Name: curtain flow column: optimization of efficiency and sensitivity
Uploaded: 2016-06-12T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Curtain Flow Column: Optimization of Efficiency and Sensitivity at JoVE.com

One of the authors (DK) acknowledges the receipt of an Australian Postgraduate Award.

Forsiktig: Se sikkerhetsdatablad (HMS) for alle materialer og reagenser før bruk (dvs. datablad for metanol). Sørg for bruk av alle nødvendige sikkerhetsrutiner ved håndtering av løsemidler og High Performance Liquid Chromatography (HPLC) elueringsmiddel. Sørg for riktig bruk av tekniske kontroller av HPLC, analytisk balanse og detektor instrumentering, og sikre bruk av personlig verneutstyr (vernebriller, hansker, frakk, full lengde bukser og lukket-toe sko). Merk: Denne prot...

<ol>
	<li>Camenzuli, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+parallel+segmented+outlet+flow+columns+for+enhanced+mass+spectral+sensitivity+at+high+chromatographic+flow+rates.">The use of parallel segmented outlet flow columns for enhanced mass spectral sensitivity at high chromatographic flow rates.</a> Rapid Commun. Mass Sp. 26 (8), 943-949 (2012).</li><li>Camenzuli, M., Ritchie, H. J., Ladine, J. R., Shalliker, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+separation+performance+using+a+new+column+technology:+Parallel+segmented+outlet+flow.">Enhanced separation performance using a new column technology: Parallel segmented outlet flow.</a> J. Chromatogr. A. 1232, 47-51 (2012).</li><li>Camenzuli, M., Ritchie, H. J., Shalliker, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gradient+elution+chromatography+with+segmented+parallel+flow+column+technology:+A+study+on+4.6mm+analytical+scale+columns.">Gradient elution chromatography with segmented parallel flow column technology: A study on 4.6mm analytical scale columns.</a> J. Chromatogr. A. 1270, 204-211 (2012).</li><li>Camenzuli, M., Ritchie, H. J., Shalliker, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+HPLC+separation+performance+using+parallel+segmented+flow+chromatography.">Improving HPLC separation performance using parallel segmented flow chromatography.</a> Microchem. J. 111, 3-7 (2013).</li><li>Camenzuli, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parallel+segmented+outlet+flow+high+performance+liquid+chromatography+with+multiplexed+detection.">Parallel segmented outlet flow high performance liquid chromatography with multiplexed detection.</a> Anal. Chim. Acta. 803, 154-159 (2013).</li><li>Kocic, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+through-put+and+highly+sensitive+liquid+chromatography-tandem+mass+spectrometry+separations+of+essential+amino+acids+using+active+flow+technology+chromatography+columns.">High through-put and highly sensitive liquid chromatography-tandem mass spectrometry separations of essential amino acids using active flow technology chromatography columns.</a> J. Chromatogr. A. 1305, 102-108 (2013).</li><li>Shalliker, R. A., Ritchie, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Segmented+flow+and+curtain+flow+chromatography:+Overcoming+the+wall+effect+and+heterogeneous+bed+structures.">Segmented flow and curtain flow chromatography: Overcoming the wall effect and heterogeneous bed structures.</a> J. Chromatogr. A. 1335, 122-135 (2014).</li><li>Shellie, R., Haddad, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comprehensive+two-dimensional+liquid+chromatography.">Comprehensive two-dimensional liquid chromatography.</a> Anal. Bioanal. Chem. 386 (3), 405-415 (2006).</li><li>Abia, J. A., Mriziq, K. S., Guiochon, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radial+heterogeneity+of+some+analytical+columns+used+in+high-performance+liquid+chromatography.">Radial heterogeneity of some analytical columns used in high-performance liquid chromatography.</a> J. Chromatogr. A. 1216 (15), 3185-3191 (2009).</li><li>Knox, J. H., Laird, G. R., Raven, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interaction+of+radial+and+axial+dispersion+in+liquid+chromatography+in+relation+to+the+&amp;#34;infinite+diameter+effect&amp;#34.">Interaction of radial and axial dispersion in liquid chromatography in relation to the &amp;#34;infinite diameter effect&amp;#34.</a> J. Chromatogr. A. 122, 129-145 (1976).</li><li>Miyabe, K., Guiochon, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estimation+of+the+column+radial+heterogeneity+from+an+analysis+of+the+characteristics+of+tailing+peaks+in+linear+chromatography.">Estimation of the column radial heterogeneity from an analysis of the characteristics of tailing peaks in linear chromatography.</a> J. Chromatogr. A. 830 (1), 29-39 (1999).</li><li>Shalliker, R. A., Scott Broyles, B., Guiochon, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axial+and+radial+diffusion+coefficients+in+a+liquid+chromatography+column+and+bed+heterogeneity.">Axial and radial diffusion coefficients in a liquid chromatography column and bed heterogeneity.</a> J. Chromatogr. A. 994 (1-2), 1-12 (2003).</li><li>Gritti, F., Guiochon, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+the+thermal+heterogeneity+of+the+column+on+chromatographic+results.">Effects of the thermal heterogeneity of the column on chromatographic results.</a> J. Chromatogr. A. 1131 (1-2), 151-165 (2006).</li><li>Shalliker, R. A., Wong, V., Broyles, B. S., Guiochon, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualization+of+bed+compression+in+an+axial+compression+liquid+chromatography+column.">Visualization of bed compression in an axial compression liquid chromatography column.</a> J. Chromatogr. A. 977 (2), 213-223 (2002).</li><li>Tallarek, U., Albert, K., Bayer, E., Guiochon, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+transverse+and+axial+apparent+dispersion+coefficients+in+packed+beds.">Measurement of transverse and axial apparent dispersion coefficients in packed beds.</a> AICHE J. 42 (11), 3041-3054 (1996).</li><li>Camenzuli, M., Ritchie, H. J., Ladine, J. R., Shalliker, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Active+flow+management+in+preparative+chromatographic+separations:+A+preliminary+investigation+into+enhanced+separation+using+a+curtain+flow+inlet+fitting+and+segmented+flow+outlet.">Active flow management in preparative chromatographic separations: A preliminary investigation into enhanced separation using a curtain flow inlet fitting and segmented flow outlet.</a> J. Sep. Sci. 35 (3), 410-415 (2012).</li><li>Shalliker, R. A., Broyles, B. S., Guiochon, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physical+evidence+of+two+wall+effects+in+liquid+chromatography.">Physical evidence of two wall effects in liquid chromatography.</a> J. Chromatogr. A. 888 (1-2), 1-12 (2000).</li><li>Shalliker, R. A., Camenzuli, M., Pereira, L., Ritchie, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parallel+segmented+flow+chromatography+columns:+Conventional+analytical+scale+column+formats+presenting+as+a+'virtual'+narrow+bore+column.">Parallel segmented flow chromatography columns: Conventional analytical scale column formats presenting as a 'virtual' narrow bore column.</a> J. Chromatogr. A. 1262, 64-69 (2012).</li><li>Camenzuli, M., Ritchie, H. J., Ladine, J. R., Shalliker, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+design+of+a+new+concept+chromatography+column.">The design of a new concept chromatography column.</a> Analyst. 136 (24), 5127-5130 (2011).</li><li>Foley, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Precision+and+Reliability:+an+Intercontinental+Study+of+Curtain+Flow+Chromatography.">Precision and Reliability: an Intercontinental Study of Curtain Flow Chromatography.</a> Thermo Scientific. , (2013).</li><li>Pravadali-Cekic, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multidimensional+Approaches+for+the+Analysis+of+Complex+Samples+using+HPLC.">Multidimensional Approaches for the Analysis of Complex Samples using HPLC.</a> University of Western Sydney. , (2014).</li><li>Soliven, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+the+performance+of+narrow-bore+HPLC+columns+using+active+flow+technology.">Improving the performance of narrow-bore HPLC columns using active flow technology.</a> Microchem. J. 116, 230-234 (2014).</li><li>Foley, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Curtain+flow+chromatography+('the+infinite+diameter+column')+with+automated+injection+and+high+sample+through-put:+The+results+of+an+inter-laboratory+study.">Curtain flow chromatography ('the infinite diameter column') with automated injection and high sample through-put: The results of an inter-laboratory study.</a> Microchem. J. 110, 127-132 (2013).</li></ol>

Denne studien involverte interlaboratorieanalyse av CF kromatografikolonner å teste den analytiske ytelsen når det gjelder effektivitet og følsomhet. CF Kolonnen ble satt opp med en dobbel pumpesystem som beskrevet i avsnittet &quot;tre. To pumper systemet satt opp &quot;for å oppnå et strømningsforhold på 40:60 (sentrum: perifert) på innløpet til CF-kolonnen. Den 40:60 (sentrum: perifert) Flytforholdet ble oppnådd ved å sette strømningshastigheten for hver pumpe til den verdi som representerer 40% og 60% av...

I de senere år kolonne teknologi for High Performance Liquid Chromatography (HPLC) har avansert sterkt; peak kapasiteter har økt betydelig mye takket være bruken av mindre partikkelstørrelser, og de mer effektive kjerneskallpartikler. Siden separasjoner er generelt mer effektive, har en flyt på effekten vært en økning i følsomhet siden toppene er nå skarpere og dermed høyere 1-8. Likevel er radial seng heterogenitet fremdeles en begrensende faktor i utførelsen av alle kolonner, men dette er ikke en ny historie siden chromatographers har kjent dette i mange år. Kolonne senger er heterogene i både radiell retning 9-12, og langs søyleaksen 10,12-15. Veggen-effekt spesielt er en viktig bidragsyter til tap av separasjon ytelse 7,16-18. Shalliker og Ritchie 7 nylig anmeldt aspekter av kolonnen seng heterogenitet og dermed dette trenger ikke være discussed her lenger. Selv om det tilstrekkelig å si, at variasjonen i kolonnepakketetthet og veggen effektene fører til en forvrengning av den oppløste substans pluggen, slik at båndene ble eluert gjennom kolonnen i plugger som ligner delvis fylt suppe skåler i stedet for tynne, flate faste plater 7 som er vanligvis avbildet i grunnleggende undervisningstekster. Når forsøk ble foretatt slik at oppløsningsmaterialet migrering gjennom sjiktet kan bli visualisert pluggprofilene inne i kolonnen var delvis hul og haleseksjonen av båndet er stort sett den veggkomponent av prøven pluggen. Sluttresultatet er at det tar mange flere plater for å skille disse &quot;delvis hul &#39;plugger enn det som ville være nødvendig hvis skivene var solid og flat 12,14,17. For å overvinne bandet bredere problemstillinger knyttet til vegg effekter og variasjonen i radialpakketetthet, ble en ny form for kolonne teknologi kjent som Active Flow Technology (AFT) designet 7,19. Hensikten med dette designet varfor å fjerne vegg effekter via fysisk separasjon av oppløsningsmiddel som elueres langs veggområdet, fra den for mobil fase eluering i radial sentrale regionen av kolonnen 19. Det finnes to hovedtyper av AFT kolonner; Parallelle segmentert Flow (PSF) kolonner og Curtain Flow (CF) kolonner 7. Siden denne protokollen er rettet mot bruk og optimalisering av CF kolonner, PSF kolonner vil ikke bli nærmere omtalt. Gardin Flow (CF) Gardinstrømnings (CF) kolonne formater utnytte AFT endebeslag på både innløpet og utløpet av kolonnen. AFT endebeslag består av en ringformet frit plassert inne i et multi passende. Fritten består av tre deler: en porøs radial sentral del som er på linje med den sentrale porten på endestykket, en porøs ytre del som er på linje med den ytre port (er) av endestykket, og en ugjennomtrengelig ring som skiller de to porøse deler og hindre eventuelle kryssmold flyt mellom de radiale sentrale og ytre områder av fritten 19. Figur 1 illustrerer konstruksjonen av AFT fritte og Figur 2 viser CF kolonneformat. I denne operasjonsmodus (CF) prøven injiseres i radial sentral port av innløpsrøret, mens andre mobil fase innføres gjennom den perifere port av innløpet til &quot;gardin&quot; migrasjon av oppløste stoffer gjennom det radiale midtområdet av søyle. Derav prøven kommer inn i sjiktet i radial sentrale regionen av kolonnen med det ytre område av kolonnen med mobil fase bare passerte gjennom den. Studier har vist at en volumetrisk strømningshastighet forhold på rundt 40:60 (av typen: perifert port) for innløpsenden montering av en 4,6 mm indre diameter (ID) kolonne er optimal 6,7,16. Den aktre utløp CF kolonnen tillater justering av det sentrale og perifere strømnings til deres relative andel og kan varieres på nesten hvilken som helst ønsket Ratio gjennom trykkstyring. Optimalisering av et CF kolonne kan forbedre ulike funksjonelle aspektene av kolonnen teknologi, for eksempel separasjonseffektivitet eller følsomhet. På denne måten en &quot;vegg-mindre&quot;, &quot;uendelig-diameter&quot; eller &quot;virtuelle kolonnen er etablert 6,10,18,20. Hensikten med CF kolonner er å aktivt styre migrering av prøven gjennom kolonnen for å forhindre at prøven fra å nå frem til veggområdet. Således blir det oppløste stoffet konsentrasjon på utgang til detektoren maksimert, og øker følsomheten på ca. 2,5 ganger større enn den konvensjonelle kolonne-format ved bruk av ultrafiolett (UV) deteksjon 16, og enda større ved bruk av masse-spektrale deteksjon 6. CF kolonner er ideell for lav konsentrasjon prøvene, siden detekteringssensitiviteten økes. Videre, de er ideelle når koplet til strømningshastighet begrenset detektorer, slik som massespektrometer (MS) 6. en AFT-kolonne i en 4,6 mm id format, for eksempel kan være innstilt til å levere det samme volumet av oppløsningsmiddel til en detektor som en standard 2,1 mm kolonne id format når opereres ved de samme lineære hastigheter, ved å justere avslutter sentrale strømnings til 21%. Likeledes AFT-kolonnen kan også være innstilt til å levere den samme volumbelastningen til en detektor som en 3,0 mm ID-kolonne, ved å justere avslutter sentrale strømnings til 43%. Faktisk noen &quot;virtuelle&quot; kolonneformatet kunne bli produsert for å dekke den analytiske krav 6,18,22. Ved hjelp av disse spesielt utformede endebeslag ved innløpet og utløpet sørger for at en sann vegg mindre kolonne er etablert. Det er to måter å sette opp løsemiddel leveringssystemet til de sentrale og perifere havner i innløpet. Split-flow system seks og to pumpesystem 6,7 Figur 3 illustrerer hver av disse CF system sett ups. Split-flow-system jegna split-flow-system (figur 3A) pumpestrømningen som fører til injektoren er delt pre-injektor ved anvendelse av en null-dødvolum T-stykke, hvor en strømning av mobil fase er forbundet med injektoren, som deretter kobles til sentral port av innløpsenden montering av kolonnen. Den andre strømnings strøm av mobil fase by-pass injektoren og er forbundet med den ytre port på innløpet av kolonnen. Under oppdeling av strømningen, blir strømningen prosent justert til 40:60 (sentrum: perifert) før linjene er koblet til kolonnen, det vil si, fra injektor for å sentrere og pumpe til perifert. To pumpesystem CF-kolonne krever to strømningsstrømmer ved innløpsenden montering av kolonnen. Avhengig av typen av prøvetageren / injektor av den HPLC-instrument, split-flow satt opp kan ikke være mulig, og slik at CF kan da oppnås gjennom 2 pumper (figur 3B) 21. Hver pumpe er tilordnet og koblet til enten den sentrale eller perifere port og strømningshastigheten er innstilt til å representere 40% av strømningen for den sentrale åpning og 60% for perifer port. For eksempel, hvis den totale strømningshastigheten er 1,0 ml min-1, er den sentrale pumpestrømningshastighet innstilt på 0,4 ml min -1 og den perifere pumpen er innstilt på 0,6 ml min-1. Valget av hvilken virkemåte er i stor grad avhengig av HPLC-instrumentering og kromatografisk virkemåte. For eksempel i noen autosamplers en endring i trykk mellom prøvebelastning stilling og prøven injisere stilling kan forekomme forstyrre split-flow ratio, og således i dette tilfelle en dobbeltpumpe satt opp vil bli anbefalt for optimal CF ytelse. Uavhengig av løsningsmiddelavgivelsessystemet satt opp valgt for innløp av CF-kolonne, forblir CF utløp optimaliseringen den samme. Utløpet sentrale port av CF-kolonnen er festet til den ultrafiolette-synlige (UV-Vis) detektor med smalforat volum mulig av røret for å minimere effekten av post-kolonne dødvolum. Siden, CF kolonner ligne smal Boret kolonner, er død volum mellom kolonne utløp og melderen skadelig for separasjon ytelsen til CF kolonnen. Det er avgjørende for å sikre den minste mengden av volumet av røret mellom den sentrale port og UV-Vis detektor for å minimalisere virkningene av dødvolum som bandets utvidelse, tap i effektivitet og følsomhet. Derfor er bruk av smale boring rør (0,1 mm id) anbefales å lett la press justeringer uten å legge upassende dødt volum. Tubing er også knyttet til det perifere port og ledet til avfall. Ved utløpet av CF-kolonnen, kan segmentering forholdet justeres til hvilket som helst forhold som passer til formålet med analytikeren. Når en 4,6 mm id CF brukes, for eksempel, er det ofte hensiktsmessig å sette forholdet som enten 43:57 eller 21:79 (senter: perifer) for å etterligne en &quot;virtuell&quot; 3.0 mm id kolonnen eller 2,1 mm id kolonne,respektfullt. På den måten separasjon ytelsen er lett benk-merket. Segmenteringsforholdet blir målt ved å veie mengden av strømning som kommer ut fra den detektor som er koplet til den sentrale port og strømmer som kommer ut av omkrets port over en periode tid. Den prosentvise strømning gjennom hver port kan deretter bestemmes og forholdene kan justeres ved å endre lengden av røret er festet, eller ved hjelp av rør som har en annen innvendig diameter (id). Denne videoen protokollen detaljer drift og optimalisering prosedyrer for et CF kolonne for forbedret kromatografisk ytelse.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="686">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">HPLC instrument</td>
			<td style="width:167px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:185px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Additional Pump</td>
			<td style="width:167px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Required if 2 pump CF system set up is to be used.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Curtain Flow HPLC column</td>
			<td style="width:167px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">Not Defined</td>
			<td>Soon to be commercialised</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Methanol</td>
			<td style="width:167px;">Any brand</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>HPLC Grade</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">PEEK tubing</td>
			<td style="width:167px;">Any brand</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Various lengths and i.d.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">PEEK tube cutter</td>
			<td style="width:167px;">Any brand</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Analytical Scale Balance</td>
			<td style="width:167px;">Any brand</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Stop watch</td>
			<td style="width:167px;">Any brand</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Eluent collection vessels</td>
			<td style="width:167px;">Any brand</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>1-2 mL Sample vials can be used as eluent collection vessels</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">T-piece</td>
			<td>Any brand</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

curtain flow column: optimization of efficiency and sensitivity

Active Flow Technology (AFT) is a form of column technology that increases the separation performance of a HPLC column through the use of a specially purpose built multiport end-fitting(s). Curtain Flow (CF) columns belong to the AFT suite of columns, specifically the CF column is designed so that the sample is injected into the radial central region of the bed and a curtain flow of mobile phase surrounding the injection of solute prevents the radial dispersion of the sample to the wall. The column functions as an 'infinite diameter' column. The purpose of the design is to overcome the radial heterogeneity of the column bed, and at the same time maximize the sample load into the radial central region of the column bed, which serves to increase detection sensitivity. The protocol described herein outlines the system and CF column set up and the tuning process for an optimized infinite diameter 'virtual' column.

AFT kolonner ble utviklet ved hjelp av en spesialisert frit design (figur 1) i multikolonneendebeslag til å overvinne kolonne seng heterogenitet i og forbedre separasjons ytelse. En inter-laboratorium studie om separasjon ytelsen til CF kromatografikolonner (figur 2) ble gjennomført med et dobbelt pumpesystem satt opp (figur 3B) som beskrevet i kapittel 3 i denne protokoll 23. En tre-komponent testblandingen ble analysert un...

Watch this Scientific Journal Video about Curtain Flow Column: Optimization of Efficiency and Sensitivity at JoVE.com

Curtain Flow Column: Optimization of Efficiency and Sensitivity

Here, we present a protocol for the operation and optimization of Active Flow Technology (AFT) column in Curtain flow (CF) mode for enhanced separation performance.

Gardin Flow Kolonne: Optimalisering av effektivitet og følsomhet

Active Flow Technology (AFT) is a form of column technology that increases the separation performance of a HPLC column through the use of a specially ...

Research

JoVE Journal

Chemistry

Use of Stopped-Flow Fluorescence and Labeled Nucleotides to Analyze the ATP Turnover Cycle of Kinesins

Bruk av Stoppet-Flow fluorescens og merkede nukleotider Analyser ATP Omsetning Cycle of kinesins

The kinesin superfamily of microtubule associated motor proteins share a characteristic motor domain which both hydrolyses ATP and binds microtubules. ...

Transport of Surface-modified Carbon Nanotubes through a Soil Column

Transport av Surface-modifisert karbonnanorør gjennom en Soil kolonne

Carbon nanotubes (CNTs) are widely manufactured nanoparticles, which are being utilized in a number of consumer products, such as sporting goods, ...

Optimization of Synthetic Proteins: Identification of Interpositional Dependencies Indicating Structurally and/or Functionally Linked Residues

Optimalisering av Syntetisk Proteiner: Identifisering av Interpositional Avhengig Hente Strukturelt og / eller Funksjonelt Koblede Rester

Protein alignments are commonly used to evaluate the similarity of protein residues, and the derived consensus sequence used for identifying functional ...

Tuning a Parallel Segmented Flow Column and Enabling Multiplexed Detection

Tuning en parallell segmentert Flow Column og Aktivere Multiplexed Detection

Active flow technology (AFT) is new form of column technology that was designed to overcome flow heterogeneity to increase separation performance in terms ...

Post Column Derivatization Using Reaction Flow High Performance Liquid Chromatography Columns

Post Column Derivatisering Bruke Reaction Flow High Performance Liquid Chromatography Columns

A protocol for the use of reaction flow high performance liquid chromatography columns for methods employing post column derivatization (PCD) is ...

Improved Heterojunction Quality in Cu2O-based Solar Cells Through the Optimization of Atmospheric Pressure Spatial Atomic Layer Deposited Zn1-xMgxO

Improved Heterojunction Quality in Cu2O-based Solar Cells Through the Optimization of Atmospheric Pressure Spatial Atomic Layer Deposited Zn1-xMgxO

Forbedret hetero Kvalitet i Cu<sub&gt; 2</sub&gt; O-baserte solceller gjennom optimalisering av Atmosfærisk trykk Spatial Atomic Layer Deponert<br /&gt; Zn<sub&gt; 1-x</sub&gt; Mg<sub&gt; x</sub&gt; O

Atmospheric pressure spatial atomic layer deposition (AP-SALD) was used to deposit n-type ZnO and Zn1-xMgxO thin films onto p-type thermally oxidized Cu2O ...

Radiolabeling and Quantification of Cellular Levels of Phosphoinositides by High Performance Liquid Chromatography-coupled Flow Scintillation

Radiomerking og Kvantifisering av Cellular Nivåer av Phosphoinositides ved HPLC-coupled Flow Scintillation

Phosphoinositides (PtdInsPs) are essential signaling lipids responsible for recruiting specific effectors and conferring organelles with molecular ...

A Protocol for Electrochemical Evaluations and State of Charge Diagnostics of a Symmetric Organic Redox Flow Battery

En protokoll for Elektro Evalueringer og ladetilstand Diagnostikk av en Symmetric Organic Redox Flow Battery

Redox flow batteries have been considered as one of the most promising stationary energy storage solutions for improving the reliability of the power grid ...

Continuous Flow Chemistry: Reaction of Diphenyldiazomethane with p-Nitrobenzoic Acid

Continuous Flow Chemistry: Reaction of Diphenyldiazomethane with p-Nitrobenzoic Acid

Kontinuerlig kjemi: Reaksjon av Diphenyldiazomethane med p- Nitrobenzoic syre

Continuous flow technology has been identified as instrumental for its environmental and economic advantages leveraging superior mixing, heat transfer and ...

Synthesis of Platinum-nickel Nanowires and Optimization for Oxygen Reduction Performance

Syntese av Platinum-nikkel Nanowires og optimalisering for oksygen ytelse

Platinum-nickel (Pt-Ni) nanowires were developed as fuel cell electrocatalysts, and were optimized for the performance and durability in the oxygen ...