Name: retroviral transduction of bone marrow progenitor cells to generate t-cell receptor retrogenic mice
Uploaded: 2016-07-11T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Retroviral Transduction of Bone Marrow Progenitor Cells to Generate T-cell Receptor Retrogenic Mice at JoVE.com

وأيد هذا العمل من المنح المقدمة من المعاهد الوطنية للصحة (5K22A1119151-01 و1R56DK104903-01) لملب، البرنامج التجريبي / الجدوى من مركز أبحاث مرض السكري (P30-DK079638) في BCM، JDRF 1-FAC-2014-243-AN APF، ADA وظائف المعهد العربي الأميركي في علم المناعة زمالة لMB، ووروبرت ومؤسسة جانيس ماكنير 1-15-JF-07.

بيان الأخلاق: تم بذل كل جهد ممكن للحفاظ على الانزعاج الحيوان أو الإجهاد إلى أدنى حد ممكن خلال التشعيع والوريد ذيل الحقن. وتستخدم الفئران كمصدر للخلايا في هذه التجارب. على هذا النحو ليست هناك إجراءات أو التلاعب بصرف النظر عن القتل الرحيم. سوف يتم التخلص الفئران عن طريق CO ...

<ol>
	<li>Qi, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diversity+and+clonal+selection+in+the+human+T-cell+repertoire.">Diversity and clonal selection in the human T-cell repertoire.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 111, 13139-13144 (2014).</li><li>Zarnitsyna, V. I., Evavold, B. D., Schoettle, L. N., Blattman, J. N., Antia, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estimating+the+diversity,+completeness,+and+cross-reactivity+of+the+T+cell+repertoire.">Estimating the diversity, completeness, and cross-reactivity of the T cell repertoire.</a> Frontiers in immunology. 4, 485 (2013).</li><li>Kisielow, P., Bluthmann, H., Staerz, U. D., Steinmetz, M., von Boehmer, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tolerance+in+T-cell-receptor+transgenic+mice+involves+deletion+of+nonmature+CD4+8++thymocytes.">Tolerance in T-cell-receptor transgenic mice involves deletion of nonmature CD4+8+ thymocytes.</a> Nature. 333, 742-746 (1988).</li><li>Hogquist, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=T+cell+receptor+antagonist+peptides+induce+positive+selection.">T cell receptor antagonist peptides induce positive selection.</a> Cell. 76, 17-27 (1994).</li><li>Verdaguer, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+autoimmune+diabetes+in+monoclonal+T+cell+nonobese+diabetic+mice.">Spontaneous autoimmune diabetes in monoclonal T cell nonobese diabetic mice.</a> J Exp Med. 186, 1663-1676 (1997).</li><li>Katz, J. D., Wang, B., Haskins, K., Benoist, C., Mathis, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Following+a+diabetogenic+T+cell+from+genesis+through+pathogenesis.">Following a diabetogenic T cell from genesis through pathogenesis.</a> Cell. 74, 1089-1100 (1993).</li><li>Pauza, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=T-cell+receptor+transgenic+response+to+an+endogenous+polymorphic+autoantigen+determines+susceptibility+to+diabetes.">T-cell receptor transgenic response to an endogenous polymorphic autoantigen determines susceptibility to diabetes.</a> Diabetes. 53, 978-988 (2004).</li><li>Jasinski, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transgenic+insulin+(B:9-23)+T-cell+receptor+mice+develop+autoimmune+diabetes+dependent+upon+RAG+genotype,+H-2g7+homozygosity,+and+insulin+2+gene+knockout.">Transgenic insulin (B:9-23) T-cell receptor mice develop autoimmune diabetes dependent upon RAG genotype, H-2g7 homozygosity, and insulin 2 gene knockout.</a> Diabetes. 55, 1978-1984 (2006).</li><li>Kersh, G. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TCR+transgenic+mice+in+which+usage+of+transgenic+alpha-+and+beta-chains+is+highly+dependent+on+the+level+of+selecting+ligand.">TCR transgenic mice in which usage of transgenic alpha- and beta-chains is highly dependent on the level of selecting ligand.</a> Journal of immunology. 161, 585-593 (1998).</li><li>Bettini, M. L., Bettini, M., Vignali, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TCR+retrogenic+mice:+A+rapid,+flexible+alternative+to+TCR+transgenic+mice.">TCR retrogenic mice: A rapid, flexible alternative to TCR transgenic mice.</a> Immunology. 136 (3), 265-272 (2012).</li><li>Holst, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+T-cell+receptor+retrogenic+mice.">Generation of T-cell receptor retrogenic mice.</a> Nat Protoc. 1, 406-417 (2006).</li><li>Holst, J., Vignali, K. M., Burton, A. R., Vignali, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+analysis+of+T-cell+selection+in+vivo+using+T+cell-receptor+retrogenic+mice.">Rapid analysis of T-cell selection in vivo using T cell-receptor retrogenic mice.</a> Nat Methods. 3, 191-197 (2006).</li><li>Bettini, M. L., Bettini, M., Nakayama, M., Guy, C. S., Vignali, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+T+cell+receptor-retrogenic+mice:+improved+retroviral-mediated+stem+cell+gene+transfer.">Generation of T cell receptor-retrogenic mice: improved retroviral-mediated stem cell gene transfer.</a> Nat Protoc. 8, 1837-1840 (2013).</li><li>Donnelly, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+the+aphthovirus+2A/2B+polyprotein+'cleavage'+mechanism+indicates+not+a+proteolytic+reaction,+but+a+novel+translational+effect:+a+putative+ribosomal+'skip'.">Analysis of the aphthovirus 2A/2B polyprotein 'cleavage' mechanism indicates not a proteolytic reaction, but a novel translational effect: a putative ribosomal 'skip'.</a> J Gen Virol. 82, 1013-1025 (2001).</li><li>Atkins, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+case+for+"StopGo":+reprogramming+translation+to+augment+codon+meaning+of+GGN+by+promoting+unconventional+termination+(Stop)+after+addition+of+glycine+and+then+allowing+continued+translation+(Go).">A case for "StopGo": reprogramming translation to augment codon meaning of GGN by promoting unconventional termination (Stop) after addition of glycine and then allowing continued translation (Go).</a> RNA. 13, 803-810 (2007).</li><li>Doronina, V. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Site-specific+release+of+nascent+chains+from+ribosomes+at+a+sense+codon.">Site-specific release of nascent chains from ribosomes at a sense codon.</a> Mol Cell Biol. 28, 4227-4239 (2008).</li><li>Bettini, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TCR+affinity+and+tolerance+mechanisms+converge+to+shape+T+cell+diabetogenic+potential.">TCR affinity and tolerance mechanisms converge to shape T cell diabetogenic potential.</a> Journal of immunology. 193, 571-579 (2014).</li><li>Brehm, M. A., Wiles, M. V., Greiner, D. L., Shultz, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+improved+humanized+mouse+models+for+human+infectious+diseases.">Generation of improved humanized mouse models for human infectious diseases.</a> J Immunol Methods. 410, 3-17 (2014).</li><li>Brehm, M. A., Shultz, L. D., Greiner, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humanized+mouse+models+to+study+human+diseases.">Humanized mouse models to study human diseases.</a> Curr Opin Endocrinol Diabetes Obes. 17, 120-125 (2010).</li><li>Chaplin, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+of+interleukin-12+as+a+self-processing+2A+polypeptide.">Production of interleukin-12 as a self-processing 2A polypeptide.</a> J Interferon Cytokine Res. 19, 235-241 (1999).</li><li>Collison, L. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+inhibitory+cytokine+IL-35+contributes+to+regulatory+T-cell+function.">The inhibitory cytokine IL-35 contributes to regulatory T-cell function.</a> Nature. 450, 566-569 (2007).</li><li>Holst, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Scalable+signaling+mediated+by+T+cell+antigen+receptor-CD3+ITAMs+ensures+effective+negative+selection+and+prevents+autoimmunity.">Scalable signaling mediated by T cell antigen receptor-CD3 ITAMs ensures effective negative selection and prevents autoimmunity.</a> Nature immunology. 9, 658-666 (2008).</li><li>Kalos, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=T+cells+with+chimeric+antigen+receptors+have+potent+antitumor+effects+and+can+establish+memory+in+patients+with+advanced+leukemia.">T cells with chimeric antigen receptors have potent antitumor effects and can establish memory in patients with advanced leukemia.</a> Sci Transl Med. 3, 95ra73 (2011).</li><li>VanSeggelen, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=T+Cells+Engineered+With+Chimeric+Antigen+Receptors+Targeting+NKG2D+Ligands+Display+Lethal+Toxicity+in+Mice.">T Cells Engineered With Chimeric Antigen Receptors Targeting NKG2D Ligands Display Lethal Toxicity in Mice.</a> Mol Ther. 23, 1600-1610 (2015).</li></ol>

في البروتوكول، ونحن بالتفصيل عدة خطوات حاسمة لضمان الأمثل الصحة نخاع العظم، وكفاءة ترنسدوكأيشن وإعادة. الخطوة الأولى الحاسمة هي جيل والصيانة الصحيحة للخلايا المنتجة الفيروسي GP + E86. استخدام ممر خطوط الخلايا المنتجة المبكرة والاحتفاظ بنسبة 80٪ confluency أو أقل قبل استخدا...

وقد قدرت الخلايا التائية مستقبلات (TCR) ذخيرة من البشر والفئران في 1 × 10 8 و 2 × 10 6 TCRs فريدة من نوعها على التوالي 1،2. هذا التنوع الكبير يسمح خلايا T إلى التعرف على مجموعة واسعة من الحواتم المستضد المستمدة من الببتيدات الذاتي وكذلك من مسببات الأمراض التي قدمها معقد التوافق النسيجي الكبير (MHC) على خلايا مقدمة للمستضد (ناقلات الجنود المدرعة). الاختلافات الطفيفة في تفاعلات TCRs مع المجمعات الببتيد MHC فريدة من نوعها تملي ما إذا كانت الخلايا التائية سيخضع لموت الخلايا المبرمج، استعطال، التنشيط، والتمايز، وإنتاج السيتوكينات أو السمية الخلوية. ومع ذلك، ويرجع ذلك إلى مرجع TCR كبير، وتحليل كيف يمكن لTCR معينا سوف تستجيب لمستضد معين يتطلب استخدام أنظمة TCR واحدة. وقد ولدت مختلف الفئران المعدلة وراثيا TCR من أجل دراسة وظيفة من TCR واحد في نموذج في الجسم الحي 3-9. ومع ذلك، هناك محاذير لTCR الفئران المعدلة وراثيا بما في ذلكالتكلفة، وطول الفترة الزمنية لتوليد الفئران المحورة جينيا واحد ويسمى تأثير مؤسس الإدراج التحوير عشوائي في الحمض النووي سلالة الجرثومية 10. لذلك، تم إنشاء عدد قليل نسبيا من الفئران المعدلة وراثيا TCR عن أي مستضد معين والآثار الفنية من ارتفاع وانخفاض تقارب TCR لنفس حاتمة نادرا ما يتم التصدي لها. لمعالجة الحاجة إلى نهج السريع إلى الشاشة ودراسة TCRs متعددة منفردة أو مجتمعة، وقد استخدمت الفئران retrogenic ( &#39;الرجعية&#39; من الفيروس الارتجاعي و &quot;جينك&quot; من المعدلة وراثيا) كبديل لTCR الفئران المعدلة وراثيا 11-13. و2A الببتيد إجماع عزر وجدت في غضون عدة الفيروسات تتكون من 2A-ASP-فال / إيل تخمة-X-الأسباراجين برو-الغليسين-2B-برو، الذي يحدث انشقاق بين الجلايسين من 2A والبرولين من 2B من رابطة الدول المستقلة -acting النشاط هيدرولاز، مما أدى إلى تخطي الريبوسومي خلال الترجمة 10،14-16. رسم تخطيطي مفصل تصور جleavage من مختلف الببتيدات 2A (F2A، E2A، T2A وP2A) يرجى الرجوع إلى المراجع 10 - 12. وبهذه الطريقة، 2 cistrons (TCR ألفا وبيتا TCR) يمكن أن تكون مرتبطة مما أدى إلى ترجمة متكافئة في ناقل واحد. باستخدام هذا النهج، ونحن قادرون على التعبير عن ومقارنة مباشرة متعددة TCRs محددة مستضد في الجسم الحي.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>DMEM, high glucose + glutamine</td>
			<td>Corning Cellgro</td>
			<td>10-013-CV</td>
			<td>Dulbecco&#39;s Modification of Eagle&#39;s Medium with 4.5 g/L glucose, L-glutamine &#38; sodium pyruvate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>Atlanta Biological</td>
			<td>S11550</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-Versene</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>17-161F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.45 um syringe filter</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>194-2545</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>polybrene</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H9268-10G</td>
			<td>Sterile Filtered in dH2O</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ciprofloxacin&#160;</td>
			<td>VWR</td>
			<td>AAJ61970-06</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5-fluorouracil (5-FU)</td>
			<td>VWR</td>
			<td>AAA13456-06</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Pyruvate</td>
			<td>Corning Cellgro</td>
			<td>25-000-CI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MEM nonessential Amino Acids</td>
			<td>Corning Cellgro</td>
			<td>25-025-CI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES 1M solution</td>
			<td>Corning Cellgro</td>
			<td>25-060-CI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-Mercaptoethanol</td>
			<td>Gibco by Life Technologies</td>
			<td>21985-023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pen/Strept</td>
			<td>Corning Cellgro</td>
			<td>30-002-CI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-glutamine</td>
			<td>Corning Cellgro</td>
			<td>25-005-CI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>150 mm tissue culture dishes</td>
			<td>Greiner Bio-one</td>
			<td>639160</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tisue culture-treated 6-well flat plate</td>
			<td>Greiner Bio-one</td>
			<td>657160</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70 um nylon cell strainers</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352350</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse IL-3</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>PMC0033</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human IL-6</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>&#160;PHC0063</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse Stem Cell Factor</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>PMC2113L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10x PBS</td>
			<td>Corning Cellgro</td>
			<td>46-D13-CM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HANKS Buffer</td>
			<td>Corning Cellgro</td>
			<td>21020147</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD 10 mL Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>300912</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD 1 mL Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>27G x 1/2 BD Precision Glide Needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>305109</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30G x 1/2 BD Precision Glide Needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>305106</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

retroviral transduction of bone marrow progenitor cells to generate t-cell receptor retrogenic mice

T cell receptor (TCR) signaling is essential in the development and differentiation of T cells in the thymus and periphery, respectively. The vast array of TCRs proves studying a specific antigenic response difficult. Therefore, TCR transgenic mice were made to study positive and negative selection in the thymus as well as peripheral T cell activation, proliferation and tolerance. However, relatively few TCR transgenic mice have been generated specific to any given antigen. Thus, studies involving TCRs of varying affinities for the same antigenic peptide have been lacking. The generation of a new TCR transgenic line can take six or more months. Additionally, any specific backcrosses can take an additional six months. In order to allow faster generation and screening of multiple TCRs, a protocol for retroviral transduction of bone marrow was established with stoichiometric expression of the TCR&#945; and TCR&#946; chains and the generation of retrogenic mice. Each retrogenic mouse is essentially a founder, virtually negating a founder effect, while the length of time to generate a TCR retrogenic is cut from six months to approximately six weeks. Here we present a rapid and flexible alternative to TCR transgenic mice that can be expressed on any chosen background with any particular TCR.

يتم فحص العظام كفاءة نخاع التنبيغ في خطوة 13.3 من البروتوكول قبل يتم حقن نخاع العظام في الرابع الوريد الذيل في نخاع العظام التمثيلي التنبيغ الرقم (الشكل 1A)، تم إضافة حوالي 10 ميكرولتر من نخاع العظم المقطوع إلى 100 ​​ميكرولتر من برنامج تلفزيوني...

Watch this Scientific Journal Video about Retroviral Transduction of Bone Marrow Progenitor Cells to Generate T-cell Receptor Retrogenic Mice at JoVE.com

Retroviral Transduction of Bone Marrow Progenitor Cells to Generate T-cell Receptor Retrogenic Mice

We present a rapid and flexible protocol for a single T cell receptor (TCR) retroviral-based in vivo expression system. Retroviral vectors are used to transduce bone marrow progenitor cells to study T cell development and function of a single TCR in vivo as an alternative to TCR transgenic mice.

فيروسات تنبيغ من خلايا نخاع العظم السلف لتوليد خلايا T مستقبلات Retrogenic الفئران

T cell receptor (TCR) signaling is essential in the development and differentiation of T cells in the thymus and periphery, respectively.  The vast array ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Transnuclear Mice with Pre-defined T Cell Receptor Specificities Against Toxoplasma gondii Obtained Via SCNT

Transnuclear Mice with Pre-defined T Cell Receptor Specificities Against Toxoplasma gondii Obtained Via SCNT

Transnuclear الفئران مع الخصوصيات المحددة مسبقا ضد مستقبلات الخلايا T المقوسة الغوندية الحصول عليها عن طريق SCNT

Lymphocytes, such as T cells, undergo genetic V(D)J recombination, to generate a receptor with a certain specificity1. Mice transgenic for a rearranged ...

Retroviral Transduction of T-cell Receptors in Mouse T-cells

تنبيغ من فيروسات تي خلية المستقبلات في الخلايا التائية ماوس

T-cell receptors (TCRs) play a central role in the immune system. TCRs on T-cell surfaces can specifically recognize peptide antigens presented by antigen ...

Bone Marrow-derived Macrophage Production

نخاع العظام المستمدة من بلعم الإنتاج

Macrophages are critical components of the innate and adaptive immune responses, and they are the first line of defense against foreign invaders because ...

Systemic Injection of Neural Stem/Progenitor Cells in Mice with Chronic EAE

حقن النظامية من الخلايا الجذعية العصبية / السلف في الفئران مع EAE المزمن

Neural stem/precursor cells (NPCs) are a promising stem cell source for transplantation approaches aiming at brain repair or restoration in regenerative ...

Murine Hind Limb Long Bone Dissection and Bone Marrow Isolation

الفئران هند الاطراف طويل العظام تشريح ونخاع العظم عزل

Investigation of the bone and the bone marrow is critical in many research fields including basic bone biology, immunology, hematology, cancer metastasis, ...

Generating De Novo Antigen-specific Human T Cell Receptors by Retroviral Transduction of Centric Hemichain

Generating De Novo Antigen-specific Human T Cell Receptors by Retroviral Transduction of Centric Hemichain

توليد<em&gt; دي نوفو</em&gt; محددة مستضد تي الإنسان مستقبلات الخلية من قبل فيروسات تنبيغ من مركزية Hemichain

T cell receptors (TCRs) are used clinically to direct the specificity of T cells to target tumors as a promising modality of immunotherapy. Therefore, ...

Retroviral Transduction of Helper T Cells as a Genetic Approach to Study Mechanisms Controlling their Differentiation and Function

فيروسات تنبيغ من الخلايا التائية المساعدة كنهج الوراثي لدراسة آليات السيطرة على التمايز وظيفة

Helper T cell development and function must be tightly regulated to induce an appropriate immune response that eliminates specific pathogens yet prevents ...

An In Vivo Mouse Model to Measure Na&#239;ve CD4 T Cell Activation, Proliferation and Th1 Differentiation Induced by Bone Marrow-derived Dendritic Cells

An In Vivo Mouse Model to Measure NaÃƒÆ’Ã†'Ãƒâ€šÃ‚Â¯ve CD4 T Cell Activation, Proliferation and Th1 Differentiation Induced by Bone Marrow-derived Dendritic Cells

نموذج ماوس في فيفو إلى تدبير السذاجة CD4 تي خلية التنشيط وانتشارها والتمايز Th1 الناجمة عن الخلايا الجذعية المشتقة من نخاع العظام

Quantification of na&#239;ve CD4 T cell activation, proliferation, and differentiation to T helper 1 (Th1) cells is a useful way to assess the role played ...

Preparation of Whole Bone Marrow for Mass Cytometry Analysis of Neutrophil-lineage Cells

إعداد نخاع العظام كله لتحليل الكتلة الخلايا من الخلايا العدلية النسب

In this article, we present a protocol that is optimized to preserve neutrophil-lineage cells in fresh BM for whole BM CyTOF analysis. We utilized a ...

Isolation of Lamina Propria Mononuclear Cells from Murine Colon Using Collagenase E

عزل الخلايا أحادية اللامينا بروبريا أحادية النونافة من القولون المورين باستخدام Collagenase E

The intestine is the home to the largest number of immune cells in the body. The small and large intestinal immune systems police exposure to exogenous ...