Name: isolation and expansion of mesenchymal stem/stromal cells derived from human placenta tissue
Uploaded: 2016-06-06T14:10:00
Duration: 12 min 40 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation and Expansion of Mesenchymal Stem/Stromal Cells Derived from Human Placenta Tissue at JoVE.com

RP был поддержан Национальным исследовательским советом здравоохранения и медицинской (NHMRC) последипломной подготовки стипендий. VS был поддержан Университетом Квинсленда Международной Аспирант стипендии. МОБ была поддержана NHMRC и внутреннее колесо Австралии. Мы благодарим клинический и медицинский персонал для оказания помощи в согласии пациента и сбора образцов. Мы благодарим профессора Nickolas Фиск, профессор Керри Аткинсон и д-р Рохана Лурье для проницательных дискуссий в акушерстве, плодово-плацентарного развития и плацента анатомии.

<ol>
	<li>Brooke, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+applications+of+mesenchymal+stromal+cells.">Therapeutic applications of mesenchymal stromal cells.</a> Semin Cell dev Biol. 18, 846-858 (2007).</li><li>Wei, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+stem+cells:+a+new+trend+for+cell+therapy.">Mesenchymal stem cells: a new trend for cell therapy.</a> Acta Phamacol Sin. 34, 747-754 (2013).</li><li>Ma, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunobiology+of+mesenchymal+stem+cells.">Immunobiology of mesenchymal stem cells.</a> Cell Death Differ. 21, 216-225 (2014).</li><li>Timmins, N. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Closed+system+isolation+and+scalable+expansion+of+human+placental+mesenchymal+stem+cells.">Closed system isolation and scalable expansion of human placental mesenchymal stem cells.</a> Biotechnol Bioeng. 109, 1817-1826 (2012).</li><li>Barlow, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+human+placenta-+and+bone+marrow-derived+multipotent+mesenchymal+stem+cells.">Comparison of human placenta- and bone marrow-derived multipotent mesenchymal stem cells.</a> Stem Cell Dev. 17, 1095-1107 (2008).</li><li>Jones, B. J., Brooke, G., Atkinson, K., McTaggart, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunosuppression+by+placental+indoleamine+2,3-dioxygenase:+a+role+for+mesenchymal+stem+cells.">Immunosuppression by placental indoleamine 2,3-dioxygenase: a role for mesenchymal stem cells.</a> Placenta. 28, 1174-1181 (2007).</li><li>Parolini, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toward+cell+therapy+using+placenta-derived+cells:+disease+mechanisms,+cell+biology,+preclinical+studies,+and+regulatory+aspects+at+the+round+table.">Toward cell therapy using placenta-derived cells: disease mechanisms, cell biology, preclinical studies, and regulatory aspects at the round table.</a> Stem Cell Dev. 19, 143-154 (2010).</li><li>Benirschke, K., Burton, G. J., Baergen, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Pathology of the Human Placenta. , (2012).</li><li>Moore, K., Persaud, T., Torchia, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The developing human: clinically oriented embryology. , (2013).</li><li>Parolini, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Concise+review:+isolation+and+characterization+of+cells+from+human+term+placenta:+outcome+of+the+first+international+Workshop+on+Placenta+Derived+Stem+Cells.">Concise review: isolation and characterization of cells from human term placenta: outcome of the first international Workshop on Placenta Derived Stem Cells.</a> Stem cells. 26, 300-311 (2008).</li><li>Brooke, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Manufacturing+of+human+placenta-derived+mesenchymal+stem+cells+for+clinical+trials.">Manufacturing of human placenta-derived mesenchymal stem cells for clinical trials.</a> Brit J Haematol. 144, 571-579 (2009).</li><li>Pelekanos, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracellular+trafficking+and+endocytosis+of+CXCR4+in+fetal+mesenchymal+stem/stromal+cells.">Intracellular trafficking and endocytosis of CXCR4 in fetal mesenchymal stem/stromal cells.</a> BMC cell biology. 15, 15 (2014).</li><li>Chen, Y. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+molecule+mesengenic+induction+of+human+induced+pluripotent+stem+cells+to+generate+mesenchymal+stem/stromal+cells.">Small molecule mesengenic induction of human induced pluripotent stem cells to generate mesenchymal stem/stromal cells.</a> Stem Cells Transl Med. 1, 83-95 (2012).</li><li>Heazlewood, C. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+incidence+of+contaminating+maternal+cell+overgrowth+in+human+placental+mesenchymal+stem/stromal+cell+cultures:+a+systematic+review.">High incidence of contaminating maternal cell overgrowth in human placental mesenchymal stem/stromal cell cultures: a systematic review.</a> Stem Cells Transl Med. 3, 1305-1311 (2014).</li><li>Horn, P., Bork, S., Wagner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardized+isolation+of+human+mesenchymal+stromal+cells+with+red+blood+cell+lysis.">Standardized isolation of human mesenchymal stromal cells with red blood cell lysis.</a> Methods Mol Biol. 698, 23-35 (2011).</li><li>Dominici, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minimal+criteria+for+defining+multipotent+mesenchymal+stromal+cells.+The+International+Society+for+Cellular+Therapy+position+statement.">Minimal criteria for defining multipotent mesenchymal stromal cells. The International Society for Cellular Therapy position statement.</a> Cytotherapy. 8, 315-317 (2006).</li><li>Friedenstein, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Precursors+for+fibroblasts+in+different+populations+of+hematopoietic+cells+as+detected+by+the+in+vitro+colony+assay+method.">Precursors for fibroblasts in different populations of hematopoietic cells as detected by the in vitro colony assay method.</a> Exp Hematol. 2, 83-92 (1974).</li><li>Caplan, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+stem+cells.">Mesenchymal stem cells.</a> J Orthop Res. 9, 641-650 (1991).</li><li>Futrega, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+microwell-mesh:+A+novel+device+and+protocol+for+the+high+throughput+manufacturing+of+cartilage+microtissues.">The microwell-mesh: A novel device and protocol for the high throughput manufacturing of cartilage microtissues.</a> Biomaterials. 62, 1-12 (2015).</li><li>Liu, Y., Goldberg, A. J., Dennis, J. E., Gronowicz, G. A., Kuhn, L. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=One-step+derivation+of+mesenchymal+stem+cell+(MSC)-like+cells+from+human+pluripotent+stem+cells+on+a+fibrillar+collagen+coating.">One-step derivation of mesenchymal stem cell (MSC)-like cells from human pluripotent stem cells on a fibrillar collagen coating.</a> PloS one. 7, 33225 (2012).</li><li>Maleki, M., Ghanbarvand, F., Reza Behvarz, M., Ejtemaei, M., Ghadirkhomi, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+mesenchymal+stem+cell+markers+in+multiple+human+adult+stem+cells.">Comparison of mesenchymal stem cell markers in multiple human adult stem cells.</a> Int J Stem Cell. 7, 118-126 (2014).</li><li>Hass, R., Kasper, C., Bohm, S., Jacobs, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Different+populations+and+sources+of+human+mesenchymal+stem+cells+(MSC):+A+comparison+of+adult+and+neonatal+tissue-derived+MSC.">Different populations and sources of human mesenchymal stem cells (MSC): A comparison of adult and neonatal tissue-derived MSC.</a> Cell Commun Signal. 9, 12 (2011).</li><li>Bianco, P., Robey, P. G., Simmons, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+stem+cells:+revisiting+history,+concepts,+and+assays.">Mesenchymal stem cells: revisiting history, concepts, and assays.</a> Cell stem cell. 2, 313-319 (2008).</li><li>Bianco, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+meaning,+the+sense+and+the+significance:+translating+the+science+of+mesenchymal+stem+cells+into+medicine.">The meaning, the sense and the significance: translating the science of mesenchymal stem cells into medicine.</a> Nature med. 19, 35-42 (2013).</li><li>Da Silva Meirelles, L., Caplan, A. I., Nardi, N. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+search+of+the+in+vivo+identity+of+mesenchymal+stem+cells.">In search of the in vivo identity of mesenchymal stem cells.</a> Stem cells. 26, 2287-2299 (2008).</li><li>Caplan, A. I., Correa, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+MSC:+an+injury+drugstore.">The MSC: an injury drugstore.</a> Cell Stem Cell. 9, 11-15 (2011).</li><li>Wegmeyer, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+Stromal+Cell+Characteristics+Vary+Depending+on+Their+Origin.">Mesenchymal Stromal Cell Characteristics Vary Depending on Their Origin.</a> Stem Cell Dev. , (2013).</li><li>Guillot, P. V., Gotherstrom, C., Chan, J., Kurata, H., Fisk, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+first-trimester+fetal+MSC+express+pluripotency+markers+and+grow+faster+and+have+longer+telomeres+than+adult+MSC.">Human first-trimester fetal MSC express pluripotency markers and grow faster and have longer telomeres than adult MSC.</a> Stem cells. 25, 646-654 (2007).</li><li>Covas, D. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multipotent+mesenchymal+stromal+cells+obtained+from+diverse+human+tissues+share+functional+properties+and+gene-expression+profile+with+CD146++perivascular+cells+and+fibroblasts.">Multipotent mesenchymal stromal cells obtained from diverse human tissues share functional properties and gene-expression profile with CD146+ perivascular cells and fibroblasts.</a> Exp Hemol. 36, 642-654 (2008).</li><li>Crisan, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+perivascular+origin+for+mesenchymal+stem+cells+in+multiple+human+organs.">A perivascular origin for mesenchymal stem cells in multiple human organs.</a> Cell stem cell. 3, 301-313 (2008).</li><li>Pelekanos, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comprehensive+transcriptome+and+immunophenotype+analysis+of+renal+and+cardiac+MSC-like+populations+supports+strong+congruence+with+bone+marrow+MSC+despite+maintenance+of+distinct+identities.">Comprehensive transcriptome and immunophenotype analysis of renal and cardiac MSC-like populations supports strong congruence with bone marrow MSC despite maintenance of distinct identities.</a> Stem cell res. 8, 58-73 (2012).</li><li>da Silva Meirelles, L., Chagastelles, P. C., Nardi, N. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+stem+cells+reside+in+virtually+all+post-natal+organs+and+tissues.">Mesenchymal stem cells reside in virtually all post-natal organs and tissues.</a> J Cell Sci. 119, 2204-2213 (2006).</li><li>James, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Review+of+Signaling+Pathways+Governing+MSC+Osteogenic+and+Adipogenic+Differentiation.">Review of Signaling Pathways Governing MSC Osteogenic and Adipogenic Differentiation.</a> Scientifica (Cairo). 2013, 684736 (2013).</li><li>Xu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cross-Talking+between+PPAR+and+WNT+Signaling+and+Its+Regulation+in+Mesenchymal+Stem+Cell+Differentiation.">Cross-Talking between PPAR and WNT Signaling and Its Regulation in Mesenchymal Stem Cell Differentiation.</a> Curr Stem Cell Res Ther. , (2015).</li><li>Zhuang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+Mechanisms+of+PPAR-gamma+Governing+MSC+Osteogenic+and+Adipogenic+Differentiation.">Molecular Mechanisms of PPAR-gamma Governing MSC Osteogenic and Adipogenic Differentiation.</a> Curr Stem Cell Res Ther. , (2015).</li><li>Moore, K., Persaud, T., Torchia, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Before We Are Born: Essentials of Embryology and Birth Defects. , (2011).</li><li>Zhu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Placental+mesenchymal+stem+cells+of+fetal+and+maternal+origins+demonstrate+different+therapeutic+potentials.">Placental mesenchymal stem cells of fetal and maternal origins demonstrate different therapeutic potentials.</a> Stem Cell Res Ther. 5, 48 (2014).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

Плацента является физически большой fetomaternal орган, из которого плода или матери MSC может быть выделен 22. Здесь мы представили подробный обзор плацентарной анатомии и инструкции о том, как конкретно рассекают децидуальной (материнской), хорионический ворсинки (плода) и хорионический пластины (плода) ткани (этап 2.2-2.4). В дальнейшем, мы изложили надежный протокол, позволяющий MSC изоляцию от каждого из этих трех тканей (этап 2,5-2,6). Расширение плацентарной MSC является эффективным и культуры выглядеть подобно из костного мозга MSC культур (3 и 4). Остеогенная дифференциация надежен (Фиг.5В), в то время как липогенный дифференциация , как правило , менее эффективны (5С) 5. Многие новички в этой области будет предположить, что культуры, полученные из плода хорионического ворсинок хориона или тканей пластины будет обогащаться для плода MSC. Тем не менее, в наших руках FeОбогащение тал клетка только переходный , когда стандартное расширение MSC среде , такой как DMEM-LG + 10% FBS используется 5. Здесь мы предлагаем репрезентативные результаты с использованием плацентарной ткани, полученные из мужского пола ребенка. При использовании плацента ткани из мужского ребенка, фетальные клетки легко идентифицируемым как имеющие XY хромосомами, в то время как материнские клетки могут быть идентифицированы как имеющие XX хромосомы. На рисунке 6 показаны результаты XY FISH для представительной культуры. В то время как эмбриональный ЦКМ (XY) обогащены (до 80%) в исходных культур, полученных из фетальной ворсин хориона или хориона ткани пластины, эти же самые культуры быстро обогнали (~ 100%) материнским (XX) MSC в течение первых двух проходах , В стандартной среде, состоящей из DMEM-LG + 10% FBS, немногие MSC материнской происхождения, которые загрязняют эмбриональные ткани вытеснять фетальные клеток, полученных в культуре. Важным шагом изложенные в этом протоколе является оценка плацентарный анатомии и откуда плодаи материнской ткани наиболее эффективно может быть собран. Как указано в разделе результаты репрезентативного, рассечение тканей плода делает позволяют кратковременное обогащение для плода, полученных MSC. Улучшения в разработке расширения среды, с помощью конкретных экзогенного фактора роста добавок среды должны позволить селективное расширение популяций MSC эмбриональных происхождения и производства продукта клеток, который обогащен для плода, а не материнской клетки (наша группа в настоящее время разрабатывает такие средние составы). Производство популяций MSC плода может иметь ряд преимуществ, что и фетальные ЦКМ подразумеваются , чтобы иметь больший ангиогенез и иммуносупрессивные свойства , чем эквивалентные популяции материнских MSC 37. В каждом из описанных протоколов изоляции, мы использовали примерно 10 г ткани. Целый плацента, как правило, 500-750 г, а в предыдущей работе мы показали, что с помощью автоматизированной ткани перевариваются и биореактора Proc расширения клетоксах, она должна быть возможность производить более 7000 клинических доз клеток из одной плаценты 4. Эти цифры подчеркивают потенциальную пригодность плацентарного происхождения MSC в аллогенных MSC терапии, и значение этого метода независимо от MSC происхождения (плода или матери). С терапевтической точки зрения, это наиболее важно, что пользователи имеют полное представление о продукте клеток и способность надежно производить этот сотовый продукт. Мы надеемся, что наше видео поможет исследователям понять, плацента анатомии, изолировать MSC из плаценты, и предвидеть вероятное плода или материнской клеточный состав их культур.

Мезенхимальных стволовых / стромальных клеток (МСК) появляются в качестве перспективного кандидата для использования в клеточной терапии 1. Большинство приложений , по всей видимости целевой MSC-опосредованного восстановления тканей или иммунной регуляции 2. Во многих из этих применений, аллогенной MSC может быть столь же эффективным , как аутологичных МСК 3. Использование аллогенных MSC имеет экономическое преимущество быть совместимы с крупномасштабного производства нескольких доз клеток из одного источника ткани 4 для лечения многих пациентов. Исторически сложилось так , доклинические и клинические исследования использовали ЦКМ , полученных из костного мозга 4. Костный мозг, как правило, собирают из гребня подвздошной кости донора добровольцев. Этот процесс является инвазивным, и лишь небольшой объем мозга (~ 20 мл) собирают через один прокол. Создание клинически значимых числа MSC требует обширной в расширении пробирке. Cell активность уменьшается с числом пассажей <suр&gt; 3, создавая парадокс , где теоретическое число клеток , необходимых для клинической эффективности увеличивается тем больше популяция клеток расширяется. В отличие от аспирата костного мозга, термин плацента является физически большой исходной ткани ( как правило , 500-750 г 4), которые могут быть собраны в асептических условиях в течение кесарева сечения без риска для донора. MSC полученный из плаценты имеют долгосрочный пролиферации 5 и иммуномодулирующее способность 6, более из костного мозга MSC. В предыдущем исследовании мы показали , что один термин плацента содержал достаточное количество MSC для производства до 7000 клинических доз 4. Эти характеристики делают плацента идеальным источником ткани для изготовления аллогенной MSC. Плацента является fetomaternal орган , состоящий из как матери и плода ткани 7, и , таким образом , MSC плода или материнского происхождения может быть, теоретически, изолированы. Следующие ссылки предоставляют дехвостатые информация о развитии и патологии, а также микроскопического и макроскопического исследование плаценты человека и придатков 8,9. Плацента собственно состоит в основном из эмбриональных кровеносных сосудов и секреторных и поддерживающих клеток , называемых трофобласты, составляя хорионический ворсинки , охватываемые хориона frondosum (пластины) 8. Разветвленные плацентарные ворсинки купаются в материнской крови, доставленных из матки спиральных артерий, что позволяет питательных веществ, гормонов и газообмен между плодом и матерью. Плацента прикреплена к эндометрии через материнские децидуальными стромальных клеток и фетальных extravillious трофобласта перемежаются во внеклеточном матриксе 8. Ворсинок сходятся на эмбриональной хорионического пластины , где они образуют пуповину 8. Итоги первого международного семинара по плацентарных стволовых клеток, полученных (2008) была оценка необходимости стандартизировать изоляцию и characterizatioп клеток из человеческого термина плаценты 10. Из-за анатомии плаценты, рассечение различных тканей, выделение MSC и ожидаемых результатов культуры может быть подавляющим для новичков в этой области. В этом протоколе, урожай плацентарных тканей хориона, а затем MSC изоляции и расширения тщательно детализированы. MSC характеристику с помощью проточной цитометрии и в пробирке дифференциации считаются рутинную 5,11-13, и , таким образом , лишь кратко подробно описаны здесь. Как было отмечено в недавнем систематическом обзоре литературы 14, MSC , полученного из плацентарных ворсин хориона , как правило , предполагается плода. Несмотря на то, только 18% исследований изучили происхождение MSC, полученного, и из них только половина исследований сообщили плода MSC, а другая половина населения сообщили матери или смешанные MSC. Каждый из трех компонентов ткани, описанных здесь (хорионический ворсинки, хориона и децидуальной пластинчатые базального) являются Composed в основном из плода мембраны / ворсинок, а также небольшая часть маточных происхождения материнских клеток, которые остаются прикрепленными к поставляемому плаценты. Мы предоставляем данные , показывающие , что изоляция MSC от материнской стороны плаценты, а не плода стороны плаценты, как мы уже ранее сообщали 5,11, является более подходящим исходным материалом , если материнский MSC желательны. Этот протокол также описывает использование XY FISH для проверки плода или материнской вклад в клеточных культурах. Несмотря на то , что это стандартный протокол от производителя, этот анализ часто пренебрегают и его значение недооценивается 14.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1131">
	<tbody>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;width:337px;">Reagents</td>
			<td style="width:121px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:555px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">HBSS</td>
			<td style="width:121px;">Gibco/Invitrogen</td>
			<td style="width:119px;">14185-052</td>
			<td>Long name: Hanks Balanced Salt Solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">FBS</td>
			<td style="width:121px;">Gibco/Invitrogen</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Long name: Fetal Bovine Serum</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">trypsin-substitute</td>
			<td style="width:121px;">Gibco/Invitrogen</td>
			<td style="width:119px;">12563-029</td>
			<td>Long name: TrypLE Select</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">DMEM-LG</td>
			<td style="width:121px;">Gibco/Invitrogen</td>
			<td style="width:119px;">11885-092</td>
			<td>Long name: Dulbecco&#8217;s Modified Eagles Medium-Low Glucose</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">DMEM-HG</td>
			<td style="width:121px;">Gibco/Invitrogen</td>
			<td style="width:119px;">11965118</td>
			<td>Long name: Dulbecco&#8217;s Modified Eagles Medium-HIgh Glucose (4.5 g/L)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">PBS (Mg+Ca+ free)</td>
			<td style="width:121px;">Gibco/Invitrogen</td>
			<td style="width:119px;">14190-250</td>
			<td>Long name: Dulbecco&#39;s Phosphate buffered saline, magnesium and calcium free</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">Anti- anti-</td>
			<td style="width:121px;">Gibco/Invitrogen</td>
			<td style="width:119px;">15240-062</td>
			<td>Long name: antibiotic-antimycotic solution x100</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">paraformaldehyde powder or 4% solution</td>
			<td style="width:121px;">any&#160;</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">Collagenase I</td>
			<td style="width:121px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:119px;">17100-017&#160;</td>
			<td>2500U/ml</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">Dnase I</td>
			<td style="width:121px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">D5025</td>
			<td>10 mg/mL in&#160; 0.15 M NaCl</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">Dispase</td>
			<td style="width:121px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:119px;">17105-041&#160;</td>
			<td>10 mg/ml in water (20,000 U/ml).</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;"></td>
			<td style="width:121px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">Material</td>
			<td style="width:121px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">Disposables:</td>
			<td style="width:121px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">50 ml centrifuge tubes</td>
			<td style="width:121px;">Falcon or any brand</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">petri dishes, sterile plactic (25 cm and 10 cm diameter)</td>
			<td style="width:121px;">Nunc</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cell strainers (100 micron)</td>
			<td style="width:121px;">Becton Dickinson</td>
			<td align="right" style="width:119px;">352340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="23">
			<td height="23" style="height:23px;">175 and 75 cm2 (T175 and T75) tissue culture flasks</td>
			<td style="width:121px;">Nunc</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">5 ml, 10 ml, 25 ml sterile serolgical pipettes</td>
			<td style="width:121px;">any brand</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">Material</td>
			<td style="width:121px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">Equipment:</td>
			<td style="width:121px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">&#160;Centrifuge&#160;&#160;</td>
			<td style="width:121px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">&#160;tissue culture incubator 37 degrees celcius, 5 % CO2</td>
			<td style="width:121px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Biological safety cabinet</td>
			<td style="width:121px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">&#160;Sterile scissors and tweezers</td>
			<td style="width:121px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tube racks&#160;</td>
			<td style="width:121px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pipette-boy or equivalent</td>
			<td style="width:121px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Gilson type pipetters and sterile tips 1000 &#181;l, 200 &#181;l, 20 &#181;l.</td>
			<td style="width:121px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">rocking or shaking incubator (37 degrees celcius)</td>
			<td style="width:121px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">personal protective equipment</td>
			<td style="width:121px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">cleaning solutions (suitable for blood)</td>
			<td style="width:121px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:337px;">waste containers, correct disposal bins for tissue/blood</td>
			<td style="width:121px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;"></td>
			<td style="width:121px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">Reagents for MSC characterization</td>
			<td style="width:121px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;"></td>
			<td style="width:121px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Antibody (Clone ID)</td>
			<td>Manufacturer</td>
			<td>Catalogue No.</td>
			<td>Isotype</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:337px;">CD73 (AD2)</td>
			<td style="width:121px;">Miltenyi Biotec</td>
			<td style="width:119px;">130-095-183</td>
			<td style="width:555px;">Mouse IgG1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:337px;">CD105 (43A4E1)</td>
			<td style="width:121px;">Miltenyi Biotec</td>
			<td style="width:119px;">130-094-941</td>
			<td style="width:555px;">Mouse IgG1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:337px;">CD90/Thy-1 (AC122)</td>
			<td style="width:121px;">Miltenyi Biotec</td>
			<td style="width:119px;">130-095-403</td>
			<td style="width:555px;">Mouse IgG1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:337px;">CD45 (5B1)</td>
			<td style="width:121px;">Miltenyi Biotec</td>
			<td style="width:119px;">130-080-202</td>
			<td style="width:555px;">Mouse IgG2a</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:337px;">CD34 (AC136)</td>
			<td style="width:121px;">Miltenyi Biotec</td>
			<td style="width:119px;">130-090-954</td>
			<td style="width:555px;">Mouse IgG2a</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:337px;">HLA-DR (AC122)</td>
			<td style="width:121px;">Miltenyi Biotec</td>
			<td style="width:119px;">130-095-298</td>
			<td style="width:555px;">Mouse IgG2a</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:337px;">CD31 (PECAM-1)</td>
			<td style="width:121px;">BD Pharmingen</td>
			<td align="right" style="width:119px;">555446</td>
			<td style="width:555px;">Mouse IgG1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:337px;">CD146 (541-10B2)</td>
			<td style="width:121px;">Miltenyi Biotec</td>
			<td style="width:119px;">130-092-849</td>
			<td style="width:555px;">Mouse IgG1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:337px;">CD44 (DB105)</td>
			<td style="width:121px;">Miltenyi Biotec</td>
			<td style="width:119px;">130-095-180</td>
			<td style="width:555px;">Mouse IgG1</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">Isotype Controls (Clone ID)</td>
			<td>Manufacturer</td>
			<td>Catalogue No.</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:337px;">Mouse IgG1 Isotype (IS5-21F5)</td>
			<td style="width:121px;">Miltenyi Biotec</td>
			<td style="width:119px;">130-092-214</td>
			<td style="width:555px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:337px;">Mouse IgG1 Isotype (IS5-21F5)</td>
			<td style="width:121px;">Miltenyi Biotec</td>
			<td style="width:119px;">130-092-212</td>
			<td style="width:555px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:337px;">Mouse IgG1 Isotype (IS5-21F5)</td>
			<td style="width:121px;">Miltenyi Biotec</td>
			<td>130-092-213</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:337px;">Mouse IgG2a (S43.10)</td>
			<td style="width:121px;">Miltenyi Biotec</td>
			<td style="width:119px;">130-091-837</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:337px;">Mouse IgG2a (S43.10)</td>
			<td style="width:121px;">Miltenyi Biotec</td>
			<td style="width:119px;">130-098-849</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:337px;">MACS Buffer</td>
			<td style="width:121px;">Miltenyi Biotec</td>
			<td>130-091-221</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;"></td>
			<td style="width:121px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;"></td>
			<td style="width:121px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">Osteogenic differentation</td>
			<td>Manufacturer</td>
			<td>Catalogue No.</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">DMEM-HG</td>
			<td style="width:121px;">Gibco/Invitrogen</td>
			<td style="width:119px;">11965118</td>
			<td>Long name: Dulbecco&#8217;s Modified Eagles Medium-HIgh Glucose (4.5 g/L)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">FBS</td>
			<td style="width:121px;">Gibco/Invitrogen</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Long name: Fetal Bovine Serum</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">Anti- anti-</td>
			<td style="width:121px;">Gibco/Invitrogen</td>
			<td style="width:119px;">15240-062</td>
			<td>Long name: antibiotic-antimycotic solution x100</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">Dexamethasone</td>
			<td style="width:121px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">D4902</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">&#946;-Glycerol Phophate</td>
			<td style="width:121px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">50020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">L-ascorbic acid 2-phosphate</td>
			<td style="width:121px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">A8960-5G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">Alizarin Red S</td>
			<td style="width:121px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">A5533-25G</td>
			<td>For calcium matrix staining</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;"></td>
			<td style="width:121px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">Adipogenic differentation</td>
			<td>Manufacturer</td>
			<td>Catalogue No.</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">DMEM-HG</td>
			<td style="width:121px;">Gibco/Invitrogen</td>
			<td style="width:119px;">11965118</td>
			<td>Long name: Dulbecco&#8217;s Modified Eagles Medium-HIgh Glucose (4.5 g/L)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">FBS</td>
			<td style="width:121px;">Gibco/Invitrogen</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Long name: Fetal Bovine Serum</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">Anti- anti-</td>
			<td style="width:121px;">Gibco/Invitrogen</td>
			<td style="width:119px;">15240-062</td>
			<td>Long name: antibiotic-antimycotic solution x100</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">insulin</td>
			<td style="width:121px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">I2643</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">Dexamethasone</td>
			<td style="width:121px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">D4902</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">Indomethacin</td>
			<td style="width:121px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">I7378</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">3-isobutyl-1-methyl xanthine</td>
			<td style="width:121px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">I5879</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;">Oil Red O solution</td>
			<td style="width:121px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">O1391-250ML</td>
			<td>For lipid vacuole staining</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:337px;"></td>
			<td style="width:121px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:337px;">XY FISH kit to determine fetal or maternal origin of cells</td>
			<td style="width:121px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:337px;">XY chomosome FISH kit</td>
			<td style="width:121px;">Vysis (Abbott Molecular)</td>
			<td style="width:119px;">07J20-050</td>
			<td>Long name: CEP X SpectrumOrange/Y SpectrumGreen Direct Labeled Fluorescent DNA Probe Kit</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

isolation and expansion of mesenchymal stem/stromal cells derived from human placenta tissue

Mesenchymal stem/stromal cells (MSC) are promising candidates for use in cell-based therapies. In most cases, therapeutic response appears to be cell-dose dependent. Human term placenta is rich in MSC and is a physically large tissue that is generally discarded following birth. Placenta is an ideal starting material for the large-scale manufacture of multiple cell doses of allogeneic MSC. The placenta is a fetomaternal organ from which either fetal or maternal tissue can be isolated. This article describes the placental anatomy and procedure to dissect apart the decidua (maternal), chorionic villi (fetal), and chorionic plate (fetal) tissue. The protocol then outlines how to isolate MSC from each dissected tissue region, and provides representative analysis of expanded MSC derived from the respective tissue types. These methods are intended for pre-clinical MSC isolation, but have also been adapted for clinical manufacture of placental MSC for human therapeutic use.

Watch this Scientific Journal Video about Isolation and Expansion of Mesenchymal Stem/Stromal Cells Derived from Human Placenta Tissue at JoVE.com

Isolation and Expansion of Mesenchymal Stem/Stromal Cells Derived from Human Placenta Tissue

Здесь мы опишем методы для рассечения плода и материнских тканей от термина плаценты человека, с последующим выделением и расширением мезенхимальных стволовых / стромальных клеток (МСК) из этих тканей.

Выделение и расширения мезенхимальных стволовых / стромальные клетки, полученные из плаценты человека ткани

Mesenchymal stem/stromal cells (MSC) are promising candidates for use in cell-based therapies. In most cases, therapeutic response appears to be cell-dose ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Isolation of Human Mesenchymal Stem Cells and their Cultivation on the Porous Bone Matrix

Выделение мезенхимальных стволовых клеток человека и их культивировании на пористых Bone Matrix

Mesenchymal stem cells (MSCs) have a differentiation potential towards osteoblastic lineage when they are stimulated with soluble factors or specific ...

Isolation and Enrichment of Human Adipose-derived Stromal Cells for Enhanced Osteogenesis

Выделение и Обогащение жировой ткани стромальных клеток для расширенной остеогенеза

Bone marrow-derived mesenchymal stromal cells (BM-MSCs) are considered the gold standard for stem cell-based tissue engineering applications. However, the ...

Three-dimensional Quantification of Dendritic Spines from Pyramidal Neurons Derived from Human Induced Pluripotent Stem Cells

Трехмерная Количественное дендритных шипиков пирамидальных нейронов из производных человеческих индуцированных плюрипотентных стволовых клеток

Dendritic spines are small protrusions that correspond to the post-synaptic compartments of excitatory synapses in the central nervous system. They are ...

Isolation of Perivascular Multipotent Precursor Cell Populations from Human Cardiac Tissue

Выделение Периваскулярный мультипотентных предшественников клеточных популяций из человеческой ткани сердца

Multipotent mesenchymal stem/stromal cells (MSC) were conventionally isolated, through their plastic adherence, from primary tissue digests whilst their ...

Isolation and Characterization of Mesenchymal Stromal Cells from Human Umbilical Cord and Fetal Placenta

Выделение и характеристика мезенхимальных стромальных клеток из пуповинной и фетальной плаценты

The human umbilical cord (UC) and placenta are non-invasive, primitive and abundant sources of mesenchymal stromal cells (MSCs) that have increasingly ...

Differentiating Chondrocytes from Peripheral Blood-derived Human Induced Pluripotent Stem Cells

Дифференцирование хондроцитов из периферических кроветворных человеческих индуцированных плюрипотентных стволовых клеток

In this study, we used peripheral blood cells (PBCs) as seed cells to produce chondrocytes via induced pluripotent stem cells (iPSCs) in an ...

The Isolation and Culture of Primary Epicardial Cells Derived from Human Adult and Fetal Heart Specimens

Изоляции и культуры клеток первичного эпикардиальной, производный от сердца человека взрослых и плода образцов

The epicardium, an epithelial cell layer covering the myocardium, has an essential role during cardiac development, as well as in the repair response of ...

Engineering Transplantation-suitable Retinal Pigment Epithelium Tissue Derived from Human Embryonic Stem Cells

Инженерные трансплантации подходит сетчатки пигментного эпителия ткани, полученных из человеческих эмбриональных стволовых клеток

Several pathological conditions of the eye affect the functionality and/or the survival of the retinal pigment epithelium (RPE). These include some forms ...

Isolation and Characterization of Human Umbilical Cord-derived Mesenchymal Stem Cells from Preterm and Term Infants

Выделение и характеристика человека пуповины производные мезенхимальных стволовых клеток из доношенных и недоношенных новорожденных

Mesenchymal stem cells (MSCs) have considerable therapeutic potential and attract increasing interest in the biomedical field. MSCs are originally ...

In Vitro Generation of Somite Derivatives from Human Induced Pluripotent Stem Cells

В Vitro поколения Сомит производных от человека индуцированных плюрипотентных стволовых клеток

In response to signals such as WNTs, bone morphogenetic proteins (BMPs), and sonic hedgehog (SHH) secreted from surrounding tissues, somites (SMs) give ...