Name: an efficient method to obtain dedifferentiated fat cells
Uploaded: 2016-07-15T13:00:00
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This research was supported in part by Program for Creating Start-ups from Advanced Research and Technology (START Program) from the Japan Society for the Promotion of Science (ST261006IP, TM) and by Program for the Strategic Research Foundation at Private Universities (2014-2019) (S1411018, TM) from the Ministry of Education, Sports, Science and Technology.

मानव वसा के नमूने प्लास्टिक सर्जरी, यूरोलॉजी, बाल चिकित्सा सर्जरी और निहोन विश्वविद्यालय इताबाशी अस्पताल (टोक्यो, जापान) के आर्थोपेडिक सर्जरी विभाग में सर्जरी के दौर से गुजर रोगियों से प्राप्त किया ग...

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	<li>Lanzoni, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Concise+review:+clinical+programs+of+stem+cell+therapies+for+liver+and+pancreas.">Concise review: clinical programs of stem cell therapies for liver and pancreas.</a> Stem Cells. 31 (10), 2047-2060 (2013).</li><li>de Girolamo, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+stem/stromal+cells:+a+new+"cells+as+drugs"+paradigm.+Efficacy+and+critical+aspects+in+cell+therapy.">Mesenchymal stem/stromal cells: a new "cells as drugs" paradigm. Efficacy and critical aspects in cell therapy.</a> Curr. Pharm. Des. 19 (13), 2459-2473 (2013).</li><li>Lindroos, B., Suuronen, R., Miettinen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+potential+of+adipose+stem+cells+in+regenerative+medicine.">The potential of adipose stem cells in regenerative medicine.</a> Stem Cell. Rev. 7 (2), 269-291 (2011).</li><li>Yan, J., Tie, G., Xu, T. Y., Cecchini, K., Messina, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+stem+cells+as+a+treatment+for+peripheral+arterial+disease:+current+status+and+potential+impact+of+type+II+diabetes+on+their+therapeutic+efficacy.">Mesenchymal stem cells as a treatment for peripheral arterial disease: current status and potential impact of type II diabetes on their therapeutic efficacy.</a> Stem Cell. Rev. 9 (3), 360-372 (2013).</li><li>Ringden, O., Keating, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+stromal+cells+as+treatment+for+chronic+GVHD.">Mesenchymal stromal cells as treatment for chronic GVHD.</a> Bone Marrow Transplant. 46 (2), 163-164 (2011).</li><li>Matsumoto, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mature+adipocyte-derived+dedifferentiated+fat+cells+exhibit+multilineage+potential.">Mature adipocyte-derived dedifferentiated fat cells exhibit multilineage potential.</a> J. Cell. Physiol. 215 (1), 210-222 (2008).</li><li>Lessard, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+human+adipose+stem+cells+through+dedifferentiation+of+mature+adipocytes+in+ceiling+cultures.">Generation of human adipose stem cells through dedifferentiation of mature adipocytes in ceiling cultures.</a> J. Vis. Exp. (97), (2015).</li><li>Lessard, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+dedifferentiating+human+mature+adipocytes+from+the+visceral+and+subcutaneous+fat+compartments:+fibroblast-activation+protein+alpha+and+dipeptidyl+peptidase+4+as+major+components+of+matrix+remodeling.">Characterization of dedifferentiating human mature adipocytes from the visceral and subcutaneous fat compartments: fibroblast-activation protein alpha and dipeptidyl peptidase 4 as major components of matrix remodeling.</a> PLoS One. 10 (3), 0122065 (2015).</li><li>Peng, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phenotypic+and+Functional+Properties+of+Porcine+Dedifferentiated+Fat+Cells+during+the+Long-Term+Culture+In+Vitro.">Phenotypic and Functional Properties of Porcine Dedifferentiated Fat Cells during the Long-Term Culture In Vitro.</a> Biomed. Res. Int. 2015, 673651 (2015).</li><li>Kono, S., Kazama, T., Kano, K., Harada, K., Uechi, M., Matsumoto, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phenotypic+and+functional+properties+of+feline+dedifferentiated+fat+cells+and+adipose-derived+stem+cells.">Phenotypic and functional properties of feline dedifferentiated fat cells and adipose-derived stem cells.</a> Vet. J. 199 (1), 88-96 (2014).</li><li>Bellin, M., Marchetto, M. C., Gage, F. H., Mummery, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induced+pluripotent+stem+cells:+the+new+patient.">Induced pluripotent stem cells: the new patient.</a> Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 13 (11), 713-726 (2012).</li></ol>

परिपक्व adipocytes है कि इन विट्रो dedifferentiation में से गुजरना है, एक प्रक्रिया छत संस्कृति के रूप में जाना जाता है, एक अधिक आदिम phenotype पर वापस लौटने और proliferative योग्यता हासिल कर सकता है। इन कोशिकाओं के रूप में dediffer...

सेल थेरेपी और ऊतक इंजीनियरिंग पुनर्योजी चिकित्सा 1-5 के क्षेत्र में गर्म विषय हैं। इन चिकित्सकीय रूपरेखा महान वादा पकड़ जबकि, कई तकनीकी मुद्दों वर्तमान में अपने नैदानिक ​​इस्तेमाल में बाधा। इस संबंध में आईपीएस कोशिकाओं की पीढ़ी के रूप में, सभी ऊतक इंजीनियरिंग के उपचारों बाहरी जीन transductions की स्वतंत्र कोशिकाओं क्रम में मरीज की सुरक्षा बनाए रखने के लिए उत्पादन होगा। तदनुसार, हम पहले समूह सफलतापूर्वक मानव DFAT कोशिकाओं 6 का उत्पादन करने के लिए थे। कई अन्य अनुसंधान समूहों के बाद से स्तनधारी मूल 7-9 की DFAT कोशिकाओं को उत्पन्न करने के लिए हमारे विधि को अपनाया है, आगे हमारे मॉडल की उपयोगिता पर प्रकाश डाला। कई अध्ययनों के दौरान, हमने पाया है कि सेल संस्कृति पर्यावरण की गुणवत्ता सेल के माध्यम से सामग्री का समायोजन करके संशोधित किया जा सकता है। यह निष्कर्ष DFAT कोशिकाओं के उत्पादन की सफलता की दर में वृद्धि करने के लिए नेतृत्व और सेल की गुणवत्ता में सुधार हुआ है; दोनों में महत्वपूर्ण कारकोंकुशलता से भविष्य चिकित्सीय परीक्षण के लिए कोशिकाओं को पैदा होता है। इस संबंध में, एक बेहतर DFAT संस्कृति के माध्यम से (डीसीएम, एक माध्यम के समान सेल माध्यम है, जो पुनः संयोजक मानव इंसुलिन, सीरम albumin, एल glutamic एसिड, कई फैटी एसिड होता है, और कोलेस्ट्रॉल स्टेम mesenchymal के लिए) और DFAT सेल पीढ़ी के लिए एक विधि में और प्रसार विकसित किया गया था (डीसीएम की सामग्री के बारे में अधिक जानकारी के अनुरोध पर उपलब्ध है)। का उपयोग करते हुए इस विधि उच्च गुणवत्ता DFAT कोशिकाओं adipogenic, osteogenic, और chondrogenic कोशिकाओं सहित कई प्रकार की कोशिकाओं में अंतर करने की क्षमता के साथ उत्पन्न किया गया। कुल मिलाकर, यह मान्य सेल संस्कृति प्रोटोकॉल DFAT कोशिकाओं की गुणवत्ता को बढ़ाता है और सेल थेरेपी और ऊतक इंजीनियरिंग के नैदानिक ​​अनुप्रयोगों को बढ़ाने के लिए काफी उपयोगी हो सकता है।

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="705">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">CSTI303-MSC medium&#160;</td>
			<td style="width:143px;">CSTI</td>
			<td style="width:155px;">87-671</td>
			<td style="width:167px;">This medium is defined as DCM in the text</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:41px;width:243px;">PBS(-)</td>
			<td style="width:143px;">Wako</td>
			<td style="width:155px;">166-23555</td>
			<td style="width:167px;">It does not contain Mg2+ and Ca2+</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">DMEM medium</td>
			<td style="width:143px;">Gibco</td>
			<td style="width:155px;">11965-092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Fetal Bovine Serum</td>
			<td style="width:143px;">Sigma</td>
			<td style="width:155px;">172012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Collagenase type II</td>
			<td style="width:143px;">Sigma</td>
			<td style="width:155px;">C-6885</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Scissors</td>
			<td style="width:143px;">Takasago Medical Industry Co., Ltd</td>
			<td style="width:155px;">TKZ-F2194-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Shaker</td>
			<td style="width:143px;">TAITEC</td>
			<td style="width:155px;">Bioshaker V.BR-36</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Falcon Cell Strainer 100um Yellow</td>
			<td style="width:143px;">CORNING LIFE SCIENCES&#160;</td>
			<td style="width:155px;">DL 352360</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:243px;">Falcon 12.5cm&#178; Rectangular Canted Neck Cell Culture Flask with Blue Vented Screw Cap</td>
			<td style="width:143px;">CORNING LIFE SCIENCES&#160;</td>
			<td style="width:155px;">353107</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">18G needle</td>
			<td style="width:143px;">NIPRO</td>
			<td style="width:155px;">02-002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">20ml Syringe&#160;</td>
			<td style="width:143px;">NIPRO</td>
			<td style="width:155px;">08-753</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Z Series Coulter Counter</td>
			<td style="width:143px;">BECKMAN COULTER</td>
			<td style="width:155px;">383550</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an efficient method to obtain dedifferentiated fat cells

ऊतक इंजीनियरिंग और सेल थेरेपी महान वादा चिकित्सकीय पकड़ो। इस संबंध में, इस तरह के mesenchymal स्टेम सेल (MSCs), के रूप में multipotent कोशिकाओं, क्षतिग्रस्त अंगों को समारोह बहाल करने के लिए उपचारात्मक इस्तेमाल किया जा सकता है, निकट भविष्य में। फिर भी, MSCs और उनके आसपास के प्रवर्धन अक्षमता को अलग करने की अत्यधिक आक्रामक प्रक्रिया सहित कई तकनीकी मुद्दों, वर्तमान में इन चिकित्सकीय तौर तरीकों के संभावित नैदानिक ​​इस्तेमाल में बाधा। इस के साथ साथ, हम dedifferentiated वसा कोशिकाओं (DFAT), एमएससी की तरह कोशिकाओं की पीढ़ी के लिए एक बेहद कारगर तरीका परिचय। दिलचस्प बात यह है DFAT कोशिकाओं adipogenic, osteogenic, और chondrogenic कोशिकाओं सहित कई प्रकार की कोशिकाओं में भेदभाव किया जा सकता है। हालांकि अन्य समूहों के पहले परिपक्व वसा ऊतकों से DFAT कोशिकाओं को पैदा करने के लिए विभिन्न तरीकों का प्रस्तुत किया है, हमारे विधि हमें और अधिक कुशलता से DFAT कोशिकाओं का उत्पादन करने के लिए अनुमति देता है। इस संबंध में, हम दिखाना है कि DFAT संस्कृति के माध्यम से (डीसीएम), 20% के साथ पूरक FBS,DMEM से DFAT कोशिकाओं, 20% FBS के साथ पूरक पैदा करने में अधिक प्रभावी है। इसके अतिरिक्त, हमारे सेल संस्कृति विधि द्वारा उत्पादित DFAT कोशिकाओं कई प्रकार के ऊतकों में redifferentiated जा सकता है। जैसे, ऊतक dedifferentiation के अध्ययन के लिए एक बहुत ही रोचक और उपयोगी मॉडल प्रस्तुत किया है।

<html> इस अध्ययन में, विधि और DFAT सेल पीढ़ी के लिए टूलकिट (चित्रा 1) में सुधार हुआ था। हमारे विधि हम दोनों डीसीएम और DMEM 20% FBS (2A चित्रा) से युक्त माध्यम का उपयोग कर DFAT कोशिकाओं को उत्पन्न करने ...

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An Efficient Method to Obtain Dedifferentiated Fat Cells

We have modified the conditions for DFAT cell generation and provide herein information regarding the use of an improved growth medium for the production of these cells.

एक कारगर तरीका dedifferentiated वसा कोशिकाओं को प्राप्त करने के लिए

Tissue engineering and cell therapy hold great promise clinically. In this regard, multipotent cells, such as mesenchymal stem cells (MSCs), may be used ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Efficient Derivation of Retinal Pigment Epithelium Cells from Stem Cells

स्टेम सेल से रेटिना वर्णक उपकला कोशिकाओं के कुशल व्युत्पत्ति

No cure has been discovered for age-related macular degeneration  (AMD), the leading cause of vision loss in people over the age of 55. AMD is complex ...

An Enzymatic Method to Rescue Mesenchymal Stem Cells from Clotted Bone Marrow Samples

एक enzymatic विधि पका अस्थि मज्जा के नमूनों से mesenchymal स्टेम सेल बचाव करने के लिए

Mesenchymal stem cells (MSCs) - usually obtained from bone marrow - often require expansion culture. Our protocol uses clinical grade urokinase to degrade ...

A Quick and Efficient Method for the Purification of Endoderm Cells Generated from Human Embryonic Stem Cells

मानव भ्रूण स्टेम कोशिकाओं से उत्पन्न एण्डोडर्म कोशिकाओं की शुद्धि के लिए एक त्वरित और कारगर तरीका

The differentiation capabilities of pluripotent stem cells such as embryonic stem cells (ESCs) allow a potential therapeutic application for cell ...

Epigenetic Conversion as a Safe and Simple Method to Obtain Insulin-secreting Cells from Adult Skin Fibroblasts

एक सुरक्षित और सरल विधि वयस्क त्वचा fibroblasts से इंसुलिन स्रावित कोशिकाओं को प्राप्त करने के रूप में Epigenetic रूपांतरण

Regenerative medicine requires new, fully functional cells that are delivered to patients in order to repair degenerated or damaged tissues. When such ...

Immunomagnetic Separation of Fat Depot-specific Sca1high Adipose-derived Stem Cells (ASCs)

Immunomagnetic Separation of Fat Depot-specific Sca1high Adipose-derived Stem Cells ASCs

वसा डिपो विशेष Sca1 की immunomagnetic पृथक्करण<sup&gt; उच्च</sup&gt; वसा व्युत्पन्न स्टेम कोशिकाओं (ASCs)

The isolation of adipose-derived stem cells (ASCs) is an important method in the field of adipose tissue biology, adipogenesis, and extracellular matrix ...

Efficient Differentiation of Pluripotent Stem Cells to NKX6-1+ Pancreatic Progenitors

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Pluripotent के कुशल भेदभाव स्टेम कोशिकाओं को NKX6-1<sup&gt; +</sup&gt; अग्नाशय प्रोजेनिटर्स

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