Name: generation of parabiotic zebrafish embryos by surgical fusion of developing blastulae
Uploaded: 2016-06-11T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Generation of Parabiotic Zebrafish Embryos by Surgical Fusion of Developing Blastulae at JoVE.com

We thank Julie R. Perlin for helpful comments on the manuscript. D.I.S. is supported by grants from the American Society of Hematology, the Cooley's Anemia Foundation, and the NIH (K01DK085217 and R03DK100672). E.J.H. is a Howard Hughes Medical Institute Fellow of the Helen Hay Whitney Foundation. B.L. is a Howard Hughes Medical Institute Medical Research Fellow. B.W.B. is supported by an Irvington Fellowship from the Cancer Research Institute and a Young Investigator Award from the Conquer Cancer Foundation of ASCO. L.I.Z. is supported by grants from the NIH (R01CA103846, P01HL032262, and R01HL04880), Taub Foundation for MDS Research, Harvard Stem Cell Institute, and is an investigator of the Howard Hughes Medical Institute.

פרוטוקול זה אושר על ידי הטיפול בבעלי החיים החולים לילדים בבוסטון ועדת השימוש. פרוטוקול זה הוא שונה משייט שפורסם בעבר 15. 1. הכנת ריאגנטים (ימים או שבועות מראש) <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כן 1.5% מנות agarose מ?...

<ol>
	<li>Zon, L. I., Orkin, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hematopoiesis:+An+evolving+paradigm+for+stem+cell+biology.">Hematopoiesis: An evolving paradigm for stem cell biology.</a> Cell. 132 (4), 631-644 (2008).</li><li>Dzierzak, E., Speck, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Of+lineage+and+legacy:+the+development+of+mammalian+hematopoietic+stem+cells.">Of lineage and legacy: the development of mammalian hematopoietic stem cells.</a> Nat Immunol. 9 (2), 129-136 (2008).</li><li>Li, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epoxyeicosatrienoic+acids+enhance+embryonic+haematopoiesis+and+adult+marrow+engraftment.">Epoxyeicosatrienoic acids enhance embryonic haematopoiesis and adult marrow engraftment.</a> Nature. 523 (7561), 468-471 (2015).</li><li>Tam, P. P., Rossant, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+embryonic+chimeras:+tools+for+studying+mammalian+development.">Mouse embryonic chimeras: tools for studying mammalian development.</a> Development. 130 (25), 6155-6163 (2003).</li><li>Tanaka, M., Gertsenstein, M., Rossant, J., Nagy, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mash2+acts+cell+autonomously+in+mouse+spongiotrophoblast+development.">Mash2 acts cell autonomously in mouse spongiotrophoblast development.</a> Dev. Biol. 190 (1), 55-65 (1997).</li><li>Morin-Kensicki, E. M., Faust, C., LaMantia, C., Magnuson, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+and+tissue+requirements+for+the+gene+eed+during+mouse+gastrulation+and+organogenesis.">Cell and tissue requirements for the gene eed during mouse gastrulation and organogenesis.</a> Genesis. 31 (4), 142-146 (2001).</li><li>Ho, R. K., Kane, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-autonomous+action+of+zebrafish+spt-1+mutation+in+specific+mesodermal+precursors.">Cell-autonomous action of zebrafish spt-1 mutation in specific mesodermal precursors.</a> Nature. 348 (6303), 728-730 (1999).</li><li>Parker, L., Stainier, D. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-autonomous+and+non-autonomous+requirements+for+the+zebrafish+gene+cloche+in+hematopoiesis.">Cell-autonomous and non-autonomous requirements for the zebrafish gene cloche in hematopoiesis.</a> Development. 126 (12), 2643-2651 (1999).</li><li>Liao, E. C., Trede, N. S., Ransom, D., Zapata, A., Kieran, M., Zon, L. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-cell+autonomous+requirement+for+the+bloodless+gene+in+primitive+hematopoiesis+of+zebrafish.">Non-cell autonomous requirement for the bloodless gene in primitive hematopoiesis of zebrafish.</a> Development. 3 (3), 649-659 (2002).</li><li>Kamran, P., Sereti, K. I., Zhao, P., Ali, S. R., Weissman, I. L., Ardehali, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parabiosis+in+mice:+a+detailed+protocol.">Parabiosis in mice: a detailed protocol.</a> J Vis Exp. (80), (2013).</li><li>Wagers, A. J., Sherwood, R. I., Christensen, J. L., Weissman, I. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Little+evidence+for+developmental+plasticity+of+adult+hematopoietic+stem+cells.">Little evidence for developmental plasticity of adult hematopoietic stem cells.</a> Science. 297 (5590), 2256-2259 (2002).</li><li>Hervey, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+lesions+in+the+hypothalamus+in+parabiotic+rats.">The effects of lesions in the hypothalamus in parabiotic rats.</a> J. Physiol. 145 (2), 336-352 (1959).</li><li>Goldman, D. C., Bailey, A. S., Pfaffle, D. L., Al Masri, A., Christian, J. L., Fleming, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=BMP4+regulates+the+hematopoietic+stem+cell+niche.">BMP4 regulates the hematopoietic stem cell niche.</a> Blood. 114 (20), 4393-4401 (2009).</li><li>Dieterlen-Li&#232;vre, F., Martin, C., Beaupain, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quail-chick+chimaeras+and+parabionts:+several+new+models+to+investigate+early+developmental+events+in+the+haemopoietic+system.">Quail-chick chimaeras and parabionts: several new models to investigate early developmental events in the haemopoietic system.</a> Folia Biol (Praha). 25 (5), 293-295 (1979).</li><li>Demy, D. L., Ranta, Z., Giorgi, J. M., Gonzalez, M., Herbomel, P., Kissa, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generating+parabiotic+zebrafish+embryos+for+cell+migration+and+homing+studies).">Generating parabiotic zebrafish embryos for cell migration and homing studies).</a> Nat. Methods. 10 (3), 256-258 (2013).</li><li>Anderson, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hematopoietic+stem+cells+develop+the+absence+of+endothelial+cadherin+5+expression.">Hematopoietic stem cells develop the absence of endothelial cadherin 5 expression.</a> Blood. 126 (26), 2811-2820 (2015).</li><li>Murayama, E., Sarris, M., Redd, M., Le Guyader, D., Vivier, C., Horsley, W., Trede, N., Herbomel, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NACA+deficiency+reveals+the+crucial+role+of+somite-derived+stromal+cells+in+haematopoietic+niche+formation.">NACA deficiency reveals the crucial role of somite-derived stromal cells in haematopoietic niche formation.</a> Nat Commun. 28 (6), 8375 (2015).</li><li>Shah, D. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+Atpif1+regulates+haem+synthesis+in+developing+erythroblasts.">Mitochondrial Atpif1 regulates haem synthesis in developing erythroblasts.</a> Nature. 491 (7425), 608-612 (2012).</li><li>Tamplin, O. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hematopoietic+stem+cell+arrival+triggers+dynamic+remodeling+of+the+perivascular+niche.">Hematopoietic stem cell arrival triggers dynamic remodeling of the perivascular niche.</a> Cell. 160 (1-2), 241-252 (2015).</li><li>Ad&#225;m, A., B&#225;rtfai, R., Lele, Z., Krone, P. H., Orb&#225;n, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heat-inducible+expression+of+a+reporter+gene+detected+by+transient+assay+in+zebrafish.">Heat-inducible expression of a reporter gene detected by transient assay in zebrafish.</a> Exp. Cell Res. 256 (1), 282-290 (2000).</li></ol>

היתוך Parabiotic כבר כלי רב עוצמה כדי לחקור תפקודים תאיים של גנים מועמדים בדגמים עוברים חומוס בעכברים בוגרים 10-14. לאחרונה, שיטה היתוך blastula תוארה להפקת 15 עוברי דג הזברה סיאמיים. בפרוטוקול הנוכחי, הדרכות וידאו מבוססות משמשות כדי להדגים וטוב יותר לתאר את המתודולו...

יצירת פסיפסים גנטיים (מפלצות) בין wild-type ובעלי החיים מהונדסים גנטיים היא אסטרטגיה ומבוססת וקלסי לחקירת תא-מהותי לעומת פונקציות תא-חיצוני של גני המועמדים 1-6. Blastula השתלת דג הזברה נוצלה נרחב כדי לייצר עובר chimeric ללימודים של תא-אוטונומיה 7-9. בהתאם הרקמה של עניין, לעומת זאת, זה יכול להיות מאתגר למקד תאים תורמים כצפוי לרקמה הרצויה (למשל, דם) 1-3, 7-9. גנטיקאים עכבר זמן מנוצלים שיטות כירורגיות parabiotic ליצור אורגניזמים סיאמיים עם תפוצה משותפת 10-14. בגלל חי parabiotic לשתף דם משותף, אינטראקציות בין תאים שמקורם מן חי אחד עם תאים של בעלי החיים האחרים של רקע גנטי שונה ניתן ללמוד 10-16. לאחרונה, הקבוצה של כרימה Kissa באלגנטיות הפגינו את היכולת creאכלו עוברי דג הזברה סיאמיים ולאחר מכן להשתמש במערכת הזאת כדי ללמוד גזע hematopoietic ו תא אב (HSPC) ההגירה 15. בנוסף, parabiosis דג הזברה שימש לאחרונה לחקור את התפקיד של cadherin אנדותל 5 בתא גזע hematopoietic (HSC) הופעתה והגירה, 16 ו כדי ללמוד את התפקיד של תאי סטרומה בגומחה HSPC במהלך ההתפתחות דג הזברה 17. בניגוד עכברים, עוברי דג הזברה הם שקוף ולאפשר להדמיה ישירה של תאים במהלך ההתפתחות parabiotic, מה שהופך את מערכת רבת עוצמה באופן ייחודי. השירות של parabiosis דג זברה, לעומת זאת, הוא מוגבל על ידי עקום למידה תלולה, וניתוחי parabiotic על העוברים העדינים יכול להיות מאתגר מבחינה טכנית ללא הדרכה מפורטת והדגמה ויזואלית. מטרת פרוטוקול זה היא לספק סט של ברור, צעד-אחר-צעד ללוות הדרכות וידאו מבוסס על איך ליצור עוברי דג הזברה parabiotic ללימודזמני, תא-מהותי, או פונקציות חיצוני תאים של גן מועמד (ים) על ידי היתוך כירורגית לפתח blastulae. שינויים עיקריים והמלצות נוספות להישרדות parabiont הגדלה ויישומים ניסיוניים חדשים כלולים.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="686">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:433px;">Methyl cellulose</td>
			<td style="width:87px;">Sigma</td>
			<td style="width:167px;">M0387</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Individual components for E3/HCR:</td>
			<td></td>
			<td style="width:167px;">For 1L: 14,61g NaCl, 0,63g KCl, 2,43g CaCl2-2H2O, 1,99g MgSO4</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">NaCl (Sodium chloride)</td>
			<td style="width:87px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:167px;">S9888</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">KCl (Potassium chloride)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:167px;">P9541</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">CaCl2 (Calcium chloride dihydrate)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:167px;">223506</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">MgSO4 (Magnessium sulfate heptahydrate)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:167px;">230391</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Hepes (1M ) buffer solution</td>
			<td style="width:87px;">ThermoFisher</td>
			<td>15630-080</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:433px;">Name</td>
			<td style="width:87px;">Company</td>
			<td style="width:167px;">Catalog Number</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Antibiotics:</td>
			<td style="width:87px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pen/Strep</td>
			<td style="width:87px;">gibco by Life technologies</td>
			<td>15140-120</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ampicilin sodium salt</td>
			<td style="width:87px;">Sigma Life Science</td>
			<td style="width:167px;">A0166</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Kanamycin sulfate from Streptomyces kanamyceticus</td>
			<td style="width:87px;">Sigma Life Science</td>
			<td style="width:167px;">K1377</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:433px;">Name of Reagent/ Equipment</td>
			<td style="width:87px;">Company</td>
			<td style="width:167px;">Catalog Number</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">50 mg/ml Pronase from Streptomyces griseus</td>
			<td style="width:87px;">Roche</td>
			<td style="width:167px;">11459643001</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">capillary glass used for needles (Capillary Glass &#38; Filaments)</td>
			<td style="width:87px;">Sutter Instrument</td>
			<td style="width:167px;">ITEM#: BF 100-50-10</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Teasing needles with wooden handles</td>
			<td style="width:87px;">Fisher Scientific</td>
			<td>S07894</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Glass Pasteur pipettes</td>
			<td style="width:87px;">Fisherbrand</td>
			<td style="width:167px;">13-678-20A</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">10 mL pipette pump (green) (Pipette Pump Pipettor)</td>
			<td style="width:87px;">Novatech International</td>
			<td style="width:167px;">F37898-0000</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">100 mm diameter/ 20 mm deep plastic petri dishes (PETRI DISH, 100/20 MM, PS, CLEAR, WITH VENTS, 
			HEAVY DESIGN, 15 PCS./BAG )</td>
			<td>Greiner Bio-one</td>
			<td>664102</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dextran, Cascade Blue, 10,000 MW, Anionic, Lysine Fixable</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>D-1976</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">PTU. working stock is 0.003% (50X is 0.15%). for 500ml, 0.75 g N-Phenylthiourea</td>
			<td style="width:87px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:167px;">P7629</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tricaine (powder) (Tricaine Methanesulfonato, Tricaine-S)</td>
			<td style="width:87px;">Western Chemical Inc</td>
			<td style="width:167px;">MS 222</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">LMP agarose (Ultrapure LMP agarose)</td>
			<td style="width:87px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:167px;">16520100</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">plastic transfer pipette (just the wide ended one I think)</td>
			<td style="width:87px;">Fisherbrand</td>
			<td style="width:167px;">137115AM</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Glass-bottom 6-well plates used for imaging</td>
			<td style="width:87px;">MatTek</td>
			<td>P06G1.5-20-F</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">plastic western gel loading tip fixed on the end of a wood-handled dissecting needle (GELoader tips)</td>
			<td style="width:87px;">Eppendorf</td>
			<td style="width:167px;">22351656</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td colspan="2" height="21" style="height:21px;">glass cover slips, slides and vacuum grease if mounting for an upright microscope:</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:433px;">Vaccum grease ( Dow Corning&#174; high-vacuum silicone grease 
			colorless, weight 5.3 oz (tube) )</td>
			<td style="width:87px;">Dow Corning</td>
			<td>Z273554</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:433px;">Glass cover slips</td>
			<td style="width:87px;">Corning Life Sciences</td>
			<td style="width:167px;">2960-244</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

generation of parabiotic zebrafish embryos by surgical fusion of developing blastulae

parabiosis כירורגי של שתי חיות של רקע גנטי שונה יוצר תרחיש ייחודי ללמוד תא פנימי לעומת תפקידי תא-חיצוני עבור גני מועמדים של עניין, התנהגויות נדידה של תאים, אותות מופרשים הגדרות גנטיות מובהקות. בגלל חי parabiotic לשתף תפוצה משותפת, כל דם או גורם מובל דם חיה אחת יתחלף עם השותף שלה, ולהיפך. לכן, תאים וגורמים מולקולריים מרקע גנטי אחד ניתנים ללמוד בהקשר של רקע גנטי שני. Parabiosis של עכברים בוגרים כבר נעשה שימוש נרחב להזדקנות מחקר, סרטן, סוכרת, השמנת יתר, והתפתחות המוח. לאחרונה, parabiosis של עוברי דג הזברה נעשה שימוש כדי ללמוד את הביולוגיה ההתפתחותית של hematopoiesis. בניגוד לעכברים, האופי השקוף של עוברי דג זברה מתיר הדמיה הישירה של תאים בהקשר parabiotic, מה שהופך אותו שיטה חזקה באופן ייחודי על חקירת fמנגנונים תאיים ומולקולריים undamental. השירות של טכניקה זו, לעומת זאת, הוא מוגבל על ידי עקומת למידה תלולה להפקת עוברי דג הזברה parabiotic. פרוטוקול זה מספק שיטת צעד אחר צעד כיצד בניתוח פתיל blastulae של שני עוברי דג זברה של רקע גנטי שונה לחקור את התפקיד של גני מועמדים מעניינים. בנוסף, עוברי דג הזברה parabiotic סובלניים הלם חום, מה שהופך שליטה הזמני של ביטוי גנים אפשריים. שיטה זו אינה דורשת הגדרה משוכללת בעל יישומים רחבים ללימוד נדידת תאים, מפרט גורל, והבחנת in vivo במהלך התפתחות עוברית.

בקנה אחד עם מחקרים שפורסמו בעבר 15, היתוך parabiotic מוצלח של עוברי דג הזברה תלוי staging והכיוון של שני עוברים ואת הריכוז של methylcellulose. עם רק כמה כלים פשוטים זולים, blastulae בפיתוח התמזגו בניתוח נוצרו שצמחו לעוברי parabiotic בעלי תפוצה משותפת. כלים אלה כללו פיפטה...

Watch this Scientific Journal Video about Generation of Parabiotic Zebrafish Embryos by Surgical Fusion of Developing Blastulae at JoVE.com

Generation of Parabiotic Zebrafish Embryos by Surgical Fusion of Developing Blastulae

This protocol provides step-by-step instruction on how to generate parabiotic zebrafish embryos of different genetic backgrounds. When combined with the unparalleled imaging capabilities of the zebrafish embryo, this method provides a uniquely powerful means to investigate cell-autonomous versus non-cell-autonomous functions for candidate genes of interest.

הדור של Parabiotic דג הזברה עוברים ידי Fusion כירורגי של פיתוח Blastulae

Surgical parabiosis of two animals of different genetic backgrounds creates a unique scenario to study cell-intrinsic versus cell-extrinsic roles for ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Mechanical Vessel Injury in Zebrafish Embryos

פגיעה כלי מכאנית בעוברי דג הזברה

Zebrafish (Danio rerio) embryos have proven to be a powerful model for studying a variety of developmental and disease processes.  External development ...

Isolation and Characterization of Single Cells from Zebrafish Embryos

בידוד ואפיון של תאים בודדים מעוברים דג הזברה

The zebrafish (Danio rerio) is a powerful model organism to study vertebrate development. Though many aspects of zebrafish embryonic development have been ...

Generation of Induced Pluripotent Stem Cells from Human Melanoma Tumor-infiltrating Lymphocytes

דור של תאי גזע מושרים ממלנומה האדם שחדר-גידול לימפוציטים

Adoptive transfer of ex vivo expanded autologous tumor-infiltrating lymphocytes (TILs) can mediate durable and complete responses in significant subsets ...

Affinity Labeling Detection of Endogenous Receptors from Zebrafish Embryos

איתור תיוג זיקה של אנדוגני רצפטורים מעוברים דג הזברה

By combining the powers of Affinity Labeling and Immunoprecipitation (AFLIP), a technique for the detection of low abundance receptors in zebrafish ...

Ploidy Manipulation of Zebrafish Embryos with Heat Shock 2 Treatment

מניפולציה ploidy של עוברי דג הזברה עם חום 2 הלם טיפול

Manipulation of ploidy allows for useful transformations, such as diploids to tetraploids, or haploids to diploids. In the zebrafish Danio rerio, ...

Biosensing Motor Neuron Membrane Potential in Live Zebrafish Embryos

Biosensing מוטורית נוירון פוטנציאל ממברנה עוברי דג הזברה חיים

The protocols described here are designed to allow researchers to study cell communication without altering the integrity of the environment in which the ...

Induction of Hypoxia in Living Frog and Zebrafish Embryos

אינדוקציה של היפוקסיה צפרדע חיה דג הזברה עוברי

Here, we introduce a novel system for hypoxia induction, which we developed to study the effects of hypoxia in aquatic organisms such as frog and ...

Development of an In Vitro Assay to Quantitate Hematopoietic Stem and Progenitor Cells (HSPCs) in Developing Zebrafish Embryos

Development of an In Vitro Assay to Quantitate Hematopoietic Stem and Progenitor Cells HSPCs in Developing Zebrafish Embryos

התפתחות במבחנה הנועד Quantitate גזע Hematopoietic, קדמון תאים (HSPCs) בפיתוח עוברי דג זברה

Hematopoiesis is an essential cellular process in which hematopoietic stem and progenitor cells (HSPCs) differentiate into the multitude of different cell ...

Visualization of Cellular Electrical Activity in Zebrafish Early Embryos and Tumors

ויזואליזציה של הפעילות החשמלית הסלולר עוברי מוקדם דג זברה, גידולים

Bioelectricity, endogenous electrical signaling mediated by ion channels and pumps located on the cell membrane, plays important roles in signaling ...

Surgical Size Reduction of Zebrafish for the Study of Embryonic Pattern Scaling

הפחתת גודל כירורגי של דג Zebrafish לחקר שינוי גודל של תבנית עובריים

In the developmental process, embryos exhibit a remarkable ability to match their body pattern to their body size; their body proportion is maintained ...