Name: a battery of motor tests in a neonatal mouse model of cerebral palsy
Uploaded: 2016-11-03T12:30:00
Duration: 10 min 2 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Battery of Motor Tests in a Neonatal Mouse Model of Cerebral Palsy at JoVE.com

We would like to thank everyone at Shriners Hospital Pediatric Research Center, in particular Dr. Mickey Seltzer, of whom without his support, this work would not have been funded. In addition, we would like to thank Isha Srivastava, who contributed to early data collection and Amy He, who helped with the figures. This study was funded by Shriners Hospitals for Children. No funding source played a role in experimental design or decision to submit the paper for publication.

<ol>
	<li>Nakamura, M., Bregman, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differences+in+neurotrophic+factor+gene+expression+profiles+between+neonate+and+adult+rat+spinal+cord+after+injury.">Differences in neurotrophic factor gene expression profiles between neonate and adult rat spinal cord after injury.</a> Exp Neurol. 169 (2), 407-415 (2001).</li><li>Widenfalk, J., Lundstr&#246;mer, K., Jubran, M., Brene, S., Olson, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurotrophic+factors+and+receptors+in+the+immature+and+adult+spinal+cord+after+mechanical+injury+or+kainic+acid.">Neurotrophic factors and receptors in the immature and adult spinal cord after mechanical injury or kainic acid.</a> J Neurosci. 21 (10), 3457-3475 (2001).</li><li>Fern&#225;ndez-L&#242;pez, D., Faustino, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood-brain+barrier+permeability+is+increased+after+acute+adult+stroke+but+not+neonatal+stroke+in+the+rat.">Blood-brain barrier permeability is increased after acute adult stroke but not neonatal stroke in the rat.</a> J Neurosci. 32 (28), 9588-9600 (2012).</li><li>Cusick, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extensive+cortical+reorganization+following+sciatic+nerve+injury+in+adult+rats+versus+restricted+reorganization+after+neonatal+injury:+implications+for+spatial+and+temporal+limits+on+somatosensory+plasticity.">Extensive cortical reorganization following sciatic nerve injury in adult rats versus restricted reorganization after neonatal injury: implications for spatial and temporal limits on somatosensory plasticity.</a> Prog Brain Res. 108, 379-390 (1996).</li><li>Barrett, C. P., Donati, E. J., Guth, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differences+between+adult+and+neonatal+rats+in+their+astroglial+response+to+spinal+injury.">Differences between adult and neonatal rats in their astroglial response to spinal injury.</a> Exp Neurol. 84 (2), 374-385 (1984).</li><li>Villapol, S., Gelot, A., Renolleau, S., Charriaut-Marlangue, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Astrocyte+Responses+after+Neonatal+Ischemia:+The+Yin+and+the+Yang.">Astrocyte Responses after Neonatal Ischemia: The Yin and the Yang.</a> Neuroscientist. 14 (4), 339-344 (2008).</li><li>Craig, A., Ling Luo, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+analysis+of+perinatal+rodent+oligodendrocyte+lineage+progression+and+its+correlation+with+human.">Quantitative analysis of perinatal rodent oligodendrocyte lineage progression and its correlation with human.</a> Exp Neurol. 181 (2), 231-240 (2003).</li><li>Shen, Y., Liu, X. B., Pleasure, D. E., Deng, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axon-glia+synapses+are+highly+vulnerable+to+white+matter+injury+in+the+developing+brain.">Axon-glia synapses are highly vulnerable to white matter injury in the developing brain.</a> J Neurosci Res. 90 (1), 105-121 (2012).</li><li>Shen, Y., Plane, J. M., Deng, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+periventricular+leukomalacia.">Mouse models of periventricular leukomalacia.</a> J Vis Exp. (39), (2010).</li><li>Fox, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reflex-ontogeny+and+behavioural+development+of+the+mouse.">Reflex-ontogeny and behavioural development of the mouse.</a> Anim Behav. 13 (2), 234-241 (1965).</li><li>Tremml, P., Lipp, H. P., M&#252;ller, U., Ricceri, L., Wolfer, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurobehavioral+development,+adult+openfield+exploration+and+swimming+navigation+learning+in+mice+with+a+modified+beta-amyloid+precursor+protein+gene.">Neurobehavioral development, adult openfield exploration and swimming navigation learning in mice with a modified beta-amyloid precursor protein gene.</a> Behav Brain Res. 95 (1), 65-76 (1998).</li><li>Wahlsten, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+developmental+time+scale+for+postnatal+changes+in+brain+and+behavior+of+B6D2F2+mice.">A developmental time scale for postnatal changes in brain and behavior of B6D2F2 mice.</a> Brain Res. 72 (2), 251-264 (1974).</li><li>Balasubramaniam, J., Xue, M., Del Bigio, . <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+motor+deficit+following+periventricular+hemorrhage+in+neonatal+rats:+A+potential+model+for+human+cerebral+palsy.">Long-term motor deficit following periventricular hemorrhage in neonatal rats: A potential model for human cerebral palsy.</a> J Cerebr Blood F Met. , (2005).</li><li>Williams, E., Scott, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Development+of+Social+Behavior+Patterns+in+the+Mouse,+in+Relation+to+Natural+Periods.">The Development of Social Behavior Patterns in the Mouse, in Relation to Natural Periods.</a> Behaviour. 6 (1), 35-65 (1954).</li><li>Heyser, C. J., Crawley, J. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+developmental+milestones+in+rodents.">Assessment of developmental milestones in rodents.</a> Current protocols in neuroscience. Chapter 8, (2004).</li><li>Corti, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Grip strength TREAT-NMD: Experimental protocols for SMA animal models. , (2014).</li><li>Corti, S., Nizzardo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+stem+cell+transplantation+can+ameliorate+the+phenotype+of+a+mouse+model+of+spinal+muscular+atrophy.">Neural stem cell transplantation can ameliorate the phenotype of a mouse model of spinal muscular atrophy.</a> J Clin Invest. 118 (10), 3316-3330 (2008).</li><li>Grondard, C., Biondi, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regular+exercise+prolongs+survival+in+a+type+2+spinal+muscular+atrophy+model+mouse.">Regular exercise prolongs survival in a type 2 spinal muscular atrophy model mouse.</a> J Neurosci. 25 (33), 7615-7622 (2005).</li><li>El-Khodor, B. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+Phenotyping+for+Neonates.">Behavioral Phenotyping for Neonates.</a> Experimental Protocols for SMA animal models. , (2011).</li><li>El-Khodor, B. F., Edgar, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+a+battery+of+tests+for+drug+candidate+evaluation+in+the+SMNDelta7+neonate+model+of+spinal+muscular+atrophy.">Identification of a battery of tests for drug candidate evaluation in the SMNDelta7 neonate model of spinal muscular atrophy.</a> Exp Neurol. 212 (1), 29-43 (2008).</li><li>Venerosi, A., Ricceri, L., Scattoni, M. L., Calamandrei, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prenatal+chlorpyrifos+exposure+alters+motor+behavior+and+ultrasonic+vocalization+in+CD-1+mouse+pups.">Prenatal chlorpyrifos exposure alters motor behavior and ultrasonic vocalization in CD-1 mouse pups.</a> Environ Health. 8 (12), (2009).</li><li>Hill, J. M., Lim, M. A., Stone, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+milestones+in+the+newborn+mouse.">Developmental milestones in the newborn mouse.</a> Neuromethods 39: Neuropeptide Techniques. , (2008).</li><li>Yu, Y., Keshner, A. E., Tucker, C. A., Thompson, E. D., Lauer, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+dependence+influences+postural+responses+to+continuous+visual+perturbation+in+adults+with+spastic+cerebral+palsy.">Visual dependence influences postural responses to continuous visual perturbation in adults with spastic cerebral palsy.</a> , (2016).</li><li>Carlson, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+four+limb+hanging+tests+to+monitor+muscle+strength+and+condition+over+time.">The use of four limb hanging tests to monitor muscle strength and condition over time.</a> Experimental Protocols for SMA animal models. , (2011).</li><li>Gordon, A. M., Duff, S. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relation+between+clinical+measures+and+fine+manipulative+control+in+children+with+hemiplegic+cerebral+palsy.">Relation between clinical measures and fine manipulative control in children with hemiplegic cerebral palsy.</a> Dev Med Child Neurol. 41 (9), 586-591 (1999).</li><li>Futagi, Y., Toribe, Y., Suzuki, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+grasp+reflex+and+moro+reflex+in+infants:+hierarchy+of+primitive+reflex+responses.">The grasp reflex and moro reflex in infants: hierarchy of primitive reflex responses.</a> Int J Pediat. , (2012).</li></ol>

The authors declare that they have no competing financial interests.

باستخدام نماذج حيوانية لدراسة الأمراض التي تصيب الإنسان هي ذات الصلة فقط إذا كان هناك تداخل بين الاستجابة الخلوية والجزيئية بين الإنسان والقوارض وأن الاختبارات السلوكية يؤديها لها صلة مباشرة الأعراض الإنسان. واحدة من القضايا الرئيسية مع دراسات أمراض الأطفال هو أن العديد من الباحثين استخدام القوارض الكبار لإنشاء نموذج، وكذلك تقييم السلوكي القوارض البالغين، دون النظر إلى الاختلافات التنموية التي قد تكون مهمة لعملية المرض. وبسبب هذه القضايا، فمن المهم أن البحوث حول استخدام أمراض الأطفال ليس فقط المعدلة التنموية نقاط الوقت المناسب (على سبيل المثال، وتطوير الجهاز العصبي المركزي الإنسان في 28-32 أسابيع ما يعادل يوم بعد الولادة 2-7 يوم القوارض) 7، ولكن أيضا الاختبارات السلوكية التي ستدرس المحرك المناسب، والسلوكيات التنموية الحسية أو انعكاسية. وهكذا، كما تم تطوير كل نموذج مرض المواليد الجدد، فإنه يجب أن يتم اختبار صارم لضمان أن الخلويةوالاستجابات السلوكية وتوفير البيانات للترجمة أنسب بين القوارض والإنسان. الشلل الدماغي هو اضطراب حركي، والتي تستمر حتى سن البلوغ. مشكلة واحدة مع العديد من النماذج الشلل الدماغي المتاحة اليوم هي عدم وجود تكرار اختبار محرك موحد، التي يمكن أن ترتبط مع العجز ينظر في طب الأطفال المرضى. في هذا النموذج الجديد، الذي يجمع بين نقص الأكسجين، ونقص التروية والتهاب في الماوس حديثي الولادة، تم تقييم السلوك الحركي باستخدام مجموعة من الاختبارات المحددة للفئران حديثي الولادة. من أجل تقليل الذاتية وزيادة الإبلاغ الكمي، تم تعديل العديد من الاختبارات لتشمل محددة جدا، ولكن من السهل تقييم التدابير التي يمكن أن تكون موحدة. وبالإضافة إلى ذلك، التقييمات الأمامية وhindlimb لا يمكن أن يؤديها على حدة، ويمكن تحديد الفروق يسار / يمين. هذا من الاختبارات هي محددة لالفئران حديثي الولادة تصل إلى أسبوعين من العمر. يوضح هذا النموذج CPصعوبة في المشي (التمشي، hindlimb زاوية القدم)، وكذلك الأطراف محددة ضعف (تعليق أربعة أطرافه، تعليق hindlimb)، والعجز في ردود الفعل التنموية (استيعاب رد الفعل). على الرغم من أن في هذه الدراسة تم فحص timepoint واحد فقط، يمكن تتبع هذا العجز مع مرور الوقت. هناك بطاريات أخرى من الاختبارات التي يمكن استخدامها على حديثي الولادة، مثل بطارية فوكس من الاختبارات أو تقييم Heyser من مراحل تطور الطفل (15). ومع ذلك، هذه الاختبارات مقارنة الوليد إلى الكبار، الذين قد لا تكون هي نفسها لأن الوليد لا تزال تتطور الاستجابات. بطارية فوكس والاختبارات Assement Heyser وتعتمد على المعلومات الموضوعية الرصد مع تقييم شيئين (نعم أو لا)، بدلا من بيانات موضوعية (زاوية، الموقف القائم على القوة، وما إلى ذلك). بسبب subjectiveness هذه الاختبارات، وقد تكيفت العديد من العلماء، وأضاف، أو إزالة المعايير، مما يجعل نتائجها لا تضاهى للآخرين والحدجي فائدة البيانات من حيث إقامة العجز الأساسي لمرض أو اضطراب معين. عن طريق إنشاء مجموعة واحدة من التجارب الحركية الموحدة التي هي النوعية والتي صممت خصيصا لاختبار حديثي الولادة، والنتائج من المجموعات البحثية الفردية ويمكن الإبلاغ عن ومقارنة بدقة وبشكل موثوق.

تطوير نماذج جديدة من إصابة الأطفال أو المرض باستخدام القوارض غالبا ما يكون صعبا بسبب قدرة مذهلة على حد سواء الجرذان والفئران لاسترداد بسرعة من الإصابة العصبية. ولذلك، من أجل التحقق من صحة أي نموذج مرض جديد للأطفال، فحص بدقة التغيرات الخلوية والجزيئية يجب أن تذهب جنبا إلى جنب مع النتائج السلوكية. في نواح كثيرة، قد يكون الانتعاش السلوكي وظيفية أكثر أهمية من التغيرات الخلوية الأساسية من حيث أهميتها العلاجية أو متعدية. كما يتعلم الباحثون أكثر عن الإصابات في البالغين وحديثي الولادة، فمن الواضح أن إجاباتهم مختلفة جدا ولا يمكن استقراء بين البلدين. على سبيل المثال، الفئران حديثي الولادة عرض مستويات مختلفة من عامل نمو الأعصاب، عامل التغذية العصبية المشتق من الدماغ، neurotrophin-3 و الدبقية عامل التغذية العصبية المشتقة خط الخلية التالية إصابة الحبل الشوكي 1،2. بالإضافة إلى ذلك، حديثي الولادة لها كبير تسرب حاجز الدم في الدماغ بعد السكتة الدماغية 3، دemonstrate القشرية إعادة ترتيب الخلايا العصبية بعد الإصابة الأعصاب الطرفية 4، ولها دباق النجمي تأخير أو تباطؤ التالية إصابة الحبل الشوكي ونقص الأكسجة نقص التروية 5،6. وبالتالي، فمن المهم أن الأبحاث الأطفال متعدية استخدام نماذج تعادل تنمويا وأن تلك النماذج يتم تقييم لكل من التغيرات الجزيئية الخلوية / والاختبارات السلوكية المناسبة للفئة العمرية. الشلل الدماغي (CP) هو اضطراب حركي يؤثر 3: 1000 ولادة حية سنويا (NIH). الأطفال يعانون من الشلل الدماغي المعرض مجموعة من الأعراض والظروف المشارك المهووسين، اعتمادا على شدة المرض. صعوبة في الحركة والتنسيق هي العلامات الأكثر شيوعا، جنبا إلى جنب مع التأخير في الوصول إلى المعالم التنموية السيارات. وتشمل علامات أخرى العضلات غير طبيعية (إما زيادة أو نقصان)، وانخفاض المهارات غرامة السيارات، وصعوبة في المشي، الترويل المفرطة والبلع، وتأخر الكلام (NIH). ويعتقد أن السبب الكامن وراء CP أن يكوننقص الأكسجين و / أو تدفق الدم إلى الدماغ خلال فترة ما قبل أو الفترة المحيطة بالولادة، أو ما يصل إلى سنة واحدة بعد الولادة. وبالإضافة إلى ذلك، يعتقد التهاب الآن أن تكون عنصرا أساسيا في تطوير الإنتاج الأنظف. وترتبط معظم الحالات CP مع الضرر المادة البيضاء حول البطينات، والمعروفة باسم تلين حول البطينات الدماغية (PVL). وتشير هذه السمة المميزة العصبية أن إهانة الأولية مما أدى إلى CP يحدث خلال فترة نمو الدماغ عندما قليلة التغصن هي الأكثر عرضة للإهانة. فترة النمو السريع دبقية قليلة التغصن في الإنسان، وأيضا الفترة عندما قليلة التغصن هي الأكثر عرضة للإصابة، ما بين 24 - 32 أسبوعا من الحمل. في القوارض، والفترة المماثلة هي أيام بعد الولادة 2-7 يوليو، وليس عند يسببها CP في هذا النموذج. نموذج الفأر حديثي الولادة من حزب المحافظين الذي تم استخدامه لإجراء الاختبارات المذكورة هنا يجمع بين نقص الأكسجين ونقص التروية مع التهاب لخلق ينجأوروغواي الذي يحاكي أفضل من التنكس العصبي ينظر في CP البشري. ويتناول هذا النموذج بعض أوجه القصور التي لوحظت في النماذج الحيوانية الأخرى من حزب المحافظين، والتي تفتقر إلى العجز الحركي المتميزة التي تشبه المرضى CP البشري، وكذلك متميز الضرر المادة البيضاء. وقد أظهرت دراسات سابقة من قبل متعاون باستخدام نفس النموذج أن إضافة التهاب يعزز الضرر المادة البيضاء، وبالتالي محاكاة أفضل PVL تظهر على الأطفال المصابين بالشلل الدماغي 8. بناء على البيانات السابقة، تعرض هذه الورقة على بطارية شاملة من اختبارات السيارات حديثي الولادة وذلك لتقييم التغيرات في السلوك الحركي والذين تتراوح أعمارهم الحيوان.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1354">
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:271px;">C57BL/6 mice</td>
			<td style="width:239px;">Charles River Laboratories</td>
			<td style="width:103px;">STRAIN CODE: 027&#160;</td>
			<td style="width:741px;">C57BL/6NCrl is the exact strain we use</td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:271px;">Anesthesia Dish, PYREX&#8482; Crystallizing Dish</td>
			<td style="width:239px;">Corning Life Sciences Glass&#160;</td>
			<td style="width:103px;">3140125</td>
			<td style="width:741px;">Capacity: 25.03 oz. (740mL); Dia. x H: 4.92 x 2.55 in. (125 x 65mm). However, any small round glass container will work. A 2 cup capacity pyrex food storage bowl with flat bottom will also work and is much cheaper (Pyrex model number: 6017399).</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:271px;">Covered lead ring</td>
			<td style="width:239px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:103px;">S90139C</td>
			<td style="width:741px;">Lead ring for stablizing flasks in a water bath. It is used inside the anesthesia dish.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:271px;">Scalpel Blade #11</td>
			<td style="width:239px;">World Precision Instrucments, Inc.</td>
			<td style="width:103px;">500240</td>
			<td style="width:741px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:271px;">Small Vessel Cauterizer</td>
			<td style="width:239px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:103px;">18000-00</td>
			<td style="width:741px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:271px;">Micro Hook</td>
			<td style="width:239px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:103px;">10064-14</td>
			<td style="width:741px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:271px;">Vetbond Suture Glue</td>
			<td style="width:239px;">3M</td>
			<td style="width:103px;">1469SB</td>
			<td style="width:741px;">n-butyl cyanoacrylate adhesive</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:271px;">Lipopolysaccharide</td>
			<td style="width:239px;">Sigma Life Science</td>
			<td style="width:103px;">L4391</td>
			<td style="width:741px;">Lipopolysaccaride from e.coli 0111:B4, gamma irradiated</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:271px;">12x12 inch opaque box</td>
			<td style="width:239px;">Acrylic Display Manufacturing: A division of Piasa Plastics</td>
			<td style="width:103px;">C4022</td>
			<td>Colored Acrylic 5-Sided Cube, 3/16&#34; Colored Acrylic, 12&#34;W x 12&#34;D x 12&#34;H;&#160; http://www.acrylicdisplaymfg.com/html/cubes_19.html</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:271px;">Camera/camcorder</td>
			<td style="width:239px;">JVC</td>
			<td style="width:103px;">GC-PX100BUS</td>
			<td style="width:741px;">Any camcorder that works well in low light and can be imported and edited. We use the JVC GC-PX100 Full HD Everio Camcorder.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:271px;">Covidien Tendersorb&#8482; Underpads</td>
			<td style="width:239px;">Kendall Healthcare Products Co</td>
			<td style="width:103px;">7174</td>
			<td style="width:741px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:271px;">WypAll L40</td>
			<td style="width:239px;">Kimberly-Clark Professional</td>
			<td style="width:103px;">5600</td>
			<td style="width:741px;">Any surface with moderate grip will do</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:271px;">Surface at 45 degree incline</td>
			<td style="width:239px;"></td>
			<td style="width:103px;"></td>
			<td style="width:741px;">We use a cardboard box.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:271px;">Thin wire from a pipe cleaner</td>
			<td style="width:239px;">Creatology</td>
			<td style="width:103px;">M10314420</td>
			<td style="width:741px;">Any pipe cleaner from any craft store will work.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:271px;">50mL conical tube</td>
			<td style="width:239px;">Falcon</td>
			<td style="width:103px;">352070</td>
			<td style="width:741px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:271px;">Fiberglass Screen Wire</td>
			<td style="width:239px;">New York Wire&#160; www.lowes.com</td>
			<td style="width:103px;">14436</td>
			<td style="width:741px;">Any supplier can be used as long as their screen is 16x16 or 18x16</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:271px;">Razor blade</td>
			<td style="width:239px;">Fisherbrand</td>
			<td style="width:103px;">12-640</td>
			<td style="width:741px;">A wooden stick applicator or wooden part of a cotton-tipped swab will also work.</td>
		</tr>
		<tr height="100">
			<td height="100" style="height:100px;width:271px;">OPTIX 24-in x 4-ft x 0.22-in Clear Acrylic Sheet to make Clear Acrylic Walkway</td>
			<td style="width:239px;">PLASKOLITE INC</td>
			<td style="width:103px;">1AG2196A</td>
			<td style="width:741px;">Clear acrylic (1/8&#34; thick) with sides and a top to limit exploration. We bought a sheet of acrylic from a local hardware store and had them cut it to size. (2) 2&#34;x2&#34;; (3) 2&#34;x 18&#34;; (1) 2&#34;x15.5&#34;; (1) 2&#34;x3&#34;. Using clear tape, tape all sides together, with the 15.5&#34; piece on top. Tape the 3&#34; piece to the end of the 15.5&#34; piece to create a flap/entryway for the mice. Alternatively, part or all of the walkway can be glued together, and only taping on the top pieces. This design will allow for the walkway to be opened for easy cleaning.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:271px;">Protractor</td>
			<td style="width:239px;">Westscott</td>
			<td style="width:103px;">ACM14371</td>
			<td style="width:741px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a battery of motor tests in a neonatal mouse model of cerebral palsy

As the sheer number of transgenic mice strains grow and rodent models of pediatric disease increase, there is an expanding need for a comprehensive, standardized battery of neonatal mouse motor tests. These tests can validate injury or disease models, determine treatment efficacy and/or assess motor behaviors in new transgenic strains. This paper presents a series of neonatal motor tests to evaluate general motor function, including ambulation, hindlimb foot angle, surface righting, negative geotaxis, front- and hindlimb suspension, grasping reflex, four limb grip strength and cliff aversion. Mice between the ages of post-natal day 2 to 14 can be used. In addition, these tests can be used for a wide range of neurological and neuromuscular pathologies, including cerebral palsy, hypoxic-ischemic encephalopathy, traumatic brain injury, spinal cord injury, neurodegenerative diseases, and neuromuscular disorders. These tests can also be used to determine the effects of pharmacological agents, as well as other types of therapeutic interventions. In this paper, motor deficits were evaluated in a novel neonatal mouse model of cerebral palsy that combines hypoxia, ischemia and inflammation. Forty-eight hours after injury, five tests out of the nine showed significant motor deficits: ambulation, hindlimb angle, hindlimb suspension, four limb grip strength, and grasping reflex. These tests revealed weakness in the hindlimbs, as well as fine motor skills such as grasping, which are similar to the motor deficits seen in human cerebral palsy patients.

تم اختبار الفئران من P7 (24 ساعة بعد الجراحة) لP13 (1 أسبوع بعد الجراحة)، وذلك باستخدام الفئران مختلفة لكل نقطة الوقت لكي تعلم اختبار النموذج لم يكن متغير الخلط. وقد تم اختيار P8 كنتائج التمثيلية، حيث أظهرت الفئران أكبر عجز في هذه المرحلة الزمنية. مؤجلة الانتقال من الزحف إلى المشي في CP الفئران حديثي الولادة المرضى CP البشري لديها تشوهات المشية، بدءا من القدمين المشي لمشية scissored. لأن هذا CP يعرض نموذج مشية العجز مماثلة على البشر، وجرى تقييم التمشي. وسجل الفئران على التماثل المشي وحركة الأطراف، مخلب أثناء المشي على التوالي. في 48 ساعة بعد الجراحة (الحزب الوطني الديمقراطي 8)، كانت الفئران CP أقل حركة الأطراف متماثل و &quot;الزحف&quot; مشية بالمقارنة مع نظرائهم الزائف الذي يرمون به (متوسط ​​درجة التمشي: CP 1.083 ±0.6337، ن = 12 مباراة صورية 1.639 ± 0.4859، ن = 9؛ ف &lt;0.05، الشكل 10). قبل أسبوع واحد، وانتقلت على حد سواء CP والفئران صورية إلى المشي (لا تظهر البيانات). <img alt="الرقم 10" src="/files/ftp_upload/53569/53569fig10.jpg" /> الرقم 10. CP الفأر الجراء لا Ambulate وكذلك شمس. الفئران الشام (شريط أسود) لديها متوسط درجة من 1.639 ± 0.4859 (ن = 9)، وهذا يعني تنميتها المتنقلة يقع بين حركة الأطراف غير المتماثلة والزحف البطيء. الفئران CP (شريط رمادي) تحصل على معدل 1.083 ± 0.6337 (ن = 12)، وهذا يعني التمشي بها هو الأقل نموا، وتميل إلى أن تكون حركة الأطراف غير المتماثلة. يتم التعبير عن البيانات كما يعني ± SEM. * غير ف &lt;0.05. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53569/53569fig10large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> هينوزيادة dlimb القدم زاوية في CP بالإضافة إلى التمشي، وجرى تقييم hindlimb القدم الزاوية. العمر ثماني يوما الجراء صورية الماوس سيرا على الأقدام مع hindpaws بهم تواجه الأمام، مقارنة مع الفئران HIL، الذين مفلطحة hindpaws عند المشي في خط مستقيم (الشكل 2، متوسط زاوية: CP 77.48 ± 9.848، ن = 9، مقابل الشام 54.54 ± 8.043، ن = 11؛ ف &lt;0.0001، الشكل 11). هذه الزيادة في زاوية يرتبط مع عدم الاستقرار بالمشي، في هذا الجراء تحتاج إلى زيادة زاوية من الكفوف الخلفية من أجل تحقيق الاستقرار مشية والمساعدة في التوازن والتنسيق. <img alt="الرقم 11" src="/files/ftp_upload/53569/53569fig11.jpg" /> الرقم 11. CP الفأر الجراء تباعد Hindpaws بهم عند المشي. الفئران CP (أشرطة سوداء) ويبلغ متوسط الزاوية بين hindlimbs بهم من 77.48 ± 8.043 (ن = 11)، في حين أن الفئران الشام (ب الرمادية<html> ARS) لديها زاوية متوسط ​​54.54 ± 9.848 (ن = 9). يتم التعبير عن البيانات كما يعني ± SEM. **** هو P &lt;0.0001. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53569/53569fig11large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> الفئران CP لا تظهر العجز عند تصحيح السطح أدرج اختبار المقوم السطح حيث أن بعض المرضى الذين يعانون من ضعف CP السيطرة على جذعه (Heyrman وآخرون، 2013). بالإضافة إلى ذلك، هو النظام الدهليزي اللازمة للكشف عن الحاجة إلى تصحيح، وهناك عجز الدهليزي في بعض المرضى CP 23. الفئران CP لا تظهر عجوزا كبيرة عند تصحيح بالمقارنة مع الضوابط صورية (لا تظهر البيانات). الفئران CP تنفيذ نفس كما الشام في سالب انجذاب بالجاذبية اختبار ر &quot;FO: المحافظة على together.within الصفحات =&quot; 1 &quot;&gt; يستخدم انجذاب بالجاذبية السلبية لاختبار التنسيق الحركي في الجراء الصغار وتحدى الفئران التي يجري مكان تواجه هبوطا على سطح منحدر تأخير أو عدم شاقة توجيه يمكن أن تشير إلى العجز. في التنسيق والتوازن، أو إدخال الدهليزي. الفئران CP تظهر أي عجز عندما تحدى مع انجذاب بالجاذبية السلبية بالمقارنة مع الفئران الشام (لا تظهر البيانات). بالإضافة إلى ذلك، الفئران CP لم تظهر تفضيل لتحويل نحو جانب واحد مقابل أخرى عند إعادة توجيه، . أمام الأطراف الاصطناعية تعليق الاختبار المناسب الفئران أقدم من 10 أيام انخفضت المرضى CP العضلات والعجز في المهارات الحركية الدقيقة، مثل استيعاب. لاختبار الضعف في هذا النموذج من الفئران، استخدمنا اختبار تعليق الأطراف الاصطناعية الجبهة. وعلاوة على ذلك، يستخدم هذا النموذج الإصابة الدماغية من جانب واحد ومن جانب ونيس يمكن تحديد باستخدام هذا الاختبار تعليق. هذا الاختبارخير الفئران الأكبر سنا من 10 أيام 15. في 8 أيام من العمر، بعد يومين الإصابة، لم تكن هناك فروق ذات دلالة إحصائية بين CP والفئران الشام (لا تظهر البيانات). وانخفض القوة Hindlimb في الفئران CP المرضى CP الإنسان غالبا ما تحتاج الأقواس أو أجهزة المشي والمساعدة بسبب نقص التحكم في المحركات وقوة. من أجل المقارنة بين نموذج CP القوارض للإنسان، وجرى تقييم قوة hindlimb باستخدام اختبار تعليق hindlimb. عندما علقت من جانب أنبوب مخروطي الشكل، وأظهرت الفئران CP ضعف hindlimb، كما يتضح من انخفاض في شنقا درجة (hindlimb شنقا النتيجة: CP 3.468 ± 0.5561، ن = 13، مقابل صورية 3.891 ± 0.1329، ن = 13؛ ف &lt; 0.05، الشكل 12). ولم يلاحظ أي اختلاف في الوقت المناسب تعليق hindlimb (لا تظهر البيانات). وهكذا، على غرار مرضى CP الإنسان والفئران CP تظهر hindlالمكتب البحري الدولي (الساق) ضعف. <img alt="الرقم 12" src="/files/ftp_upload/53569/53569fig12.jpg" /> الرقم 12. الفئران الشام هي قليلا ولكن أقوى بكثير في Hindlimbs بهم من الفئران CP. بمتوسط درجة اعدام 3.891 ± 0.1329 (ن = 13)، والفئران الشام (شريط أسود) تظهر فصل أكثر hindlimb، وبالتالي موقفا أقوى hindlimb، عندما معلقة على حافة أنبوب من الفئران CP (شريط رمادي) مع متوسط ​​درجة اعدام 3.468 ± 0.5561 (ن = 13). يتم التعبير عن البيانات كما يعني ± SEM. * غير ف &lt;0.05. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53569/53569fig12large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> وانخفض قبضة القوة الآتية CP الإصابات استيعاب مع كل الكفوف أربعة المهم للالقوارض فيحيث تسلق الجبال ويمر عبر الأسطح غير المستوية. قبضة تتطلب قوة مستمرة كبيرة، بدلا من البراعة أو قوة الخطية، لا سيما في خانة والكفوف 24. وطلب من الفئران لاجراء وزن الجسم على شاشة سلكية مقلوب. وكانت الفئران CP لم تستطع الحفاظ على قبضتهم وانخفضت هذه الفئران في زوايا أقل بكثير (أربعة أطرافه متوسط زاوية: CP 75.627 ± 24.48، ن = 11، مقابل صورية 96.57 ± 10.836، ن = 9؛ ف &lt;0.05، الشكل 13). هذه البيانات تظهر أن هناك عجز كبير في قوة قبضة في الفئران CP. <img alt="الرقم 13" src="/files/ftp_upload/53569/53569fig13.jpg" /> الرقم 13. الفئران CP لها قبضة الأضعف من شمس. الفئران الشام (شريط أسود) يمكن فهم إلى زاوية مقلوب متوسط 96.57 ± 10.836 (ن = 9). يمكن أن الفئران CP (شريط رمادي) تصل فقط زاوية مقلوب من 75،627 ± 24.48 (ن = 11). يتم التعبير عن البيانات كما يعني ± SEM. * غير ع0؛ 0.05. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53569/53569fig13large.jpg" target="_blank">يرجى النقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> العجز استيعاب رد الفعل واضحة في الفئران CP جنبا إلى جنب مع العجز الحركية، وضعف الحركات الحركية الدقيقة أيضا في المرضى الذين يعانون CP 25،26. منعكس استيعاب في البشر موجودا عند الولادة ويختفي حوالي 5-6 أشهر. ومع ذلك، والتغيرات في رد الفعل استيعاب، مثل سرعة مبالغ فيها أو قوة استيعاب، وعدم الفهم، أو عودة ظهور رد الفعل استيعاب بعد 6 أشهر من العمر، وكلها تشير إلى تلف الجهاز العصبي. لمقارنة استيعاب في نموذج حزب المحافظين، وتم تحديد العجز في استيعاب انعكاسية. في 48 ساعة بعد الإصابة، الفئران CP يبرهن على وجود انخفاض في استيعاب العاكسة (متوسط ​​الكفوف اغتنامهافي 48 ساعة: CP 2.429 ± 0.9376، ن = 14، مقابل صورية 3.214 ± 0.8018، ن = 14؛ ف &lt;0.05، الشكل 14A). وكانت هناك زيادة طفيفة، ولكن ليس كبيرة في تفضيل مخلب المناسب في الأرجل الأمامية (لا تظهر البيانات). كان هناك تفضيل مخلب الصحيح كبير في hindpaws (CP 75.0 ± 42.74، ن = 14، مقابل صورية 17.86 ± 54.09، ن = 14؛ ف &lt;0.005، الشكل 14B). بعد أسبوع واحد إصابة الفئران، CP تظهر العجز استيعاب (اغتنامها متوسط الكفوف في 1 الأسبوع: CP 2.75 ± 1.035، ن = 8، مقابل صورية 3.80 ± 0.6325، ن = 10؛ ف &lt;0.05، الشكل 14C)، مع عدم وجود تفضيل مخلب ملحوظ . <img alt="الرقم 14" src="/files/ftp_upload/53569/53569fig14.jpg" /> الرقم 14. الفئران CP ديها عجز استيعاب، في Hindpaws، المقابل للدماغ منطقة المصاب. (A) 48 ساعة بعد الإصابة (الحزب الوطني الديمقراطي 8)، والفئران CP (شريط رمادي) يمسك العصا معه، في المتوسط، الكفوف أقل من أنيما صوريةليرة سورية (شريط أسود). الفئران (B) CP (شريط رمادي) عرض تفضيل لاستيعاب مع hindpaw الأيمن (المقابل للإصابة) بدلا من استخدام hindpaw الأيسر (المماثل للإصابة). الفئران الشام (شريط أسود) لا يتم عرض هذه مخلب الصحيح تفضيل. يتم احتساب تفضيل مخلب الصحيح كما ([مخلب الحق - غادر مخلب] / [مخلب الصحيح + مخلب الأيسر + على حد سواء الكفوف] * 100) (C) أسبوع واحد إصابة التالية، الفئران CP (شريط الرمادي) لا تزال تظهر استيعاب العجز مقارنة. شمس (شريط أسود). يتم التعبير عن البيانات كما يعني ± SEM. * غير ف &lt;0.05، ** غير ع &lt;0.005. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53569/53569fig14large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> الفئران CP تتحول بعيدا عن حافة خلال نفور كليف يعتمد اختبار جرف النفور على الخوف المتأصل من الفئران لتحويل العواذ من منحدر حاد ويتجه نحو بر الأمان. على الرغم من أن بعض المرضى CP صعوبات الدهليزي، فضلا عن ضعف التحكم في المحركات، فإن الفئران CP لا تظهر أي عجز في هذا الاختبار.

Watch this Scientific Journal Video about A Battery of Motor Tests in a Neonatal Mouse Model of Cerebral Palsy at JoVE.com

A Battery of Motor Tests in a Neonatal Mouse Model of Cerebral Palsy

Presented is a concise battery of mouse neonatal motor tests. Using these tests, neonatal motor deficits can be demonstrated in a variety of neonatal motor disorders. By having a standardized set of tests, results from different studies can be compared, allowing for better and accurate reporting between groups.

مجموعة من الاختبارات للسيارات في ماوس نموذج حديثي الولادة من الشلل الدماغي

As the sheer number of transgenic mice strains grow and rodent models of pediatric disease increase, there is an expanding need for a comprehensive, ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Making Sense of Listening: The IMAP Test Battery

جعل الشعور الاستماع : البطارية اختبار IMAP

The ability to hear is only the first step towards making sense of the range of information contained in an auditory signal. Of equal importance are the ...

Mouse Model of Middle Cerebral Artery Occlusion

نموذج الفأر من انسداد الشريان الدماغي الأوسط

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the ...

Multi-photon Imaging of Tumor Cell Invasion in an Orthotopic Mouse Model of Oral Squamous Cell Carcinoma

متعدد الفوتون التصوير من غزو خلايا الورم في الفأر نموذج مثلي الفم سرطان الخلايا الحرشفية

Loco-regional invasion of head and neck cancer is linked to metastatic risk and presents a difficult challenge in designing and implementing patient ...

A Swine Model of Neonatal Asphyxia

نموذج الخنازير من الاختناق الوليدي

Annually more than 1 million neonates die worldwide as related to asphyxia. Asphyxiated neonates commonly have multi-organ failure including hypotension, ...

Non-invasive Optical Measurement of Cerebral Metabolism and Hemodynamics in Infants

غير الغازية قياس بصري من الأيض الدماغي وديناميكا الدم في الأطفال الرضع

Perinatal brain injury remains a significant cause of infant mortality  and morbidity, but there is not yet an effective bedside tool that can  accurately ...

A Piglet Model of Neonatal Hypoxic-Ischemic Encephalopathy

A الخنزير الصغير نموذج من الأطفال حديثي الولادة نقص الأوكسجين، اعتلال الدماغ الإقفاري

Birth asphyxia, which causes hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE), accounts for 0.66 million deaths worldwide each year, about a quarter of the ...

Assessment of Perigenital Sensitivity and Prostatic Mast Cell Activation in a Mouse Model of Neonatal Maternal Separation

تقييم محيط بالغدد التناسلية حساسية والبروستات ماست تنشيط خلية في نموذج الفأر من فصل الأمهات حديثي الولادة

Chronic prostatitis/chronic pelvic pain syndrome (CP/CPPS) has a lifetime prevalence of 14% and is the most common urological diagnosis for men under the ...

A Neonatal Mouse Spinal Cord Compression Injury Model

وحديثي الولادة ماوس الحبل الشوكي ضغط إصابة نموذج

Spinal cord injury (SCI) typically causes devastating neurological deficits, particularly through damage to fibers descending from the brain to the spinal ...

Myocardial Infarction in Neonatal Mice, A Model of Cardiac Regeneration

احتشاء عضلة القلب في الفئران حديثي الولادة، نموذج للتجديد القلب

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and ...

Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Model of Neonatal Stroke in P10 Rats

عابر الدماغي الأوسط الشريان انسداد نموذج من السكتة الدماغية حديثي الولادة في الفئران P10

A number of animal models have been used to study hypoxic-ischemic injury, traumatic injury, global hypoxia, or permanent ischemia in both the immature ...