Name: tissue characterization after a new disaggregation method for skin micro-grafts generation
Uploaded: 2016-03-04T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Tissue Characterization after a New Disaggregation Method for Skin Micro-Grafts Generation at JoVE.com

המחברים מבקשים הודות ד&quot;ר פדריקה Zanzottera לתרום לחקר ביצוע ניתוח תזרים cytometry.

הצהרת אתיקה: מאז היישום הקליני של הפרוטוקול מחייב שימוש רקמות עצמיות עורית של המטופל, האפיון שלה במבחנה בוצעה לפני שימוש קליני על רקמות עורית הומולוגיות בבנק עור האזורי אמיליה רומניה ביצוע ההנחיות של חוקי המדינה על קצירה, עיבוד והפצת רקמות להשתלה (CNT 2013). <p class="...

<ol>
	<li>Sen, C. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+skin+wounds:+a+major+and+snowballing+threat+to+public+health+and+the+economy.">Human skin wounds: a major and snowballing threat to public health and the economy.</a> Wound Repair Regen. 17, 763-771 (2009).</li><li>Ellis, E., Sinn, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+homologous+bone+grafts+in+maxillofacial+surgery.">Use of homologous bone grafts in maxillofacial surgery.</a> J Oral Maxillofac Surg. 51, 1181-1193 (1993).</li><li>Nguyen, A., Pasyk, K. A., Bouvier, T. N., Hassett, C. A., Argenta, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+study+of+survival+of+autologous+adipose+tissue+taken+and+transplanted+by+different+techniques.">Comparative study of survival of autologous adipose tissue taken and transplanted by different techniques.</a> Plast Reconstr Sur. 85, 378-389 (1990).</li><li>Abuzeni, P. Z., Alexander, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhancement+of+Autologous+Fat+Transplantation+With+Platelet+Rich+Plasma.">Enhancement of Autologous Fat Transplantation With Platelet Rich Plasma.</a> AJCS. 18 (2), 59-70 (2001).</li><li>Trovato, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+New+Medical+Device+Rigeneracons+Allows+to+Obtain+Viable+Micro-Grafts+from+Mechanical+Disaggregation+of+Human+Tissues.">A New Medical Device Rigeneracons Allows to Obtain Viable Micro-Grafts from Mechanical Disaggregation of Human Tissues.</a> J Cell Physiol. , (2015).</li><li>Zanzottera, F., Lavezzari, E., Trovato, L., Icardi, A., Graziano, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose+Derived+Stem+Cells+and+Growth+Factors+Applied+on+Hair+Transplantation+Follow-Up+of+Clinical+Outcome.">Adipose Derived Stem Cells and Growth Factors Applied on Hair Transplantation Follow-Up of Clinical Outcome.</a> JCDSA. 4 (4), 268-274 (2014).</li><li>Giaccone, M., Brunetti, M., Camandona, M., Trovato, L., Graziano, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+New+Medical+Device,+Based+on+Rigenera+Protocol+in+the+Management+of+Complex+Wounds.">A New Medical Device, Based on Rigenera Protocol in the Management of Complex Wounds.</a> J Stem Cells Res, Rev &amp; Rep. 1 (3), 3 (2014).</li><li>Aimetti, M., Ferrarotti, F., Cricenti, L., Mariani, G. M., Romano, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autologous+dental+pulp+stem+cells+in+periodontal+regeneration:+a+case+report.">Autologous dental pulp stem cells in periodontal regeneration: a case report.</a> Int J Periodontics Restorative Dent. 34 (3), s27-s33 (2014).</li><li>Graziano, A., Carinci, F., Scolaro, S., D'Aquino, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Periodontal+tissue+generation+using+autologous+dental+ligament+micro-grafts:+case+report+with+6+months+follow-up.">Periodontal tissue generation using autologous dental ligament micro-grafts: case report with 6 months follow-up.</a> AOMS. 1 (2), 20 (2013).</li><li>Brunelli, G., Motroni, A., Graziano, A., D'Aquino, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sinus+lift+tissue+engineering+using+autologous+pulp+micro-grafts:+A+case+report+of+bone+density+evaluation.">Sinus lift tissue engineering using autologous pulp micro-grafts: A case report of bone density evaluation.</a> J Indian Soc Periodontol. 17 (5), 644-647 (2013).</li><li>Ellner, P. D., Stoessel, C. J., Drakeford, E., Vasi, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+culture+medium+for+medical+bacteriology.">A new culture medium for medical bacteriology.</a> Am J Clin Pathol. 45, 502-504 (1966).</li></ol>

מחקר ראשוני מראה כי שתלי מיקרו-מתקבל על ידי פרוטוקול זה יכול להיות משולב עם ספוגים קולגן, כפי שכבר דווח ביישומים קליניים אחרים, כדי לייעל את היעילות של שתלים מיקרו שתלי 9, 10. בפרט, מחקר זה דיווח על קיבולת של ביו -complexes, היווה ידי שתלים-מייקרו וספוגי קולגן, כדי adjuvant ל...

בשנים האחרונות, מספר שיטות חדשות פותחו בתחום הביוטכנולוגיה להשיג השעיות הסלולר עצמיות במהלך ניתוח על מנת לספק טיפולי צעד אחד עבור נגעי עור כרוניים וחמורים. יתר על כן, את הניהול של פצעים חריפים אבל בעיקר כרוניים כתוצאה מטראומה, סוכרת, זיהומים, וכן גורמים נוספים, נותר מאתגר. יש ראיות גוברות כי בפצעים כרוניים הפכו בעיה בריאותית עולמית רצינית, ועלולים ליצור ניטל כספי עצום על מערכות בריאות ברחבי עולם 1. כדי להגדיל את שיעור ההצלחה בטיפול נגעים בעור, בהיעדר המניפולציה נרחבת (כולל שיפור הסלולר) והשמירה על תנאים סטריליים חיוניים, כדי ליצור השעיה הסלולר שניתן ליישם באופן מיידי על האזור הפגוע של חולים, ובכך להימנע עיבוד יותר מן החדרים הנקיים כגון מפעלי סלולרי. רחובarting ביופסיות עור קטנים, טחינה, צנטריפוגה ושיטות הפרדה אחרות (למשל, אנזימטי או מכאני), משמשים לעתים קרובות כדי לקבל השעיה הסלולר, אשר יכול להיות מתורבתת במדיום גידול. כל השיטות האלה דורשים בדרך כלל זמן רב של ביצוע, והדגיש מבני התא, מה שמוביל לירידה של כדאיויות תא. היבט נוסף משמעותי הוא להשיג השעיה הסלולר עצמית מוכנה להיות בשימוש על ידי רופאים, למשל, כדי לתקן אזורים פגועים. יתר על כן, היא מבוססת היטב כי שתל רקמה עצמית לשרוד את נהלי ההעברה בסופו של דבר לשרוד האתר המקבל על פי העקרונות של אינדוקציה וחוטים 2, 3. רקמת השתל האידיאלית צריכה להיות זמינה ויש antigenicity נמוך באתר תורם לתחלואה 4. על בסיס עדויות אלה, המטרה הראשונה של המחקר הנוכחי הייתה ליצור מתחמי ביו עצמיים מתאימיםיישום קליני בתיקון רקמות. לשם כך, אנו מתארים שיטה חדשה לקבלה-שתל מייקרו עצמי החל רקמות עורית שהיו מפוצלות על פי פרוטוקול זה. הצגה מקרה גם מתוארת במסמך זה כיישום קליני של שתלי מייקרו העצמיים מתקבלים על ידי פרוטוקול זה בשילוב עם ספוגי קולגן. גישה זו כבר דווחה להיות יעיל החלוקה המכאנית של רקמות אנושיות 5 וזה כבר בשימוש קליני עבור שתלים והתחדשות של רקמות עורי 6,7 וכן עבור טיפולים רגנרטיבית של רקמות חיבור בכירורגיה אוראלית ולסת 8-10 . בנוסף, המטרה השנייה של המחקר היה ביולוגי והאפיון של הרקמות עורית לאחר החלוקה שלהם על ידי פרוטוקול זה. לשם כך, דגימות הומולוגיות שונות של רקמות עורית נגזרו באזור תא המטען של באיברים רבים שוניםו / או תורמים רבות רקמות עובד הבאים חוקים לאומיים קציר, עיבוד והפצה של רקמות להשתלה (CNT 2013) ב Skin אמיליה רומניה האזורית בנק. הצגת מקרה: מטופלת 35 בן מראה טראומה מורכבת בשל תאונת דרכים אושפז ביחידה לטיפול נמרץ של בית החולים אנקונה. החולה הראה זיהום על הרגל בשל פצע פתוח שבר מסובך התייצב עם קיבוע חיצוני. שנייה הטריה רדיקלית בוצעה וכאשר הפצע הפך נקי לאחר טיפול בלחץ שלילי (טיפול VAC) ואת קרום העצם ונראה בריא, אנחנו מוחלים הפרוטוקול לאחר חודשי התאוששות. לאחר חלוקה עם מערכת זו, מיקרו-שתלי השיג שימשו כדי ליצור ביו-קומפלקסים עם ספוג קולגן אשר הושתלו מכן על מנת לחקור את יעילותם על תיקון הנגע.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="978">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:245px;">Rigenera Machine</td>
			<td style="width:257px;">Human Brain Wave</td>
			<td style="width:217px;">79210R</td>
			<td style="width:259px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:245px;">Rigeneracons</td>
			<td style="width:257px;">Human Brain Wave</td>
			<td style="width:217px;">79450S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:245px;">MTT</td>
			<td style="width:257px;">Roche Diagnostic GmbH</td>
			<td style="width:217px;">11465007001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="29">
			<td height="29" style="height:29px;width:245px;">RPMI medium</td>
			<td style="width:257px;">PBI International</td>
			<td style="width:217px;">733-2292</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="29">
			<td height="29" style="height:29px;width:245px;">DMEM medium</td>
			<td style="width:257px;">PBI International</td>
			<td style="width:217px;">F 0415</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:245px;">Antibiotics</td>
			<td style="width:257px;">Biological Industries PBI</td>
			<td style="width:217px;">03-038-1 &#160;&#160;&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="48">
			<td height="48" style="height:48px;width:245px;">Antibodies for FACS Analysis</td>
			<td style="width:257px;">eBiosciences</td>
			<td style="width:217px;">code 12-1469 for CD146-P; code 17-0349&#160; for CD34-APC&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:245px;">Columbia agar</td>
			<td style="width:257px;">BioMerieux Company</td>
			<td style="width:217px;">43041</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:245px;">Condress&#174;</td>
			<td style="width:257px;">Abiogen Pharma</td>
			<td style="width:217px;"></td>
			<td>collagen sponge used for bio-complexes</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:245px;">DMSO&#160;</td>
			<td style="width:257px;">Bioniche Pharma USA LLC, Lake Forest, IL</td>
			<td style="width:217px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">NaCl solution</td>
			<td>Fresenius Kabi, Bad Homburg, Germany</td>
			<td style="width:217px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Xylene&#160;</td>
			<td style="width:257px;">Carlo Erba</td>
			<td style="width:217px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

tissue characterization after a new disaggregation method for skin micro-grafts generation

כמה שיטות חדשות פותחו בתחום הביוטכנולוגיה להשיג השעיות הסלולר עצמיות במהלך ניתוח, על מנת לספק טיפולי צעד אחד עבור נגעי עור כרוניים וחמורים. יתר על כן, ההנהלה כרוני אלא גם פצעים חריפים כתוצאה מטראומה, סוכרת, זיהומים וכן גורמים נוספים, נותרת מאתגרת. במחקר זה אנו מתארים שיטה חדשה ליצירה-שתל מייקרו עצמי מרקמות עורית של חולה יחיד היישום הקליני שלהם. יתר על כן, במבחנה ביולוגית ואפיון של רקמות עורית נגזרו עור, הדרמיס-epidermized דה (Ded) ו הדרמיס של באיברים רבים ו / או תורמים רבות רקמות גם בוצע. כל הרקמות היו מפוצל על פי הפרוטוקול החדש, המאפשר לנו להשיג-שתלי מיקרו קיימא. בפרט, דיווחנו כי פרוטוקול חדשני זו הוא מסוגל ליצור ביו-מתחמים שהלחינו שתלי-מייקרו עצמי וקולגן ספוגים מוכן להיות מיושם על פצעים בעור. cliniיישום קאל של מתחמי ביו עצמיים על נגע ברגלו נמסר גם, מראה שיפור של שני תהליך מחדש epitalization ורכות של הנגע. בנוסף, המודל במבחנה שלנו הראה כי כדאיויות תא לאחר חלוקה מכאנית עם מערכת זו נשמרות לאורך זמן עד שבעה (7) ימים של התרבות. אנחנו גם ציינו, על ידי ניתוח תזרים cytometry, כי ברכת תאים המתקבלים חלוק מורכבת של תאים מסוגים שונים, כוללים בתאי גזע mesenchymal, כי להפעיל תפקיד מרכזי בתהליכי התחדשות ותיקון רקמות, עבור פוטנציאל ההתחדשות הגבוה שלהם. לבסוף, הראינו במבחנה כי נוהל זה שומר על סטריליות של שתלי מיקרו כאשר בתרבית במנות אגר. לסיכום, אנו מגיעים למסקנה כי גישת משובים חדשה זו יכולה להיות כלי מבטיח עבור קלינאים להשיג בצעד אחד קיימא, סטרילי ומוכנה לשימוש-שתל מייקרו שניתן ליישם לבד או בשילוב עם מרבית scaffo הביולוגי המשותףLDS.

במחקר ראשוני זה, המטרה הראשונה הייתה לבדוק את היכולת של שתלי מייקרו עצמיים אדם בשילוב עם תמיכה ביולוגית, כגון קולגן, לייצר ביו-מתחמים מוכנים לשימוש. ביו-מתחמים אלה הושתלו בחולה עם פצע ברגל נגרם על ידי (איור 2 א) בתאונת דרכי...

Watch this Scientific Journal Video about Tissue Characterization after a New Disaggregation Method for Skin Micro-Grafts Generation at JoVE.com

Tissue Characterization after a New Disaggregation Method for Skin Micro-Grafts Generation

הפרוטוקול מתאר שיטה חדשה disaggregate ברקמות אדם ליצור-שתל מייקרו עצמי, וזה ביחד עם ספוגי קולגן, להצמיח-מתחמים ביו אדם מוכנים לשימוש בטיפול נגעים בעור. יתר על כן, מערכת זו שומרת כדאיות התא של שתלי מיקרו בזמנים שונים לאחר חלוקה מכני.

אפיון רקמות לאחר שיטה חדשה חלוקה לעור מיקרו שתלי הדור

Several new methods have been developed in the field of biotechnology to obtain autologous cellular suspensions during surgery, in order to provide one ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Manual Muscle Testing:  A Method of Measuring Extremity Muscle Strength Applied to Critically Ill Patients

בדיקת שרירים ידנית: שיטת מדידת חוזק שרירים בגפיים יישומית על חולים אנושים

Survivors of acute respiratory distress syndrome (ARDS) and other causes of critical illness often have generalized weakness, reduced exercise tolerance, ...

Accurate and Simple Measurement of the Pro-inflammatory Cytokine IL-1&beta; using a Whole Blood Stimulation Assay

Accurate and Simple Measurement of the Pro-inflammatory Cytokine IL-1ÃƒÅ½Ã‚Â² using a Whole Blood Stimulation Assay

מדידה מדויקת ופשוטה 1β-IL Pro-ציטוקין דלקתי באמצעות גירוי Assay Whole Blood

Inflammatory processes resulting from the secretion of soluble mediators by immune cells, lead to various manifestations in skin, joints and other tissues ...

A Next-generation Tissue Microarray (ngTMA) Protocol for Biomarker Studies

A Next-generation Tissue Microarray ngTMA Protocol for Biomarker Studies

פרוטוקול Microarray רקמות הדור הבא (ngTMA) לביומרקר לימודים

Biomarker research relies on tissue microarrays (TMA). TMAs are produced by repeated transfer of small tissue cores from a &#8216;donor&#8217; block into ...

Ischemic Tissue Injury in the Dorsal Skinfold Chamber of the Mouse: A Skin Flap Model to Investigate Acute Persistent Ischemia

פגיעה ברקמות איסכמי בהגבו skinfold לשכת העכבר: דגם דש עור לחקור איסכמיה מתמיד חריפה

Despite profound expertise and advanced surgical techniques, ischemia-induced complications ranging from wound breakdown to extensive tissue necrosis are ...

A Mouse Fetal Skin Model of Scarless Wound Repair

דגם עור עכבר עוברי של תיקון פצע צלקות

Early in utero, but not in postnatal life, cutaneous wounds undergo regeneration and heal without formation of a scar. Scarless fetal wound healing occurs ...

An In Vitro Dormancy Model of Estrogen-sensitive Breast Cancer in the Bone Marrow: A Tool for Molecular Mechanism Studies and Hypothesis Generation

An In Vitro Dormancy Model of Estrogen-sensitive Breast Cancer in the Bone Marrow: A Tool for Molecular Mechanism Studies and Hypothesis Generation

<em&gt; במבחנה</em&gt; תרדמת דגם של סרטן השד רגיש לאסטרוגן במוח העצם: כלי ללימודי מנגנון מולקולרי והשערת דור

The study of breast cancer dormancy in the bone marrow is an exceptionally difficult undertaking due to the complexity of the interactions of dormant ...

Cutaneous Surgical Denervation:  A Method for Testing the Requirement for Nerves in Mouse Models of Skin Disease

Denervation כירורגי עורית: שיטה לבדיקת הדרישה עצבה בעכברי מודל של מחלת עור

Cutaneous somatosensory nerves function to detect diverse stimuli that act upon the skin. In addition to their established sensory roles, recent studies ...

Quantitative Visualization of Leukocyte Infiltrate in a Murine Model of Fulminant Myocarditis by Light Sheet Microscopy

ויזואליזציה כמותית של ליקוציטים לחדור במודל Murine של שריר הלב הדוקרני על ידי מיקרוסקופית גיליון אור

Light-sheet fluorescence microscopy (LSFM), in combination with chemical clearing protocols, has become the gold standard for analyzing fluorescently ...

A Technique for Subcutaneous Abdominal Adipose Tissue Biopsy via a Non-diathermy Method

שיטה לביופסיה רקמת השומן התת עורית בטן באמצעות שיטה בלתי-diathermy

Adipose tissue biopsies offer tissue samples that, upon analysis, may provide insightful overviews of mechanisms relating to metabolism and disease. To ...

An Enzyme-free Method for Isolation and Expansion of Human Adipose-derived Mesenchymal Stem Cells

שיטה נטולת אנזימים לבידוד והתרחבות של אדיפוז האנושית-תאי גזע נגזרים

Mesenchymal stem cells (MSCs) are a population of multipotent cells that can be isolated from various adult and fetal tissues, including adipose tissue. ...