Name: use of rabbit eyes in pharmacokinetic studies of intraocular drugs
Uploaded: 2016-07-23T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Use of Rabbit Eyes in Pharmacokinetic Studies of Intraocular Drugs at JoVE.com

We would like to thank Ms. Ji Hyun Park and Ji Yeon Park for their technical assistance in the animal experiments. This work was supported by a grant from the Seoul National University Bundang Hospital Research Fund (grant number: Grant No. 14-2014-022) and from a grant (CCP-13-02-KIST) from the Convergence Commercialization Project of the National Research Council of Science and Technology, Seoul, Korea.

Наш протокол следует рекомендациям по Уходу за животными и использованию комитета (IACUC) Сеульского национального университета Бунданг больницы, который одобрил все процедуры животных и методов по уходу за животными, представленными в данном протоколе. IACUC находится в полном соответст...

With the increasing use of intraocular drugs, such as anti-vascular endothelial growth factor (VEGF) agents, for the treatment of diverse ocular diseases, knowledge of the tissue distribution and clearance of the drug after the intraocular injection is important. Understanding the pharmacokinetics of intraocular drugs is important for understanding the efficacy and safety of drugs, determining the optimal dosage of the drugs, and minimizing systemic or intraocular complications. However, detailed pharmacokinetic studies ...

До появления внутриглазной доставки лекарственного средства, основной проблемой медицинской терапии внутриглазных заболеваний была эффективность, с которой препарат может проникать в глаза. Кровь-глазное барьер препятствует множество веществ, в том числе наркотиков, диффузию в глаза. Поэтому концентрации лекарственных средств, которые выше терапевтических уровней не могут быть легко получены. Метод внутриглазного введения лекарственного средства, в том числе внутрикамерное и интравитреальных инъекций, могут непосредственно обойти кровью глазное барьер 1-3, таким образом , что терапевтические концентрации препаратов могут быть достигнуты в глаза 4,5. Соответственно, интравитреальную доставки лекарственных средств стала популярным методом лечения в течение нескольких внутриглазных заболеваний 5,6. Например, инъекция широко выполняется для связанных с возрастом дегенерация желтого пятна, диабетическая ретинопатия, вены сетчатки окклюзий и внутриглазных инфекций 7-10. В частности, так каквведение анти-VEGF препаратами, частота интравитреальных инъекций значительно вырос для лечения заболеваний сетчатки. Поэтому, важно, чтобы понять, внутриглазное фармакокинетику таких препаратов для оценки эффективности и безопасности медицинской терапии. Хотя внутриглазное введение наркотиков считается крупным прорывом в медицинской терапии глазных заболеваний, мониторинг концентрации лекарственного средства в пределах глазного яблока является технически требовательным. Так как человеческий глаз содержат лишь небольшие количества внутриглазной жидкости (около 200 мкл) и стекловидные (около 4,5 мл, таблица 1), что технически трудно получить достаточное количество жидкости , глазное для измерения концентрации лекарственного средства. Кроме того, методы, которые используются для получения влаге глаза, такие, как стекловидное тело или постукивания передней камеры пункции, может привести к повреждению глазной ткани и привести к серьезным осложнениям, таким как катаракта, эндофтальмит, илиотслойка сетчатки 11,12. Соответственно, животные модели используются в фармакокинетических исследованиях , обычно используемых интраокулярных препаратов 13. Среди этих моделей на животных, кроликов или обезьян являются наиболее часто используются животные. Кролики, которые являются мелкие млекопитающие отряда зайцеобразных в семье зайцевых, находятся в нескольких частях мира. Потому что кролики не агрессивны, они просты в обращении, использовать в эксперименте, и наблюдать. Более низкая стоимость, легкая доступность животного, подобного размера глаз для людей, и большая база данных информации для сравнения пользу проведения фармакокинетических исследований с использованием глаз кролика. В данной работе, протокол для фармакокинетических исследований интраокулярных препаратов в глаз кролика описано.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="647">
	<tbody>
		<tr height="46">
			<td height="46" style="height:46px;width:213px;">Zoletil</td>
			<td style="width:143px;">Virbac Laboratories, Carros Cedex, France</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:173px;"></td>
		</tr>
		<tr height="46">
			<td height="46" style="height:46px;width:213px;">Xylazine hydrochloride&#160;</td>
			<td style="width:143px;">Fort Dodge Laboratories, Fort Dodge, IA</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:173px;"></td>
		</tr>
		<tr height="46">
			<td height="46" style="height:46px;width:213px;">Proparacaine hydrochloride (Alcaine)</td>
			<td style="width:143px;">Alcon laboratories, Fort Worth, TX</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:173px;"></td>
		</tr>
		<tr height="46">
			<td height="46" style="height:46px;width:213px;">Phenylephrine hydrochloride and tropicamide</td>
			<td style="width:143px;">Santen Pharmaceutical, Co., Osaka, Japan</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:173px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:213px;">Recombinant Human VEGF 165</td>
			<td style="width:143px;">R&#38;D systems</td>
			<td style="width:119px;">293-VE-050</td>
			<td style="width:173px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:213px;">Carbobate-Bicarbonate buffer</td>
			<td style="width:143px;">SIGMA</td>
			<td style="width:119px;">C3041-50CAP</td>
			<td style="width:173px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:213px;">NUNC MICROWELL 96F&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160; W/LID NUNCLON D SI&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;</td>
			<td style="width:143px;">Thermo SCIENTIFIC</td>
			<td style="width:119px;">167008</td>
			<td style="width:173px;">96 well plate</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:213px;">Bovine Serum Albumin (BSA) 25grams(Net)</td>
			<td style="width:143px;">BOVOGEN</td>
			<td style="width:119px;">BSA025</td>
			<td style="width:173px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:213px;">Phosphate Buffered Saline (PBS) pH7.4 (1X), 500mL</td>
			<td style="width:143px;">gibco</td>
			<td style="width:119px;">10010-023</td>
			<td style="width:173px;"></td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:213px;">Sheep anti-Human IgG Secondary Antibody, HRP conjugate</td>
			<td style="width:143px;">Thermo SCIENTIFIC</td>
			<td style="width:119px;">PA1-28652</td>
			<td style="width:173px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:213px;">Goat Anti-Human IgG Fc(HRP)</td>
			<td style="width:143px;">abcam</td>
			<td style="width:119px;">ab97225</td>
			<td style="width:173px;"></td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:213px;">Goat anti-Human IgG, Fab&#39;2 Secondary Antibody, HRP conjugate</td>
			<td style="width:143px;">Thermo SCIENTIFIC</td>
			<td style="width:119px;">PA1-85183</td>
			<td style="width:173px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:213px;">CelLytic MT&#160; Cell Lysis Reagent</td>
			<td style="width:143px;">SIGMA</td>
			<td style="width:119px;">C3228-50ML</td>
			<td style="width:173px;">lysis buffer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:213px;">100 Scalpel Blades</td>
			<td style="width:143px;">nopa instruments</td>
			<td style="width:119px;">BLADE #15</td>
			<td style="width:173px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:213px;">100 Scalpel Blades</td>
			<td style="width:143px;">nopa instruments</td>
			<td style="width:119px;">BLADE #10</td>
			<td style="width:173px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:213px;">FEATHER SURGICAL BLADE STAINLESS STEEL</td>
			<td style="width:143px;">FEATHER</td>
			<td style="width:119px;">11</td>
			<td style="width:173px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:213px;">1-StepTM TMB-Blotting substrate solution, 250mL</td>
			<td style="width:143px;">Thermo SCIENTIFIC</td>
			<td style="width:119px;">34018</td>
			<td style="width:173px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:213px;">Stable Peroxide Substrate Buffer (10X), 100mL</td>
			<td style="width:143px;">Thermo SCIENTIFIC</td>
			<td style="width:119px;">34062</td>
			<td style="width:173px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:213px;">Softmax Pro</td>
			<td style="width:143px;">Molecular Devices</td>
			<td style="width:119px;">v.5.4.1</td>
			<td style="width:173px;">software for generating standard curve</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:213px;">SAAM II&#160;</td>
			<td style="width:143px;">Saam Institute, Seattle, WA</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:173px;">software for pharmacokinetic modeling</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;">Phoenix WinNonlin</td>
			<td style="width:143px;">Pharsight, Cary, NC</td>
			<td style="width:119px;">v. 6.3</td>
			<td style="width:173px;">software for pharmacokinetic modeling</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:213px;">Avastin (bevacizumab)</td>
			<td style="width:143px;">Genentech</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:173px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

use of rabbit eyes in pharmacokinetic studies of intraocular drugs

Внутриглазное путь введения лекарственного средства обеспечивает доставку высоких концентраций лекарственных препаратов, в то время как свести к минимуму их системной абсорбции. Некоторые лекарственные средства вводят в переднюю камеру или стекловидное тело, и внутриглазное инъекций является эффективным в лечении различных заболеваний интраокулярных. Кролик глаза широко используются для офтальмологических исследований, поскольку животное прост в обращении и экономичными по сравнению с другими млекопитающими, а размер глаз кролика похож на человеческий глаз. С помощью 30 G иглы, препараты могут быть введены в внутрикамерное и интравитреальных пространств глаз кролика. Глазные яблоки не будут затем замораживают до анализа, и можно разделить на водный юмор, стекловидное тело и сетчатку / хориоидеи. Стекловидного тела и сетчатки глаза / сосудистое образцы могут быть гомогенизируют и солюбилизировали перед анализом. Затем, иммунологические тесты могут быть выполнены для измерения концентрации внутриглазного препаратов в каждом отделении. Соответствующие модели фармакокинетики могут бытьиспользуется для вычисления нескольких параметров, таких, как период полураспада и максимальной концентрации лекарственного средства. Кролик глаз может быть хорошей моделью для исследования фармакокинетики внутриглазного препаратов.

Процедура , которая используется для проведения Интравитреальная инъекции препарата интереса глаз кролика стерильными методами показана на рисунке 1. Обработанные глаза энуклеировали в запланированное время и хранили при -80 ° С. Для анализа, три отсека, водя...

Watch this Scientific Journal Video about Use of Rabbit Eyes in Pharmacokinetic Studies of Intraocular Drugs at JoVE.com

Use of Rabbit Eyes in Pharmacokinetic Studies of Intraocular Drugs

Rabbits are widely used to study the pharmacokinetics of intraocular drugs. We describe a method for conducting pharmacokinetic studies of intraocular drugs using rabbit eyes.

Использование глаз кролика в фармакокинетических исследованиях внутриглазного наркотиков

The intraocular route of drug administration enables the delivery of high concentrations of therapeutic drugs, while minimizing their systemic absorption. ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

Сонной артерии Настои для Фармакокинетические и фармакодинамические анализ Таксаны в мышах

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study ...

The Rabbit Blood-shunt Model for the Study of Acute and Late Sequelae of Subarachnoid Hemorrhage: Technical Aspects

Кролик Кровь-шунт Модель по изучению острой и отдаленных последствий субарахноидального кровоизлияния: Технические аспекты

Early brain injury and delayed cerebral vasospasm both contribute to unfavorable outcomes after subarachnoid hemorrhage (SAH). Reproducible and ...

Assessing Specificity of Anticancer Drugs In Vitro

Assessing Specificity of Anticancer Drugs In Vitro

Оценка специфичности противоопухолевых препаратов<em&gt; In Vitro</em

A procedure for assessing specificity of anticancer drugs in vitro using cultures containing both tumor and non-tumor cells is demonstrated. The key ...

A Mouse Model of Retinal Ischemia-Reperfusion Injury Through Elevation of Intraocular Pressure

Мышь Модель Ретинального ишемией реперфузии через Elevation внутриглазного давления

Retinal ischemia-reperfusion (I/R) is a pathophysiological process contributing to cellular damage in multiple ocular conditions, including glaucoma, ...

Use of a Central Venous Line for Fluids, Drugs and Nutrient Administration in a Mouse Model of Critical Illness

Использование центрального венозного линии для жидкостей, лекарственных средств и питательных веществ управления в мышиной модели критических заболеваний

This protocol describes a centrally catheterized mouse model of prolonged critical illness. We combine the cecal ligation and puncture method to induce ...

Ultrahigh Resolution Mouse Optical Coherence Tomography to Aid Intraocular Injection in Retinal Gene Therapy Research

Сверхвысоких резолюции мышь оптическая когерентная томография помощи внутриглазных инъекций в исследованиях сетчатки генной терапии

HR-SD-OCT is utilized to monitor the progression of photoreceptor degeneration in live mouse models, assess the delivery of therapeutic agents into the ...

Differential Effects of Lipid-lowering Drugs in Modulating Morphology of Cholesterol Particles

Дифференциального воздействия гиполипидемические препараты в модуляции морфологией частиц холестерина

Treatment of dyslipidemia patients with lipid-lowering drugs leads to a significant reduction in low-density lipoproteins (LDL) level and a low to ...

Transthoracic Echocardiographic Examination in the Rabbit Model

Трансторакальная эхокардиографическая экспертиза в модели кролика

Large animal models such as the rabbit are valuable for translational preclinical research. Rabbits have a similar cardiac electrophysiology compared to ...

A Rabbit Model of Aqueous-Deficient Dry Eye Disease Induced by Concanavalin A Injection into the Lacrimal Glands: Application to Drug Efficacy Studies

Кролик Модель Aqueous-дефицитных сухих заболеваний глаз индуцированных Concanavalin инъекции в Lacrimal Glands: Применение к наркотикам эффективности исследований

Dry eye disease (DED), a multifactorial inflammatory disease of the ocular surface, affects 1 in 6 humans worldwide with staggering implications for ...