Name: a human glioblastoma organotypic slice culture model for study of tumor cell migration and patient-specific effects of anti-invasive drugs
Uploaded: 2017-07-20T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Human Glioblastoma Organotypic Slice Culture Model for Study of Tumor Cell Migration and Patient-specific Effects of Anti-Invasive Drugs at JoVE.com

We willen graag Dr. Lee Niswander en dr. Rada Massarwa bedanken voor hun technische expertise en bijdragen aan het hier beschreven sneeuwcultuur-confocale beeldvormingsprotocol. Verder dankzij dr. Kalen Dionne die deskundigheid verstrekt over het optimaliseren van hersen tumorweefsel snijden en kweekparameters.

Voordat het verzamelen van patiëntenweefselmonsters wordt gestart, moet op elke patiënt geïnformeerde toestemming worden verkregen onder een goedgekeurd Institutional Review Board (IRB) protocol. De auteurs van dit protocol hebben toestemming gekregen voor het werk dat wordt beschreven onder goedgekeurde IRB-protocollen bij het University of Colorado Hospital en Inova Fairfax Hospital. Gegevens verzameld uit deze segmentenculturen werden niet gebruikt om patiëntenzorg beslissingen te geven. <p class="jove_title"...

<ol>
	<li>Beadle, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+myosin+II+in+glioma+invasion+of+the+brain.">The role of myosin II in glioma invasion of the brain.</a> Mol Biol Cell. 19, 3357-3368 (2008).</li><li>Farin, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplanted+glioma+cells+migrate+and+proliferate+on+host+brain+vasculature:+a+dynamic+analysis.">Transplanted glioma cells migrate and proliferate on host brain vasculature: a dynamic analysis.</a> Glia. 53, 799-808 (2006).</li><li>Panopoulos, A., Howell, M., Fotedar, R., Margolis, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glioblastoma+motility+occurs+in+the+absence+of+actin+polymer.">Glioblastoma motility occurs in the absence of actin polymer.</a> Mol Biol Cell. 22, 2212-2220 (2011).</li><li>Ivkovic, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+inhibition+of+myosin+II+effectively+blocks+glioma+invasion+in+the+presence+of+multiple+motogens.">Direct inhibition of myosin II effectively blocks glioma invasion in the presence of multiple motogens.</a> Mol Biol Cell. 23, 533-542 (2012).</li><li>Assanah, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glial+progenitors+in+adult+white+matter+are+driven+to+form+malignant+gliomas+by+platelet-derived+growth+factor-expressing+retroviruses.">Glial progenitors in adult white matter are driven to form malignant gliomas by platelet-derived growth factor-expressing retroviruses.</a> J Neurosci. 26, 6781-6790 (2006).</li><li>Chaichana, K. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preservation+of+glial+cytoarchitecture+from+ex+vivo+human+tumor+and+non-tumor+cerebral+cortical+explants:+A+human+model+to+study+neurological+diseases.">Preservation of glial cytoarchitecture from ex vivo human tumor and non-tumor cerebral cortical explants: A human model to study neurological diseases.</a> J Neurosci Methods. 164, 261-270 (2007).</li><li>Grube, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overexpression+of+fatty+acid+synthase+in+human+gliomas+correlates+with+the+WHO+tumor+grade+and+inhibition+with+Orlistat+reduces+cell+viability+and+triggers+apoptosis.">Overexpression of fatty acid synthase in human gliomas correlates with the WHO tumor grade and inhibition with Orlistat reduces cell viability and triggers apoptosis.</a> J Neurooncol. 118, 277-287 (2014).</li><li>Hovinga, K. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+notch+signaling+in+glioblastoma+targets+cancer+stem+cells+via+an+endothelial+cell+intermediate.">Inhibition of notch signaling in glioblastoma targets cancer stem cells via an endothelial cell intermediate.</a> Stem Cells. 28, 1019-1029 (2010).</li><li>Merz, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organotypic+slice+cultures+of+human+glioblastoma+reveal+different+susceptibilities+to+treatments.">Organotypic slice cultures of human glioblastoma reveal different susceptibilities to treatments.</a> Neurooncol. 15, 670-681 (2013).</li><li>Xu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vorinostat+modulates+cell+cycle+regulatory+proteins+in+glioma+cells+and+human+glioma+slice+cultures.">Vorinostat modulates cell cycle regulatory proteins in glioma cells and human glioma slice cultures.</a> J Neurooncol. 105, 241-251 (2011).</li><li>Verhaak, R. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integrated+genomic+analysis+identifies+clinically+relevant+subtypes+of+glioblastoma+characterized+by+abnormalities.">Integrated genomic analysis identifies clinically relevant subtypes of glioblastoma characterized by abnormalities.</a> in PDGFRA, IDH1, EGFR, and NF1. Cancer cell. 17, 98-110 (2010).</li><li>Gill, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MRI-localized+biopsies+reveal+subtype-specific+differences+in+molecular+and+cellular+composition+at+the+margins+of+glioblastoma.">MRI-localized biopsies reveal subtype-specific differences in molecular and cellular composition at the margins of glioblastoma.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 111, 12550-12555 (2014).</li><li>Snuderl, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mosaic+amplification+of+multiple+receptor+tyrosine+kinase+genes+in+glioblastoma.">Mosaic amplification of multiple receptor tyrosine kinase genes in glioblastoma.</a> Cancer cell. 20, 810-817 (2011).</li><li>Kakita, A., Goldman, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patterns+and+dynamics+of+SVZ+cell+migration+in+the+postnatal+forebrain:+monitoring+living+progenitors+in+slice+preparations.">Patterns and dynamics of SVZ cell migration in the postnatal forebrain: monitoring living progenitors in slice preparations.</a> Neuron. 23, 461-472 (1999).</li><li>Meijering, E., Dzyubachyk, O., Smal, I., van Cappellen, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tracking+in+cell+and+developmental+biology.">Tracking in cell and developmental biology.</a> Sem Cell Dev Biol. 20, 894-902 (2009).</li><li>Parker, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gefitinib+selectively+inhibits+tumor+cell+migration+in+EGFR-amplified+human+glioblastoma.">Gefitinib selectively inhibits tumor cell migration in EGFR-amplified human glioblastoma.</a> Neurooncol. 15, 1048-1057 (2013).</li><li>Brat, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pseudopalisades+in+glioblastoma+are+hypoxic,+express+extracellular+matrix+proteases,+and+are+formed+by+an+actively+migrating+cell+population.">Pseudopalisades in glioblastoma are hypoxic, express extracellular matrix proteases, and are formed by an actively migrating cell population.</a> Cancer Res. 64, 920-927 (2004).</li><li>Shweiki, D., Itin, A., Soffer, D., Keshet, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+endothelial+growth+factor+induced+by+hypoxia+may+mediate+hypoxia-initiated+angiogenesis.">Vascular endothelial growth factor induced by hypoxia may mediate hypoxia-initiated angiogenesis.</a> Nature. 359, 843-845 (1992).</li><li>Shamir, E. R., Ewald, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+organotypic+culture:+experimental+models+of+mammalian+biology+and+disease.">Three-dimensional organotypic culture: experimental models of mammalian biology and disease.</a> Nat Rev Mol Cell Biol. 15, 647-664 (2014).</li><li>Charles, N. A., Holland, E. C., Gilbertson, R., Glass, R., Kettenmann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+brain+tumor+microenvironment.">The brain tumor microenvironment.</a> Glia. 60, 502-514 (2012).</li><li>Di Cristofori, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+vacuolar+H++ATPase+is+a+novel+therapeutic+target+for+glioblastoma.">The vacuolar H+ ATPase is a novel therapeutic target for glioblastoma.</a> Oncotarget. 6, 17514-17513 (2015).</li><li>Vaira, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+model+of+organotypic+culture+for+pharmacodynamic+profiling+of+human+tumors.">Preclinical model of organotypic culture for pharmacodynamic profiling of human tumors.</a> Proc Natl Acad Sci USA. , 8352-8356 (2010).</li><li>Gerlach, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Slice+cultures+from+head+and+neck+squamous+cell+carcinoma:+a+novel+test+system+for+drug+susceptibility+and+mechanisms+of+resistance.">Slice cultures from head and neck squamous cell carcinoma: a novel test system for drug susceptibility and mechanisms of resistance.</a> Br J Cancer. 110, 479-488 (2014).</li><li>Holliday, D. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+practicalities+of+using+tissue+slices+as+preclinical+organotypic+breast+cancer+models.">The practicalities of using tissue slices as preclinical organotypic breast cancer models.</a> J Clin Pathol. 66, 253-255 (2013).</li><li>Maund, S. L., Nolley, R., Peehl, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+and+comprehensive+characterization+of+a+faithful+tissue+culture+model+of+the+benign+and+malignant+human+prostate.">Optimization and comprehensive characterization of a faithful tissue culture model of the benign and malignant human prostate.</a> Lab Invest. 94, 208-221 (2014).</li></ol>

Organotypische snijculturen uit menselijk kankerweefsel bieden een aantrekkelijk en onderbenut platform voor preklinische translatie-experimenten. Het ontbreken van een begrip van populair gedrag van tumorcellen met betrekking tot migratie, proliferatie en celdood in de micro-omgeving van de moedertaal. Critisch kan het bestuderen van tumorrespons op therapie in een dynamische, tijdopgeloste manier op het niveau van celgedrag licht werpen op nieuwe mechanismen van behandelingsweerstand. Human tumor slice culturen versch...

De laboratoriumstudie van glioblastoom (GBM) wordt belemmerd door een gebrek aan modellen die de vereiste pathologische kenmerken van de menselijke ziekte getrouwd herhalen, namelijk tumorcel migratie en invasie. Vergelijkende studies van 2D- en 3D- in vitro- assays, evenals 3D-knaagdier-slice-cultuurmodellen, hebben mechanistische uiteenlopende cellulaire migratieprogramma&#39;s in deze twee contexten ontdekt, waardoor de translatabiliteit van bevindingen van 2D-systemen mogelijk is voor de menselijke ziekte 1 , 2 , 3 . De hier beschreven organotypische tumorskijfcultuur en imagingparadigma maakt het mogelijk om tumorcel migratie te onderzoeken in segmenten ex vivo humaan tumorweefsel verkregen uit chirurgische resectie. Zo vormen slice culturen van chirurgisch geresecteerd tumorweefsel in samenhang met confiscale microscopie met time-lapse een platform om tumorcelmigratie in de native te bestuderenMicro-omgeving zonder weefseloplossing of cultuurpassage. Er is uitgebreide literatuur die gebruik maakt van knaagdierbrein-slice cultuurmodellen van GBM gegenereerd uit humane tumor xenografen, retrovirale geïnduceerde tumoren en cellulaire overlays om tumorinval 1 , 2 , 3 , 4 , 5 te bestuderen. Onlangs hebben verschillende groepen de generatie van organotypische snijculturen beschreven direct van humaan GBM-weefsel 6 , 7 , 8 , 9 , 10 . Er is echter een duidelijke variatie tussen gepubliceerde protocollen met betrekking tot snijtechniek en cultuurmedia. Verder heeft het gebruik van organotypische snijculturen zich geconcentreerd op statische experimentele eindpunten die veranderingen in celsignaal hebben opgenomenNg, proliferatie en dood. Het hierin beschreven protocol breidt zich uit op vroegere scherpcultuurparadigma&#39;s door tijdopgenomen observatie van dynamische tumorcelgedrag in te nemen door middel van time-lapse laser scanning confocal microscopy. Recente ontdekking van inter 11 en intratumorale 12 , 13 genetische variatie in humane GBM onderstreept het belang van het verbinden van deze heterogeniteit met tumorcelgedrag en de implicaties ervan op tumorrespons op therapie. Hier rapporteren we een gestroomlijnd en reproduceerbaar protocol voor het gebruik van directe snijculturen uit een menselijk kankerweefsel om tumorcelmigratie in nabije real-time te visualiseren.

<table fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>DMEM High Glucose&#160;</td>
			<td>Invitrogen (Gibco)</td>
			<td>11960-044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neurobasal-A Medium, minus phenol red</td>
			<td>Invitrogen (Gibco)</td>
			<td>12349-015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B-27 Supplement (50X), serum free</td>
			<td>Invitrogen (Gibco)</td>
			<td>17504-044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin (10,000 U/mL)</td>
			<td>Invitrogen (Gibco)</td>
			<td>15140-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GlutaMAX Supplement</td>
			<td>Invitrogen (Gibco)</td>
			<td>35050-061</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Glutamine (200 mM)</td>
			<td>Invitrogen (Gibco)</td>
			<td>25030-081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES (1 M)</td>
			<td>Invitrogen (Gibco)</td>
			<td>15630-080</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nystatin Suspension</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>N1638-20ML</td>
			<td>10,000 unit/mL in DPBS, aseptically processed, BioReagent, suitable for cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UltraPure Low Melting Point Agarose</td>
			<td>Invitrogen (Gibco)</td>
			<td>16520-050</td>
			<td>Melts at 65.5 C, Remains fluid at 37 C, and sets rapidly below 25 C.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isolectin GS-IB4 from Griffonia simplicifolia, Alexa Fluor 647 Conjugate</td>
			<td>Thermo Fisher (Molecular Probes)</td>
			<td>I32450</td>
			<td>Used in media to label Microglia/Macrophages</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pRetroX-IRES-ZsGreen1 Vector</td>
			<td>Clonetech</td>
			<td>632520</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retro-X Concentrator&#160;</td>
			<td>Clonetech</td>
			<td>31455</td>
			<td>Binding resin for non-ultracentrifugation concentration of viral supernatants</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pVSG-G Vector</td>
			<td>Clonetech</td>
			<td>631530</td>
			<td>part of the Retro-X Universal Retroviral Expression System</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GP2-293 Viral packaging cells</td>
			<td>Clonetech</td>
			<td>631530</td>
			<td>part of the Retro-X Universal Retroviral Expression System</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cyanoacrylate Glue (Super Glue)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Z105899</td>
			<td>Medium-viscosity</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peel-A-Way Embedding Mold (Square - S22)</td>
			<td>Polysciences, Inc.</td>
			<td>18646A-1</td>
			<td>Molds for tumor sample embedding</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless Steel Micro Spatulas</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>S50823</td>
			<td>Bend instrument 45 degrees at the neck of the spoon blade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved Fisherbrand Dissecting Fine-Pointed Forceps</td>
			<td>Fisher Scientific&#160;</td>
			<td>08-875</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Single Edge Razor Blade (American Safety Razors)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>17-989-001</td>
			<td>Blade edge is 0.009&#34; thick. Crimped blunt-edge cover is removed before loading onto vibratome.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica VT1000 S Vibratome</td>
			<td>Leica Biosystems</td>
			<td>VT1000 S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrophilic PTFE cell culture insert&#160;</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>PICM0RG50</td>
			<td>30 mm, hydrophilic PTFE, 0.4 &#181;m pore size</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>35 mm Glass Bottom Dishes&#160;</td>
			<td>MatTek</td>
			<td>P35G-1.5-20-C Sleeve</td>
			<td>20mm glass diameter. Coverslip glass thickness 1.5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LSM 510 Confocal Micoscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>LSM 510</td>
			<td>10x Air Objective (c-Apochromat NA 0.45)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PECON Stagetop Incubator</td>
			<td>PeCON Germany</td>
			<td>(Discontinued)</td>
			<td>Incubator PM 2000 RBT is a comprable product designed for use with Zeiss Microscopes.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a human glioblastoma organotypic slice culture model for study of tumor cell migration and patient-specific effects of anti-invasive drugs

Glioblastoom (GBM) heeft ondanks chirurgische, chemotherapeutische en radiotherapie een extreem slechte klinische prognose. Progressieve tumorinval in het omliggende hersenparenchyma vertegenwoordigt een blijvende therapeutische uitdaging. Om anti-migratie therapieën voor GBM te ontwikkelen, zijn model systemen die een fysiologisch relevante achtergrond voor gecontroleerde experimenten verschaffen essentieel. Hier presenteren wij een protocol voor het genereren van plakculturen uit menselijk GBM-weefsel dat wordt verkregen tijdens chirurgische resectie. Deze culturen maken het mogelijk ex-vivo experimentatie zonder passeren door dierlijke xenografen of enkelcelculturen. Verder beschrijven we het gebruik van confocal microscopie met behulp van time-lapse laser scanning in combinatie met cell tracking om het migrerende gedrag van tumorcellen kwantitatief te bestuderen en de daarmee verband houdende respons op de therapeutica. Plakjes worden reproduceerbaar gegenereerd binnen 90 minuten van chirurgische weefselverwerving. Retrovirale gemedieerde fluorescerende cel laBeling, confocal imaging en tumor cell migratie analyses worden vervolgens binnen twee weken na de kultuur voltooid. We hebben deze slice culturen succesvol gebruikt om genetische factoren die verband houden met verhoogd migrerend gedrag in menselijke GBM te ontdekken. Verder hebben we het vermogen van de patiënt geconstateerd om patiëntenspecifieke variatie te detecteren in reactie op anti-migratie therapieën. Doorgaan naar voren zijn menselijke GBM-segmentculturen een aantrekkelijk platform voor snelle ex vivo beoordeling van tumorgevoeligheid voor therapeutische middelen, om gepersonaliseerde neuro-oncologische therapie te bevorderen.

<html> Onze groep heeft succesvolle slice cultures opgebouwd uit meer dan 50 patiënten die de eerste GBM resectie ondergaan. Dit protocol voor slice-generatie, cultuur, retroviral-etikettering, beeldvorming en migratieanalyse is gestroomlijnd in een reproduceerbare werkstroom ( Figuur 1 ). Kritisch tonen deze organotypische GBM-snijpunten concordantie met afkomstige tumorweefsel in de gehele cultuur, inclusief het behoud van pathologische kenmerken en microglia tot 15 da...

Watch this Scientific Journal Video about A Human Glioblastoma Organotypic Slice Culture Model for Study of Tumor Cell Migration and Patient-specific Effects of Anti-Invasive Drugs at JoVE.com

A Human Glioblastoma Organotypic Slice Culture Model for Study of Tumor Cell Migration and Patient-specific Effects of Anti-Invasive Drugs

Huidige ex vivo modellen van glioblastoom (GBM) zijn niet geoptimaliseerd voor fysiologisch relevant onderzoek naar menselijke tumorinval. Hier presenteren we een protocol voor het genereren en onderhouden van organotypische plakculturen uit vers menselijk GBM-weefsel. Een beschrijving van time-lapse microscopie en kwantitatieve cel migratie analyse technieken wordt verschaft.

Een humane glioblastoom organotypische snijcultuurmodel voor de studie van tumorcellenmigratie en patiëntspecifieke effecten van anti-invasieve medicijnen

Glioblastoma (GBM) continues to carry an extremely poor clinical prognosis despite surgical, chemotherapeutic, and radiation therapy. Progressive tumor ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Multi-photon Imaging of Tumor Cell Invasion in an Orthotopic Mouse Model of Oral Squamous Cell Carcinoma

Multi-foton Imaging van de tumorcel invasie in een orthotope Muis Model van Oral plaveiselcelcarcinoom

Loco-regional invasion of head and neck cancer is linked to metastatic risk and presents a difficult challenge in designing and implementing patient ...

Stereotactic Intracranial Implantation and In vivo Bioluminescent Imaging of Tumor Xenografts in a Mouse Model System of Glioblastoma Multiforme

Stereotactic Intracranial Implantation and In vivo Bioluminescent Imaging of Tumor Xenografts in a Mouse Model System of Glioblastoma Multiforme

Stereotactische Intracraniale Implantatie en<em&gt; In vivo</em&gt; Bioluminescent Imaging van tumorxenograften in een Muis Model Systeem van glioblastoma multiforme

Glioblastoma multiforme (GBM) is a high-grade primary brain cancer with a median survival of only 14.6 months in humans despite standard tri-modality ...

Human Neuroendocrine Tumor Cell Lines as a Three-Dimensional Model for the Study of Human Neuroendocrine Tumor Therapy

Human Neuro-endocriene tumor cellijnen als een drie-dimensionaal model voor de studie van de mens Neuro-endocriene Tumor Therapy

Neuroendocrine tumors (NETs) are rare tumors, with an incidence of two per 100,&#x200A;000 individuals per year, and they account for 0.5% of all human ...

Processing of Human Reduction Mammoplasty and Mastectomy Tissues for Cell Culture

Verwerking van de mens Vermindering mammoplasty en mastectomie weefsels voor Cultuur van de Cel

Experimental  examination of normal human mammary epithelial cell (HMEC) behavior, and how  normal cells acquire abnormal properties, can be facilitated ...

Patient Derived Cell Culture and Isolation of CD133+ Putative Cancer Stem Cells from Melanoma

Patient Derived Cell Culture and Isolation of CD133+ Putative Cancer Stem Cells from Melanoma

Patiënt Derived Cell Cultuur en isolatie van CD133<sup&gt; +</sup&gt; Vermeende Cancer Stem Cells van Melanoom

Despite improved treatments options for melanoma available today, patients with advanced malignant melanoma still have a poor prognosis for ...

A Three-dimensional Tissue Culture Model to Study Primary Human Bone Marrow and its Malignancies

Een Drie-dimensionale Tissue Culture Model om te studeren Primary humaan beenmerg en zijn Malignancies

Tissue culture has been an invaluable tool to study many aspects of cell function, from normal development to disease. Conventional cell culture methods ...

Human Dupuytren's Ex Vivo Culture for the Study of Myofibroblasts and Extracellular Matrix Interactions

Human Dupuytren's Ex Vivo Culture for the Study of Myofibroblasts and Extracellular Matrix Interactions

Menselijke Dupuytren<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Cultuur voor de Studie van Myofibroblasten en extracellulaire matrix interacties

Organ fibrosis or &#8220;scarring&#8221; is known to account for a high death toll due to the extensive amount of disorders and organs affected (from ...

Establishment of a Human Multiple Myeloma Xenograft Model in the Chicken to Study Tumor Growth, Invasion and Angiogenesis

Oprichting van een Human Multiple Myeloma Xenograft Model in de Chicken tumorgroei, invasie en Angiogenese Studie

Multiple myeloma (MM), a malignant plasma cell disease, remains incurable and novel drugs are required to improve the prognosis of patients. Due to the ...

Isolation and Culture Expansion of Tumor-specific Endothelial Cells

Isolatie en Cultuur Uitbreiding van Tumor-specifieke endotheelcellen

Freshly isolated tumor-specific endothelial cells (TEC) can be used to explore molecular mechanisms of tumor angiogenesis and serve as an in vitro model ...

A Brain Tumor/Organotypic Slice Co-culture System for Studying Tumor Microenvironment and Targeted Drug Therapies

Een hersentumor / organotypische Slice Co-cultuur voor het bestuderen tumor micro en Gerichte Drug therapieën

Brain tumors are a major cause of cancer-related morbidity and mortality. Developing new therapeutics for these cancers is difficult, as many of these ...