Yeast Cell Culture and Radiolabeling of Phosphoinositides
2:58
Deacylation and Extraction of the Radiolabeled Phosphoinositides
5:14
Separation of Tritium-labeled Glycero-inositides by High Pressure Liquid Chromatography (HPLC)
7:15
Data Analysis
8:55
Results: HPLC Analysis of Radiolabeled Phosphoinositides
9:55
Conclusion
Transcript
The overall goal of this procedure is to measure the amount of each phosphoinositide species in cells under various genetic and environmental conditions in order to understand phosphoinositide function and regulation. Phosphoinositide lipids contr
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Fosfoinositídeos estão sinalizando lipídios, cuja abundância relativa muda rapidamente em resposta a vários estímulos. Este artigo descreve um método para medir a abundância de fosfoinositídeos por meio de rotulagem metabolicamente células com 3 H- mio-inositol, seguido por extracção e desacilação. Extraídos glicero-inositides são então separados por cromatografia líquida de alto desempenho e quantificadas por cintilação fluxo.