Name: the c-fos protein immunohistological detection: a useful tool as a marker of central pathways involved in specific physiological responses in vivo and ex vivo
Uploaded: 2016-04-25T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about The c-FOS Protein Immunohistological Detection: A Useful Tool As a Marker of Central Pathways Involved in Specific Physiological Responses In Vivo and Ex Vivo

The University Paris 13 supported this work. ASPT was supported by a University Paris 13 fellowship and the "Association Fran&#231;aise pour le Syndrome d'Ondine". FJ was supported by a Laboratory of Excellence GR-Ex fellowship. The GR-Ex (ref ANR-11-LABX-0051) is funded by the program "Investissement d'avenir" of the French National Research agency (ref ANR-11-IDEX-0005-02).

नोट: सी-FOS का पता लगाने के एक मानकीकृत कई कदम (चित्रा 1) को शामिल प्रक्रिया है। सभी प्रयोगों चूहों या चूहों पर प्रदर्शन किया गया। प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल, पशु प्रयोग चार्ल्स डार्विन (CE5 / 2011/05) में आचार सम...

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	<li>Curran, T., Teich, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+a+39,000-dalton+protein+in+cells+transformed+by+the+FBJ+murine+osteosarcoma+virus.">Identification of a 39,000-dalton protein in cells transformed by the FBJ murine osteosarcoma virus.</a> Virology. 116, 221-235 (1982).</li><li>Curran, T., MacConnell, W. P., van Straaten, F., Verma, I. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structure+of+the+FBJ+murine+osteosarcoma+virus+genome:+molecular+cloning+of+its+associated+helper+virus+and+the+cellular+homolog+of+the+v-fos+gene+from+mouse+and+human+cells.">Structure of the FBJ murine osteosarcoma virus genome: molecular cloning of its associated helper virus and the cellular homolog of the v-fos gene from mouse and human cells.</a> Mol Cell Biol. 3, 914-921 (1983).</li><li>Curran, T., Miller, A. D., Zokas, L., Verma, I. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Viral+and+cellular+fos+proteins:+a+comparative+analysis.">Viral and cellular fos proteins: a comparative analysis.</a> Cell. 36, 259-268 (1984).</li><li>Herdegen, T., Leah, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inducible+and+constitutive+transcription+factors+in+the+mammalian+nervous+system:+control+of+gene+expression+by+Jun,+Fos+and+Krox,+and+CREB/ATF+proteins.">Inducible and constitutive transcription factors in the mammalian nervous system: control of gene expression by Jun, Fos and Krox, and CREB/ATF proteins.</a> Brain Res Brain Res Rev. 28, 370-490 (1998).</li><li>Dragunow, M., Faull, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+c-fos+as+a+metabolic+marker+in+neuronal+pathway+tracing.">The use of c-fos as a metabolic marker in neuronal pathway tracing.</a> J Neurosci Methods. 29, 261-265 (1989).</li><li>Bullitt, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+c-fos-like+protein+as+a+marker+for+neuronal+activity+following+noxious+stimulation+in+the+rat.">Expression of c-fos-like protein as a marker for neuronal activity following noxious stimulation in the rat.</a> J Comp Neurol. 296, 517-530 (1990).</li><li>Greenberg, M. E., Ziff, E. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stimulation+of+3T3+cells+induces+transcription+of+the+c-fos+proto-oncogene.">Stimulation of 3T3 cells induces transcription of the c-fos proto-oncogene.</a> Nature. 311, 433-438 (1984).</li><li>Greenberg, M. E., Greene, L. A., Ziff, E. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nerve+growth+factor+and+epidermal+growth+factor+induce+rapid+transient+changes+in+proto-oncogene+transcription+in+PC12+cells.">Nerve growth factor and epidermal growth factor induce rapid transient changes in proto-oncogene transcription in PC12 cells.</a> J Biol Chem. 260, 14101-14110 (1985).</li><li>Muller, R., Bravo, R., Burckhardt, J., Curran, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+c-fos+gene+and+protein+by+growth+factors+precedes+activation+of+c-myc.">Induction of c-fos gene and protein by growth factors precedes activation of c-myc.</a> Nature. 312, 716-720 (1984).</li><li>Teppema, L. J., Berkenbosch, A., Veening, J. G., Olievier, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypercapnia+induces+c-fos+expression+in+neurons+of+retrotrapezoid+nucleus+in+cats.">Hypercapnia induces c-fos expression in neurons of retrotrapezoid nucleus in cats.</a> Brain Res. 635, 353-356 (1994).</li><li>Teppema, L. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+c-fos+in+the+rat+brainstem+after+exposure+to+hypoxia+and+to+normoxic+and+hyperoxic+hypercapnia.">Expression of c-fos in the rat brainstem after exposure to hypoxia and to normoxic and hyperoxic hypercapnia.</a> J Comp Neurol. 388, 169-190 (1997).</li><li>Larnicol, N., Wallois, F., Berquin, P., Gros, F., Rose, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=c-fos-like+immunoreactivity+in+the+cat's+neuraxis+following+moderate+hypoxia+or+hypercapnia.">c-fos-like immunoreactivity in the cat's neuraxis following moderate hypoxia or hypercapnia.</a> J Physiol Paris. 88, 81-88 (1994).</li><li>Bodineau, L., Larnicol, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brainstem+and+hypothalamic+areas+activated+by+tissue+hypoxia:+Fos-like+immunoreactivity+induced+by+carbon+monoxide+inhalation+in+the+rat.">Brainstem and hypothalamic areas activated by tissue hypoxia: Fos-like immunoreactivity induced by carbon monoxide inhalation in the rat.</a> Neuroscience. 108, 643-653 (2001).</li><li>Erickson, J. T., Millhorn, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoxia+and+electrical+stimulation+of+the+carotid+sinus+nerve+induce+Fos-like+immunoreactivity+within+catecholaminergic+and+serotoninergic+neurons+of+the+rat+brainstem.">Hypoxia and electrical stimulation of the carotid sinus nerve induce Fos-like immunoreactivity within catecholaminergic and serotoninergic neurons of the rat brainstem.</a> J Comp Neurol. 348, 161-182 (1994).</li><li>Bodineau, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Consequences+of+in+utero+caffeine+exposure+on+respiratory+output+in+normoxic+and+hypoxic+conditions+and+related+changes+of+Fos+expression:+a+study+on+brainstem-spinal+cord+preparations+isolated+from+newborn+rats.">Consequences of in utero caffeine exposure on respiratory output in normoxic and hypoxic conditions and related changes of Fos expression: a study on brainstem-spinal cord preparations isolated from newborn rats.</a> Pediatr Res. 53, 266-273 (2003).</li><li>Voituron, N., Frugiere, A., Gros, F., Macron, J. M., Bodineau, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diencephalic+and+mesencephalic+influences+on+ponto-medullary+respiratory+control+in+normoxic+and+hypoxic+conditions:+an+in+vitro+study+on+central+nervous+system+preparations+from+newborn+rat.">Diencephalic and mesencephalic influences on ponto-medullary respiratory control in normoxic and hypoxic conditions: an in vitro study on central nervous system preparations from newborn rat.</a> Neuroscience. 132, 843-854 (2005).</li><li>Voituron, N., Frugiere, A., Champagnat, J., Bodineau, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoxia-sensing+properties+of+the+newborn+rat+ventral+medullary+surface+in+vitro.">Hypoxia-sensing properties of the newborn rat ventral medullary surface in vitro.</a> J Physiol. 577, 55-68 (2006).</li><li>Voituron, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+kreisler+mutation+leads+to+the+loss+of+intrinsically+hypoxia-activated+spots+in+the+region+of+the+retrotrapezoid+nucleus/parafacial+respiratory+group.">The kreisler mutation leads to the loss of intrinsically hypoxia-activated spots in the region of the retrotrapezoid nucleus/parafacial respiratory group.</a> Neuroscience. 194, 95-111 (2011).</li><li>Suzue, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Respiratory+rhythm+generation+in+the+in+vitro+brain+stem-spinal+cord+preparation+of+the+neonatal+rat.">Respiratory rhythm generation in the in vitro brain stem-spinal cord preparation of the neonatal rat.</a> J Physiol. 354, 173-183 (1984).</li><li>Gage, G. J., Kipke, D. R., Shain, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole+animal+perfusion+fixation+for+rodents.">Whole animal perfusion fixation for rodents.</a> J Vis Exp. , e3564 (2012).</li><li>Rousseau, J. P., Caravagna, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophysiology+on+isolated+brainstem-spinal+cord+preparations+from+newborn+rodents+allows+neural+respiratory+network+output+recording.">Electrophysiology on isolated brainstem-spinal cord preparations from newborn rodents allows neural respiratory network output recording.</a> J Vis Exp. , e53071 (2015).</li><li>Start, R. D., Layton, C. M., Cross, S. S., Smith, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reassessment+of+the+rate+of+fixative+diffusion.">Reassessment of the rate of fixative diffusion.</a> J Clin Pathol. 45, 1120-1121 (1992).</li><li>Paxinos, G., Watson, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The rat brain in stereotaxic coordinates. , (1998).</li><li>Paxinos, G., Franklin, K. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The mouse brain in stereotaxic coordinates. , (2001).</li><li>Berquin, P., Bodineau, L., Gros, F., Larnicol, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brainstem+and+hypothalamic+areas+involved+in+respiratory+chemoreflexes:+a+Fos+study+in+adult+rats.">Brainstem and hypothalamic areas involved in respiratory chemoreflexes: a Fos study in adult rats.</a> Brain Res. 857, 30-40 (2000).</li><li>Berquin, P., Cayetanot, F., Gros, F., Larnicol, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postnatal+changes+in+Fos-like+immunoreactivity+evoked+by+hypoxia+in+the+rat+brainstem+and+hypothalamus.">Postnatal changes in Fos-like immunoreactivity evoked by hypoxia in the rat brainstem and hypothalamus.</a> Brain Res. 877, 149-159 (2000).</li><li>Bodineau, L., Cayetanot, F., Frugiere, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fos+study+of+ponto-medullary+areas+involved+in+the+in+vitro+hypoxic+respiratory+depression.">Fos study of ponto-medullary areas involved in the in vitro hypoxic respiratory depression.</a> Neuroreport. 12, 3913-3916 (2001).</li><li>Takakura, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peripheral+chemoreceptor+inputs+to+retrotrapezoid+nucleus+(RTN)+CO2-sensitive+neurons+in+rats.">Peripheral chemoreceptor inputs to retrotrapezoid nucleus (RTN) CO2-sensitive neurons in rats.</a> J Physiol. 572, 503-523 (2006).</li><li>Mulkey, D. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Respiratory+control+by+ventral+surface+chemoreceptor+neurons+in+rats.">Respiratory control by ventral surface chemoreceptor neurons in rats.</a> Nat Neurosci. 7, 1360-1369 (2004).</li><li>Finley, J. C., Katz, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+central+organization+of+carotid+body+afferent+projections+to+the+brainstem+of+the+rat.">The central organization of carotid body afferent projections to the brainstem of the rat.</a> Brain Res. 572, 108-116 (1992).</li><li>Bodineau, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Data+supporting+a+new+physiological+role+for+brain+apelin+in+the+regulation+of+hypothalamic+oxytocin+neurons+in+lactating+rats.">Data supporting a new physiological role for brain apelin in the regulation of hypothalamic oxytocin neurons in lactating rats.</a> Endocrinology. 152, 3492-3503 (2011).</li><li>Okada, Y., Chen, Z., Jiang, W., Kuwana, S., Eldridge, F. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomical+arrangement+of+hypercapnia-activated+cells+in+the+superficial+ventral+medulla+of+rats.">Anatomical arrangement of hypercapnia-activated cells in the superficial ventral medulla of rats.</a> J Appl Physiol (1985). 93, 427-439 (2002).</li><li>Saadani-Makki, F., Frugiere, A., Gros, F., Gaytan, S., Bodineau, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Involvement+of+adenosinergic+A1+systems+in+the+occurrence+of+respiratory+perturbations+encountered+in+newborns+following+an+in+utero+caffeine+exposure.+a+study+on+brainstem-spinal+cord+preparations+isolated+from+newborn+rats.">Involvement of adenosinergic A1 systems in the occurrence of respiratory perturbations encountered in newborns following an in utero caffeine exposure. a study on brainstem-spinal cord preparations isolated from newborn rats.</a> Neuroscience. 127, 505-518 (2004).</li><li>Morgan, J. I., Cohen, D. R., Hempstead, J. L., Curran, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mapping+patterns+of+c-fos+expression+in+the+central+nervous+system+after+seizure.">Mapping patterns of c-fos expression in the central nervous system after seizure.</a> Science. 237, 192-197 (1987).</li><li>Sagar, S. M., Sharp, F. R., Curran, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+c-fos+protein+in+brain:+metabolic+mapping+at+the+cellular+level.">Expression of c-fos protein in brain: metabolic mapping at the cellular level.</a> Science. 240, 1328-1331 (1988).</li><li>Herdegen, T., Kovary, K., Leah, J., Bravo, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Specific+temporal+and+spatial+distribution+of+JUN,+FOS,+and+KROX-24+proteins+in+spinal+neurons+following+noxious+transsynaptic+stimulation.">Specific temporal and spatial distribution of JUN, FOS, and KROX-24 proteins in spinal neurons following noxious transsynaptic stimulation.</a> J Comp Neurol. 313, 178-191 (1991).</li><li>Marina, N., Morales, T., Diaz, N., Mena, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Suckling-induced+activation+of+neural+c-fos+expression+at+lower+thoracic+rat+spinal+cord+segments.">Suckling-induced activation of neural c-fos expression at lower thoracic rat spinal cord segments.</a> Brain Res. 954, 100-114 (2002).</li></ol>

सी-FOS एक तत्काल जल्दी जीन है, और अपने उत्पाद का पता लगाने, सी-FOS प्रोटीन, प्रतिष्ठित न्यूरोनल विवो 11,13,25,28 में विशिष्ट सांस की प्रतिक्रियाओं में शामिल आबादी की पहचान के लिए प्रयोग किया जाता ...

सी FOS जीन 1980 1,2 की शुरुआत में पहली बार के लिए पहचान की थी और अपने उत्पाद को एक परमाणु प्रोटीन जीन-उत्प्रेरक गुण 3,4 होने के रूप में 1984 में विशेषता थी। यह लंबी अवधि के न्यूरॉन उत्तेजना के साथ जुड़े तंत्र में भाग लेता है। दरअसल, neuronal गतिविधि में परिवर्तन का दूसरा दूत cascades संकेत है कि तत्काल जल्दी जीन सी FOS की अभिव्यक्ति है, जो प्रतिलेखन कारक सी FOS के उत्पादन लाती प्रेरित करने के लिए नेतृत्व। उत्तरार्द्ध देर जीनों की अभिव्यक्ति शुरू की है और इस तरह उत्तेजनाओं 4 के कई अलग अलग प्रकार के तंत्रिका तंत्र के अनुकूली प्रतिक्रियाओं में भाग लेता है। इस प्रकार, 1980 5,6 के अंत के बाद से, सी-FOS प्रोटीन का पता लगाने अक्सर सामान्य 4 में और केंद्रीय तंत्रिका तंत्र (सीएनएस) की गतिविधि पर जीन प्रतिलेखन पर बहिर्जात कारकों के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए neuronal रास्ते बाहर मानचित्रण के लिए इस्तेमाल किया गया है विभिन्न शारीरिक में शामिलअल शर्तों। बेसल सी FOS अभिव्यक्ति चूहे, चूहे, बिल्ली, बंदर, और मानव 4 सहित विभिन्न प्रजातियों में अध्ययन किया गया है। इस प्रकार, अपनी अभिव्यक्ति के कैनेटीक्स अपेक्षाकृत अच्छी तरह से जाना जाता है। प्रतिलेखन सक्रियण तेजी से होता है (5 से 20 मिनट) 7,8, और mRNA संचय उत्तेजना 9 के शुरू होने के बाद 30 और 45 मिनट के बीच एक अधिकतम तक पहुँच जाता है और 12 मिनट की एक लघु आधा जीवन के साथ गिरावट आती है। सी-FOS प्रोटीन संश्लेषण mRNA संचय के बाद और 20 से 90 मिनट पद उत्तेजना 6 पर immunohistochemistry से पता लगाया जा सकता है। सी-FOS अभिव्यक्ति का विश्लेषण प्रतिष्ठित हाइपोक्सिया या hypercapnia 10-14 के लिए जीवन रक्षक प्रणाली प्रतिक्रियाओं में शामिल केंद्रीय श्वसन नेटवर्क की पहचान करने में vivo अध्ययन में प्रयोग किया जाता है। अभी हाल ही में इस उपकरण भी पूर्व vivo brainstem की तैयारी में इस्तेमाल किया गया था हाइपोक्सिया या एच के लिए केंद्रीय श्वसन नेटवर्क रूपांतरों का पता लगाने के लिएypercapnia 15-18। दरअसल, इन तैयारियों एक लयबद्ध गतिविधि प्रतिष्ठित केंद्रीय श्वसन ड्राइव 19 को आत्मसात उत्पन्न करते हैं। इस प्रकार, तैयारी के इस प्रकार पूरी तरह से deafferented होने का फायदा है, और इसलिए, सी-FOS अभिव्यक्ति के बारे में परिणाम केवल परिधीय संरचनाओं के किसी भी हस्तक्षेप के बिना एक केंद्रीय उत्तेजना के परिणामों को प्रतिबिंबित। सी-FOS पता लगाने प्रतिरक्षाऊतकरसायन या immunohistofluorescence दृष्टिकोण से बनाया जा सकता है। अप्रत्यक्ष immunodetection सी FOS के खिलाफ एक प्राथमिक एंटीबॉडी और एक माध्यमिक एंटीबॉडी प्रजातियों जिसमें प्राथमिक एंटीबॉडी का उत्पादन किया गया था के खिलाफ निर्देशित का उपयोग जरूरी है। प्रतिरक्षाऊतकरसायन विधि के लिए, माध्यमिक एंटीबॉडी एक एंजाइम (peroxidase, उदाहरण के लिए) है कि एक सब्सट्रेट (एच 2 ओ 2 peroxidase के लिए) पर काम करता है के साथ संयुग्मित है। enzymatic प्रतिक्रिया के उत्पाद एक वर्णकोत्पादक (3.3-diaminobenzidine tetrahydrochlorid द्वारा विकसित की हैई) है, जो यह दाग और प्रकाश माइक्रोस्कोपी के तहत देखा जा सकता है। प्रतिक्रिया निकल अमोनियम सल्फेट का उपयोग कर मजबूत बनाया जा सकता है। इन विधियों विभिन्न शारीरिक चुनौतियों के दौरान सक्रिय न्यूरॉन्स का पता लगाने और इसलिए पहचान और / या लगातार शारीरिक प्रतिक्रियाओं में शामिल परिधीय और केंद्रीय रास्ते में से मानचित्रण अनुमति देते हैं।

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="573">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Cell culture plate 12-Well</td>
			<td style="width:71px;">Costa</td>
			<td style="width:119px;">35/3</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="106">
			<td height="106" style="height:107px;width:216px;">15 mm Netwell inserts with mesh polyester membrane</td>
			<td style="width:71px;">Corning</td>
			<td style="width:119px;">3477</td>
			<td style="width:167px;">The 15mm diameter well inserts have 74&#181;m polyester mesh bottoms attached to polystyrene inserts</td>
		</tr>
		<tr height="85">
			<td height="85" style="height:85px;width:216px;">primary antibody (rabbit polyclonal antibody against the c-Fos protein)</td>
			<td style="width:71px;">Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td style="width:119px;">sc-52</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Vectastain Elite ABC KIT&#160;</td>
			<td rowspan="2" style="width:71px;">Vector laboratories</td>
			<td rowspan="2" style="width:119px;">PK-6101</td>
			<td rowspan="2" style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">(Rabbit IgG-secondary antibody)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">NaH2PO4*2H2O</td>
			<td style="width:71px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">71505</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Na2HPO4</td>
			<td style="width:71px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">S7907</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Paraformaldehyde</td>
			<td style="width:71px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">P6148</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">NaOH 0.1N</td>
			<td style="width:71px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">43617</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Polyvinyl-Pyrrolidone</td>
			<td style="width:71px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">PVP-360</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Sucrose</td>
			<td style="width:71px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">S7903</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">NaCl</td>
			<td style="width:71px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">S7653</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Ethylene-glycol</td>
			<td style="width:71px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">33068</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Triton X100</td>
			<td style="width:71px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">T8787</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Trisma HCl</td>
			<td style="width:71px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">T5941</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Trisma Base</td>
			<td style="width:71px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">T1503</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">3.3-diaminobenzidine tetrahydrochloride&#160;</td>
			<td style="width:71px;">Rockland</td>
			<td style="width:119px;">DAB50</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Nickel ammonium sulphate</td>
			<td style="width:71px;">Alfa Aesar</td>
			<td style="width:119px;">12519</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">H2O2</td>
			<td style="width:71px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">H1009</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Xylene</td>
			<td style="width:71px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">33817</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Entellan Neo</td>
			<td style="width:71px;">Merck Millipore</td>
			<td style="width:119px;">107961</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Slide&#160;</td>
			<td style="width:71px;">Thermo-scientific</td>
			<td style="width:119px;">1014356190</td>
			<td style="width:167px;">Superfrost ultraplus</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Cover glass</td>
			<td style="width:71px;">Thermo-scientific</td>
			<td style="width:119px;">Q10143263NR1</td>
			<td style="width:167px;">24 x 60mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">BSA</td>
			<td style="width:71px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">A2153</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the c-fos protein immunohistological detection: a useful tool as a marker of central pathways involved in specific physiological responses in vivo and ex vivo

कई अध्ययनों से पहचान करने और मस्तिष्क विशिष्ट शारीरिक नियमों में शामिल क्षेत्रों नक्शा करने के लिए करना चाहते हैं। आद्य ओंकोजीन सी FOS, एक तत्काल जल्दी जीन, विभिन्न उत्तेजनाओं के जवाब में न्यूरॉन्स में व्यक्त किया जाता है। प्रोटीन उत्पाद आसानी से प्रतिरक्षाऊतकरसायन सी FOS का पता लगाने का उपयोग न्यूरॉन्स कि उनकी गतिविधि में परिवर्तन प्रदर्शित के समूहों को मैप करने के लिए अग्रणी तकनीक के साथ पाया जा सकता है। इस अनुच्छेद में, हम हाइपोक्सिया या hypercapnia करने के लिए जीवन रक्षक प्रणाली अनुकूलन में शामिल brainstem neuronal आबादी की पहचान पर ध्यान केंद्रित किया। दो दृष्टिकोण पशुओं में विवो में शामिल neuronal आबादी की पहचान करने में वर्णित किया गया है और deafferented brainstem तैयारी में पूर्व vivo। में विवो, जानवरों hypercapnic या hypoxic गैस के मिश्रण से अवगत कराया गया। पूर्व vivo, deafferented तैयारियों hypoxic या hypercapnic कृत्रिम मस्तिष्कमेरु द्रव के साथ superfused थे। दोनों ही मामलों में, या तो विवो जानवरों या ई में नियंत्रणएक्स विवो तैयारियों normoxic और normocapnic की शर्तों के तहत बनाए रखा गया। इन दो दृष्टिकोणों की तुलना न्यूरोनल सक्रियण यानी की उत्पत्ति, के निर्धारण की अनुमति देता परिधीय और / या केंद्रीय। में vivo और पूर्व vivo, brainstems, एकत्र किए गए थे तय है, और वर्गों में कटा हुआ। एक बार जब वर्गों तैयार थे, सी-FOS प्रोटीन का पता लगाने के आदेश प्रतिरक्षाऊतकरसायन hypoxic या hypercapnic stimulations से सक्रिय कोशिकाओं के brainstem समूहों की पहचान करने के लिए बनाया गया था। लेबल की कोशिकाओं brainstem सांस की संरचनाओं में गिना रहे थे। नियंत्रण हालत, हाइपोक्सिया या hypercapnia की तुलना में कई विशिष्ट brainstem साइटों है कि इस प्रकार न्यूरोनल केंद्रीय सांस की ड्राइव के अनुकूलन में शामिल रास्ते के विधान में सी-FOS लेबल की कोशिकाओं की संख्या में वृद्धि हुई।

सी-FOS का पता लगाने कि इस तरह के हाइपोक्सिया और इन विवो (2A चित्रा) में hypercapnia के रूप में या स्थितियों है कि इन शर्तों के पूर्व vivo (चित्रा 2 बी) की नकल में विशेष परिस्थितियों में...

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The c-FOS Protein Immunohistological Detection: A Useful Tool As a Marker of Central Pathways Involved in Specific Physiological Responses In Vivo and Ex Vivo

सी-FOS प्रोटीन Immunohistological जांच: एक उपयोगी उपकरण केंद्रीय रास्ते विशिष्ट शारीरिक प्रतिक्रियाओं में शामिल की एक मार्कर के रूप में<em&gt; Vivo</em&gt; और<em&gt; पूर्व विवो</em

Here, we present a protocol based on c-FOS protein immunohistological detection, a classical technique used for the identification of neuronal populations involved in specific physiological responses in vivo and ex vivo.

Many studies seek to identify and map the brain regions involved in specific physiological regulations. The proto-oncogene c-fos, an immediate early gene, ...

Research

JoVE Journal

Biology

The c-FOS Protein Immunohistological Detection: A Useful Tool As a Marker of Central Pathways Involved in Specific Physiological Responses In Vivo and Ex Vivo

Single Cell Electroporation in vivo within the Intact Developing Brain

सिंगल सेल electroporation vivo में बरकरार विकासशील मस्तिष्क के भीतर

Single-cell electroporation (SCE) is a specialized technique allowing the delivery of DNA or other macromolecules into individual cells within intact ...

Method for Culture of Early Chick Embryos ex vivo (New Culture)

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प्रारंभिक चिकी भ्रूण पूर्व vivo (नई संस्कृति) की संस्कृति के लिए विधि

The chick embryo is a valuable tool in the study of early embryonic development. Its transparency, accessibility and ease of manipulation, make it an ...

In utero and ex vivo Electroporation for Gene Expression in Mouse Retinal Ganglion Cells

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Utero और पूर्व जीन एक्सप्रेशन के लिए माउस रेटिना नाड़ीग्रन्थि कोशिकाओं में vivo electroporation में

The retina and its sole output neuron, the retinal ganglion cell (RGC), comprise an excellent model in which to examine biological questions such as cell ...

In-vivo Detection of Protein-protein Interactions on Micro-patterned Surfaces

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में vivo माइक्रो नमूनों सतहों पर प्रोटीन, प्रोटीन बातचीत की जांच

Unraveling the interaction network of molecules in-vivo is key to understanding the mechanisms that regulate cell function and metabolism. A multitude of ...

Using SecM Arrest Sequence as a Tool to Isolate Ribosome Bound Polypeptides

SECM गिरफ्तार अनुक्रम एक ribosome बाध्य polypeptides पृथक उपकरण के रूप में का उपयोग

Extensive research has provided ample evidences suggesting that protein folding in the cell is a co-translational process1-5. However, the exact pathway ...

A Novel Ex vivo Culture Method for the Embryonic Mouse Heart

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एक उपन्यास<em&gt; पूर्व vivo</emभ्रूण माउस हार्ट के लिए&gt; संस्कृति विधि

Developmental studies in the mouse are hampered  by the inaccessibility of the embryo during gestation. Thus, protocols to  isolate and culture individual ...

Using Caenorhabditis elegans as a Model System to Study Protein Homeostasis in a Multicellular Organism

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The folding and assembly of proteins is essential for protein function, the long-term health of the cell, and longevity of the organism. Historically, the ...

Chromatin Immunoprecipitation Assay for the Identification of Arabidopsis Protein-DNA Interactions In Vivo

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एराबिडोप्सिस प्रोटीन डीएनए बातचीत की पहचान के लिए chromatin immunoprecipitation परख<em&gt; Vivo</em

Intricate gene regulatory networks orchestrate biological processes and developmental transitions in plants. Selective transcriptional activation and ...

Measuring the Stiffness of Ex Vivo Mouse Aortas Using Atomic Force Microscopy

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मापने की कठोरता<em&gt; पूर्व विवो</em&gt; माउस Aortas परमाणु शक्ति माइक्रोस्कोपी का उपयोग

Arterial stiffening is a significant risk factor and biomarker for cardiovascular disease and a hallmark of aging. Atomic force microscopy (AFM) is a ...

In Vivo Detection and Analysis of Rb Protein SUMOylation in Human Cells

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Vivo में मानव कोशिकाओं में आरबी प्रोटीन SUMOylation का पता लगाने और विश्लेषण

The post-translational modifications of proteins are critical for the proper regulation of intracellular signal transduction. Among these modifications, ...