Name: development of a multicellular three-dimensional organotypic model of the human intestinal mucosa grown under microgravity
Uploaded: 2016-07-25T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Development of a Multicellular Three-dimensional Organotypic Model of the Human Intestinal Mucosa Grown Under Microgravity at JoVE.com

This work was supported, in part, by NIAID, NIH, DHHS federal research grants R01 AI036525 and U19 AI082655 (CCHI) to MBS and by NIH grant DK048373 to AF. The content is solely the responsibility of the authors and does not necessarily represent the official views of the National Institute of Allergy And Infectious Diseases or the National Institutes of Health.

Etik uttalande: Alla blodprover samlades in från frivilliga som deltog i protokoll nummer HP-00.040.025-1. University of Maryland Institutional Review Board godkänt detta protokoll och godkänt insamling av blodprover från friska frivilliga försökspersoner för de studier som ingår i detta manuskript. Syftet med denna studie var förklarat för volontärer, och alla volontärer gav informerat undertecknade samtycke innan bloddragningen. Obs: Se tabell 1 för beredning medel tillägg. Se <stron...

I detta manuskript beskriver vi utvecklingen av en genmanipulerad modell av det mänskliga tarmslemhinna består av multiplar celltyper inklusive primära humana lymfocyter, fibroblaster, och endotelceller, såväl som intestinala epiteliala cellinjer 24. I denna 3-D-modellen, celler odlas i en kollagen-rika extracellulära matrix i mikrogravitation villkor 24. Såsom tidigare beskrivits, de viktigaste egenskaperna hos denna modell är: (i) förmåga at...

Det första genombrottet i att bygga en 3-D-modellen rapporterades i början av 1980-talet då forskare började undersöka olika typer av byggnadsställningen (t.ex.., Laminin, kollagen typ I, kollagen IV och fibronektin) och cocktails av tillväxtfaktorer för att förbättra cell-till-cell och ECM-interaktioner av &quot;statiska&quot; 3-D-modeller 1-7. Sedan dess har det största problemet med dessa modeller varit begränsningar i överföringen av näringsämnen och syre i mediet och vävnadskonstruktioner 8. I motsats till celler i in vivo-miljö som mottar en jämn tillförsel av näringsämnen och syre från omgivande nätverk av blodkärl, den statiska karaktären hos dessa modeller hindrar effektiv fördelning av dem till cellerna. Till exempel, kommer cellaggregat som genereras i in vitro statiska modeller som överskrider några millimeter i storlek undantagslöst utvecklar hypoxiska, nekrotiska kärnor 9. De RWV bioreaktorer kan kringgå detta problemgenom att tillhandahålla fluiddynamik som tillåter effektiv diffusion av näringsämnen och syre 10-12. Men hittills arbete med RWV bioreaktorer har begränsats till införandet av en eller två celltyper 13-17. Dessutom, i stället för en rumslig orientering som liknar naturliga vävnader, dessa celler bildade cellaggregat. Den främsta orsaken till dessa begränsningar har varit bristen på en byggnadsställning kunna införliva celler på ett integrerat sätt. De ställningar som används i de RWV bioreaktorer hittills består, med få undantag 16-18, huvudsakligen av syntetiska mikropärlor, rörformiga cylindrar eller små ark 13-15,19-23. Dessa är styva material vars sammansättning och flexibilitet inte kan manipuleras, och till vilken cellerna är fästa till sin yta. Således, är det osannolikt att dessa modeller kommer att tillhandahålla ett system i vilket för att utvärdera, på ett integrerat sätt, de olika cellkomponenter såsom stromala celler (t ex., Fibroblaster, immun- och endoteliala celler) att should dispergeras inom byggnadsställning för att närmare efterlikna mänsklig vävnad. Här beskriver vi utvecklingen av en multicellulär 3-D organotypisk modell av det mänskliga tarmslemhinnan som består av en intestinal epitelcellinje och primära humana lymfocyter, endotelceller och fibroblaster 24. Dessa celler odlades enligt mikrogravitation tillhandahålla av RWV bioreaktorn 13,25-30. I vårt 3-D-modellen, ECM besitter många distinkta egenskaper, såsom en osmolalitet som liknar till odlingsmediet (t ex., Försumbara diffusionssystem begränsningar under odling) och möjligheten att införliva celler och andra relevanta extracellulära matrisproteiner, såväl som den lämplig styvhet för att användas i bioreaktorer 24. Biologiska system är mycket komplexa, och under de senaste åren har det skett en förskjutning i fokus för mucosal forskning mot undersökning av cellinteraktioner med sin omgivning snarare än att studera dem i isolation. I synnerhet, är betydelsen av cell-cell interaktioner påverka tarmcellöverlevnad och differentiering väl dokumenterad 31-34. Specifikt kommunikationen mellan epitelceller och deras nisch har en djup påverkan på epitelceller expansionen och differentieringen 35. I själva verket är det allmänt accepterat att inte bara cell till cell utan även cell-till-ECM interaktioner är avgörande för underhåll och differentieringen av epitelceller i 3-D kulturmodeller. Tidigare studier har visat att gut ECM-proteiner, såsom kollagen I 24,36,37, laminin 38 och fibronektin 39 bidrar till att påverka tarmepitelceller att förvärva rymdorientering som liknar den nativa slemhinnan. Således, utveckling av ny teknik, som vår 3-D-modellen 24, som kan efterlikna den fenotypiska mångfald tarmen krävs om forskare har för avsikt att återskapa den komplexa cellulära och strukturella arkitekturoch funktion i tarmmikromiljö. Dessa modeller utgör ett viktigt verktyg i utvecklingen och utvärderingen av nya orala läkemedel och vaccinkandidater.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="845">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="70">
			<td height="70" style="height:70px;width:319px;">Quad Rotator/Independent Rotating Wall Vessel (RWV) bioreactor&#160;</td>
			<td style="width:131px;">Synthecon</td>
			<td style="width:115px;">RCCs-4DQ</td>
			<td style="width:283px;">For up to 4 vessels. Models with more or less vessels are also available.</td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:319px;">Disposable 50 ml-vessel</td>
			<td style="width:131px;">Synthecon</td>
			<td style="width:115px;">D-405</td>
			<td style="width:283px;">Box with 4 vessels</td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:319px;">HCT-8 epithelial cells&#160;</td>
			<td style="width:131px;">ATCC</td>
			<td style="width:115px;">CCL-244</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:319px;">CCD-18Co Fibroblasts&#160;</td>
			<td style="width:131px;">ATCC</td>
			<td style="width:115px;">CRL-1459</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;">Human Umbilical Vein Endothelial Cells</td>
			<td style="width:131px;">ATCC</td>
			<td style="width:115px;">CRL-1730</td>
			<td style="width:283px;">HUVEC</td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:319px;">Fibroblast Growth Factor-Basic&#160;</td>
			<td style="width:131px;">Sigma</td>
			<td style="width:115px;">F0291</td>
			<td>bFGF</td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:319px;">Stem Cell Factor&#160;</td>
			<td style="width:131px;">Sigma</td>
			<td style="width:115px;">S7901</td>
			<td>SCF</td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:319px;">Hepatocyte Growth Factor&#160;</td>
			<td style="width:131px;">Sigma</td>
			<td style="width:115px;">H1404</td>
			<td>HGF</td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:319px;">Endothelin 3</td>
			<td style="width:131px;">Sigma</td>
			<td style="width:115px;">E9137</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="49">
			<td height="49" style="height:49px;width:319px;">Laminin</td>
			<td style="width:131px;">Sigma</td>
			<td style="width:115px;">L2020</td>
			<td style="width:283px;">Isolated from mouse Engelbreth-Holm-Swarm tumor</td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:319px;">Vascular Endothelial Growth Factor&#160;</td>
			<td style="width:131px;">Sigma</td>
			<td style="width:115px;">V7259</td>
			<td>VEGF</td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:319px;">Leukemia Inhibitory Factor&#160;</td>
			<td style="width:131px;">Santa Cruz</td>
			<td style="width:115px;">sc-4377</td>
			<td>(LIF</td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:319px;">Adenine</td>
			<td style="width:131px;">Sigma</td>
			<td style="width:115px;">A2786</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:319px;">Insulin</td>
			<td style="width:131px;">Sigma</td>
			<td style="width:115px;">I-6634</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:319px;">3,3&#39;,5-triiodo-L-thyronine&#160;</td>
			<td style="width:131px;">Sigma</td>
			<td style="width:115px;">T-6397</td>
			<td>T3</td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:319px;">Cholera Toxin</td>
			<td style="width:131px;">Sigma</td>
			<td style="width:115px;">C-8052</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="30">
			<td height="30" style="height:30px;width:319px;">Fibronectin</td>
			<td style="width:131px;">BD</td>
			<td style="width:115px;">354008</td>
			<td style="width:283px;">Isolated from human plasma</td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:319px;">apo-Transferrin</td>
			<td style="width:131px;">Sigma</td>
			<td style="width:115px;">T-1147</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:319px;">Heparin</td>
			<td style="width:131px;">Sigma</td>
			<td style="width:115px;">H3149</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="46">
			<td height="46" style="height:46px;width:319px;">Heparan sulfate&#160; proteoglycan</td>
			<td style="width:131px;">Sigma</td>
			<td style="width:115px;">H4777</td>
			<td style="width:283px;">Isolated from basement membrane of mouse&#160; Engelbreth-Holm-Swarm tumor</td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:319px;">Collagen IV</td>
			<td style="width:131px;">Sigma</td>
			<td style="width:115px;">C5533</td>
			<td style="width:283px;">Isolated from human placenta</td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:319px;">Heat-inactivated fetal bovine serum&#160;</td>
			<td style="width:131px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:115px;">10437-028</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:319px;">D-MEM, powder</td>
			<td style="width:131px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:115px;">12800-017</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:319px;">10% formalin&#8211;PBS&#160;</td>
			<td style="width:131px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:115px;">SF100-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:319px;">Bovine type I collagen&#160;</td>
			<td style="width:131px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:115px;">A1064401</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:319px;">Trypsin-EDTA&#160;</td>
			<td style="width:131px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:115px;">MT25-052-CI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:319px;">Sodium pyruvate</td>
			<td style="width:131px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:115px;">11360-070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:319px;">Gentamicin&#160;</td>
			<td style="width:131px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:115px;">15750-060</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:319px;">Penicillin/streptomincin&#160;</td>
			<td style="width:131px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:115px;">15140-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:319px;">L-Glutamine</td>
			<td style="width:131px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:115px;">25030-081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:319px;">Hepes</td>
			<td style="width:131px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:115px;">15630-080</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:319px;">Ham&#39;s F-12</td>
			<td style="width:131px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:115px;">11765-054</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:319px;">Basal Medium Eagle</td>
			<td style="width:131px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:115px;">21010-046</td>
			<td style="width:283px;">BME</td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:319px;">RPMI-1640</td>
			<td style="width:131px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:115px;">11875-093</td>
			<td style="width:283px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:319px;">Endothelial Basal Medium</td>
			<td style="width:131px;">Lonza</td>
			<td style="width:115px;">CC-3156</td>
			<td style="width:283px;">EBM-2</td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:319px;">Endothelial cell growth supplement</td>
			<td style="width:131px;">Millipore</td>
			<td style="width:115px;">02-102</td>
			<td style="width:283px;">ECGS</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

development of a multicellular three-dimensional organotypic model of the human intestinal mucosa grown under microgravity

Eftersom celler som växer i en tredimensionell (3-D) miljö har potential att överbrygga många luckor i cellodling i 2-D miljöer (t.ex.., Flaskor eller tallrikar). I själva verket är det allmänt erkänt att celler odlade i flaskor eller rätter tenderar att de-differentiera och förlora specialiserade funktioner i vävnader från vilka de härstammar. För närvarande finns det i huvudsak två typer av 3-D systems kultur där cellerna sås i ställningar som härmar den nativa extracellulära matrisen (ECM): (a) statiska modeller och (b) modeller med hjälp bioreaktorer. Det första genombrottet var de statiska 3-D-modeller. 3D-modeller med hjälp av bioreaktorer såsom roterande vägg kärl (RWV) bioreaktorer är en senare utveckling. Det ursprungliga konceptet av RWV bioreaktorer utvecklades vid NASA: s Johnson Space Center i början av 1990-talet och tros att övervinna begränsningarna av statiska modeller såsom utveckling av hypoxiska, nekrotiska kärnor. De RWV bioreaktorer kan kringgå thär problem genom att tillhandahålla fluiddynamik som tillåter effektiv diffusion av näringsämnen och syre. Dessa bioreaktorer består av en rotator bas som tjänar till att uppbära och rotera två olika format av odlingskärl som skiljer sig genom sin typ luftning källa: (1) Långsam Svarvsido Vessels (STLVs) med en koaxiell oxygenator i centrum, eller (2 ) högt sidoförhållande Fartyg (HARVs) med syresättning via en platt, silikongummi gasöverföring membran. Dessa fartyg tillåter effektiv överföring gas samtidigt undvika bubbelbildning och åtföljande turbulens. Dessa villkor resulterar i laminärt flöde och minimal skjuvkraft som modeller reducerade vikt (mikrogravitation) i odlingskärlet. Här beskriver vi utvecklingen av en multicellulär 3-D organotypisk modell av det mänskliga tarmslemhinnan som består av en intestinal epitelcellinje och primära humana lymfocyter, endotelceller och fibroblaster som odlats under mikrogravitation som tillhandahålls av RWV bioreaktorn. &lt;/ P&gt;

<html> Tidigare har vi konstruerat en multicellulär 3-D organotypisk modell av det mänskliga tarmslemhinnan som består av en intestinal epitelcellinje och primära humana lymfocyter, endotelceller och fibroblaster som odlats under mikrogravitation betingelser 24 (Figur 1). Fibroblaster och endotelceller var inbäddade i en kollagen I matris berikad med ytterligare gut basalmembranproteiner 45 (ie., Laminin, kollagen IV, fibronektin och he...

Watch this Scientific Journal Video about Development of a Multicellular Three-dimensional Organotypic Model of the Human Intestinal Mucosa Grown Under Microgravity at JoVE.com

Development of a Multicellular Three-dimensional Organotypic Model of the Human Intestinal Mucosa Grown Under Microgravity

Celler som växer i en tredimensionell (3-D) miljö representerar en markant förbättring jämfört med cellodling i 2-D-miljöer (t.ex. flaskor eller rätter). Här beskriver vi utvecklingen av en multicellulär 3-D organotypisk modell av det mänskliga tarmslemhinnan odlas under mikrogravitation som tillhandahålls av roterande-vägg-kärl (RWV) bioreaktorer.

Utveckling av en multicellulär Tredimensionell Organotypiska modell av det mänskliga tarmslemhinnan odlade under mikrogravitation

Because cells growing in a three-dimensional (3-D) environment have the potential to bridge many gaps of cell cultivation in 2-D environments (e.g., ...

The overall goal of this procedure is to describe the development of a multi-cellular 3-D organotypic model of the human intestinal mucosa cultured under micro-gravity provided by rotating wall vessel bioreactors. This method has a wide range potential as a tool for discovery in both health and disease. Including interactions with pathogens, antigen trafficking and the inflammatory processes.The main advantages of this technique are the mimicking of the phenotypic diversity of the cat and the use of the D-12 vessel bioreactors that allow efficient diffusion of nutrients and oxygen. Start by unscrewing the cap from the fill port of the culture vessel and adding 50 milliliters of our PMI. Once the vessel is full, replace the cap and wipe any spilled medium with 70%ethanol.Allow the vessel to incubate for at least 15 minutes to overnight at room temperature. When ready to continue, use the fill port to discard the culture medium and add 30 milliliters of the 3-D culture medium to the vessel. Replace the cap on the fill port and again, wipe up any spilled medium with 70%ethanol.Remove near confluent flasks containing human umbilical vein endothelial cells and human colonic fibroblasts from the incubator and wash them twice with PBS. Then, detach the cells by covering them using a 0.25%trypsin solution with 0.05%trypsin EDTA. Once the cells detach, collect them in a 50 milliliter tube preloaded with 30 milliliters of DMEM containing 30%FBS.Centrifuge the tube for 10 minutes to pellet the cells. Then, re-suspend the cells in 30 milliliters of DMEM containing 30%FBS. Next, dilute 20 microliters of the re-suspended cells with 20 micro-liters of trypan blue dye.Load the hemocytometer with the cell mixture and count the concentration of viable cells. Then, re-suspend each cell type at 50 to 80 million cells per milliliter in DMEM containing 30%FBS. First, place the appropriate number of culture inserts into the wells of a six well plate.Next, prepare the collagen mixture by first adding 10x DMEM, 10x Reconstitution Media, 200 millimolar L-glutamine and heat inactivated FBS to a 50 milliliter conical tube. Then add bovine collagen type one, laminin, collagen type four, fibronectin, heparin sulfate proteoglycan and finally add sodium hydroxide to neutralize the solution's pH. If at any time the mixture develops a yellowish colored acidic appearance, add a few drops of sterile 1 normal sodium hydroxide to neutralize the mixture.Close the tube and mix the solution by inverting it several times while avoiding bubble formation. When not mixing, keep the solution on ice to prevent it from polymerizing. Once mixed, add the cell suspensions to the collagen preparation and mix the tubes by gently inverting the tubes several times to avoid bubble formation.Then place them back on the ice. Add four to five milliliters of the cell containing collagen solution into each insert and allow the collagen to gel in the hood with little or no movement for one hour. After one hour, transfer the six well plate to an incubator for one to two additional hours.Next, return the plate to the tissue culture hood and use a pair of sterile forceps and a scalpel to aseptically cut the membrane from the insert. Detach the cell containing gel from the membrane and then cut the detached gel into small squares. Add the small cell containing collagen squares into one of the pre-filled 50 milliliter vessels using the fill port.Next prepare a suspension of HCT-8 human epithelial cells as described in the accompanying text protocol. Re-suspend the cells at a concentration of 10 million cells per milliliter in DMEM containing 30%FBS. Then, add one milliliter of the HCT-8 cell suspension into the 50 milliliter vessel using its fill port.After adding the cells, add an additional 20 milliliters of 3-D culture medium into the vessel so that it is nearly full. Replace the cap and wet the lip of the fill port with 70%ethanol. Next, place a five milliliter syringe containing three to four milliliters of 3-D culture medium into one port of the vessel and an empty five milliliter syringe in the other port.Remove any visible bubbles by pulling into the empty syringe while approximately the same volume of medium is injected through the other syringe into the vessel. With all of the air now removed, place the vessels in the bioreactor, turn on the power and set the speed at 13 to 14 rotations per minute. Adjust the speed as necessary to prevent the cells from contacting the vessel walls.Culture the cells under micro-gravity and change the culture medium every three to four days. To change the media, use the dual syringe method to replace approximately 30 milliliters of the used medium with fresh 3-D culture medium. After three to five days in culture, isolate peripheral blood mononuclear cells as described in the accompanying text protocol.Then remove the vessel from the bioreactor and add approximately 20 million cells consisting of lymphocytes and monocytes to the vessels through the fill port. Place the vessels back in the bioreactor and culture for an additional four to six days. Around day nine of the culture, add an additional 20 million cells consisting of lymphocytes and monocytes into the vessel and continue the cultures for up to 12 additional days.At the end of the experiment, use a transfer pipette to harvest each small gel fragment, now called a construct, and place them into the wells of a six well plate containing 10 milliliters of 10%formalin buffer. Fix the constructs for three hours at room temperature and then proceed with standard histological embedding, sectioning and staining protocols. The methods presented in this video produce a multi-cellular 3-D organotypic model of the human intestinal mucosa.In micro-gravity culture, cells become well differentiated and form ordered, villus-like features by day 20. Once mastered, this technique can be done in six hours if it is performed properly. While attempting this procedure, it's important to remember to adhere to good cell culture guidelines.It is crucial to systematically control cells for viability, mycoplasma contamination and changes in cell growth behavior. Following this procedure, other methods like immunohistochemistry can be performed in order to identify markers of lineage and cell differentiation. After watching this video, you should have a good understanding of how to develop a multi-cellular 3-D organotypic model of the human intestinal mucosa cultured under micro-gravity.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

The Three-Dimensional Human Skin Reconstruct Model: a Tool to Study Normal  Skin and Melanoma Progression

Den tredimensionella human hud Rekonstruera Modell: ett verktyg för att studera normal hud och melanom Progression

Most in vitro studies in experimental skin biology have been done in 2-dimensional (2D) monocultures, while accumulating evidence suggests that cells ...

Planar and Three-Dimensional Printing of Conductive Inks

Plana och tredimensionella Tryckning av ledande bläck

Printed electronics rely on low-cost, large-area fabrication routes to create flexible or multidimensional electronic, optoelectronic, and biomedical ...

A Novel Three-dimensional Flow Chamber Device to Study Chemokine-directed Extravasation of Cells Circulating under Physiological Flow Conditions

A Novel Tredimensionell strömningskammare Device att studera Chemokine-riktad Extravasering av celler som cirkulerar under fysiologiska flödesförhållanden

Extravasation of circulating cells from the bloodstream plays a central role in many physiological and pathophysiological processes, including stem cell ...

Investigating the Three-dimensional Flow Separation Induced by a Model Vocal Fold Polyp

Undersöka den tredimensionella flödesseparationen inducerad av en modell vokal vikpolyp

The fluid-structure energy exchange process for normal speech has been studied extensively, but it is not well understood for pathological conditions. ...

Human Cartilage Tissue Fabrication Using Three-dimensional Inkjet Printing Technology

Human Brosk Tissue Fabrication Använda Tredimensionell Inkjet Printing Technology

Bioprinting, which is based on thermal inkjet printing, is one of the most attractive enabling technologies in the field of tissue engineering and ...

Analysis of Cell Migration within a Three-dimensional Collagen Matrix

Analys av Cell Migration inom en tredimensionell kollagenmatris

The ability to migrate is a hallmark of various cell types and plays a crucial role in several physiological processes, including&#160;embryonic ...

Generation of a Three-dimensional Full Thickness Skin Equivalent and Automated Wounding

Generering av ett tredimensionellt Full Tjocklek hudekvivalent och automatiserade sårar

In vitro models are a cost effective and ethical alternative to study cutaneous wound healing processes. Moreover, by using human cells, these models ...

A Net Mold-based Method of Scaffold-free Three-Dimensional Cardiac Tissue Creation

En netto mögel-baserade metod byggnadsställning-fri tredimensionella hjärtvävnad skapelsens

This protocol describes a novel and easy net mold-based method to create three-dimensional (3-D) cardiac tissues without additional scaffold material. ...

Lab-on-a-CD Platform for Generating Multicellular Three-dimensional Spheroids

Lab-på-en-CD plattform för att generera Multicellulära tredimensionell spheroids

A three-dimensional spheroid cell culture can obtain more useful results in cell experiments because it can better simulate cell microenvironments of the ...

Preclinical Cardiac Electrophysiology Assessment by Dual Voltage and Calcium Optical Mapping of Human Organotypic Cardiac Slices

Preklinisk hjärtelektrofysiologisk bedömning av dubbel spänning och kalciumoptisk kartläggning av mänskliga organotypiska hjärtskivor

Human cardiac slice preparations have recently been developed as a platform for human physiology studies and therapy testing to bridge the gap between ...