Name: a human glioblastoma organotypic slice culture model for study of tumor cell migration and patient-specific effects of anti-invasive drugs
Uploaded: 2017-07-20T12:30:00
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Nous tenons à remercier le Dr Lee Niswander et le Dr Rada Massarwa pour leur expertise technique et leurs contributions au protocole d&#39;imagerie confocale de la culture en coupe décrite ici. Merci encore au docteur Kalen Dionne qui a fourni une expertise en matière d&#39;optimisation des paramètres de coupe et de culture des tissus tumoraux du cerveau.

Avant que la collecte des échantillons de tissus de patients ne soit initiée, il faut obtenir un consentement éclairé de chaque patient en vertu d&#39;un protocole approuvé de la Commission de révision institutionnelle (IRB). Les auteurs de ce protocole ont reçu le consentement pour le travail décrit dans les protocoles IRB approuvés à l&#39;Hôpital de l&#39;Université de Colorado et à l&#39;hôpital Inova Fairfax. Les données recueillies à partir de ces cultures en coupe n&#39;ont pas été utilisées po...

<ol>
	<li>Beadle, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+myosin+II+in+glioma+invasion+of+the+brain.">The role of myosin II in glioma invasion of the brain.</a> Mol Biol Cell. 19, 3357-3368 (2008).</li><li>Farin, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplanted+glioma+cells+migrate+and+proliferate+on+host+brain+vasculature:+a+dynamic+analysis.">Transplanted glioma cells migrate and proliferate on host brain vasculature: a dynamic analysis.</a> Glia. 53, 799-808 (2006).</li><li>Panopoulos, A., Howell, M., Fotedar, R., Margolis, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glioblastoma+motility+occurs+in+the+absence+of+actin+polymer.">Glioblastoma motility occurs in the absence of actin polymer.</a> Mol Biol Cell. 22, 2212-2220 (2011).</li><li>Ivkovic, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+inhibition+of+myosin+II+effectively+blocks+glioma+invasion+in+the+presence+of+multiple+motogens.">Direct inhibition of myosin II effectively blocks glioma invasion in the presence of multiple motogens.</a> Mol Biol Cell. 23, 533-542 (2012).</li><li>Assanah, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glial+progenitors+in+adult+white+matter+are+driven+to+form+malignant+gliomas+by+platelet-derived+growth+factor-expressing+retroviruses.">Glial progenitors in adult white matter are driven to form malignant gliomas by platelet-derived growth factor-expressing retroviruses.</a> J Neurosci. 26, 6781-6790 (2006).</li><li>Chaichana, K. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preservation+of+glial+cytoarchitecture+from+ex+vivo+human+tumor+and+non-tumor+cerebral+cortical+explants:+A+human+model+to+study+neurological+diseases.">Preservation of glial cytoarchitecture from ex vivo human tumor and non-tumor cerebral cortical explants: A human model to study neurological diseases.</a> J Neurosci Methods. 164, 261-270 (2007).</li><li>Grube, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overexpression+of+fatty+acid+synthase+in+human+gliomas+correlates+with+the+WHO+tumor+grade+and+inhibition+with+Orlistat+reduces+cell+viability+and+triggers+apoptosis.">Overexpression of fatty acid synthase in human gliomas correlates with the WHO tumor grade and inhibition with Orlistat reduces cell viability and triggers apoptosis.</a> J Neurooncol. 118, 277-287 (2014).</li><li>Hovinga, K. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+notch+signaling+in+glioblastoma+targets+cancer+stem+cells+via+an+endothelial+cell+intermediate.">Inhibition of notch signaling in glioblastoma targets cancer stem cells via an endothelial cell intermediate.</a> Stem Cells. 28, 1019-1029 (2010).</li><li>Merz, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organotypic+slice+cultures+of+human+glioblastoma+reveal+different+susceptibilities+to+treatments.">Organotypic slice cultures of human glioblastoma reveal different susceptibilities to treatments.</a> Neurooncol. 15, 670-681 (2013).</li><li>Xu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vorinostat+modulates+cell+cycle+regulatory+proteins+in+glioma+cells+and+human+glioma+slice+cultures.">Vorinostat modulates cell cycle regulatory proteins in glioma cells and human glioma slice cultures.</a> J Neurooncol. 105, 241-251 (2011).</li><li>Verhaak, R. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integrated+genomic+analysis+identifies+clinically+relevant+subtypes+of+glioblastoma+characterized+by+abnormalities.">Integrated genomic analysis identifies clinically relevant subtypes of glioblastoma characterized by abnormalities.</a> in PDGFRA, IDH1, EGFR, and NF1. Cancer cell. 17, 98-110 (2010).</li><li>Gill, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MRI-localized+biopsies+reveal+subtype-specific+differences+in+molecular+and+cellular+composition+at+the+margins+of+glioblastoma.">MRI-localized biopsies reveal subtype-specific differences in molecular and cellular composition at the margins of glioblastoma.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 111, 12550-12555 (2014).</li><li>Snuderl, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mosaic+amplification+of+multiple+receptor+tyrosine+kinase+genes+in+glioblastoma.">Mosaic amplification of multiple receptor tyrosine kinase genes in glioblastoma.</a> Cancer cell. 20, 810-817 (2011).</li><li>Kakita, A., Goldman, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patterns+and+dynamics+of+SVZ+cell+migration+in+the+postnatal+forebrain:+monitoring+living+progenitors+in+slice+preparations.">Patterns and dynamics of SVZ cell migration in the postnatal forebrain: monitoring living progenitors in slice preparations.</a> Neuron. 23, 461-472 (1999).</li><li>Meijering, E., Dzyubachyk, O., Smal, I., van Cappellen, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tracking+in+cell+and+developmental+biology.">Tracking in cell and developmental biology.</a> Sem Cell Dev Biol. 20, 894-902 (2009).</li><li>Parker, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gefitinib+selectively+inhibits+tumor+cell+migration+in+EGFR-amplified+human+glioblastoma.">Gefitinib selectively inhibits tumor cell migration in EGFR-amplified human glioblastoma.</a> Neurooncol. 15, 1048-1057 (2013).</li><li>Brat, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pseudopalisades+in+glioblastoma+are+hypoxic,+express+extracellular+matrix+proteases,+and+are+formed+by+an+actively+migrating+cell+population.">Pseudopalisades in glioblastoma are hypoxic, express extracellular matrix proteases, and are formed by an actively migrating cell population.</a> Cancer Res. 64, 920-927 (2004).</li><li>Shweiki, D., Itin, A., Soffer, D., Keshet, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+endothelial+growth+factor+induced+by+hypoxia+may+mediate+hypoxia-initiated+angiogenesis.">Vascular endothelial growth factor induced by hypoxia may mediate hypoxia-initiated angiogenesis.</a> Nature. 359, 843-845 (1992).</li><li>Shamir, E. R., Ewald, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+organotypic+culture:+experimental+models+of+mammalian+biology+and+disease.">Three-dimensional organotypic culture: experimental models of mammalian biology and disease.</a> Nat Rev Mol Cell Biol. 15, 647-664 (2014).</li><li>Charles, N. A., Holland, E. C., Gilbertson, R., Glass, R., Kettenmann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+brain+tumor+microenvironment.">The brain tumor microenvironment.</a> Glia. 60, 502-514 (2012).</li><li>Di Cristofori, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+vacuolar+H++ATPase+is+a+novel+therapeutic+target+for+glioblastoma.">The vacuolar H+ ATPase is a novel therapeutic target for glioblastoma.</a> Oncotarget. 6, 17514-17513 (2015).</li><li>Vaira, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+model+of+organotypic+culture+for+pharmacodynamic+profiling+of+human+tumors.">Preclinical model of organotypic culture for pharmacodynamic profiling of human tumors.</a> Proc Natl Acad Sci USA. , 8352-8356 (2010).</li><li>Gerlach, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Slice+cultures+from+head+and+neck+squamous+cell+carcinoma:+a+novel+test+system+for+drug+susceptibility+and+mechanisms+of+resistance.">Slice cultures from head and neck squamous cell carcinoma: a novel test system for drug susceptibility and mechanisms of resistance.</a> Br J Cancer. 110, 479-488 (2014).</li><li>Holliday, D. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+practicalities+of+using+tissue+slices+as+preclinical+organotypic+breast+cancer+models.">The practicalities of using tissue slices as preclinical organotypic breast cancer models.</a> J Clin Pathol. 66, 253-255 (2013).</li><li>Maund, S. L., Nolley, R., Peehl, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+and+comprehensive+characterization+of+a+faithful+tissue+culture+model+of+the+benign+and+malignant+human+prostate.">Optimization and comprehensive characterization of a faithful tissue culture model of the benign and malignant human prostate.</a> Lab Invest. 94, 208-221 (2014).</li></ol>

Les cultures de tranche organotypiques issues de tissus cancéreux humains constituent une plate-forme attrayante et sous-utilisée pour une expérimentation de traduction préclinique. La compréhension des comportements au niveau de la population des cellules tumorales en ce qui concerne la migration, la prolifération et la mort cellulaire dans le microenvironnement tumoral natif est insuffisante. De manière critique, l&#39;étude de la réponse tumorale au traitement d&#39;une manière dynamique, résolue dans le t...

L&#39;étude en laboratoire du glioblastome (GBM) est entravée par un manque de modèles qui récapitulent fidèlement les caractéristiques pathologiques requises de la maladie humaine, à savoir la migration des cellules tumorales et l&#39;invasion. Les études comparatives des essais d&#39;invasion in vitro 2D et 3D ainsi que des modèles de culture en tranche de rongeurs 3D ont révélé des programmes de migration cellulaire variés mécaniquement dans ces deux contextes, limitant potentiellement la traduction des résultats des systèmes 2D à la maladie humaine 1 , 2 , 3 . La culture de la tranche tumorale organotypique et le paradigme d&#39;imagerie décrit ici permettent l&#39;étude de la migration des cellules tumorales dans des tranches de tissu tumoral humain ex vivo obtenu à partir d&#39;une résection chirurgicale. Ainsi, les cultures en tranche de tissu tumoral réséqué chirurgicalment en conjonction avec une microscopie confocale temporelle fournissent une plate-forme pour étudier la migration de cellules tumorales chez le natifMicroenvironnement sans dissolution tissulaire ou passage à la culture. Il existe une littérature approfondie employant des modèles de culture de tranche de cerveau de rongeurs de GBM générés à partir de xénogreffes de tumeur humaine, de tumeurs induites par des retrovirus et de superpositions cellulaires pour étudier l&#39;invasion tumorale 1 , 2 , 3 , 4 , 5 . Récemment, plusieurs groupes ont décrit la génération de cultures de tranches organotypiques directement à partir de tissu GBM humain 6 , 7 , 8 , 9 , 10 . Cependant, il existe une variation marquée entre les protocoles publiés en ce qui concerne la technique de découpe et les médias de culture. En outre, l&#39;utilisation de cultures de tranches organotypiques s&#39;est concentrée sur des paramètres expérimentaux statiques qui ont inclus des changements dans les signaux cellulairesNg, la prolifération et la mort. Le protocole décrit ici se développe sur des paradigmes antérieurs de culture en tranche en incorporant une observation résolue dans le temps des comportements dynamiques de cellules tumorales par microscopie confocale à balayage laser. La découverte récente de la variation génétique intra 11 et intratumorale 12 , 13 dans le GBM humain souligne l&#39;importance de lier cette hétérogénéité aux comportements des cellules tumorales et ses implications sur la réponse tumorale au traitement. Ici, nous rapportons un protocole simplifié et reproductible pour l&#39;utilisation de cultures en coupe directe à partir d&#39;un tissu cancéreux humain pour visualiser la migration des cellules tumorales en temps quasi réel.

<table fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>DMEM High Glucose&#160;</td>
			<td>Invitrogen (Gibco)</td>
			<td>11960-044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neurobasal-A Medium, minus phenol red</td>
			<td>Invitrogen (Gibco)</td>
			<td>12349-015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B-27 Supplement (50X), serum free</td>
			<td>Invitrogen (Gibco)</td>
			<td>17504-044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin (10,000 U/mL)</td>
			<td>Invitrogen (Gibco)</td>
			<td>15140-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GlutaMAX Supplement</td>
			<td>Invitrogen (Gibco)</td>
			<td>35050-061</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Glutamine (200 mM)</td>
			<td>Invitrogen (Gibco)</td>
			<td>25030-081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES (1 M)</td>
			<td>Invitrogen (Gibco)</td>
			<td>15630-080</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nystatin Suspension</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>N1638-20ML</td>
			<td>10,000 unit/mL in DPBS, aseptically processed, BioReagent, suitable for cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UltraPure Low Melting Point Agarose</td>
			<td>Invitrogen (Gibco)</td>
			<td>16520-050</td>
			<td>Melts at 65.5 C, Remains fluid at 37 C, and sets rapidly below 25 C.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isolectin GS-IB4 from Griffonia simplicifolia, Alexa Fluor 647 Conjugate</td>
			<td>Thermo Fisher (Molecular Probes)</td>
			<td>I32450</td>
			<td>Used in media to label Microglia/Macrophages</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pRetroX-IRES-ZsGreen1 Vector</td>
			<td>Clonetech</td>
			<td>632520</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retro-X Concentrator&#160;</td>
			<td>Clonetech</td>
			<td>31455</td>
			<td>Binding resin for non-ultracentrifugation concentration of viral supernatants</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pVSG-G Vector</td>
			<td>Clonetech</td>
			<td>631530</td>
			<td>part of the Retro-X Universal Retroviral Expression System</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GP2-293 Viral packaging cells</td>
			<td>Clonetech</td>
			<td>631530</td>
			<td>part of the Retro-X Universal Retroviral Expression System</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cyanoacrylate Glue (Super Glue)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Z105899</td>
			<td>Medium-viscosity</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peel-A-Way Embedding Mold (Square - S22)</td>
			<td>Polysciences, Inc.</td>
			<td>18646A-1</td>
			<td>Molds for tumor sample embedding</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless Steel Micro Spatulas</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>S50823</td>
			<td>Bend instrument 45 degrees at the neck of the spoon blade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved Fisherbrand Dissecting Fine-Pointed Forceps</td>
			<td>Fisher Scientific&#160;</td>
			<td>08-875</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Single Edge Razor Blade (American Safety Razors)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>17-989-001</td>
			<td>Blade edge is 0.009&#34; thick. Crimped blunt-edge cover is removed before loading onto vibratome.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica VT1000 S Vibratome</td>
			<td>Leica Biosystems</td>
			<td>VT1000 S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrophilic PTFE cell culture insert&#160;</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>PICM0RG50</td>
			<td>30 mm, hydrophilic PTFE, 0.4 &#181;m pore size</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>35 mm Glass Bottom Dishes&#160;</td>
			<td>MatTek</td>
			<td>P35G-1.5-20-C Sleeve</td>
			<td>20mm glass diameter. Coverslip glass thickness 1.5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LSM 510 Confocal Micoscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>LSM 510</td>
			<td>10x Air Objective (c-Apochromat NA 0.45)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PECON Stagetop Incubator</td>
			<td>PeCON Germany</td>
			<td>(Discontinued)</td>
			<td>Incubator PM 2000 RBT is a comprable product designed for use with Zeiss Microscopes.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a human glioblastoma organotypic slice culture model for study of tumor cell migration and patient-specific effects of anti-invasive drugs

Le glioblastome (GBM) continue de présenter un pronostic clinique extrêmement médiocre malgré une intervention chirurgicale, chimiothérapeutique et radiothérapeutique. L&#39;invasion tumorale progressive dans le parenchyme du cerveau environnant représente un défi thérapeutique durable. Pour développer des thérapies anti-migration pour GBM, les systèmes modèles qui fournissent un fond physiologiquement pertinent pour une expérimentation contrôlée sont essentiels. Ici, nous présentons un protocole pour générer des cultures en coupe à partir de tissu GBM humain obtenu lors d&#39;une résection chirurgicale. Ces cultures permettent une expérimentation ex vivo sans passage à travers des xénogreffes animales ou des cultures cellulaires simples. En outre, nous décrivons l&#39;utilisation de la microscopie confocale à balayage laser à temps partiel en conjonction avec le suivi des cellules pour étudier quantitativement le comportement migratoire des cellules tumorales et la réponse associée à la thérapeutique. Les tranches sont reproduites de manière reproductible dans les 90 minutes suivant l&#39;acquisition de tissus chirurgicaux. Cellule fluorescente à médiation rétroviraleL&#39;imagerie confocale et les analyses de migration des cellules tumorales sont complétées dans les deux semaines suivant la culture. Nous avons réussi à utiliser ces cultures en tranche pour découvrir des facteurs génétiques associés à un comportement migratoire accru dans le GBM humain. En outre, nous avons validé la capacité du modèle à détecter les variations spécifiques du patient en réponse aux traitements anti-migration. En avançant, les cultures de tranche GBM humaine sont une plate-forme attrayante pour une évaluation rapide et ex vivo de la sensibilité tumorale aux agents thérapeutiques, afin de favoriser une thérapie neuro-oncologique personnalisée.

<html> Notre groupe a généré avec succès des cultures en tranches de plus de 50 patients soumis à une résection GBM initiale. Ce protocole de génération, de culture, d&#39;étiquetage rétroviral, d&#39;imagerie et d&#39;analyse de migration a été rationalisé en un flux de travail reproductible ( Figure 1 ). De manière critique, ces tranches de GBM organotypiques démontrent une concordance avec le tissu tumoral originaire à travers la culture, y compris le m...

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A Human Glioblastoma Organotypic Slice Culture Model for Study of Tumor Cell Migration and Patient-specific Effects of Anti-Invasive Drugs

Les modèles existants ex vivo de glioblastome (GBM) ne sont pas optimisés pour une étude physiologiquement pertinente de l&#39;invasion de tumeur humaine. Ici, nous présentons un protocole pour la génération et la maintenance de cultures de tranches organotypiques à partir de tissu GBM humain frais. Une description de la microscopie temporelle et des techniques quantitatives d&#39;analyse de la migration cellulaire est fournie.

Un modèle de culture de coupe organotypique du glioblastome humain pour l&#39;étude de la migration des cellules tumorales et des effets spécifiques des patients contre les médicaments anti-invasifs

Glioblastoma (GBM) continues to carry an extremely poor clinical prognosis despite surgical, chemotherapeutic, and radiation therapy. Progressive tumor ...

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