Name: the ex vivo culture and pattern recognition receptor stimulation of mouse intestinal organoids
Uploaded: 2016-05-18T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about The Ex Vivo Culture and Pattern Recognition Receptor Stimulation of Mouse Intestinal Organoids at JoVE.com

The authors would like to thank Dr. Sheryl Coutermarsh-Ott, Dylan McDaniel and Bettina Heid for technical discussions. The authors thank Dr. Nanda Nanthakumar for providing the Caco-2 cells. The authors also thank The Multicultural Academic Opportunities Program (MAOP) at Virginia Tech. This work was supported by the National Institute of Diabetes and Digestive and Kidney Diseases Award K01DK092355 (to I.C.A.). The content is solely the responsibility of the authors and does not necessarily represent the official views of the National Institutes of Health.

सभी अनुसंधान मंजूरी दे दी है और वर्जीनिया टेक IACUC दिशा निर्देशों के तहत आयोजित किया गया 1. तैयार आर-Spondin1 HEK293T-Rspo1 कोशिका लाइन से वातानुकूलित मीडिया <ol><li> HEK293T-Rspondin1 कोशिकाओं की पीढ़ी पहले 10 में वर्णित किया ग?...

<ol>
	<li>Sato, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single+Lgr5+stem+cells+build+crypt-villus+structures+in+vitro+without+a+mesenchymal+niche.">Single Lgr5 stem cells build crypt-villus structures in vitro without a mesenchymal niche.</a> Nature. 459 (7244), 262-265 (2009).</li><li>Sato, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+expansion+of+epithelial+organoids+from+human+colon,+adenoma,+adenocarcinoma,+and+Barrett's+epithelium.">Long-term expansion of epithelial organoids from human colon, adenoma, adenocarcinoma, and Barrett's epithelium.</a> Gastroenterology. 141 (5), 1762-1772 (2011).</li><li>Boj, S. 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A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+organoids+model+human+brain+development+and+microcephaly.">Cerebral organoids model human brain development and microcephaly.</a> Nature. 501 (7467), 373-379 (2013).</li><li>Freshney, R. I., Freshney, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Culture of epithelial cells. 2nd edn. , (2002).</li><li>Vachon, P. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differentiation+state-selective+roles+of+p38+isoforms+in+human+intestinal+epithelial+cell+anoikis.">Differentiation state-selective roles of p38 isoforms in human intestinal epithelial cell anoikis.</a> Gastroenterology. 123 (6), 1980-1991 (2002).</li><li>Hynds, R. 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C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NLRX1+protein+attenuates+inflammatory+responses+to+infection+by+interfering+with+the+RIG-I-MAVS+and+TRAF6-NF-kappaB+signaling+pathways.">NLRX1 protein attenuates inflammatory responses to infection by interfering with the RIG-I-MAVS and TRAF6-NF-kappaB signaling pathways.</a> Immunity. 34 (6), 854-865 (2011).</li><li>Zhang, Y. G., Wu, S., Xia, Y., Sun, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Salmonella-infected+crypt-derived+intestinal+organoid+culture+system+for+host-bacterial+interactions.">Salmonella-infected crypt-derived intestinal organoid culture system for host-bacterial interactions.</a> Physiol Rep. 2 (9), (2014).</li><li>Grabinger, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ex+vivo+culture+of+intestinal+crypt+organoids+as+a+model+system+for+assessing+cell+death+induction+in+intestinal+epithelial+cells+and+enteropathy.">Ex vivo culture of intestinal crypt organoids as a model system for assessing cell death induction in intestinal epithelial cells and enteropathy.</a> Cell Death Dis. 5, 1228 (2014).</li><li>Slater, T. F., Sawyer, B., Straeuli, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+on+Succinate-Tetrazolium+Reductase+Systems.+Iii.+Points+of+Coupling+of+Four+Different+Tetrazolium+Salts.">Studies on Succinate-Tetrazolium Reductase Systems. Iii. Points of Coupling of Four Different Tetrazolium Salts.</a> Biochim Biophys Acta. 77, 383-393 (1963).</li><li>Parry, M. F., Neu, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+N-acetylcysteine+on+antibiotic+activity+and+bacterial+growth+in+vitro.">Effect of N-acetylcysteine on antibiotic activity and bacterial growth in vitro.</a> J Clin Microbiol. 5 (1), 58-61 (1977).</li></ol>

संस्कृति और आंतों organoids के रखरखाव के लिए एक प्रक्रिया है कि पर्याप्त मात्रा में टिशू कल्चर तकनीक के साथ किसी भी व्यक्ति द्वारा महारत हासिल किया जा सकता है। वहाँ बारीकियों passaging में जब एक और अधिक परंपरागत mon...

क्षमता फसल के लिए और संस्कृति प्राथमिक organoids छोटी आंत, पेट, अग्न्याशय, जिगर और मस्तिष्क के लिए वर्णित किया गया है और कर रहे हैं रोमांचक अग्रिम ऊतक जीव विज्ञान 1-5 के लिए एक अधिक physiologically प्रतिनिधि घटना को समझने के लिए सार्थक। संस्कृति और छोटे आंत्र organoids के रखरखाव का वर्णन पहली तरीकों सातो एट अल द्वारा सूचना मिली थी। हंस Clevers 1 की प्रयोगशाला से बाहर। इस विधि, संचयन और प्राथमिक आंतों उपकला साबित हुई कोशिकाओं की संस्कृति से पहले सीमित और उपकला कोशिकाओं के विकास को बनाए रखने में अप्रभावी हो। इस तरह के तरीके कोलैजिनेज़ और Dispase के रूप में एंजाइमों, जो अंततः intermixed प्राथमिक fibroblast कोशिकाओं 6 के परिणाम के लिए नेतृत्व करेंगे के साथ ऊष्मायन के माध्यम से ऊतक की हदबंदी शामिल थे। इन वजहों से भी समय उपकला सेल संस्कृति को बनाए रखने में प्रतिबंधित किया जाएगा। कोई उपकला सेल आला करने के लिए कम से कम, फार्म के रूप में उपकला कोशिकाओं के कारण apoptosis दर्ज होगाउचित वृद्धि कारक या संपर्क अखंडता के नुकसान की कमी है, anokis 7 करार दिया। 3 डी-organoid संस्कृति प्रणाली के आगमन के संस्कृति प्राथमिक आंतों निरंतर संस्कृति 1 में आंतों सेल प्रकार की एक स्पेक्ट्रम युक्त कोशिकाओं के लिए एक विधि प्रदान की गई है। ये उपकला organoids सेल लाइनों की जा रही है कि वे कई विभेदित कोशिकाओं से बना रहे हैं से अधिक लाभ है, और बेहतर अंग वे विवो 8 में से निकाली गई है नकल। प्रक्रिया अंतत &quot;बढ़ने एक थाली में एक मिनी पेट&quot; के लिए विभिन्न उत्तेजनाओं के तहत आंतों उपकला की प्रतिक्रिया का आकलन करने के लिए एक महत्वपूर्ण उपकरण साबित हो गया है। माइक्रोबियल रोगज़नक़ जुड़े आणविक पैटर्न (PAMPs) के साथ प्राथमिक आंतों की कोशिकाओं की बातचीत की जांच इम्यूनोलॉजी के क्षेत्र के लिए प्रासंगिक के रूप में इन आणविक पैटर्न दोनों मेजबान और सूक्ष्म जीव 9 से विविध प्रतिक्रियाओं को नियंत्रित कर सकते है। इतना ही नहीं जांचकर्ताओं अब माउस organoids के साथ इन संबंधों का पता लगाने कर सकते हैं, लेकिन वेअच्छी तरह से 2 के रूप में मनुष्यों से संवर्धित किया जा सकता है। इस तकनीक के संभावित नाटकीय रूप से व्यक्तिगत दवा को बदलने के लिए है और यह प्रगति के बारे में अटकलें हैं कि इस तकनीक को निकट भविष्य में संभव कर देगा आकर्षक है। इस विधि के समग्र लक्ष्य उत्तेजनाओं की एक किस्म के साथ संस्कृति, विस्तार के लिए एक प्रोटोकॉल, और आंतों organoids के उपचार प्रदान करना है। इस तरह की उत्तेजनाओं टीके, बैक्टीरियल PAMPs, जीना रोगजनकों, जठरांत्र (सैनिक) और कैंसर चिकित्सा विज्ञान से अंततः लेकर कर सकते हैं। अलगाव और माउस आंतों organoids की संस्कृति सातो एट अल से अनुकूलित किया गया है। हालांकि मूल विधि से मामूली विचलन, अंत उत्पाद संस्कृति organoid जा रहा है अभी भी हासिल की है जब इस प्रोटोकॉल के बाद कर रहे हैं। इस विधि को उचित सामान्य बनाने के लिए एक पर्याप्त तकनीक का वर्णन है जब गैर-समरूप सेल संरचनाओं, जो जब सेल n पर आधारित एक परख का आयोजन ध्यान में रखा जाना चाहिए के साथ काम करने पर ध्यान केंद्रित किया हैभूरा रंग।

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum (FBS)</td>
			<td>Atlanta Biologicals</td>
			<td>S11050</td>
			<td>(Section 1,3,6) Or equivalent brand</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sorvall Legend XTR Centrifuge</td>
			<td>Thermo</td>
			<td></td>
			<td>(Section 1,3)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>Sh30243.01</td>
			<td>(Section 1,6) For Caco-2 and HEK293 Rspondin1 cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEK293T-Rspondin1 secreting cell line</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>(Section 1) Described and modified from Kim, K.A. et al. Lentiviral particles contained RSPO1(NM_138683) ORF cDNA cloned into a pReceiver-Lv105 backbone custom ordered and purchased from GeneCopoeia.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 ml conical tube</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352070</td>
			<td>(Section 1) Or equivalent brand</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T-175 Flask</td>
			<td>Corning</td>
			<td>431079</td>
			<td>(Section 1) Or equivalent brand&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protein Matrix</td>
			<td>Corning</td>
			<td>356231</td>
			<td>(Section 2,3,4,5,6) Matrigel Growth Factor Reduced&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HyClone Dulbecco&#39;s (DPBS)</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>SH30264.01</td>
			<td>(Section 2,3)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM/F12&#160;</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>12634-010</td>
			<td>(Section 2,3) Advanced DMEM/F12</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corning 24 Well TC Plates</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3524</td>
			<td>(Section 2)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N2 Supplement 100x&#160;</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>17502-048</td>
			<td>(Section 2)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27 without vitamin A 50x&#160;</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>12587-010&#160;</td>
			<td>(Section 2)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trizol</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>15596-026</td>
			<td>(Section 2)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutamine Supplement (Glutamax)</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>35050-061</td>
			<td>(Section 2) Can Combine with Advanced DMEM/ F12</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES (1 M)</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>15630-080</td>
			<td>(Section 2) Can Combine with Advanced DMEM/ F12&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10ml Serological Pipet</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>357551</td>
			<td>(Section 2) Or equivalent brand</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Murine Noggin</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>250-38</td>
			<td>(Section 2) Stock = 100 mg/ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-Acetyl-L-cysteine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A9165</td>
			<td>(Section 2) Stock = 1M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant Mouse EGF</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>585608</td>
			<td>(Section 2) Stock = 500 mg/ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rocker Variable</td>
			<td>Bioexpres</td>
			<td></td>
			<td>(Section 3)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dissecting scissors</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>(Section 3)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>forceps</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>(Section 3)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>glass slides</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>(Section 3)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dissecting tweezers</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>(Section 3)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25 ml Serological Pipet</td>
			<td>Falcon</td>
			<td></td>
			<td>(Section 3)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>SLBB9821</td>
			<td>(Section 3) 0.5M or alternative TC grade EDTA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Petri Dish 100mm x 15mm</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>FB0875712</td>
			<td>(Section 3) Or equal sized TC dish</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1ml Syringe</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>309659</td>
			<td>(Section 4)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precision Glide Needle</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>305120</td>
			<td>(Section 4) 23G x 1 1/4 (0.6mm x 30mm)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flagellin from Bacillus subtilis</td>
			<td>Invivogen</td>
			<td>tlrl-bsfla&#160;</td>
			<td>(Section 5,6)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Listeria monocytogenes</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>19115</td>
			<td>(Section 5,6)&#160;(Murray&#160;et&#160;al.)&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemocytometer</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Z359629-1EA</td>
			<td>(Section 5,6)Or equivalent brand</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BBL Brain Heart Infusion Agar</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>211065</td>
			<td>(Section 5)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bacto Brain Heart Infusion</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>237500</td>
			<td>(Section 5)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Caco-2</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>HTB-37</td>
			<td>(Section 6)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin&#160;</td>
			<td>gibco</td>
			<td>25200056</td>
			<td>(section 6)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>A412-4</td>
			<td>(Section 6)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SpectraMax M5</td>
			<td>Molecuar Devices</td>
			<td></td>
			<td>(Section 6)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96 Well Assay Plate</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3603</td>
			<td>(Section 6) Black Plate, Clear Bottom TC treated</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nuclear Staining Dye</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>H1399</td>
			<td>(section 6) Hoechst 33342</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T-75 Flask</td>
			<td>Corning</td>
			<td>430641</td>
			<td>(Section 6) Or equivalent brand</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 ml conical tube</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352096</td>
			<td>(Section1,3) Or equivalent brand</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.7 ml polypropylene tube</td>
			<td>Bioexpress</td>
			<td>C-3262-1</td>
			<td>Or equivalent brand</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quick-RNA MiniPrep</td>
			<td>Zymo Research</td>
			<td>R1054</td>
			<td>Or equivalent brand</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TNF-alpha&#160;</td>
			<td>Applied Biosystems</td>
			<td>Mm 00443260_g1</td>
			<td>Taqman gene expression assay kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IL-6&#160;</td>
			<td>Applied Biosystems</td>
			<td>(Mm 00446190_m1</td>
			<td>Taqman gene expression assay kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IL-1beta</td>
			<td>Applied Biosystems</td>
			<td>Mm 00434228_m1</td>
			<td>Taqman gene expression assay kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IL-18</td>
			<td>Applied Biosystems</td>
			<td>Mm 00434225_m1</td>
			<td>Taqman gene expression assay kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>18s</td>
			<td>Applied Biosystems</td>
			<td>Hs 99999901_s1</td>
			<td>Taqman gene expression assay kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>7500 Fast Real Time PCR System</td>
			<td>Applied Biosystems</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nexus gradient Mastercycler</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TaqMan Fast Universal PCR Master Mix</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>4352042</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High Capacity cDNA Reverse Transcription Kit</td>
			<td>Life Technologies/Applied Biosystems</td>
			<td>4368814</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fast Optical 96-Well Reaction Plate, 0.1 mL</td>
			<td>Life Technologies/Applied Biosystems</td>
			<td>4346907</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant Mouse R-Spondin 1 Protein</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>3474-RS-050</td>
			<td>500 ng/ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>chloroform</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C7559</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the ex vivo culture and pattern recognition receptor stimulation of mouse intestinal organoids

प्राथमिक आंतों organoids एक मूल्यवान मॉडल प्रणाली संभावित काफी श्लैष्मिक इम्यूनोलॉजी के क्षेत्र को प्रभावित करने के लिए हो गया है। हालांकि, organoid विकास विशेषताओं की जटिलताओं अन्वेषक के लिए महत्वपूर्ण निरंतर ले। विशेष रूप से, प्रत्येक व्यक्ति organoid के विकास पैटर्न अत्यधिक चर रहे हैं और संस्कृति में उपकला कोशिकाओं के एक विषम जनसंख्या पैदा करते हैं। इस तरह के निरंतर के साथ, आम टिशू कल्चर प्रथाओं बस सेलुलर संरचना की जटिलता के कारण organoid प्रणाली को लागू नहीं किया जा सकता है। गिनती और सेल नंबर है, जो इस तरह के सेल लाइनों के रूप में व्यक्तिगत रूप से अलग कोशिकाओं, के लिए आम बात है पर पूरी तरह आधारित चढ़ाना, organoids के लिए एक विश्वसनीय विधि जब तक कुछ सामान्य बनाने की तकनीक लागू किया जाता है नहीं है। कुल प्रोटीन सामग्री के लिए सामान्य निवासी प्रोटीन मैट्रिक्स के कारण जटिल बना दिया है। जब secreted चुनाव के मूल्यांकन के सेल नंबर, आकार और प्रकार की कोशिका के संदर्भ में इन विशेषताओं को ध्यान में रखा जाना चाहिएorganoid जन से टेंट। इस प्रोटोकॉल संस्कृति के लिए एक सरल प्रक्रिया की रूपरेखा और माइक्रोबियल रोगज़नक़ों और रोगज़नक़ जुड़े आणविक पैटर्न (PAMPs) के साथ छोटे आंतों organoids के इलाज के लिए उत्पन्न किया गया है। यह भी सामान्य बनाने की तकनीक है कि जब प्रोटीन विश्लेषण एक ऐसी चुनौती के बाद आयोजित की जाती हैं लागू किया जाना चाहिए पर जोर दिया।

जब पेट के organoids खेती करने के लिए इस प्रोटोकॉल के बाद, विशेषता क्षेत्र आकार का organoids कटाई के बाद उपस्थित रहेंगे। आर-spondin1 वातानुकूलित मीडिया के अलावा दैनिक विकास और organoids की नवोदित आरंभ हो जाएगा। Organoid...

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The Ex Vivo Culture and Pattern Recognition Receptor Stimulation of Mouse Intestinal Organoids

इधर, फसल को बनाए रखने, और रोगज़नक़ जुड़े आणविक पैटर्न (PAMPs) और लिस्टेरिया monocytogenes के साथ माउस छोटी आंतों organoids के इलाज के लिए एक प्रोटोकॉल के रूप में अच्छी तरह से जीन अभिव्यक्ति और प्रोटीन के लिए उचित सामान्य बनाने की तकनीक पर जोर देने के रूप में वर्णित है।

<em&gt; पूर्व विवो</em&gt; संस्कृति और पैटर्न मान्यता रिसेप्टर माउस आंतों Organoids की उत्तेजना

Primary intestinal organoids are a valuable model system that has the potential to significantly impact the field of mucosal immunology. However, the ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

The Ex Vivo Culture and Pattern Recognition Receptor Stimulation of Mouse Intestinal Organoids

Assessing the Innate Sensing of HIV-1 Infected CD4+ T Cells by Plasmacytoid Dendritic Cells Using an Ex vivo Co-culture System.

Assessing the Innate Sensing of HIV-1 Infected CD4+ T Cells by Plasmacytoid Dendritic Cells Using an Ex vivo Co-culture System.

एचआईवी -1 संक्रमित सीडी 4 की सहज सेंसिंग का आकलन<sup&gt; +</sup&gt; एक का उपयोग Plasmacytoid वृक्ष के समान कोशिकाओं द्वारा टी कोशिकाओं<em&gt; पूर्व vivo</em&gt; प्रणाली सह संस्कृति।

HIV-1 innate sensing requires direct contact of infected CD4+ T cells with plasmacytoid dendritic cells (pDCs). In order to study this process, the ...

Monitoring Activation of the Antiviral Pattern Recognition Receptors RIG-I And PKR By Limited Protease Digestion and Native PAGE

Antiviral पैटर्न पहचान रिसेप्टर्स रिग, मैं और PKR द्वारा सीमित Protease पाचन और मूल निवासी पृष्ठ की मॉनिटरिंग सक्रियण

Host defenses to virus infection are dependent on a rapid detection by pattern recognition receptors (PRRs) of the innate immune system. In the cytoplasm, ...

Lymphocyte Isolation from Human Skin for Phenotypic Analysis and Ex Vivo Cell Culture

Lymphocyte Isolation from Human Skin for Phenotypic Analysis and Ex Vivo Cell Culture

प्ररूपी विश्लेषण और के लिए मानव त्वचा से लिम्फोसाइट अलगाव<em&gt; पूर्व विवो</em&gt; सेल संस्कृति

Human skin has an important barrier function and contains various immune cells that contribute to tissue homeostasis and protection from pathogens. As the ...

Organoids as Model for Infectious Diseases: Culture of Human and Murine Stomach Organoids and Microinjection of Helicobacter Pylori

संक्रामक रोगों के लिए मॉडल के रूप में Organoids: हेलिकोबेक्टर के मानव की संस्कृति और murine पेट Organoids और microinjection

Recently infection biologists have employed stem cell derived cultures to answer the need for new and better models to study host-pathogen interactions. ...

Isolation and Ex Vivo Culture of V&#948;1+CD4+&#947;&#948; T Cells, an Extrathymic &#945;&#946;T-cell Progenitor

Isolation and Ex Vivo Culture of VÃƒÅ½Ã‚Â´1+CD4+ÃƒÅ½Ã‚Â³ÃƒÅ½Ã‚Â´ T Cells, an Extrathymic ÃƒÅ½Ã‚Â±ÃƒÅ½Ã‚Â²T-cell Progenitor

अलगाव और<em&gt; पूर्व Vivo</emVδ1 की&gt; संस्कृति<sup&gt; +</sup&gt; सीडी 4<sup&gt; +</sup&gt; Γδ टी कोशिकाओं, एक Extrathymic αβT सेल पूर्वज

The thymus, the primary organ for the generation of &#945;&#946; T cells and backbone of the adaptive immune system in vertebrates, has long been ...

Using X-ray Crystallography, Biophysics, and Functional Assays to Determine the Mechanisms Governing T-cell Receptor Recognition of Cancer Antigens

का उपयोग करते हुए एक्स-रे क्रिस्टलोग्राफी, बायोफिजिक्स, और कार्यात्मक assays तंत्र शासी टी-सेल कैंसर प्रतिजनों की रिसेप्टर मान्यता निर्धारित करने के लिए

Human CD8+ cytotoxic T lymphocytes (CTLs) are known to play an important role in tumor control. In order to carry out this function, the cell ...

The Ex Vivo Colon Organ Culture and Its Use in Antimicrobial Host Defense Studies

The Ex Vivo Colon Organ Culture and Its Use in Antimicrobial Host Defense Studies

<em&gt; पूर्व विवो</em&gt; पेट के अंग संस्कृति और रोगाणुरोधी होस्ट रक्षा अध्ययन में इसके उपयोग

The intestine displays an architecture of repetitive crypt structures consisting of different types of epithelial cells, lamina propia containing immune ...

Isolating Lymphocytes from the Mouse Small Intestinal Immune System

अलग माउस से लिम्फोसाइटों छोटे आंत्र प्रतिरक्षा प्रणाली

The intestinal immune system plays an essential role in maintaining the barrier function of the gastrointestinal tract by generating tolerant responses to ...

An Ex Vivo Chicken Primary Bursal-cell Culture Model to Study Infectious Bursal Disease Virus Pathogenesis

An Ex Vivo Chicken Primary Bursal-cell Culture Model to Study Infectious Bursal Disease Virus Pathogenesis

संक्रामक Bursal रोग वायरस का अध्ययन करने के लिए एक पूर्व Vivo चिकन प्राथमिक Bursal-सेल संस्कृति मॉडल रोगजनन

Infectious bursal disease virus (IBDV) is a birnavirus of economic importance to the poultry industry. The virus infects B cells, causing morbidity, ...

Confocal Imaging of Double-Stranded RNA and Pattern Recognition Receptors in Negative-Sense RNA Virus Infection

डबल-असहाय आरएनए और पैटर्न मान्यता रिसेप्टर्स की फोकल इमेजिंग में नकारात्मक-भावना आरएनए वायरस संक्रमण

Double-stranded (ds) RNA is produced as a replicative intermediate during RNA virus infection. Recognition of dsRNA by host pattern recognition receptors ...