Name: true gene silencing: screening of a heptamer-type small guide rna library for potential cancer therapeutic agents
Uploaded: 2016-06-02T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about TRUE Gene Silencing: Screening of a Heptamer-type Small Guide RNA Library for Potential Cancer Therapeutic Agents at JoVE.com

이 작품은 대상 중심의 R &amp; D, 일본 과학 기술 진흥기구, 일본의 사립 학교에 대한 홍보 및 공제 Corporation의 과학 연구 진흥 기금을 통해 적응력과 원활한 기술 이전 프로그램에서 지원하고, JSPS KAKENHI ​​그랜트 번호 24300342과 15H04313했다 .

헵 타머 형 1. 건설 sgRNA 도서관 <ol><li> 본격적인 라이브러리의 구축에 사용되지 않는 한, 384 (4-7) -7- NT 시퀀스의 서브 세트를 선택한다. 참고 : 순서는 랜덤 및 / 또는 특정 세포의 RNA를 대상으로 설계 할 수있다. 후자의 경우, 헤어핀 구조 -4,10-의 바로 하류 -7- NT 서열에 상보 적절한 컴퓨터 프로그램 및 / 또는 시각, 선택 시퀀스들을 이용하여 표적 RNA에서의 tRNA의 T 아암 닮은 ?...

<ol>
	<li>Scherer, L., Rossi, J. J., Morris, K. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+potential+of+RNA-mediated+control+of+gene+expression:+Options+and+designs.">Therapeutic potential of RNA-mediated control of gene expression: Options and designs.</a> RNA and the Regulation of Gene Expression: A hidden layer of complexity. , 201-226 (2008).</li><li>Nashimoto, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conversion+of+mammalian+tRNA+3&#8242;+processing+endoribonuclease+to+four-base-recognizing+RNA+cutters.">Conversion of mammalian tRNA 3&#8242; processing endoribonuclease to four-base-recognizing RNA cutters.</a> Nucleic Acids Res. 23, 3642-3647 (1995).</li><li>Nashimoto, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Specific+cleavage+of+target+RNAs+from+HIV-1+with+5&#8242;+half+tRNA+by+mammalian+tRNA+3&#8242;+processing+endoribonuclease.">Specific cleavage of target RNAs from HIV-1 with 5&#8242; half tRNA by mammalian tRNA 3&#8242; processing endoribonuclease.</a> RNA. 2, 523-534 (1996).</li><li>Nashimoto, M., Geary, S., Tamura, M., Kasper, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNA+heptamers+that+directs+RNA+cleavage+by+mammalian+tRNA+3&#8242;+processing+endoribonuclease.">RNA heptamers that directs RNA cleavage by mammalian tRNA 3&#8242; processing endoribonuclease.</a> Nucleic Acids Res. 26, 2565-2571 (1998).</li><li>Nashimoto, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anomalous+RNA+substrates+for+mammalian+tRNA+3&#8242;+processing+endoribonuclease.">Anomalous RNA substrates for mammalian tRNA 3&#8242; processing endoribonuclease.</a> FEBS Lett. 472, 179-186 (2000).</li><li>Takaku, H., Minagawa, A., Takagi, M., Nashimoto, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+candidate+prostate+cancer+susceptibility+gene+encodes+tRNA+3&#8242;+processing+endoribonuclease.">A candidate prostate cancer susceptibility gene encodes tRNA 3&#8242; processing endoribonuclease.</a> Nucleic Acids Res. 31, 2272-2278 (2003).</li><li>Takaku, H., Minagawa, A., Takagi, M., Nashimoto, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+N-terminal+half-domain+of+the+long+form+of+tRNase+Z+is+required+for+the+RNase+65+activity.">The N-terminal half-domain of the long form of tRNase Z is required for the RNase 65 activity.</a> Nucleic Acids Res. 32, 4429-4438 (2004).</li><li>Takaku, H., Minagawa, A., Takagi, M., Nashimoto, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+four-base-recognizing+RNA+cutter+that+can+remove+the+single+3&#8242;+terminal+nucleotides+from+RNA+molecules.">A novel four-base-recognizing RNA cutter that can remove the single 3&#8242; terminal nucleotides from RNA molecules.</a> Nucleic Acids Res. 32, e91 (2004).</li><li>Shibata, H. S., Takaku, H., Takagi, M., Nashimoto, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+T+loop+structure+is+dispensable+for+substrate+recognition+by+tRNase+ZL.">The T loop structure is dispensable for substrate recognition by tRNase ZL.</a> J. Biol. Chem. 280, 22326-22334 (2005).</li><li>Tamura, M., Nashimoto, C., Miyake, N., Daikuhara, Y., Ochi, K., Nashimoto, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracellular+mRNA+cleavage+by+3&#8242;+tRNase+under+the+direction+of+2&#8242;-O-methyl+RNA+heptamers.">Intracellular mRNA cleavage by 3&#8242; tRNase under the direction of 2&#8242;-O-methyl RNA heptamers.</a> Nucleic Acids Res. 31, 4354-4360 (2003).</li><li>Habu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+HIV-1+gene+expression+by+retroviral+vector-mediated+small-guide+RNAs+that+direct+specific+RNA+cleavage+by+tRNase+ZL.">Inhibition of HIV-1 gene expression by retroviral vector-mediated small-guide RNAs that direct specific RNA cleavage by tRNase ZL.</a> Nucleic Acids Res. 33, 235-243 (2005).</li><li>Nakashima, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene-silencing+by+the+tRNA+maturase+tRNase+ZL+under+the+direction+of+small+guide+RNA.">Gene-silencing by the tRNA maturase tRNase ZL under the direction of small guide RNA.</a> Gene Ther. 14, 78-85 (2007).</li><li>Elbarbary, R. A., Takaku, H., Tamura, M., Nashimoto, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+vascular+endothelial+growth+factor+expression+by+TRUE+gene+silencing.">Inhibition of vascular endothelial growth factor expression by TRUE gene silencing.</a> Biochem. Biophys. Res. Commun. 379, 924-927 (2009).</li><li>Sano, T., Takahashi, M., Nozaki, T., Takahashi, Y., Tamura, M., Nashimoto, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expanding+the+utility+of+heptamer-type+sgRNA+for+TRUE+gene+silencing.">Expanding the utility of heptamer-type sgRNA for TRUE gene silencing.</a> Biochem. Biophys. Res. Commun. 416, 427-432 (2011).</li><li>Iizuka, S., Oridate, N., Nashimoto, M., Fukuda, S., Tamura, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growth+inhibition+of+head+and+neck+squamous+cell+carcinoma+cells+by+sgRNA+targeting+the+cyclin+D1+mRNA+based+on+TRUE+gene+silencing.">Growth inhibition of head and neck squamous cell carcinoma cells by sgRNA targeting the cyclin D1 mRNA based on TRUE gene silencing.</a> PLoS One. 9 (114121), (2014).</li><li>Takahashi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elimination+of+specific+miRNAs+by+naked+14-nt+sgRNAs.">Elimination of specific miRNAs by naked 14-nt sgRNAs.</a> PLoS One. 7 (38496), (2012).</li><li>Takahashi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+naked+RNA+heptamer+targeting+the+human+Bcl-2+mRNA+induces+apoptosis+of+HL60+leukemia+cells.">A naked RNA heptamer targeting the human Bcl-2 mRNA induces apoptosis of HL60 leukemia cells.</a> Cancer Lett. 328, 362-368 (2013).</li><li>Watanabe, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+apoptosis+of+leukemic+cells+by+TRUE+gene+silencing+using+small+guide+RNAs+targeting+the+WT1+mRNA.">Induction of apoptosis of leukemic cells by TRUE gene silencing using small guide RNAs targeting the WT1 mRNA.</a> Leukemia Res. 37, 580-585 (2013).</li><li>Elbarbary, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modulation+of+gene+expression+by+human+cytosolic+tRNase+ZL+through+5&#8242;-half-tRNA.">Modulation of gene expression by human cytosolic tRNase ZL through 5&#8242;-half-tRNA.</a> PLoS One. 4, 5908 (2009).</li><li>Elbarbary, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+cytosolic+tRNase+ZL+can+downregulate+gene+expression+through+miRNA.">Human cytosolic tRNase ZL can downregulate gene expression through miRNA.</a> FEBS Lett. 583, 3241-3246 (2009).</li><li>Ninomiya, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potential+small+guide+RNAs+for+tRNase+ZL+from+human+plasma,+peripheral+blood+mononuclear+cells,+and+cultured+cell+lines.">Potential small guide RNAs for tRNase ZL from human plasma, peripheral blood mononuclear cells, and cultured cell lines.</a> PLoS One. 10, 0118631 (2015).</li><li>Takahashi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Screening+of+a+heptamer-type+sgRNA+library+for+potential+therapeutic+agents+against+hematological+malignancies.">Screening of a heptamer-type sgRNA library for potential therapeutic agents against hematological malignancies.</a> Leukemia Res. 38, 808-815 (2014).</li><li>Shivarov, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TRUE+gene+silencing+for+hematologic+malignancies.">TRUE gene silencing for hematologic malignancies.</a> Leukemia Res. 38, 729 (2014).</li></ol>

In most cases, fully 2&#8242;-O-methylated, 5&#8242;- and 3&#8242;-phosphorylated heptamer-type sgRNAs dissolved in water-for-injection-grade water (in the concentration of 100 &#181;M) appear to be stable at below -20 &#176;C for at least one year, judging from their activity to induce apoptosis in cancer cells. However, their stability would change depending on their sequence, quality, and purity. In some cases, 5&#8242;- or 3&#8242;-phosphate of a part of sgRNA molecules appears to be removed spontaneously du...

(TR Nase Z의 L 후 라 - 유 전자 fficacious 유전자 침묵을 tilizing) TRUE 유전자 침묵은 RNA 지시 유전자 침묵 기술 (1) 중 하나입니다. 이 기술은 개발 tRNase Z L (또는 3 &#39;tRNase), tRNA의 3&#39;처리 endoribonuclease의 속성을 기반으로하고있다 : 그것은을 인식하여 인공 작은 가이드 RNA (sgRNA)의 지시에 따라 어떤 예상 사이트에있는 모든 대상 RNA를 절단 할 수 있습니다 9 - 표적 RNA와 sgRNA (2) 사이에 형성된 프리 tRNA의 형상 또는 마이크로 사전의 tRNA 형 구조. 길이 NT를 일반적으로 7-31이다 sgRNA는 네 그룹, 5&#39;- 절반의 tRNA, 헵 타머 RNA, 14 NT를 선형 RNA, 그리고 훅 RNA로 분류된다. 15 - 우리는 셀 (10) 생활에 다양한 인위적으로 설계 sgRNAs을 도입하여 TRUE 유전자 침묵의 효과를 증명하고있다. 우리는 또한 sgRNAs이 세포 위스콘신에 의해 흡수 될 수 있음을 보여 주었다모든 형질 전환 시약 사전 통 보없이 그들의 표적 RNA 수준을 하향 조절 및 / 또는 인간 암세포 (16)에 세포 자멸을 유도 할 수있다 - 18. 21 - TRUE 유전자 침묵은 tRNase Z L과 자연 sgRNAs (19)를 통해 세포 내와 세포 간 유전자 조절 네트워크 시스템에서 작동하도록 나타납니다. 우리는 혈액 암 (22)에 대한 잠재적 인 치료 헵 타머 형 sgRNAs 검색 156 헵 타머 형 sgRNAs 함유 sgRNA 라이브러리를 구축했다. 우리는 인간 골수종 및 백혈병 세포의 생존에 대한 효과를 스크리닝하고 20 효율적으로 암세포의 적어도 하나의 세포 사멸을 유도 할 수 있음을 발견 하였다. 그 중 4 마우스 이종 이식 실험에서 종양 성장 속도를 감소시키는 것으로 나타났다. 여기에서 우리는 혈액 암에 대한 잠재적 인 치료 약물에 대한 헵 타머 형 sgRNA 라이브러리의 스크리닝을위한 프로토콜을 제시한다. 이 프로토콜은 어떻게 포함세포 생존, 어떻게 더 유동 세포 계측법에 의해 유효 sgRNAs을 평가하는 각 sgRNA의 효과를 평가하는 방법 sgRNA 라이브러리를 구성합니다. 이러한 프로토콜이 포함되지 않더라도 마우스 이종 이식 모델에서의 셀룰러 sgRNA 표적 RNA를위한 분석 및 sgRNAs 효과의 평가는, 17, 22 종래의 방법에 따라 수행 될 수있다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="948">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Custom heptamer RNA</td>
			<td style="width:167px;">Nippon Bioservice</td>
			<td style="width:144px;"></td>
			<td style="width:180px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">OligoSep Prep HC Cartridge</td>
			<td style="width:167px;">Transgenomic</td>
			<td style="width:144px;">99-3860</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Water-for-injection-grade Water</td>
			<td style="width:167px;">Otsuka Pharmaceutical&#160;</td>
			<td style="width:144px;">7131400A2129</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">RPMI-1640 medium</td>
			<td style="width:167px;">Wako</td>
			<td style="width:144px;">189-02025</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fetal Bovine Serum</td>
			<td style="width:167px;">SIGMA-ALDRICH</td>
			<td style="width:144px;">172012-500ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:457px;">Penicillin-Streptomycin Mixed Solution</td>
			<td style="width:167px;">Nacalai Tesque</td>
			<td style="width:144px;">26253-84</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">96 Well Plate</td>
			<td style="width:167px;">Greiner Bio-one</td>
			<td style="width:144px;">655 180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cell Counting Kit-8</td>
			<td style="width:167px;">DOJINDO</td>
			<td style="width:144px;">343-07623</td>
			<td>WST-8 solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Microplate Reader, Sunrise Thermo RC-R</td>
			<td style="width:167px;">TEKAN</td>
			<td style="width:144px;">510-82851</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">FACS Round-Bottom Tube</td>
			<td style="width:167px;">BD Falcon</td>
			<td style="width:144px;">60819-820</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Phosphate Buffered Saline</td>
			<td style="width:167px;">SIGMA-ALDRICH</td>
			<td style="width:144px;">P7059-1L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">PE Annexin V Binding Buffer</td>
			<td style="width:167px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:144px;">51-66121E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">PE Annexin V</td>
			<td style="width:167px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:144px;">51-65875X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">7AAD</td>
			<td style="width:167px;">SIGMA-ALDRICH</td>
			<td style="width:144px;">A9400-1MG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Flow Cytometer, FACSCalibur</td>
			<td style="width:167px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:144px;">342973</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

true gene silencing: screening of a heptamer-type small guide rna library for potential cancer therapeutic agents

TRUE 유전자 침묵은 (TR Nase Z의 L 후 라 - 유 전자 fficacious 유전자 침묵 tilizing)의 tRNA 3 &#39;처리 endoribonuclease, tRNase Z L을 안내하는 인공 작은 가이드 RNA (sgRNA)을 이용 기술을 입을 RNA의 지시 유전자 중 하나입니다 , 표적 RNA를 인식한다. sgRNAs 모든 형질 전환 시약없이 세포에 의해 용해 될 수 있고, 그들의 표적 RNA 수준을 하향 조절 및 / 또는 인간의 암세포에서 아폽토시스를 유도 할 수있다. 우리는 인간 골수종 및 백혈병 세포의 생존에 미치는 영향 156 헵 타머 형 sgRNAs 함유 sgRNA 라이브러리를 스크리닝하고 20 효율적으로 암세포의 적어도 하나의 세포 사멸을 유도 할 수 있음을 발견 하였다. 여기에서 우리는 혈액 암에 대한 잠재적 인 치료 약물에 대한 헵 타머 형 sgRNA 라이브러리의 스크리닝을위한 프로토콜을 제시한다. 이 프로토콜은 세포 생존, 그리고 각 sgRNA의 효과를 평가하는 방법 쿵푸를하는 방법 sgRNA 라이브러리를 구성하는 방법을 포함rther는 유동 세포 계측법에 의해 유효 sgRNAs을 평가합니다. 약 2,000 명중은 16,384 heptamers 이루어지는 본격적인 sgRNA 라이브러리를 스크리닝함으로써 얻어 질 것으로 예상된다.

여섯 헵 타머 형 sgRNAs 5&#39;- AUCUUCA-3 &#39;(H1885), 5&#39;- ACACACA-3&#39;(H3277), 5&#39;- GGGGGCG-3 &#39;(H10927), 5&#39;- GGGGCCC-3&#39;(H10944), 5&#39;-GCCCCCG-3 &#39;(H12287), 및 5&#39;-CACCAGC-3&#39;(H13260)을 화학적으로 3&#39;- 및 5&#39;- 포스페이트를 함유하는 O -2&#39;- 메틸 RNA 합성 하였다. 이러한 sgRNAs은 인간 백혈병 세포주, HL60과 인간 골수종 세포주, RPM...

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TRUE Gene Silencing: Screening of a Heptamer-type Small Guide RNA Library for Potential Cancer Therapeutic Agents

여기에서 우리는 혈액 암에 대한 잠재적 인 치료 약물에 대한 헵 타머 형 sgRNA 라이브러리의 스크리닝을위한 프로토콜을 제시한다.

TRUE 유전자 음소거 : 잠재적 인 암 치료제에 대한 헵 타머 형 소형 가이드 RNA 라이브러리의 심사

TRUE gene silencing (termed after tRNase ZL-utilizing efficacious gene silencing) is one of the RNA-directed gene silencing technologies, which utilizes ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Bronchial Thermoplasty:  A Novel Therapeutic Approach to Severe Asthma

기관지 Thermoplasty : 심한 천식에 소설 치료 접근

Bronchial thermoplasty is a non-drug procedure for severe persistent asthma that delivers thermal energy to the airway wall in a precisely controlled ...

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의학

Orthotopic Xenografting of Human Luciferase-Tagged Malignant Peripheral Nerve Sheath Tumor Cells for in vivo Testing of Candidate Therapeutic Agents

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대한 인간 루시페라제 태그가 추가된 악성 주변 신경 쉬스 종양 세포 Orthotopic Xenografting 생체내에</em후보 치료 대리점> 테스트

Although in vitro screens are essential for the initial identification of candidate therapeutic agents, a rigorous assessment of the drug's ability to ...

Delivery of Therapeutic Agents Through Intracerebroventricular (ICV) and Intravenous (IV) Injection in Mice

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마우스에 Intracerebroventricular을 통해 치료 대리점 납품 (ICV)과 정맥 (IV) 사출

Despite the protective role that blood brain barrier plays in shielding the brain, it limits the access to the central nervous system (CNS) which most ...

A Simple Guide Screw Method for Intracranial Xenograft Studies in Mice

마우스에 Intracranial 이종 이식 연구에 대한 간단한 안내 스크류 방법

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Screening for Melanoma Modifiers using a Zebrafish Autochthonous Tumor Model

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