Name: the ex vivo culture and pattern recognition receptor stimulation of mouse intestinal organoids
Uploaded: 2016-05-18T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about The Ex Vivo Culture and Pattern Recognition Receptor Stimulation of Mouse Intestinal Organoids at JoVE.com

The authors would like to thank Dr. Sheryl Coutermarsh-Ott, Dylan McDaniel and Bettina Heid for technical discussions. The authors thank Dr. Nanda Nanthakumar for providing the Caco-2 cells. The authors also thank The Multicultural Academic Opportunities Program (MAOP) at Virginia Tech. This work was supported by the National Institute of Diabetes and Digestive and Kidney Diseases Award K01DK092355 (to I.C.A.). The content is solely the responsibility of the authors and does not necessarily represent the official views of the National Institutes of Health.

Все исследования были утверждены и проведены в соответствии с руководящими принципами Virginia Tech IACUC 1. Подготовьте R-Spondin1 кондиционированной среды От HEK293T-RSPO1 клеточной линии <ol><li> Генерация клеток HEK293T-Rspondin1 было описано ранее 10. Семенной HEK293T-Rspondin1 секретирующих клеток на 5-10% сп?...

<ol>
	<li>Sato, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single+Lgr5+stem+cells+build+crypt-villus+structures+in+vitro+without+a+mesenchymal+niche.">Single Lgr5 stem cells build crypt-villus structures in vitro without a mesenchymal niche.</a> Nature. 459 (7244), 262-265 (2009).</li><li>Sato, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+expansion+of+epithelial+organoids+from+human+colon,+adenoma,+adenocarcinoma,+and+Barrett's+epithelium.">Long-term expansion of epithelial organoids from human colon, adenoma, adenocarcinoma, and Barrett's epithelium.</a> Gastroenterology. 141 (5), 1762-1772 (2011).</li><li>Boj, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organoid+models+of+human+and+mouse+ductal+pancreatic+cancer.">Organoid models of human and mouse ductal pancreatic cancer.</a> Cell. 160 (1-2), 324-338 (2015).</li><li>Huch, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+culture+of+genome-stable+bipotent+stem+cells+from+adult+human+liver.">Long-term culture of genome-stable bipotent stem cells from adult human liver.</a> Cell. 160 (1-2), 299-312 (2015).</li><li>Lancaster, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+organoids+model+human+brain+development+and+microcephaly.">Cerebral organoids model human brain development and microcephaly.</a> Nature. 501 (7467), 373-379 (2013).</li><li>Freshney, R. I., Freshney, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Culture of epithelial cells. 2nd edn. , (2002).</li><li>Vachon, P. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differentiation+state-selective+roles+of+p38+isoforms+in+human+intestinal+epithelial+cell+anoikis.">Differentiation state-selective roles of p38 isoforms in human intestinal epithelial cell anoikis.</a> Gastroenterology. 123 (6), 1980-1991 (2002).</li><li>Hynds, R. E., Giangreco, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Concise+review:+the+relevance+of+human+stem+cell-derived+organoid+models+for+epithelial+translational+medicine.">Concise review: the relevance of human stem cell-derived organoid models for epithelial translational medicine.</a> Stem Cells. 31 (3), 417-422 (2013).</li><li>Kaiko, G. E., Stappenbeck, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Host-microbe+interactions+shaping+the+gastrointestinal+environment.">Host-microbe interactions shaping the gastrointestinal environment.</a> Trends Immunol. 35 (11), 538-548 (2014).</li><li>Kim, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitogenic+influence+of+human+R-spondin1+on+the+intestinal+epithelium.">Mitogenic influence of human R-spondin1 on the intestinal epithelium.</a> Science. 309 (5738), 1256-1259 (2005).</li><li>Chomczynski, P., Sacchi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+single-step+method+of+RNA+isolation+by+acid+guanidinium+thiocyanate-phenol-chloroform+extraction:+twenty-something+years+on.">The single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction: twenty-something years on.</a> Nat Protoc. 1 (2), 581-585 (2006).</li><li>Allen, I. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NLRX1+protein+attenuates+inflammatory+responses+to+infection+by+interfering+with+the+RIG-I-MAVS+and+TRAF6-NF-kappaB+signaling+pathways.">NLRX1 protein attenuates inflammatory responses to infection by interfering with the RIG-I-MAVS and TRAF6-NF-kappaB signaling pathways.</a> Immunity. 34 (6), 854-865 (2011).</li><li>Zhang, Y. G., Wu, S., Xia, Y., Sun, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Salmonella-infected+crypt-derived+intestinal+organoid+culture+system+for+host-bacterial+interactions.">Salmonella-infected crypt-derived intestinal organoid culture system for host-bacterial interactions.</a> Physiol Rep. 2 (9), (2014).</li><li>Grabinger, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ex+vivo+culture+of+intestinal+crypt+organoids+as+a+model+system+for+assessing+cell+death+induction+in+intestinal+epithelial+cells+and+enteropathy.">Ex vivo culture of intestinal crypt organoids as a model system for assessing cell death induction in intestinal epithelial cells and enteropathy.</a> Cell Death Dis. 5, 1228 (2014).</li><li>Slater, T. F., Sawyer, B., Straeuli, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+on+Succinate-Tetrazolium+Reductase+Systems.+Iii.+Points+of+Coupling+of+Four+Different+Tetrazolium+Salts.">Studies on Succinate-Tetrazolium Reductase Systems. Iii. Points of Coupling of Four Different Tetrazolium Salts.</a> Biochim Biophys Acta. 77, 383-393 (1963).</li><li>Parry, M. F., Neu, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+N-acetylcysteine+on+antibiotic+activity+and+bacterial+growth+in+vitro.">Effect of N-acetylcysteine on antibiotic activity and bacterial growth in vitro.</a> J Clin Microbiol. 5 (1), 58-61 (1977).</li></ol>

Культура и содержание кишечных органоидами является процедурой, которая может быть освоена любым человеком с адекватной техникой тканевой культуры. Есть тонкости в пересева, когда по сравнению с выращивания клеток в более традиционных монослоя, но эти тонкости не трудно преодолеть. К...

Способность собирать и культуры первичных органоиды были описаны для тонкой кишки, толстой кишки, поджелудочной железы, печени и головного мозга и захватывающие достижения релевантно для понимания более физиологически представительный явления для тканевой биологии 1-5. Первые методы , характеризующие культуру и поддержания тонкого кишечника органоидами сообщает Сато и др. Из лаборатории Ганса Clevers 1. До этого метода, сбора и культуры первичных эпителиальных клеток кишечника оказалась ограниченной и неэффективной в поддержании эпителиальной роста клеток. Методы включали диссоциацию ткани с помощью инкубации с ферментами, такими как коллагеназы и диспазу, которые в конечном итоге привести к вырост перемешанных первичных клеток фибробластов 6. Эти условия также будут ограничены время в поддержании эпителиальной клеточной культуры. Минимальное чтобы не эпителиальной клетки ниши будет формироваться, как эпителиальные клетки вступит апоптоз из-заотсутствие соответствующих факторов роста или потери целостности контактов, называется anokis 7. Появление 3D-Органоид системы культуры предложен способ культивирования первичных клеток кишечника , содержащих спектр кишечных типов клеток в культуре устойчивой 1. Эти эпителиальные органоиды имеют преимущества по сравнению с клеточными линиями в том , что они состоят из нескольких дифференцированных клеток, и лучше имитировать орган они получены из 8 в естественных условиях. Процесс в конечном счете, &quot;вырастить мини-кишка в блюде&quot; оказалась ценным инструментом для оценки реакции кишечного эпителия при различных раздражителей. Исследуя взаимодействие первичных клеток кишечника с микробным патогенам связаны молекулярных моделей (PAMPs) имеет отношение к области иммунологии , как эти молекулярные структуры могут регулировать различные ответы от хозяина и микроба 9. Мало того, что исследователи в настоящее время исследовать эти взаимодействия с органоидами мыши, но онимогут быть выращены от людей , а также 2. Эта технология имеет потенциал, чтобы резко изменить персонализированной медицины и заманчиво порассуждать о достижениях, что этот метод даст возможность в ближайшем будущем. Общая цель этого метода заключается в создании протокола для культуры, расширение и лечение кишечных органоидами с различными стимулами. Такие стимулы могут в конечном счете, в диапазоне от вакцин, бактериальных PAMPs, живых патогенных микроорганизмов, желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) и терапии рака. Выделение и культура мыши кишечных органоидами была заимствована из Сато и др. Хотя есть небольшие отклонения от первоначального способа, конечный продукт является Органоид культура все еще ​​достигается , когда после этого протокола. Этот метод ориентирован на описании адекватную методику для правильной нормализации при работе с неоднородных клеточных структур, которые должны быть приняты во внимание при проведении анализа на основе клеток пхариус.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum (FBS)</td>
			<td>Atlanta Biologicals</td>
			<td>S11050</td>
			<td>(Section 1,3,6) Or equivalent brand</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sorvall Legend XTR Centrifuge</td>
			<td>Thermo</td>
			<td></td>
			<td>(Section 1,3)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>Sh30243.01</td>
			<td>(Section 1,6) For Caco-2 and HEK293 Rspondin1 cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEK293T-Rspondin1 secreting cell line</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>(Section 1) Described and modified from Kim, K.A. et al. Lentiviral particles contained RSPO1(NM_138683) ORF cDNA cloned into a pReceiver-Lv105 backbone custom ordered and purchased from GeneCopoeia.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 ml conical tube</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352070</td>
			<td>(Section 1) Or equivalent brand</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T-175 Flask</td>
			<td>Corning</td>
			<td>431079</td>
			<td>(Section 1) Or equivalent brand&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protein Matrix</td>
			<td>Corning</td>
			<td>356231</td>
			<td>(Section 2,3,4,5,6) Matrigel Growth Factor Reduced&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HyClone Dulbecco&#39;s (DPBS)</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>SH30264.01</td>
			<td>(Section 2,3)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM/F12&#160;</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>12634-010</td>
			<td>(Section 2,3) Advanced DMEM/F12</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corning 24 Well TC Plates</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3524</td>
			<td>(Section 2)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N2 Supplement 100x&#160;</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>17502-048</td>
			<td>(Section 2)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27 without vitamin A 50x&#160;</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>12587-010&#160;</td>
			<td>(Section 2)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trizol</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>15596-026</td>
			<td>(Section 2)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutamine Supplement (Glutamax)</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>35050-061</td>
			<td>(Section 2) Can Combine with Advanced DMEM/ F12</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES (1 M)</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>15630-080</td>
			<td>(Section 2) Can Combine with Advanced DMEM/ F12&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10ml Serological Pipet</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>357551</td>
			<td>(Section 2) Or equivalent brand</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Murine Noggin</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>250-38</td>
			<td>(Section 2) Stock = 100 mg/ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-Acetyl-L-cysteine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A9165</td>
			<td>(Section 2) Stock = 1M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant Mouse EGF</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>585608</td>
			<td>(Section 2) Stock = 500 mg/ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rocker Variable</td>
			<td>Bioexpres</td>
			<td></td>
			<td>(Section 3)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dissecting scissors</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>(Section 3)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>forceps</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>(Section 3)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>glass slides</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>(Section 3)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dissecting tweezers</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>(Section 3)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25 ml Serological Pipet</td>
			<td>Falcon</td>
			<td></td>
			<td>(Section 3)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>SLBB9821</td>
			<td>(Section 3) 0.5M or alternative TC grade EDTA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Petri Dish 100mm x 15mm</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>FB0875712</td>
			<td>(Section 3) Or equal sized TC dish</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1ml Syringe</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>309659</td>
			<td>(Section 4)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precision Glide Needle</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>305120</td>
			<td>(Section 4) 23G x 1 1/4 (0.6mm x 30mm)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flagellin from Bacillus subtilis</td>
			<td>Invivogen</td>
			<td>tlrl-bsfla&#160;</td>
			<td>(Section 5,6)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Listeria monocytogenes</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>19115</td>
			<td>(Section 5,6)&#160;(Murray&#160;et&#160;al.)&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemocytometer</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Z359629-1EA</td>
			<td>(Section 5,6)Or equivalent brand</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BBL Brain Heart Infusion Agar</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>211065</td>
			<td>(Section 5)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bacto Brain Heart Infusion</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>237500</td>
			<td>(Section 5)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Caco-2</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>HTB-37</td>
			<td>(Section 6)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin&#160;</td>
			<td>gibco</td>
			<td>25200056</td>
			<td>(section 6)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>A412-4</td>
			<td>(Section 6)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SpectraMax M5</td>
			<td>Molecuar Devices</td>
			<td></td>
			<td>(Section 6)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96 Well Assay Plate</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3603</td>
			<td>(Section 6) Black Plate, Clear Bottom TC treated</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nuclear Staining Dye</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>H1399</td>
			<td>(section 6) Hoechst 33342</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T-75 Flask</td>
			<td>Corning</td>
			<td>430641</td>
			<td>(Section 6) Or equivalent brand</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 ml conical tube</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352096</td>
			<td>(Section1,3) Or equivalent brand</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.7 ml polypropylene tube</td>
			<td>Bioexpress</td>
			<td>C-3262-1</td>
			<td>Or equivalent brand</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quick-RNA MiniPrep</td>
			<td>Zymo Research</td>
			<td>R1054</td>
			<td>Or equivalent brand</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TNF-alpha&#160;</td>
			<td>Applied Biosystems</td>
			<td>Mm 00443260_g1</td>
			<td>Taqman gene expression assay kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IL-6&#160;</td>
			<td>Applied Biosystems</td>
			<td>(Mm 00446190_m1</td>
			<td>Taqman gene expression assay kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IL-1beta</td>
			<td>Applied Biosystems</td>
			<td>Mm 00434228_m1</td>
			<td>Taqman gene expression assay kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IL-18</td>
			<td>Applied Biosystems</td>
			<td>Mm 00434225_m1</td>
			<td>Taqman gene expression assay kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>18s</td>
			<td>Applied Biosystems</td>
			<td>Hs 99999901_s1</td>
			<td>Taqman gene expression assay kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>7500 Fast Real Time PCR System</td>
			<td>Applied Biosystems</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nexus gradient Mastercycler</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TaqMan Fast Universal PCR Master Mix</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>4352042</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High Capacity cDNA Reverse Transcription Kit</td>
			<td>Life Technologies/Applied Biosystems</td>
			<td>4368814</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fast Optical 96-Well Reaction Plate, 0.1 mL</td>
			<td>Life Technologies/Applied Biosystems</td>
			<td>4346907</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant Mouse R-Spondin 1 Protein</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>3474-RS-050</td>
			<td>500 ng/ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>chloroform</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C7559</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the ex vivo culture and pattern recognition receptor stimulation of mouse intestinal organoids

Первичные кишечные органоиды являются ценным модель системы, которая имеет потенциал, чтобы существенно повлиять на поле через слизистую оболочку иммунология. Тем не менее, сложность в Органоид характеристики роста несут значительные предостережений для исследователя. В частности, закономерности роста каждого отдельного Органоид весьма разнообразны и создают гетерогенную популяцию эпителиальных клеток в культуре. С помощью таких предостережений, общие ткани практики культуры не могут быть просто применены к Органоид системе из-за сложности клеточной структуры. Подсчет и металлизированный исключительно на основе числа клеток, который является общим для индивидуально разделенных клеток, таких как клеточные линии, не является надежным методом органоидов, если не применяется какой-то метод нормализации. Нормализация к общему содержанию белка выполнен комплекс благодаря матрице резидентного белка. Эти характеристики с точки зрения количества клеток, формы и типа клеток следует принимать во внимание при оценке секретируемый CONпалатки от Органоид массы. Этот протокол был сформирован, чтобы наметить простую процедуру для культуры и лечения тонкого кишечника с органоиды микробных патогенов и патогенных микроорганизмов, связанные молекулярных моделей (PAMPs). В нем также подчеркивается методы нормализации, которые должны применяться при анализе белка проводится после такого вызова.

При следовании этому протоколу культивировать кишечных органоиды, характерные сферы в форме органоиды будет присутствовать после сбора урожая. Добавление R-spondin1 кондиционированной среды ежедневно инициирует рост и почкование органоидов. Рост органоидами показан н?...

Watch this Scientific Journal Video about The Ex Vivo Culture and Pattern Recognition Receptor Stimulation of Mouse Intestinal Organoids at JoVE.com

The Ex Vivo Culture and Pattern Recognition Receptor Stimulation of Mouse Intestinal Organoids

Здесь, протокол для сбора, сохранения и лечения тонкого кишечника мыши органоиды патогена связаны молекулярных моделей (PAMPs) и листерий описывается, а также акцент на экспрессию генов и надлежащих методов нормализации для белка.

<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Культура и Pattern Recognition Рецептор Стимуляция мыши Кишечные органоидами

Primary intestinal organoids are a valuable model system that has the potential to significantly impact the field of mucosal immunology. However, the ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

The Ex Vivo Culture and Pattern Recognition Receptor Stimulation of Mouse Intestinal Organoids

Assessing the Innate Sensing of HIV-1 Infected CD4+ T Cells by Plasmacytoid Dendritic Cells Using an Ex vivo Co-culture System.

Assessing the Innate Sensing of HIV-1 Infected CD4+ T Cells by Plasmacytoid Dendritic Cells Using an Ex vivo Co-culture System.

Оценка Врожденная зондирование инфицированных ВИЧ-1 CD4<sup&gt; +</sup&gt; Т-клеток плазмоцитов дендритных клеток с помощью<em&gt; Экс естественных</em&gt; Совместное культивирование системы.

HIV-1 innate sensing requires direct contact of infected CD4+ T cells with plasmacytoid dendritic cells (pDCs). In order to study this process, the ...

Monitoring Activation of the Antiviral Pattern Recognition Receptors RIG-I And PKR By Limited Protease Digestion and Native PAGE

Мониторинг Активация противовирусной Распознавание Рецепторы RIG-I И PKR По ограниченной протеазы Пищеварение и Native СТРАНИЦЕ

Host defenses to virus infection are dependent on a rapid detection by pattern recognition receptors (PRRs) of the innate immune system. In the cytoplasm, ...

Lymphocyte Isolation from Human Skin for Phenotypic Analysis and Ex Vivo Cell Culture

Lymphocyte Isolation from Human Skin for Phenotypic Analysis and Ex Vivo Cell Culture

Лимфоцит Изоляция из человеческой кожи для фенотипического анализа и<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Культура клеток

Human skin has an important barrier function and contains various immune cells that contribute to tissue homeostasis and protection from pathogens. As the ...

Organoids as Model for Infectious Diseases: Culture of Human and Murine Stomach Organoids and Microinjection of Helicobacter Pylori

Органоиды как модель для инфекционных болезней: Культура человека и мыши желудка органоидов и Микроинъекция Helicobacter Pylori

Recently infection biologists have employed stem cell derived cultures to answer the need for new and better models to study host-pathogen interactions. ...

Isolation and Ex Vivo Culture of V&#948;1+CD4+&#947;&#948; T Cells, an Extrathymic &#945;&#946;T-cell Progenitor

Isolation and Ex Vivo Culture of VÃƒÅ½Ã‚Â´1+CD4+ÃƒÅ½Ã‚Â³ÃƒÅ½Ã‚Â´ T Cells, an Extrathymic ÃƒÅ½Ã‚Â±ÃƒÅ½Ã‚Â²T-cell Progenitor

Выделение и<em&gt; Экс Vivo</em&gt; Культура Vδ1<sup&gt; +</sup&gt; CD4<sup&gt; +</sup&gt; γδ Т-клеток, А.Н. Extrathymic αβT-клеток-предшественников

The thymus, the primary organ for the generation of &#945;&#946; T cells and backbone of the adaptive immune system in vertebrates, has long been ...

Using X-ray Crystallography, Biophysics, and Functional Assays to Determine the Mechanisms Governing T-cell Receptor Recognition of Cancer Antigens

С помощью рентгеновской кристаллографии, биофизики и функциональными пробами, чтобы определить механизмы управляющих Т-клеточного рецептора распознавания рака антигенам

Human CD8+ cytotoxic T lymphocytes (CTLs) are known to play an important role in tumor control. In order to carry out this function, the cell ...

The Ex Vivo Colon Organ Culture and Its Use in Antimicrobial Host Defense Studies

The Ex Vivo Colon Organ Culture and Its Use in Antimicrobial Host Defense Studies

<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Colon органной культуры и ее использование в Антимикробная хост оборонных исследований

The intestine displays an architecture of repetitive crypt structures consisting of different types of epithelial cells, lamina propia containing immune ...

Isolating Lymphocytes from the Mouse Small Intestinal Immune System

Изоляция лимфоциты от мыши небольшой кишечной иммунной системы

The intestinal immune system plays an essential role in maintaining the barrier function of the gastrointestinal tract by generating tolerant responses to ...

An Ex Vivo Chicken Primary Bursal-cell Culture Model to Study Infectious Bursal Disease Virus Pathogenesis

An Ex Vivo Chicken Primary Bursal-cell Culture Model to Study Infectious Bursal Disease Virus Pathogenesis

Ex Vivo курица первичной Bursal клеточной культуры модель для изучения патогенеза вирус инфекционного Bursal

Infectious bursal disease virus (IBDV) is a birnavirus of economic importance to the poultry industry. The virus infects B cells, causing morbidity, ...

Confocal Imaging of Double-Stranded RNA and Pattern Recognition Receptors in Negative-Sense RNA Virus Infection

Конфокальная томография двуцепочечной РНК и шаблон признание рецепторов в отрицательной смысл РНК вируса

Double-stranded (ds) RNA is produced as a replicative intermediate during RNA virus infection. Recognition of dsRNA by host pattern recognition receptors ...