Name: preparation of acute brain slices using an optimized n-methyl-d-glucamine protective recovery method
Uploaded: 2018-02-26T12:30:00
Duration: 10 min 53 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method at JoVE.com

Эта работа финансировалась Институтом Аллен мозга науки. Авторы хотели бы поблагодарить учредителей Института Аллен, G. Пол Аллен и Джоди Аллен, за их дальновидность, поощрения и поддержки. Мы также благодарим Аллен институт технического вспомогательного персонала для выполнения ухода за животными, животноводства и генотипирования.

Авторы не имеют ничего сообщать.

Na + Спайк - улучшает уплотнение Gigaohm формирования и фиксации записи успех Первоначальный вариант метода NMDG защитные восстановления был специально разработан для взрослых и старение животных2,5. Некоторые ранние также стремились применять эту методологию для несовершеннолетних животных мозг нарезки (то есть, мышей < 30 дней). Однако было отмечено, что в отличие от выдающиеся визуально подтвердила нейронов сохранение с помощью метода NMDG защитные восстановления этой возрастной, формирование gigaohm уплотнение может часто стойло, приводит к Сбой фиксации записи попыток. Одна из гипотез является что NMDG катионов большей готовностью попали в ломтики несовершеннолетних мозга относительно взрослого мозга ломтиками и может препятствовать печать формирования; Однако gigaohm уплотнения легко могут образовываться в то время как фрагменты несовершеннолетних мозг полностью погруженной в NMDG Фаго (данные не показаны), таким образом указывает что NMDG фаго само по себе не препятствует gigaohm уплотнение формирования.
Быстрый переход от низкой к высокой Na+ решения в связи с завершением этапа восстановления первоначального мозга ломтик наносит ущерб нейрональных мембран и возмущает процесс формирования печать. Это интуитивно, учитывая, что переход от низкой к высокой Na+, холодной и теплой температуры и резкое повышение Ca2 + Mg2 + соотношение коллективно приводят к массовым возрождение спонтанной синаптической активности. Этот этап ингибирующее отскок в головном мозге, нарезка процедура скорее всего зеркало реперфузионных повреждений после ишемического инсульта. Таким образом для дальнейшего смягчения ущерба нейрональных мембран на этапе первоначального восстановления, постепенно Na+ Спайк-процедура была включена в котором повышение концентрации Na+ в зале NMDG защитные восстановления инкубации это медленно и можно воспроизвести повышенных с точные сроки. Как и оригинальные защитные восстановления процедуры выгодно височной диссоциации Na+ высота от температуры и Ca2 +/Mg2 + соотношение высоты. Но Кроме того, Na+ Спайк в процедура приводит к небольшой прирост в внеклеточной концентрации Na+ более ранние моменты времени и увеличений к конце моменты времени, тем самым предоставляя ткани мозга возможность для лучшего размещения для повышения уровня Na+ . Эта процедура является альтернативой постепенное решение Обмен контролируется перфузионного насоса или тяжести капельной линии, которые приводят к постоянным увеличением уровня Na+ и требуют внимания к приток и отток, чтобы избежать переполнения срез камеры. В частности в этом Na+ Спайк в процедуре осмотического давления раствора в зале срез постепенно повышается в течение нескольких минут, прежде чем срезы возвращаются в нормальное осмоляльность решение, но это не повлияло отрицательно ломтик здоровья или фиксации записи успех. Решение высокой осмотического давления резки ранее был использован для подготовки срез мозга для того, чтобы лучше сохранить дофаминовых нейронов для патч зажим записей57,58, продемонстрировав тем самым, что это временное hyperosmolality может быть полезным в некоторых контекстах.
Путем реализации оптимизированной процедуры, сочетая метода защитные восстановления NMDG и постепенное Na+ Спайк в шаге утилита этой методологии срез мозга был расширен для покрытия несовершеннолетних веками зрелых взрослых животных. Этот обновленный Протокол теперь подходит для широкого спектра животных возрастов, с использованием единого оптимального формулирования фаго NMDG и процедуры. При необходимости, Na+ Спайк в процедура может быть применена с прогрессивно больше задержки или медленнее время курс повышения жизнеспособности срезы мозга из старых животных, и мы предоставили основное руководство рекомендованных Спайк графиков согласно чтобы животное возраст (см. таблицу 2). В то время как мы обеспечили основные рамки, подходит для широкого спектра приложений, дополнительные передовые шаги могут быть изучены для дальнейшего укрепления жизнеспособности и долговечность срезы мозга от взрослых и старение животных. К примеру глутатион восстановление стратегии являются особенно эффективными в этом отношении и может быть реализован как описано в других разделах2,6.
Повышение пропускной способности для сложных экспериментов Требовательных приложение, которое требует отличные сохранение нейронные структуры и функции для того, чтобы достичь высокой надежности успеха является анализ синаптической связи патч зажим записи. Как количество нейронов одновременно регистрируются идет вверх линейно, уровень технической сложности поднимается выше линейно. Существуют многочисленные типы сбоя, и один из наиболее частых причин сбоев является неспособность формы адекватные gigaohm пломбы на один или несколько целевых ячеек. Это может значительно замедлить прогресс, особенно тогда, когда три или более нейронов должны быть записаны одновременно. Согласуется с выводом быстрее gigaohm уплотнение время формирования с оптимизированный метод NMDG защитные восстановления, существует заметное улучшение в успех скорость и пропускную способность патч мульти нейрон зажим записи экспериментов с обоих взрослых трансгенных мозг мыши и взрослого мозга человека нейрохирургических фрагменты. Повышение эффективности почти наверняка объясняется более быстрое и надежное уплотнение формирования gigaohm и улучшение нейрональных сохранение фрагментов с настоящим Протоколом. Хотя этот протокол фокусируется на преимущества явно для фиксации записи приложений, аналогичные прирост ожидается для других сложных экспериментальных приложений, где мозг ломтик жизнеспособность имеет первостепенное значение.

Подготовка кусочек острого мозга является важным Экспериментальная модель системой в неврологии. Примерно половину века эта платформа позволила динамических функциональных исследований мозга жизни через широкий спектр видов животных и анатомические мозга. Является ли предполагаемого применения биохимии, функциональной томографии, морфология или электрофизиологии, это крайне важно для обеспечения оптимального целостности и жизнеспособности кусочки ткани. Именно по этой причине, что подготовка срез весьма устойчивыми несовершеннолетних грызунов мозга (т.е., моложе, чем послеродовой день 30 для мышей) был наиболее предпочтительным на сегодняшний день. Трудности в получении достаточно здорового мозга кусочки от зрелых взрослых и старения животных оказалась грозный вызов для большинства и ввел жесткие ограничения для изучения функциональной архитектуры зрелого мозга. Это особенно верно для фиксации записи, технику, которая требует отличные морфологических и функциональных сохранения и является необходимым условием для характеризующие подробные внутренние и синаптическую свойства выявленных одного нейронов. За последние несколько десятилетий подавляющее большинство электрофизиологов зажим патч полагались на «защитные резки» метод, с помощью сахарозы замещенных низкой Na+ -фаго1 для подготовки здоровый мозг фрагменты из несовершеннолетних и в гораздо меньшей степени, молодых взрослых животных. Этот метод основан на предпосылке, что пассивный Na+ приток и последующих воды вход и клеток опухоль на этапе резки срез является преобладающим оскорбления, что приводит к плохой выживания нейронов, особенно для этих нейронов, расположенных в поверхностные слои, которые с наибольшей вероятностью для поддержания прямой травмы от движения лезвия. Однако метод защитные резки по-прежнему оставляет желать много лучшего для подготовки срез мозга от зрелых взрослых животных независимо от конкретной фаго разработки реализована.
Простые, но эффективные решения этой проблемы был описан2,3,4,5,6 и называют метод slice «защитные восстановления» мозга. Оригинальной версии этот метод использует NMDG-замещенных фаго, как NMDG была определена как наиболее универсальный и эффективный среди различных других кандидата натрия Ион заменителей (в том числе сахарозы, глицерин, холин и Tris). При разработке средств массовой информации был еще более усиливается добавлением HEPES противостоять ломтик отек мозга и обеспечить более рН буферизации7, а также дополнение добавки для противодействия пагубные последствия оксидативного стресса (Таблица 1). Эмпирически было установлено, что инкубации первоначального восстановления шаг в низкой Na+, низкий Ca2 +, и высокой мг2 + NMDG фаго сразу после резки ткани взрослого мозга был необходимой и достаточной для улучшения нейронов сохранение в широком диапазоне областей мозга, типы клеток и животных возрасте3,5,6.
Примечательно ранее воплощения то, что теперь называют метод защитные восстановления можно найти в литературе1,8,9,10,11,12, 13, хотя полный потенциал для Зрелые взрослого и старения животных мозг срез и патч зажим записи не было признано или продемонстрировал в этих более ранних работах. Кроме того нюансы процедурные различия продолжают появляться в поддержку конкретных экспериментальных приложений4,14,,1516. Коллективный орган работы этих многочисленных исследовательских групп придает высокую уверенность в надежности метода защитные восстановления для сохранения Улучшенная ткани. Метод восстановления защитных NMDG теперь были широко приняты и осуществлены в многочисленных опубликованных научных исследований, используя фрагмент подготовки взрослых животных мозга. Эти острый срез исследования охватывают кортикальное3,17,18, гиппокампа15,19,20,21, полосатой22 , 23 , 24, средний мозг25,26,27,28,29и задний мозг30,,3132, 33 , 34 регионов и различных нейромедиаторов и нейромодулятора типов, включая глутаматергические4,30, ГАМК18,,2031,35 ,36, дофаминергической24,29,37,38, холинергических14,,3738, 39, норадренергической40и серотонинергической27,28 синапсах. Этот метод также хорошо подходит для контроля активности нейронов в фрагментов, полученных от трансгенных животных3,39 или после в vivo вирусный инъекции17,27, optogenetic 28,40,,4142,43, как также как функциональные Ca2 + визуализация активности нейронов2,44 ,45,46. Анализ краткосрочных пластичности4,,4748 и различных форм долгосрочного пластичности16,,3548 были сообщениям. Недавнее исследование применяется метод NMDG защитные восстановления для облегчения широкое и систематическое зондирование синаптической связи в зрительной коре в зрелых взрослых мыши срезы мозга с помощью octopatch, записи конфигурации49 — мощный демонстрация полезности и надежности этого метода. Метод восстановления защитных даже успешно применяется в ранее непредвиденных экспериментальной контекстах, например, улучшение сохранения сосудистую и pericytes взрослых коры мозга ломтики50, фиксации записи из пересаженные межнейронного населения в 1-1,5 лет болезни Альцгеймера мыши модели20и взрослого мозга ломтик рецептор людьми пробирного51.
Следующий протокол описывает пошаговые процедуры для реализации оптимизированный метод защитные восстановления NMDG мозга фрагмент подготовки для повышения жизнеспособности острого мозга ломтиками. Принципы для улучшения сохранения нейрональных обсуждаются, а также демонстрация четкие преимущества этой методологии для сложных мульти нейрон фиксации записи экспериментов в молодых взрослых трансгенные мыши мозга ломтиками и зрелого взрослого мозг человека нейрохирургических ломтиками. Следующий протокол был утвержден для мышей от 21 дней до более чем одного года, а также для человека нейрохирургических образцов, полученных от взрослых пациентов.

<table style="width:948px;" width="948">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:319px;height:21px;">Compresstome VF-200</td>
			<td style="width:185px;">Precisionary Instruments</td>
			<td style="width:131px;">VF-200</td>
			<td style="width:315px;">Vibrating tissue slicer (recommended)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">N-methyl-D-glucamine</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>M2004</td>
			<td>aCSF constituent</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sodium Chloride</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S3014</td>
			<td>aCSF constituent</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Potassium Chloride</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P5405</td>
			<td>aCSF constituent</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sodium Phosphate monobasic dihydrate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>71505</td>
			<td>aCSF constituent</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sodium Bicarbonate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S5761</td>
			<td>aCSF constituent</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">HEPES</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>H4034</td>
			<td>aCSF constituent</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Glucose</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>G7021</td>
			<td>aCSF constituent</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sodium Ascorbate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A4034</td>
			<td>aCSF constituent</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Thiourea</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T8656</td>
			<td>aCSF constituent</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sodium pyruvate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P5280</td>
			<td>aCSF constituent</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Calcium chloride dihydrate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>C7902</td>
			<td>aCSF constituent</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Magnesium Sulfate heptahydrate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>M1880</td>
			<td>aCSF constituent</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">2,2,2-Tribromoethanol&#160;</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T48402</td>
			<td>Anesthetic component 1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">2-methyl-2-butanol&#160;</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>240486</td>
			<td>Anesthetic component 2</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Curved blunt forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11065-07</td>
			<td>Brain dissection tools</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fine dissecting scissors (supercut)</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14058-09</td>
			<td>Brain dissection tools</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Large heavy duty scissors 7&#39;&#39;</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14000-18</td>
			<td>Brain dissection tools</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Metal spatula</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>Z511455-1PAK</td>
			<td>Brain dissection tools</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Razor blades</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89031-954</td>
			<td>Brain dissection tools</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Brain Slice Keeper-4</td>
			<td>Automate Scientific</td>
			<td>S-BSK4</td>
			<td>brain slice holding chamber</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">nylon netting&#160;</td>
			<td>Warner Instruments</td>
			<td>64-0198</td>
			<td>For building small slice recovery chambers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pyrex glass beakers (250 mL)</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89090-434</td>
			<td>For building small slice recovery chambers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">35 mm plastic dish, round</td>
			<td>VWR</td>
			<td>100488-376</td>
			<td>For building small slice recovery chambers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Gas diffuser stones (10 &#181;m)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>59277</td>
			<td>For constant carbogenation (fine bubbles)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Agarose Type I-B</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A0576</td>
			<td>For embedding brain specimens</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Micro loader tips</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>22491229</td>
			<td>For filling patch clamp electrodes</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sylgard</td>
			<td>VWR</td>
			<td>102092-312</td>
			<td>For making a custom dissecting platform</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Hydrochloric acid&#160;</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>H1758-100ML</td>
			<td>For pH adjustment of media</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sodium Hydroxide&#160;</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>221465-25G</td>
			<td>For pH adjustment of media</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Potassium Hydroxide</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>221473</td>
			<td>For pH adjustment of media</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Plastic transfer pipets 3 mL graduated</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89497-676</td>
			<td>For slice transfer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Zirconium ceramic injector blades</td>
			<td>Cadence Specialty Blades</td>
			<td>EF-INZ10</td>
			<td>http://cadenceinc.com/</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">KG-33 borosilicate glass capillary w/filament</td>
			<td>King Glass Company</td>
			<td>custom quote</td>
			<td>ID: 0.87mm, OD 1.50mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Biocytin</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>B4261</td>
			<td>Intern pipette solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Phosphocreatine disodium</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P7936</td>
			<td>Intern pipette solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Potassium Gluconate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>G4500-100G</td>
			<td>Intern pipette solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">EGTA</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>E3889</td>
			<td>Intern pipette solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Mg-ATP</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A9187</td>
			<td>Intern pipette solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Na2-GTP</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>51120</td>
			<td>Intern pipette solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">sucrose</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S0389</td>
			<td>Intern pipette solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Heated water bath (2.5L)</td>
			<td>VWR</td>
			<td style="width:131px;">13491-060</td>
			<td>Miscellaneous</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Filter paper rounds</td>
			<td>VWR</td>
			<td>28456-022</td>
			<td>Miscellaneous</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cyanoacrylate glue</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>B000BQRBO6</td>
			<td>Miscellaneous</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Glass petri dish</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89000-326</td>
			<td>Miscellaneous</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">10X Phosphate buffered saline</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P5493</td>
			<td>Miscellaneous</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">30 mL syringes</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BD302832</td>
			<td>Miscellaneous</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">1 mL syringes</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BD-309628</td>
			<td>Miscellaneous</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">25 5/8 gauge needles</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89219-292</td>
			<td>Miscellaneous</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Thermomixer (w/1.5 mL tube block)</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89232-908</td>
			<td>To keep agarose molten&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preparation of acute brain slices using an optimized n-methyl-d-glucamine protective recovery method

Этот протокол представляет собой практическое руководство для N-метил-D-glucamine (NMDG) защитные восстановления метод подготовки срез мозга. Многочисленные недавние исследования подтвердили полезность этого метода для повышения нейрональных сохранения и общей жизнеспособности срез мозга. Реализация этого метода в начале усыновителей способствовала подробные расследования функции мозга с помощью различных экспериментальных приложений и охватывающих широкий спектр животных возрастов, области мозга и типов клеток. Шаги, намеченные для проведения защитных восстановления мозга ломтик техника с использованием оптимизированный NMDG искусственные спинномозговой жидкости (ФАГО) СМИ разработки и усовершенствованной процедуры надежно получить здоровый мозг ломтики для патч зажим электрофизиологии. Этот обновленный подход наблюдается значительное улучшение в скорости и надежности gigaohm уплотнение в процессе целенаправленной фиксации записи экспериментов при сохранении отличную нейрональных сохранения, способствуя тем самым сложным экспериментальных приложений. Представитель результаты предоставляются от мульти нейрон фиксации записи экспериментов для assay синаптической связи кортикальное мозга ломтиками готовится из молодых взрослых трансгенных мышей и зрелого взрослого человека нейрохирургических образцов. Кроме того оптимизированный метод защитные восстановления NMDG мозга нарезки совместим с несовершеннолетних и взрослых животных, таким образом разрешения ограничение оригинальной методологии. В резюме формулирования одного средства массовой информации и мозга, нарезка процедура может осуществляться различных видов и возрастов для достижения отличные сохранения жизнеспособности и тканей.

Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method at JoVE.com

Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method

Этот протокол демонстрируется реализация оптимизированной N-метил-D-glucamine (NMDG) защитные восстановления метод подготовки срез мозга. Один СМИ формулировка используется надежно получить здоровый мозг кусочки от животных, любого возраста и для различных экспериментальных приложений.

Подготовка фрагментов острого мозга, с помощью оптимизированного N-метил-D-glucamine защитные восстановления метод

This protocol is a practical guide to the N-methyl-D-glucamine (NMDG) protective recovery method of brain slice preparation. Numerous recent studies have ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method

Preparation of Oligomeric &beta;-amyloid1-42 and Induction of Synaptic Plasticity Impairment on Hippocampal Slices

Preparation of Oligomeric ÃƒÅ½Ã‚Â²-amyloid1-42 and Induction of Synaptic Plasticity Impairment on Hippocampal Slices

Подготовка Олигомерные β-амилоида 1-42 И индукция Synaptic Обесценение Пластичность на срезах гиппокампа

Impairment of synaptic connections is likely to underlie the subtle amnesic changes occurring at the early stages of Alzheimer s Disease (AD). ...

Preparation of Acute Subventricular Zone Slices for Calcium Imaging

Подготовка Острый субвентрикулярной фрагменты зона для кальция изображений

The subventricular zone (SVZ) is one of the two neurogenic zones in the postnatal brain. The SVZ contains densely packed cells, including neural ...

In vivo Postnatal Electroporation and Time-lapse Imaging of Neuroblast Migration in Mouse Acute Brain Slices

In vivo Postnatal Electroporation and Time-lapse Imaging of Neuroblast Migration in Mouse Acute Brain Slices

В естественных послеродовой электропорации и Покадровый Визуализация из нейробласта миграции в Mouse острой мозга Ломтики

The subventricular zone (SVZ) is one of the main neurogenic niches in the postnatal brain. Here, neural progenitors proliferate and give rise to ...

Electrophysiological and Morphological Characterization of Neuronal Microcircuits in Acute Brain Slices Using Paired Patch-Clamp Recordings

Электрофизиологических и морфологических характеристик нейронов микросхем при остром мозга срезов при использовании парных патч-зажим Recordings

The combination of patch clamp recordings from two (or more) synaptically coupled neurons (paired recordings) in acute brain slice preparations with ...

Investigation of Synaptic Tagging/Capture and Cross-capture using Acute Hippocampal Slices from Rodents

Исследование Synaptic Tagging / Захват и кросс-захвата с помощью острой срезах гиппокампа от грызунов

Synaptic tagging and capture (STC) and cross-tagging are two important mechanisms at cellular level that explain how synapse-specificity and associativity ...

Recording Synaptic Plasticity in Acute Hippocampal Slices Maintained in a Small-volume Recycling-, Perfusion-, and Submersion-type Chamber System

Запись синаптической пластичности в острой гиппокампа ломтики в малообъемной рециркуляции-, перфузии и погружения типа камерная система

Even though experiments on brain slices have been in use since 1951, problems remain that reduce the probability of achieving a stable and successful ...

Optimized Management of Endovascular Treatment for Acute Ischemic Stroke

Оптимизированное управление эндоваскулярного лечения острого ишемического инсульта

This manuscript describes a streamlined protocol for the management of patients with acute ischemic stroke, which aims at the minimization of time from ...

An Alternative Approach to Study Primary Events in Neurodegeneration Using Ex Vivo Rat Brain Slices

An Alternative Approach to Study Primary Events in Neurodegeneration Using Ex Vivo Rat Brain Slices

Альтернативный подход к изучению основных событий в нейродегенеративные, используя срезы мозга крысы Ex Vivo

Despite&#160;numerous studies that attempt to develop reliable animal models&#160;which reflecting the primary processes underlying neurodegeneration, ...

Preparation of Acute Spinal Cord Slices for Whole-cell Patch-clamp Recording in Substantia Gelatinosa Neurons

Подготовка острого спинного фрагменты записи поклеточного патч зажим в Substantia Gelatinosa нейронов

Recent whole-cell patch-clamp studies from substantia gelatinosa (SG) neurons have provided a large body of information about the spinal mechanisms ...

Two-photon Imaging of Microglial Processes' Attraction Toward ATP or Serotonin in Acute Brain Slices

Двух Фотон изображений микроглии процессов притяжения к СПС или серотонина в острой мозга фрагментов

Microglial cells are resident innate immune cells of the brain that constantly scan their environment with their long processes and, upon disruption of ...