Name: murine prostate micro-dissection and surgical castration
Uploaded: 2016-05-11T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Murine Prostate Micro-dissection and Surgical Castration at JoVE.com

Noen av tallene i dette manuskriptet ble sjenerøst gitt av laboratoriet av Bart O. Williams. Forfatterne er støttet av National Cancer Institute gir U54CA143803, CA163124, CA093900 OG CA143055.

Denne protokollen møter og følger retningslinjer fastsatt av Johns Hopkins University Institutional Animal Care og bruk komité. 1. Micro-dissekere en mus prostata <ol><li> Avlive musen ved karbondioksidasfyksiering eller en alternativ godkjent metode i henhold til institusjonelle dyrepleie og retningslinjer for bruk. </li><li> Pin mus i en liggende stilling til en disseksjon bord ved å sette en pinne gjennom hver av de fire poter. </li><li> Spray magen med 70% etanol. </li><li> Hold i huden av den nedre de...

<ol>
	<li>Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+statistics.">Cancer statistics.</a> CA Cancer J Clin. 65 (1), 5-29 (2015).</li><li>Roehrborn, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathology+of+benign+prostatic+hyperplasia.">Pathology of benign prostatic hyperplasia.</a> Int J Impot Res. 20 (suppl 3), 11-18 (2008).</li><li>Valkenburg, K. C., Williams, B. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+prostate+cancer.">Mouse models of prostate cancer.</a> Prostate Cancer. , 895238 (2011).</li><li>Shappell, S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prostate+pathology+of+genetically+engineered+mice:+definitions+and+classification.+The+consensus+report+from+the+Bar+Harbor+meeting+of+the+Mouse+Models+of+Human+Cancer+Consortium+Prostate+Pathology+Committee.">Prostate pathology of genetically engineered mice: definitions and classification. The consensus report from the Bar Harbor meeting of the Mouse Models of Human Cancer Consortium Prostate Pathology Committee.</a> Cancer Res. 64 (6), 2270-2305 (2004).</li><li>Valkenburg, K. C., Pienta, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug+discovery+in+prostate+cancer+mouse+models.">Drug discovery in prostate cancer mouse models.</a> Expert Opin Drug Discov. , 1-14 (2015).</li><li>El-Alfy, M., Pelletier, G., Hermo, L. S., Labrie, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unique+features+of+the+basal+cells+of+human+prostate+epithelium.">Unique features of the basal cells of human prostate epithelium.</a> Microsc Res Tech. 51 (5), 436-446 (2000).</li><li>Prins, G. S., Huang, L., Birch, L., Pu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+estrogens+in+normal+and+abnormal+development+of+the+prostate+gland.">The role of estrogens in normal and abnormal development of the prostate gland.</a> Ann N Y Acad Sci. 1089, 1-13 (2006).</li><li>Valkenburg, K. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+Wnt/beta-catenin+signaling+in+a+subpopulation+of+murine+prostate+luminal+epithelial+cells+induces+high+grade+prostate+intraepithelial+neoplasia.">Activation of Wnt/beta-catenin signaling in a subpopulation of murine prostate luminal epithelial cells induces high grade prostate intraepithelial neoplasia.</a> Prostate. 74 (15), 1506-1520 (2014).</li><li>Lukacs, R. U., Goldstein, A. S., Lawson, D. A., Cheng, D., Witte, O. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation,+cultivation+and+characterization+of+adult+murine+prostate+stem+cells.">Isolation, cultivation and characterization of adult murine prostate stem cells.</a> Nat Protoc. 5 (4), 702-713 (2010).</li><li>Michiel Sedelaar, J. P., Dalrymple, S. S., Isaacs, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Of+mice+and+men--warning:+intact+versus+castrated+adult+male+mice+as+xenograft+hosts+are+equivalent+to+hypogonadal+versus+abiraterone+treated+aging+human+males,+respectively.">Of mice and men--warning: intact versus castrated adult male mice as xenograft hosts are equivalent to hypogonadal versus abiraterone treated aging human males, respectively.</a> Prostate. 73 (12), 1316-1325 (2013).</li><li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+luminal+epithelial+stem+cell+that+is+a+cell+of+origin+for+prostate+cancer.">A luminal epithelial stem cell that is a cell of origin for prostate cancer.</a> Nature. 461 (7263), 495-500 (2009).</li><li>Pascal, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=5alpha-Reductase+inhibition+coupled+with+short+off+cycles+increases+survival+in+the+LNCaP+xenograft+prostate+tumor+model+on+intermittent+androgen+deprivation+therapy.">5alpha-Reductase inhibition coupled with short off cycles increases survival in the LNCaP xenograft prostate tumor model on intermittent androgen deprivation therapy.</a> J Urol. 193 (4), 1388-1393 (2015).</li><li>Shen, M. M., Abate-Shen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+genetics+of+prostate+cancer:+new+prospects+for+old+challenges.">Molecular genetics of prostate cancer: new prospects for old challenges.</a> Genes Dev. 24 (18), 1967-2000 (2010).</li></ol>

Prostata mikro-disseksjon muliggjør lobe-spesifikk eksperimentering og analyse av mus prostata (figur 1). I genmanipulerte musemodeller, kan fenotyper sees i en lapp som ikke er sett i andre. Også for histologisk analyse, sikrer denne protokollen at den maksimale mengden av ren prostatavevet kan seksjoneres og beiset, uten andre urogenitaltractus vev som finnes i seksjonen. Til slutt, for encellede eksperimenter, tillater denne protokollen for isolering av nesten ren prostata celler. Epiteliale celle ...

Prostata er den vanligste stedet for kreft hos menn i USA. Nesten 220 000 mennesker hvert år vil bli diagnostisert med prostatakreft, og ca 27 000 mennesker vil bukke under for sin sykdom 1. Menn har en 1 i 7 levetid risiko for prostatakreft diagnose i USA en. Benign prostatahyperplasi (BPH), en aldersrelatert noncancerous forstørrelse av prostata, er også en utbredt tilstand, påvirker over 80% av menn over 80 to. Som sådan, er prostata fokus for betydelig forskning. Musemodeller har blitt brukt mye for å studere sykdommer i prostata 3. Totalt sett er musen prostata en utmerket representant for den menneskelige kjertel 4, men det er likheter og forskjeller mellom mus og menneske prostata anatomi og fysiologi 5. I begge artene, er den prostata plassert på undersiden av blæren rundt urinrøret. Den menneskelige prostatakjertel er en enkelt lovære, delt inn i fire soner: sentral, overgang, perifer, og anterior fibromuscular stroma. I motsetning til musa prostata består av tre sammenkoblede fliker på forskjellige posisjoner rundt urinrøret: fremre, ventral, og dorsolateral. På cellenivå, er hovedforskjellen at basal celle til celle luminal-forholdet hos mennesker er ca. 1: 1, men det er 1: 4 i mus 6. Den murine stroma er også forskjellig i mus i forhold til mennesker - mennesker har mer omfattende glatt muskulatur, mens muskelen laget er mye tynnere i murine prostata. Riktig identifisering, disseksjon og håndtering av musen prostata er avgjørende for mus prostata forskning. Hormonnivået drastisk påvirke utviklingen og homeostase av prostatakjertelen hos både mennesker og mus. Mens østrogen ser ut til å spille en rolle i utvikling prostata 7, er det viktigste hormonet i prostata er testosteron. Testosteron er viktig for kjertel utvikling end vedlikehold. Etter enten fysisk eller kjemisk kastrering, omtrent 90% av den luminale cellene i voksen prostata apoptose, og pakkboksen krymper. Hvis testosteron gjeninnføres til et individ i henhold til kastrerings betingelser, prostata er i stand til å regenerere seg selv til full kapasitet. Testosteron ser også ut til å kjøre prostatakreft, som er grunnen til androgen deprivasjon terapi er en vanlig terapeutisk strategi. Men mange prostatakreft blir resistent mot androgen deprivasjon. I tillegg menn som gjennomgår androgen deprivasjon terapi for behandling av prostatakreft gjennomgå sykluser av kastrerte og regenerert forhold. I mus, kirurgisk kastrasjon, sammen med hormonelle regenerering av prostata ved å gjeninnføre testosteron, er et viktig redskap for å studere kastrering motstand og effekten av testosteron sykling på prostata. I denne artikkelen vil vi diskutere og demonstrere de riktige teknikkene ved å Locate og mikro-dissekere en mus prostata, så vel som å kirurgisk kastrering en mus.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="741">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:244px;">Surgical tools</td>
			<td style="width:145px;">Roboz</td>
			<td style="width:113px;">Various</td>
			<td style="width:239px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Formaldehyde</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F8775</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">OCT medium</td>
			<td>VWR</td>
			<td>25608-930</td>
			<td style="width:239px;">Must be placed on dry ice to freeze, and stored at -80C</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">PBS</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td align="right">10010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Isoflurane</td>
			<td>Johns Hopkins</td>
			<td></td>
			<td>Also available from vendors online</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cautery Pen</td>
			<td>Medline</td>
			<td>ESCT002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Silk suture</td>
			<td>AD Surgical</td>
			<td>M-S330R19</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Surgical Wound Clips</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-9265</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine prostate micro-dissection and surgical castration

Mouse models are used extensively to study prostate cancer and other diseases. The mouse is an excellent model with which to study the prostate and has been used as a surrogate for discoveries in human prostate development and disease. Prostate micro-dissection allows consistent study of lobe-specific prostate anatomy, histology, and cellular characteristics in the absence of contamination of other tissues. Testosterone affects prostate development and disease. Androgen deprivation therapy is a common treatment for prostate cancer patients, but many prostate tumors become castration-resistant. Surgical castration of mouse models allows for the study of castration resistance and other facets of hormonal biology on the prostate. This procedure can be coupled with testosterone reintroduction, or hormonal regeneration of the prostate, a powerful method to study stem cell lineages in the prostate. Together, prostate micro-dissection and surgical castration opens up a multitude of opportunities for robust and consistent research of prostate development and disease. This manuscript describes the protocols for prostate micro-dissection and surgical castration in the laboratory mouse.

Alle seks prostata lapper ble fjernet fra en mus via prostata mikro disseksjon (figur 1). Den komplette urogenitaltraktus (UGT) er sammensatt av alle prostata lapper, blæren, sædblære, og urinrøret (Figur 1a). Vas deferens festes til urinrøret, men er unødvendig for prostata mikro-disseksjon, og kan derfor tas av før fjerning av UGT ved å kutte urinrøret (figur 1b-1c). Den urogenitaltractus vil forbli sammen en gang fjernet fra ...

Watch this Scientific Journal Video about Murine Prostate Micro-dissection and Surgical Castration at JoVE.com

Murine Prostate Micro-dissection and Surgical Castration

Dette manuskriptet beskriver protokollene for prostata mikro-disseksjon og kirurgisk kastrering i laboratoriet mus. Vi viser også representative resultatene som produseres av disse protokollene. Til slutt diskuterer vi fordeler og utnyttelse av disse protokollene.

Murine Prostata Micro-disseksjon og kirurgisk kastrering

Mouse models are used extensively to study prostate cancer and other diseases. The mouse is an excellent model with which to study the prostate and has ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Evaluation of Nanoparticle Uptake in Tumors in Real Time Using Intravital Imaging

Current technologies for tumor imaging, such as ultrasound, MRI, PET and CT, are unable to yield high-resolution images for the assessment of nanoparticle ...

An Orthotopic Murine Model of Human Prostate Cancer Metastasis

En orthotopic Murine Model of Human Prostate Cancer Metastase

Our laboratory has developed a novel orthotopic implantation model of  human prostate cancer (PCa). As PCa death is not due to the primary tumor, but  ...

A Novel Murine Model of Arteriovenous Fistula Failure: The Surgical Procedure in Detail

A Novel Murine modell av arteriovenøs fistel Failure: den kirurgiske prosedyren i detalj

The arteriovenous fistula (AVF) still suffers from a high number of failures caused by insufficient remodeling and intimal hyperplasia from which the ...

Using Saccadometry with Deep Brain Stimulation to Study Normal and Pathological Brain Function

Bruke Saccadometry med dyp hjernestimulering for å studere normal og patologisk hjernefunksjon

The oculomotor system involves a large number of brain areas including parts of the basal ganglia, and various neurodegenerative diseases including ...

Pre-clinical Orthotopic Murine Model of Human Prostate Cancer

Preklinisk ortotopiske Murine Model of Human prostatakreft

To study the multifaceted biology of prostate cancer, pre-clinical in vivo models offer a range of options to uncover critical biological information ...

Intravital Microscopy of Tumor-associated Vasculature Using Advanced Dorsal Skinfold Window Chambers on Transgenic Fluorescent Mice

Intravital mikroskopi av svulst-assosiert blodkar benytter avansert Dorsal Skinfold vinduet Chambers på transgene fluorescerende mus

Tumor and tumor vessel development, as well as tumor response to therapeutics, are highly dynamic biological processes. Histology provides static ...

Using In Vitro Live-cell Imaging to Explore Chemotherapeutics Delivered by Lipid-based Nanoparticles

Using In Vitro Live-cell Imaging to Explore Chemotherapeutics Delivered by Lipid-based Nanoparticles

Bruke In Vitro Live-celle Imaging for å utforske Chemotherapeutics levert av Lipid-baserte nanopartikler

Conventional imaging techniques can provide detailed information about cellular processes. However, this information is based on static images in an ...

Surgical Treatment for Benign Prostatic Hyperplasia: Holmium Laser Enucleation of the Prostate (HoLEP).

Surgical Treatment for Benign Prostatic Hyperplasia: Holmium Laser Enucleation of the Prostate HoLEP.

Kirurgisk behandling for Benign prostatahyperplasi: Holmium Laser Enucleation av Prostate (HoLEP).

Benign prostatic hyperplasia (BPH) commonly occurs among elderly males. The condition causes symptoms in the lower urinary tract, thereby reducing the ...

Micro-dissection of Enamel Organ from Mandibular Incisor of Rats Exposed to Environmental Toxicants

Mikro-Disseksjon av emalje orgel fra Mandibular helikopteret rotter utsatt for miljømessig giftstoffer

Enamel defects resulting from environmental conditions and ways of life are public health concerns because of their high prevalence. These defects result ...

Generating a Murine Orthotopic Metastatic Breast Cancer Model and Performing Murine Radical Mastectomy

Genererer en Murine Orthotopic metastatisk brystkreft Cancer modell og utføre Murine radikale mastektomi

In vivo mouse models to assess breast cancer progression are essential for cancer research, including preclinical drug developments. However, the majority ...