width:357px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:181px;">504506</td>
			<td>For surgery</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Puritan Cotton-Tipped Applicators</td>
			<td style="width:357px;">VWR International</td>
			<td>10806-005&#160;</td>
			<td>For surgery</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:436px;">Dental Caulk Grip Cement Kit</td>
			<td style="width:357px;">Dentsply</td>
			<td>675570</td>
			<td>For surgery; dental cement</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

whisker-signaled eyeblink classical conditioning in head-fixed mice

Eyeblink conditioning is a common paradigm for investigating the neural mechanisms underlying learning and memory. To better utilize the extensive repertoire of scientific techniques available to study learning and memory at the cellular level, it is ideal to have a stable cranial platform. Because mice do not readily tolerate restraint, they are usually trained while moving about freely in a chamber. Conditioned stimulus (CS) and unconditioned stimulus (US) information are delivered and eyeblink responses recorded via a tether connected to the mouse's head. In the head-fixed apparatus presented here, mice are allowed to run as they desire while their heads are secured to facilitate experimentation. Reliable conditioning of the eyeblink response is obtained with this training apparatus, which allows for the delivery of whisker stimulation as the CS, a periorbital electrical shock as the US, and analysis of electromyographic (EMG) activity from the eyelid to detect blink responses.

8-10 settimane di età topi maschi C57Bl6 / J sono stati formati sulla traccia eyeblink condizionata sull&#39;apparato tapis roulant cilindrica testa fissa. 8 topi sono stati addestrati con le presentazioni appaiate CS-Stati Uniti (gruppo condizionata) e 9 topi sono stati addestrati con le presentazioni spaiati CS e statunitensi (gruppo pseudoconditioned). Esempio EMG registrazioni di una risposta condizionata da un mouse cond...

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Whisker-signaled Eyeblink Classical Conditioning in Head-fixed Mice

The preparation presented here for whisker-signaled eyeblink conditioning in head-fixed mice precisely stimulates specific whiskers while allowing mice to ambulate on a cylindrical treadmill. A whisker stimulation conditioned stimulus (CS) paired with a periorbital shock unconditioned stimulus (US) results in reliable associative learning on this apparatus.

Baffo-segnalato Eyeblink condizionamento classico nei topi Head-fisso

Eyeblink conditioning is a common paradigm for investigating the neural mechanisms underlying learning and memory. To better utilize the extensive ...

Research

JoVE Journal

Behavior

Contextual and Cued Fear Conditioning Test Using a Video Analyzing System in Mice

Contestuali e Cued paura condizionata test utilizzando un sistema di video Analizzare in topi

The contextual and cued fear conditioning test is one of the behavioral tests that assesses the ability of mice to learn and remember an association ...

Ricerca

Comportamento

A Fully Automated Rodent Conditioning Protocol for Sensorimotor Integration and Cognitive Control Experiments

Un completamente automatizzata Roditore condizionata Protocollo per Sensomotoria Integrazione e esperimenti di controllo cognitive

Rodents have been traditionally used as a standard animal model in laboratory experiments involving a myriad of sensory, cognitive, and motor tasks. ...

Trace Fear Conditioning in Mice

Trace paura condizionata in topi

In this experiment we present a technique to measure learning and memory. In the trace fear conditioning protocol presented here there are five pairings ...

The Modified Hole Board - Measuring Behavior, Cognition and Social Interaction in Mice and Rats

The Hole Consiglio Modified - Behavior, Cognition e l&#39;interazione sociale in topi e ratti di misura

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure ...

Quantifying Social Motivation in Mice Using Operant Conditioning

Quantificare motivazione sociale nei topi mediante condizionamento operante

In this protocol, social motivation is measured in mice through a pair of operant conditioning paradigms. To conduct the experiments, two-chambered ...

Classical Short-Delay Eyeblink Conditioning in One-Year-Old Children

Classica-ritardo Eyeblink condizionata a One-Year-Old Children

Classical eyeblink conditioning (EBC) refers to the learned association between a conditioned stimulus (an auditory tone) and an unconditioned stimulus (a ...

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Visual condizionamento classico in legna formiche

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Operant Conditioning Task to Measure Song Preference in Zebra Finches

Attività di condizionamento operante per misurare la preferenza canzone in finches zebra

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Valutazione della funzione di memoria nei topi epilettici indotti da pilocarpina

Cognitive impairment is one of the most common comorbidities in temporal lobe epilepsy. To recapitulate epilepsy-associated cognitive decline in an animal ...