Name: murine prostate micro-dissection and surgical castration
Uploaded: 2016-05-11T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Murine Prostate Micro-dissection and Surgical Castration at JoVE.com

Certains des chiffres dans ce manuscrit ont été généreusement fournies par le laboratoire de Bart O. Williams. Les auteurs sont pris en charge par l&#39;Institut national du cancer accorde U54CA143803, CA163124, CA093900, CA143055 ET.

Ce protocole respecte et suit les lignes directrices établies par la Commission institutionnelle soin et l&#39;utilisation des animaux de l&#39;Université Johns Hopkins. 1. Micro-disséquant un Prostate souris <ol><li> Euthanasier la souris par asphyxie au dioxyde de carbone ou une méthode approuvée de remplacement, conformément aux soins des animaux et de l&#39;utilisation des lignes directrices institutionnelles. </li><li> Pin de la souris dans une position couchée sur une planche à dissection en mett...

<ol>
	<li>Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+statistics.">Cancer statistics.</a> CA Cancer J Clin. 65 (1), 5-29 (2015).</li><li>Roehrborn, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathology+of+benign+prostatic+hyperplasia.">Pathology of benign prostatic hyperplasia.</a> Int J Impot Res. 20 (suppl 3), 11-18 (2008).</li><li>Valkenburg, K. C., Williams, B. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+prostate+cancer.">Mouse models of prostate cancer.</a> Prostate Cancer. , 895238 (2011).</li><li>Shappell, S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prostate+pathology+of+genetically+engineered+mice:+definitions+and+classification.+The+consensus+report+from+the+Bar+Harbor+meeting+of+the+Mouse+Models+of+Human+Cancer+Consortium+Prostate+Pathology+Committee.">Prostate pathology of genetically engineered mice: definitions and classification. The consensus report from the Bar Harbor meeting of the Mouse Models of Human Cancer Consortium Prostate Pathology Committee.</a> Cancer Res. 64 (6), 2270-2305 (2004).</li><li>Valkenburg, K. C., Pienta, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug+discovery+in+prostate+cancer+mouse+models.">Drug discovery in prostate cancer mouse models.</a> Expert Opin Drug Discov. , 1-14 (2015).</li><li>El-Alfy, M., Pelletier, G., Hermo, L. S., Labrie, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unique+features+of+the+basal+cells+of+human+prostate+epithelium.">Unique features of the basal cells of human prostate epithelium.</a> Microsc Res Tech. 51 (5), 436-446 (2000).</li><li>Prins, G. S., Huang, L., Birch, L., Pu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+estrogens+in+normal+and+abnormal+development+of+the+prostate+gland.">The role of estrogens in normal and abnormal development of the prostate gland.</a> Ann N Y Acad Sci. 1089, 1-13 (2006).</li><li>Valkenburg, K. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+Wnt/beta-catenin+signaling+in+a+subpopulation+of+murine+prostate+luminal+epithelial+cells+induces+high+grade+prostate+intraepithelial+neoplasia.">Activation of Wnt/beta-catenin signaling in a subpopulation of murine prostate luminal epithelial cells induces high grade prostate intraepithelial neoplasia.</a> Prostate. 74 (15), 1506-1520 (2014).</li><li>Lukacs, R. U., Goldstein, A. S., Lawson, D. A., Cheng, D., Witte, O. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation,+cultivation+and+characterization+of+adult+murine+prostate+stem+cells.">Isolation, cultivation and characterization of adult murine prostate stem cells.</a> Nat Protoc. 5 (4), 702-713 (2010).</li><li>Michiel Sedelaar, J. P., Dalrymple, S. S., Isaacs, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Of+mice+and+men--warning:+intact+versus+castrated+adult+male+mice+as+xenograft+hosts+are+equivalent+to+hypogonadal+versus+abiraterone+treated+aging+human+males,+respectively.">Of mice and men--warning: intact versus castrated adult male mice as xenograft hosts are equivalent to hypogonadal versus abiraterone treated aging human males, respectively.</a> Prostate. 73 (12), 1316-1325 (2013).</li><li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+luminal+epithelial+stem+cell+that+is+a+cell+of+origin+for+prostate+cancer.">A luminal epithelial stem cell that is a cell of origin for prostate cancer.</a> Nature. 461 (7263), 495-500 (2009).</li><li>Pascal, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=5alpha-Reductase+inhibition+coupled+with+short+off+cycles+increases+survival+in+the+LNCaP+xenograft+prostate+tumor+model+on+intermittent+androgen+deprivation+therapy.">5alpha-Reductase inhibition coupled with short off cycles increases survival in the LNCaP xenograft prostate tumor model on intermittent androgen deprivation therapy.</a> J Urol. 193 (4), 1388-1393 (2015).</li><li>Shen, M. M., Abate-Shen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+genetics+of+prostate+cancer:+new+prospects+for+old+challenges.">Molecular genetics of prostate cancer: new prospects for old challenges.</a> Genes Dev. 24 (18), 1967-2000 (2010).</li></ol>

Prostate microdissection permet une expérimentation précise du lobe et l&#39; analyse de la prostate de la souris (figure 1). Dans les modèles de souris génétiquement modifiées, les phénotypes peuvent être vus dans un lobe qu&#39;on ne voit pas dans d&#39;autres. En outre, pour l&#39;analyse histologique, ce protocole assure que la quantité maximale de tissus de la prostate pur peut être sectionné et coloré, sans autres tissus du tractus uro-génital présentes dans la section. Enfin, pour d...

La prostate est le site le plus commun de cancer chez les hommes aux États-Unis. Près de 220.000 hommes chaque année recevront un diagnostic de cancer de la prostate, et environ 27.000 hommes succomberont à leur maladie 1. Les hommes ont un risque de 1 sur 7 à vie d&#39;un diagnostic de cancer de la prostate aux États - Unis 1. Hyperplasie bénigne de la prostate (HBP), un élargissement noncancerous liée à l&#39; âge de la prostate, est également une condition répandue, affectant plus de 80% des hommes de plus de 80 2. En tant que tel, la prostate est l&#39;objet de nombreuses recherches. Des modèles de souris ont été largement utilisés pour étudier les maladies de la prostate 3. Dans l&#39; ensemble, la prostate de la souris est un excellent représentant de la glande humaine 4, mais il y a des similitudes et des différences entre la souris et de l&#39; anatomie de la prostate et la physiologie humaine 5. Chez les deux espèces, la prostate est située à la base de la vessie, qui entoure l&#39;urètre. La glande de la prostate humaine est un loêtre divisé en quatre zones: centrale, transition, périphérique, et antérieure fibromusculaire stroma. En revanche, la prostate de la souris est composé de trois lobes couplés à des positions différentes autour de l&#39;urètre: antérieure ventrale et dorso. Au niveau cellulaire, la principale différence est que la cellule de base au rapport cellulaire luminale humain est d&#39; environ 1: 1, mais il est de 1: 4 à 6 souris. Le stroma de souris est également différente chez les souris par rapport à l&#39;homme - les humains ont plus étendu des muscles lisses, tandis que la couche musculaire est beaucoup plus mince dans la prostate murin. L&#39;identification correcte, la dissection et la manipulation de la prostate de la souris sont essentiels à la recherche de la prostate de la souris. Les niveaux d&#39;hormones influencent fortement le développement et l&#39;homéostase de la glande de la prostate chez les humains et les souris. Alors que l&#39; oestrogène semble jouer un rôle dans le développement de la prostate 7, l&#39;hormone la plus importante de la prostate est la testostérone. La testostérone est essentielle pour glandulaire un développementd &#39;entretien. Soit après la castration chimique ou physique, environ 90% des cellules luminales de la prostate apoptose des adultes et la glande se rétrécit. Si la testostérone est réintroduit à un individu dans des conditions de castration, la prostate est capable de se régénérer à pleine capacité. La testostérone semble également conduire le cancer de la prostate, ce qui explique pourquoi la thérapie de privation androgénique est une stratégie thérapeutique utilisée. Cependant, de nombreux cancers de la prostate deviennent résistantes à la privation androgénique. En outre, les hommes qui suivent un traitement de privation androgénique pour le traitement du cancer de la prostate subissent des cycles de conditions castrés et régénérées. Chez la souris, la castration chirurgicale, ainsi que la régénération hormonale de la prostate en réintroduisant la testostérone, est un outil important pour étudier la résistance à la castration et les effets du cyclisme de la testostérone sur la prostate. Dans cet article, nous allons discuter et démontrer les techniques appropriées par lequel Locate et la micro-dissection d&#39;une prostate de souris, ainsi que pour castrer chirurgicalement d&#39;une souris.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="741">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Surgical tools</td>
			<td style="width:145px;">Roboz</td>
			<td style="width:113px;">Various</td>
			<td style="width:239px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Formaldehyde</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F8775</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">OCT medium</td>
			<td>VWR</td>
			<td>25608-930</td>
			<td style="width:239px;">Must be placed on dry ice to freeze, and stored at -80C</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">PBS</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td align="right">10010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Isoflurane</td>
			<td>Johns Hopkins</td>
			<td></td>
			<td>Also available from vendors online</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cautery Pen</td>
			<td>Medline</td>
			<td>ESCT002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Silk suture</td>
			<td>AD Surgical</td>
			<td>M-S330R19</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Surgical Wound Clips</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-9265</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine prostate micro-dissection and surgical castration

Mouse models are used extensively to study prostate cancer and other diseases. The mouse is an excellent model with which to study the prostate and has been used as a surrogate for discoveries in human prostate development and disease. Prostate micro-dissection allows consistent study of lobe-specific prostate anatomy, histology, and cellular characteristics in the absence of contamination of other tissues. Testosterone affects prostate development and disease. Androgen deprivation therapy is a common treatment for prostate cancer patients, but many prostate tumors become castration-resistant. Surgical castration of mouse models allows for the study of castration resistance and other facets of hormonal biology on the prostate. This procedure can be coupled with testosterone reintroduction, or hormonal regeneration of the prostate, a powerful method to study stem cell lineages in the prostate. Together, prostate micro-dissection and surgical castration opens up a multitude of opportunities for robust and consistent research of prostate development and disease. This manuscript describes the protocols for prostate micro-dissection and surgical castration in the laboratory mouse.

Les six lobes de la prostate ont été retirés de la prostate par l&#39; intermédiaire d&#39; une souris microdissection (figure 1). Tractus urogénital intégral (UGT) se compose de tous les lobes de la prostate, la vessie, les vésicules séminales et l&#39;urètre (figure 1a). Le canal déférent se fixe à l&#39;urètre, mais il est inutile de la prostate microdissection, et peuvent ainsi être détachées avant le retrait de l&#39;UGT en coupant l...

Watch this Scientific Journal Video about Murine Prostate Micro-dissection and Surgical Castration at JoVE.com

Murine Prostate Micro-dissection and Surgical Castration

Ce manuscrit décrit les protocoles de la prostate microdissection et la castration chirurgicale chez la souris de laboratoire. Nous représentons également des résultats représentatifs produits par ces protocoles. Enfin, nous discutons des avantages et de l&#39;utilisation de ces protocoles.

Murine Prostate Micro-dissection et Castration chirurgicale

Mouse models are used extensively to study prostate cancer and other diseases. The mouse is an excellent model with which to study the prostate and has ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Evaluation of Nanoparticle Uptake in Tumors in Real Time Using Intravital Imaging

Evaluation de la fixation des nanoparticules dans les tumeurs en temps réel par imagerie intravitale

Current technologies for tumor imaging, such as ultrasound, MRI, PET and CT, are unable to yield high-resolution images for the assessment of nanoparticle ...

Recherche

Médecine

An Orthotopic Murine Model of Human Prostate Cancer Metastasis

Un modèle murin orthotopique de cancer de la prostate humain métastases

Our laboratory has developed a novel orthotopic implantation model of  human prostate cancer (PCa). As PCa death is not due to the primary tumor, but  ...

A Novel Murine Model of Arteriovenous Fistula Failure: The Surgical Procedure in Detail

A Novel modèle murin de la fistule artério-veineuse échec: la procédure chirurgicale en détail

The arteriovenous fistula (AVF) still suffers from a high number of failures caused by insufficient remodeling and intimal hyperplasia from which the ...

Using Saccadometry with Deep Brain Stimulation to Study Normal and Pathological Brain Function

Utilisation de Saccadometry avec la stimulation cérébrale profonde pour l&#39;étude normale et pathologique fonction cérébrale

The oculomotor system involves a large number of brain areas including parts of the basal ganglia, and various neurodegenerative diseases including ...

Pre-clinical Orthotopic Murine Model of Human Prostate Cancer

Pré-clinique Orthotopique modèle murin de cancer de la prostate humaine

To study the multifaceted biology of prostate cancer, pre-clinical in vivo models offer a range of options to uncover critical biological information ...

Intravital Microscopy of Tumor-associated Vasculature Using Advanced Dorsal Skinfold Window Chambers on Transgenic Fluorescent Mice

La microscopie intravitale du système vasculaire associées à la tumeur en utilisant Advanced dorsale pli fenêtre Chambers sur des souris transgéniques fluorescents

Tumor and tumor vessel development, as well as tumor response to therapeutics, are highly dynamic biological processes. Histology provides static ...

Using In Vitro Live-cell Imaging to Explore Chemotherapeutics Delivered by Lipid-based Nanoparticles

Using In Vitro Live-cell Imaging to Explore Chemotherapeutics Delivered by Lipid-based Nanoparticles

À l’aide de In Vitro imagerie de cellules vivantes pour explorer les agents chimiothérapeutiques livré par nanoparticules à base de lipides

Conventional imaging techniques can provide detailed information about cellular processes. However, this information is based on static images in an ...

Surgical Treatment for Benign Prostatic Hyperplasia: Holmium Laser Enucleation of the Prostate (HoLEP).

Surgical Treatment for Benign Prostatic Hyperplasia: Holmium Laser Enucleation of the Prostate HoLEP.

Traitement chirurgical de l’hyperplasie bénigne de la prostate : énucléation Laser Holmium de la Prostate (HoLEP).

Benign prostatic hyperplasia (BPH) commonly occurs among elderly males. The condition causes symptoms in the lower urinary tract, thereby reducing the ...

Micro-dissection of Enamel Organ from Mandibular Incisor of Rats Exposed to Environmental Toxicants

Micro-dissection de l’organe de l’émail des incisives mandibulaires de Rats exposés à des substances toxiques environnementales

Enamel defects resulting from environmental conditions and ways of life are public health concerns because of their high prevalence. These defects result ...

Generating a Murine Orthotopic Metastatic Breast Cancer Model and Performing Murine Radical Mastectomy

Génération d’un modèle de Cancer du sein métastatique orthotopique murin et effectuant une mastectomie radicale Murine

In vivo mouse models to assess breast cancer progression are essential for cancer research, including preclinical drug developments. However, the majority ...