Name: human placental and decidual organ cultures to study infections at the maternal-fetal interface
Uploaded: 2016-07-21T15:00:00
Duration: 7 min 4 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Human Placental and Decidual Organ Cultures to Study Infections at the Maternal-fetal Interface at JoVE.com

We are grateful to Cristina Faralla and David Lowe for helpful discussions. We acknowledge Mark Weinstein and San Francisco General Hospital Pathology Department for expert advice. This work was supported by National Institute of Health grants R01AI084928 and Burroughs Wellcome Fund 41259 to A.I.B; G.A.R. was supported by F32AI108195, Society for Pediatric Pathology Young Investigator Research grant, and University of California Partnerships for Faculty Diversity President's Post-doctoral Fellowship.

<ol>
	<li>Pan, X., Yang, Y., Zhang, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+basis+of+host+specificity+in+human+pathogenic+bacteria.">Molecular basis of host specificity in human pathogenic bacteria.</a> Emerging microbes &amp; infections. 3, e23 (2014).</li><li>Robbins, J. R., Skrzypczynska, K. M., Zeldovich, V. B., Kapidzic, M., Bakardjiev, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Placental+syncytiotrophoblast+constitutes+a+major+barrier+to+vertical+transmission+of+Listeria+monocytogenes.">Placental syncytiotrophoblast constitutes a major barrier to vertical transmission of Listeria monocytogenes.</a> PLoS pathogens. 6, e1000732 (2010).</li><li>Zhang, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+polymeric+immunoglobulin+receptor+translocates+pneumococci+across+human+nasopharyngeal+epithelial+cells.">The polymeric immunoglobulin receptor translocates pneumococci across human nasopharyngeal epithelial cells.</a> Cell. 102, 827-837 (2000).</li><li>Ngampasutadol, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+C4b-binding+protein+selectively+interacts+with+Neisseria+gonorrhoeae+and+results+in+species-specific+infection.">Human C4b-binding protein selectively interacts with Neisseria gonorrhoeae and results in species-specific infection.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 102, 17142-17147 (2005).</li><li>Pishchany, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Specificity+for+human+hemoglobin+enhances+Staphylococcus+aureus+infection.">Specificity for human hemoglobin enhances Staphylococcus aureus infection.</a> Cell host &amp; microbe. 8, 544-550 (2010).</li><li>Benirschke, K., Kaufmann, P., Baergen, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Pathology of the Human Placenta. , (2012).</li><li>Robbins, J. R., Zeldovich, V. B., Poukchanski, A., Boothroyd, J. C., Bakardjiev, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+barriers+of+the+human+placenta+to+infection+with+Toxoplasma+gondii.">Tissue barriers of the human placenta to infection with Toxoplasma gondii.</a> Infection and immunity. 80, 418-428 (2012).</li><li>Shamir, E. R., Ewald, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+organotypic+culture:+experimental+models+of+mammalian+biology+and+disease.+Nature+reviews.">Three-dimensional organotypic culture: experimental models of mammalian biology and disease. Nature reviews.</a> Molecular cell biology. 15, 647-664 (2014).</li><li>Hazan, A. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular-leukocyte+interactions:+mechanisms+of+human+decidual+spiral+artery+remodeling+in+vitro.">Vascular-leukocyte interactions: mechanisms of human decidual spiral artery remodeling in vitro.</a> The American journal of pathology. 177, 1017-1030 (2010).</li><li>Dunk, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+in+vitro+model+of+trophoblast-mediated+decidual+blood+vessel+remodeling.">A novel in vitro model of trophoblast-mediated decidual blood vessel remodeling.</a> Laboratory investigation; a journal of technical methods and pathology. 83, 1821-1828 (2003).</li><li>Hunkapiller, N. M., Fisher, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+12.+Placental+remodeling+of+the+uterine+vasculature.">Chapter 12. Placental remodeling of the uterine vasculature.</a> Methods in enzymology. 445, 281-302 (2008).</li><li>Miller, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guidelines+for+safe+work+practices+in+human+and+animal+medical+diagnostic+laboratories.+Recommendations+of+a+CDC-convened,+Biosafety+Blue+Ribbon+Panel.">Guidelines for safe work practices in human and animal medical diagnostic laboratories. Recommendations of a CDC-convened, Biosafety Blue Ribbon Panel.</a> MMWR Surveill Summ. 61 Suppl, 1-102 (2012).</li><li>Lash, G. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low+oxygen+concentrations+inhibit+trophoblast+cell+invasion+from+early+gestation+placental+explants+via+alterations+in+levels+of+the+urokinase+plasminogen+activator+system.">Low oxygen concentrations inhibit trophoblast cell invasion from early gestation placental explants via alterations in levels of the urokinase plasminogen activator system.</a> Biol Reprod. 74, 403-409 (2006).</li><li>Wang, N., Strugnell, R., Wijburg, O., Brodnicki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+bacterial+load+and+immune+responses+in+mice+infected+with+Listeria+monocytogenes.">Measuring bacterial load and immune responses in mice infected with Listeria monocytogenes.</a> Journal of visualized experiments : JoVE. , (2011).</li><li>Palmer, M. E., Watson, A. L., Burton, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphological+analysis+of+degeneration+and+regeneration+of+syncytiotrophoblast+in+first+trimester+placental+villi+during+organ+culture.">Morphological analysis of degeneration and regeneration of syncytiotrophoblast in first trimester placental villi during organ culture.</a> Hum Reprod. 12, 379-382 (1997).</li><li>Elsinghorst, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+invasion+by+gentamicin+resistance.">Measurement of invasion by gentamicin resistance.</a> Methods in enzymology. 236, 405-420 (1994).</li><li>Kucherenko, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Paraffin-embedded+and+frozen+sections+of+Drosophila+adult+muscles.">Paraffin-embedded and frozen sections of Drosophila adult muscles.</a> Journal of visualized experiments : JoVE. , (2010).</li><li>Croy, B. A., Yamada, A. T., DeMayo, F. J., Adamson, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Guide to Investigation of Mouse Pregnancy, 1st Edition. , (2014).</li><li>JoVE Science Education Database. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=General+Laboratory+Techniques.+Histological+Sample+Preparation+for+Light+Microscopy.">General Laboratory Techniques. Histological Sample Preparation for Light Microscopy.</a> JoVE. , (2016).</li><li>Troy, T. C., Arabzadeh, A., Enikanolaiye, A., Lariviere, N., Turksen, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistochemistry+on+paraffin+sections+of+mouse+epidermis+using+fluorescent+antibodies.">Immunohistochemistry on paraffin sections of mouse epidermis using fluorescent antibodies.</a> Journal of visualized experiments : JoVE. , (2008).</li><li>Chi, V., Chandy, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistochemistry:+paraffin+sections+using+the+Vectastain+ABC+kit+from+vector+labs.">Immunohistochemistry: paraffin sections using the Vectastain ABC kit from vector labs.</a> Journal of visualized experiments : JoVE. , e308 (2007).</li><li>Zeldovich, V. B., Bakardjiev, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Host+defense+and+tolerance:+unique+challenges+in+the+placenta.">Host defense and tolerance: unique challenges in the placenta.</a> PLoS pathogens. 8, e1002804 (2012).</li><li>Yue, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparative+encyclopedia+of+DNA+elements+in+the+mouse+genome.">A comparative encyclopedia of DNA elements in the mouse genome.</a> Nature. 515, 355-364 (2014).</li><li>Robbins, J. R., Bakardjiev, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathogens+and+the+placental+fortress.">Pathogens and the placental fortress.</a> Current opinion in microbiology. 15, 36-43 (2012).</li><li>Mestas, J., Hughes, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Of+mice+and+not+men:+differences+between+mouse+and+human+immunology.">Of mice and not men: differences between mouse and human immunology.</a> J Immunol. 172, 2731-2738 (2004).</li><li>Redline, R. W., Shea, C. M., Papaioannou, V. E., Lu, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defective+anti-listerial+responses+in+deciduoma+of+pseudopregnant+mice.">Defective anti-listerial responses in deciduoma of pseudopregnant mice.</a> The American journal of pathology. 133, 485-497 (1988).</li><li>Redline, R. W., McKay, D. B., Vazquez, M. A., Papaioannou, V. E., Lu, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macrophage+functions+are+regulated+by+the+substratum+of+murine+decidual+stromal+cells.">Macrophage functions are regulated by the substratum of murine decidual stromal cells.</a> The Journal of clinical investigation. 85, 1951-1958 (1990).</li><li>Bakardjiev, A. I., Theriot, J. A., Portnoy, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Listeria+monocytogenes+traffics+from+maternal+organs+to+the+placenta+and+back.">Listeria monocytogenes traffics from maternal organs to the placenta and back.</a> PLoS pathogens. 2, e66 (2006).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

يمكن الفطرية، المعدلة وراثيا والماوس خروج المغلوب سلالات يخدم في النظم التجريبية لاختبار بقوة الآليات. ومع ذلك، على الرغم من الحفظ العام للمادة الوراثية الأساسية، والجينوم وظيفية لدى الفئران والبشر تظهر اختلافات كبيرة في العناصر التنظيمية 23. وليس من المستغرب، لذلك، وأحيانا لا تلخيصها أن الدراسات قبل السريرية واعدة في النماذج الحيوانية في المرضى من البشر. معارض المشيمة التنوع بين الأنواع عالية جدا، مما يجعل نماذج حيوانية أقل من مثالية لدراسة الأمراض التي تصيب البشر 24. يعترف كل من اختلافات ملحوظة في علم المناعة البشرية والفأر 25، وتطور متباينة وضوحا في علم التشريح المشيمة، فإنه من الحكمة أن تنظر في استخدام خارج الجسم الحي الثقافات الجهاز من أنسجة الحمل الإنسان للتحقيق التجريبي. والوصف، والصور الفوتوغرافية، والفيديو التعليمي في هذا البروتوكول إرشاد الباحثين علىكيفية إنشاء زغابي والثقافات الجهاز الساقطة على إدراج زراعة الأنسجة transwell ECM المغلفة. وتشمل مزايا هذه التقنية البساطة النسبية للتشريح الصغيرة والميكانيكية نظام الدعم transwell، لا سيما بالمقارنة مع الطرق البديلة مثل المصفوفات جزءا لا يتجزأ 3D أو الثقافات الجهاز شريحة. تعليق الثقافة الجهاز على دعم غشاء يسمح لتبادل المواد الغذائية في جميع الأسطح الأنسجة ويتم الحفاظ على استمرارية للثقافة على المدى القصير (96 ساعة للثقافات زغبي، 72 ساعة للثقافات الساقطية)، وهذا الأسلوب يسمح لدراسة البيولوجيا المشيمة البشري في الأنسجة مستوى، لا يمكن إنكاره أكثر بيولوجيا من النماذج ثقافة الخلية أحادي الطبقة. الخطوة الأكثر أهمية في هذا البروتوكول هو تشريح الصغير من القطع زغبي والساقطية المناسبة للثقافة الجهاز. وأظهرت قطع المثلى من الأنسجة فوتوغرافيا (الشكل 2A) والشكل (3A) لمساعدة الباحثين الذينالتصور العينات الحمل هو جديد. من المهم بصفة خاصة لتحديد الأشجار زغبي التي تنتهي في الأعمدة EVT الفروع، وهذه الخلايا سوف يهاجر إلى ECM وتساعد على ترسيخ الزغب إلى الغشاء. لكلا النوعين من الثقافات الجهاز مفيد للحد من الاضطرابات في الأنسجة خلال التغييرات وسائل الإعلام من قبل pipetting بطريقة متأنية وتؤدة. تقدم هذه التقنية سوى الحد الأدنى من الصعوبات. في بعض الأحيان، تظهر العينات التلوث. التلوث هو عادة البكتيري (في بعض الأحيان بولي للميكروبات)، وإلا يصبح واضحا بعد 1-2 أيام في الثقافة. مرة واحدة لوحظ تلوث، ينبغي أن تطبق التبييض، وثقافة التخلص منها، ونسيج الثقافة الحاضنة تعقيمها لمنع مشكلة على المدى الطويل. هناك عدة طرق ممكنة قد تنشأ التلوث: في عدوى الرحم، أثناء الجراحة، خلال العينات الحصاد / المعالجة، أو أثناء الصيانة الثقافة الجهاز. الخطوات الحصاد والتجهيز والوقت على الأرجحومكان للتلوث لإدخالها. وبالتالي، فمن المهم للحد من مقدار الوقت يتم التلاعب العينة خلال جمع وتشريح الصغيرة. وهذا سوف يقلل التعرض العينة إلى المحيط والبيئة غير معقمة. اعتمادا على إعداد المختبر، ومجهر تشريح يمكن أن يكون موجودا داخل المعقم نسيج الثقافة هود. تحليل الإمراضية الثقافات الجهاز بعد العدوى مع الممرض ذات الصلة طبيا L. اللستيريا، ويظهر هنا كما طلب واحد ممكن من البروتوكول. توطين المناعي من كل من البكتيريا والخلايا المناعية بعد عوائد العدوى رؤى جديدة لاستجابة المضيف الإنسان لمسببات الأمراض. الثقافات الجهاز الساقطية قد تكون بمثابة فيفو السابقين تقنية التجربة مكملة لدراسة البيانات التي تم إنشاؤها من المجراة العدوى الماوس، بما في ذلك تقارير مثيرة للاهتمام تظهر العيوب في وظائف الدفاع بلعم الساقطية الفئران 26،27. بالإضافة إلى ذلك، غزاله البشريعلى الثقافات يمكن استخدامها في استراتيجيات مختلط العدوى، مثل اللقاح تنافسية تتألف من عدة سلالات إسوي من L. الليستريا. عدوى تنافسية الثقافات الجهاز هو وسيلة حساسة لاختبار مدى ملاءمة عوامل الفوعة داخل المضيف البشري. القيد واحد من هذا الأسلوب هو بقاء الأنسجة، والذي يقتصر على ثقافة على المدى القصير (96 ساعة للثقافات زغبي، 72 ساعة للثقافات الساقطية). هذا هو المثل الأعلى للعدوى بالميكروبات سريعة النمو مثل L. اللستيريا، ولكن الثقافات أطول قد تكون ضرورية لمسببات الأمراض التي يستغرق مزيدا من الوقت لإنشاء وينتشر عن طريق الأنسجة. للحد من العبء العالمي للمضاعفات الحمل، يجب أن تركز البحوث على فهم الفيزيولوجيا المرضية واجهة الإنسان الأم والجنين. بكتيرية أو فطرية، ومسببات الأمراض الفيروسية التي تعبر من الأم إلى الجنين قضية المدمرة مضاعفات الحمل وعدوى الجنين. التحكم في العدوى فيفو العاني مختبريعتبر ملس عادة المعيار الذهبي لمعالجة كيفية استعمار مسببات الأمراض والعبور بين الأجهزة 28. لأن التشريح المشيمة يختلف بشكل ملحوظ في كل أنواع الثدييات، فإنه من الأهمية بمكان أن تدمج الأنسجة البشرية في استراتيجيات البحوث. الثقافات الجهاز زغبي والساقطية الإنسان هي أنظمة النموذجية ذات الصلة للغاية لتحقيق التفاعلات المضيف الممرض. لدراسة هذا الجهاز الحيوي بعد مفهومة، يمكن للباحثين الاستفادة من وفرة من المشيمة البشرية التخلص منها خلاف ذلك، والعينات الساقطة، وذلك باستخدام استراتيجيات الثقافة الجهاز مثل كما هو موضح هنا.

العدوى والالتهاب في واجهة الأم والجنين يمثل مصدرا رئيسيا للمراضة والوفيات في النساء والأطفال. فهم كيف تصيب الجراثيم هذه الأنسجة أمر بالغ الأهمية لتطوير استراتيجيات جديدة لمنع وعلاج الأمراض مثل الولادة المبكرة ووفاة الجنين. ومع ذلك، بين الأنواع عالية التباين واجهة الأم والجنين يعقد التحقيق التجريبي. وعلاوة على ذلك، تظهر مسببات الأمراض الأكثر الميكروبية خصوصية العائل، وبالتالي العديد من النماذج الحيوانية لا يمكن أن ألخص تماما الأمراض المعدية الإنسان. بعض الكائنات الحية (المستدمية النزلية، السالمونيلا التيفية، ضمة الكوليرا، والعديد من الآخرين) هي المسببة للأمراض بدقة في البشر، في حين أن البعض الآخر، مثل الليستريا الليستيريا، وعلى مستوى أكثر وسيطة من خصوصية المضيف 1. وقد تم توثيق خصوصية المضيف في كثير من جوانب المرضية، بما في ذلك الاستعمار 2، 3 نشر والتهرب المناعة 4 </sتصل&gt;، واقتناء المواد الغذائية 5. وبالتالي، فإنه من الأهمية بمكان لتحديد أنظمة نموذج المضيف الأمثل. يتألف من خلايا الجنين ودم الأم، والمشيمة هي العضو الذي يتطور بسرعة على مدار الحمل 6. في أبسط شروط، هي التي شيدت المشيمة البشرية هياكل تشبه شجرة &quot;زغبي&quot; الجنين استحم في دم الأم. الغاز وتبادل المغذيات يحدث عبر طبقات الخلايا الجنينية متخصصة تسمى أرومة مغذية التي تبطن السطح من أشجار زغبي. بطانة الرحم المخاطية الأمهات، وصف بطانة الرحم في الأنثى غير الحوامل، يحول هيكليا ووظيفيا في الساقط لاستيعاب وحدة جنيني مشيمي. وترسو الأشجار زغبي إلى الرحم عن طريق أرومة مغذية extravillous (EVT) التي تهاجر من ترسيخ أعمدة خلية في الساقط. واجهة الأم والجنين، وبالتالي، يتكون من الساقط والمشيمة. ووصفت تقنية زراعة الأعضاء هناوقد استخدمت لدراسة أين وكيف سريريا مسببات الأمراض البشرية ذات الصلة، بما في ذلك L. monocytogene الصورة والتوكسوبلازما، عبور الحاجز المشيمي 2،7. هذه الثقافات جهاز خارج الجسم الحي تكرار في الهندسة المعمارية أنسجة الجسم الحي، وهي نظم نموذج يمكن القول من الناحية الفسيولوجية ذات الصلة للغاية لالمشيمة البشرية. وتشمل تقنيات زراعة إضافية إإكسبلنتس كامل الجهاز، شرائح الجهاز، والأنسجة أو وقف organoids خلية جزءا لا يتجزأ في 3D مصفوفة. لمزيد من التفاصيل حول هذه الخيارات، يرجى الرجوع إلى استعراض حديث شامل 8. يرجى ملاحظة أن هذا البروتوكول هو لثقافة منفصلة من الساقط والزغب المشيمي. لدراسة التفاعل بين الخلايا المشيمة والخلايا الساقطة، قد يكون من المفضل تقنية ثقافة مشتركة. نشير القارئ المهتم إلى تقنية المشارك ثقافة زغابي ساقطي سبق وصفها، وتستخدم من قبل الباحثين الذين يدرسون بوساطة الأرومة الغاذية ساقطي إعادة الأوعية الدموية 9-11.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="573">
	<tbody>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:216px;">Sterilization pouches</td>
			<td style="width:71px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">01-812-54</td>
			<td style="width:167px;">For autoclaving individual dissecting tools</td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:216px;">Fine mesh strainer</td>
			<td style="width:71px;">Cuisinart (Amazon.com)</td>
			<td style="width:119px;">NA</td>
			<td>Wrap completely in aluminum foil and autoclave prior to tissue collection.&#160;&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:216px;">Carboy with spigot</td>
			<td style="width:71px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">03-007-647</td>
			<td>For large volume preparation of Wash buffer.</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Ice packs</td>
			<td style="width:71px;">Nortech labs</td>
			<td style="width:119px;">GB8818</td>
			<td>These do not have to be purchased, rather they can be recycled/reused from any routine laboratory shipment that includes them in the packaging.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">70% Ethanol</td>
			<td style="width:71px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">V1001</td>
			<td>70% solution made by adding dH20 to 190 or 200 proof research grade alcohol.&#160;&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:216px;">10% Bleach</td>
			<td style="width:71px;">Waxie Sanitary Supply</td>
			<td>CLO 30966</td>
			<td>10% solution made by adding dH20.</td>
		</tr>
		<tr height="80">
			<td height="80" style="height:80px;width:216px;">Light Box</td>
			<td style="width:71px;">Litebox Lumina (dickblick.com)</td>
			<td style="width:119px;">55305-2009&#160;</td>
			<td>Note replacement bulbs also purchased on Blick (55305.0100)</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Micro dissecting forceps&#160;</td>
			<td style="width:71px;">Stoelting&#160;</td>
			<td style="width:119px;">52102-43</td>
			<td>4in, 1x2 0.5mm, Slight Curve</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Micro dissecting forceps</td>
			<td style="width:71px;">Stoelting</td>
			<td style="width:119px;">52102-06</td>
			<td>4in, Straight Fine, Sharp</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Micro dissecting vannas spring scissors</td>
			<td style="width:71px;">Stoelting&#160;</td>
			<td style="width:119px;">52130-01P</td>
			<td>McPherson-Vannas Spring Scissors, 8.5cm, 0.33 Tip, Slight Curve</td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:216px;">Dissecting microscope</td>
			<td style="width:71px;">Leica Microsystems</td>
			<td style="width:119px;">MZ16 or M60</td>
			<td>We have had success with the listed models.&#160; External gooseneck flexible light sources are helpful but not necessary.</td>
		</tr>
		<tr height="80">
			<td height="80" style="height:80px;width:216px;">50 mL conical tubes</td>
			<td style="width:71px;">Sigma-Aldrich (Corning)</td>
			<td style="width:119px;">CLS4558</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="100">
			<td height="100" style="height:100px;width:216px;">Phosphate Buffered Saline</td>
			<td style="width:71px;">Gibco (ThermoFisher Scientific)</td>
			<td style="width:119px;">10010023</td>
			<td>We purchase from our university Tissue Culture Core facility, alternate options such as this are available.&#160;&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">10X Phosphate Buffered Saline</td>
			<td style="width:71px;">Teknova</td>
			<td style="width:119px;">P0195</td>
			<td>For preparation of Wash buffer we use 10X PBS</td>
		</tr>
		<tr height="80">
			<td height="80" style="height:80px;width:216px;">DMEM/F-12 nutrient mixture (Ham&#39;s) with GlutaMAX</td>
			<td style="width:71px;">Gibco (Life Technologies)</td>
			<td style="width:119px;">10565-018</td>
			<td>We purchase this specific media formulation, containing 2.438 g/L sodium bicarbonate, 55 mg/L sodium pyruvate, and 4.5 g/L glucose</td>
		</tr>
		<tr height="80">
			<td height="80" style="height:80px;width:216px;">Gentamicin</td>
			<td style="width:71px;">Thermofisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">15710072</td>
			<td>1000X stock. Recommend to prepare and store aliquots at -20 &#176;C to avoid freeze/thaw.</td>
		</tr>
		<tr height="100">
			<td height="100" style="height:100px;width:216px;">Penicillin/Streptomycin</td>
			<td style="width:71px;">Gibco (ThermoFisher Scientific)</td>
			<td>15140-122</td>
			<td>100X stock.&#160; Recommend to prepare and store aliquots at -20 &#176;C to avoid freeze/thaw.</td>
		</tr>
		<tr height="100">
			<td height="100" style="height:100px;width:216px;">Amphotericin B</td>
			<td style="width:71px;">Gibco (ThermoFisher Scientific)</td>
			<td style="width:119px;">15290-018</td>
			<td>500X stock.&#160; Recommend to prepare and store aliquots at -20 &#176;C to avoid freeze/thaw.</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">progesterone</td>
			<td style="width:71px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">P8783</td>
			<td>A 1 mM stock solution is made by reconstituting 15.7 mg progesterone powder in 15.7 mL Ethanol and adding 34.3 mL PBS. Solution is sterile filtered, aliquoted, and stored at -20 &#176;C.</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">17&#946;-estradiol</td>
			<td style="width:71px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">E2758</td>
			<td>A 10 &#956;M stock solution is made by reconstituting 13.5 mg estradiol powder in 10 mL ethanol and adding 40 mL PBS. Solution is sterile filtered, aliquoted, and stored at -20 &#176;C.</td>
		</tr>
		<tr height="80">
			<td height="80" style="height:80px;width:216px;">Bottle-top vaccum filter (0.22 &#956;m)</td>
			<td style="width:71px;">Sigma-Aldrich (Corning)</td>
			<td style="width:119px;">CLS430769</td>
			<td>For sterile filtration of Collection media after preparation</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">6-well tissue culture plate</td>
			<td style="width:71px;">BD Falcon</td>
			<td style="width:119px;">353224</td>
			<td>Polystyrene, Tissue culture treated</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">6-well transwells&#160;</td>
			<td style="width:71px;">Millipore</td>
			<td style="width:119px;">PICM03050</td>
			<td>Insert - 30mm diameter, 0.4&#956;m pore size hydrophilic PTFE membrane</td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:216px;">Extracellular Matrix (for example, Matrigel Matrix)</td>
			<td style="width:71px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:119px;">354234</td>
			<td>We have utilized Matrigel Matrix in our studies. It is a solid at room temperature and at -20 &#176;C. Avoid repeat freeze/thawing. Thaw bottle to viscous solution at 4 &#176;C, and prepare ~300&#956;L aliquotsin the cold room with chilled pipette tips. Store aliquots at -20 &#176;C.&#160;&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Paraformaldehyde, 16% w/v aqueous solution&#160;</td>
			<td style="width:71px;">Alfa Aesar</td>
			<td style="width:119px;">30525-89-4</td>
			<td>For tissue fixation, a fresh preparation of 4% paraformaldehyde is made by diluting this stock in PBS.</td>
		</tr>
		<tr height="80">
			<td height="80" style="height:80px;width:216px;">Tissue culture incubator, maintained at 37 &#176;C, 5% CO2, 3% oxygen (optional for villous organ cultures)</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>For some experiments, hypoxia may be preferred.&#160; This can be established multiple ways, including addition of exogenous nitrogen via gas cylinder, Tygon tubing, and a regulator.&#160;&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:216px;">Bench top centrifuge</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

human placental and decidual organ cultures to study infections at the maternal-fetal interface

تظهر المشيمة على درجة كبيرة من التباين التشريحي بين الأنواع. لفهم أفضل البيولوجيا والفيزيولوجيا المرضية من المشيمة البشرية، لا بد من تصميم التجارب باستخدام الخلايا البشرية والأنسجة. ميزة من الثقافة الجهاز هو الحفاظ على ثلاثي الأبعاد (3D) التنظيم الهيكلي والمصفوفة خارج الخلية. والهدف من هذا الأسلوب هو موضح هنا هو نجاح إنشاء فيفو السابقين الثقافات الحمل هيئة الأنسجة البشرية وعلى صيانة ثقافة صحية لل72-96 ساعة. تفاصيل بروتوكول لمعالجته فورا من البحوث وافق، المشيمة والعينات الساقطية جديدة من جناح التشغيل. هذه هي عينات وفيرة إلا سيتم التخلص منها. تعليمات مفصلة حول جمع عقيمة من هذه العينات، بما في ذلك تفاصيل الشكلية على كيفية اختيار الأنسجة المناسبة لإقامة الثقافات الجهاز 3D، يتم توفيرها. وmicrodissected الأنسجة زغبي والساقطية المشيمة إلى 2-3 مم 3 قطعوضعت بشكل منفصل على مرشحات transwell مبطنة مصفوفة ومثقف لعدة أيام. زغابي والثقافات الجهاز الساقطية مناسبة تماما للدراسة البشري التفاعل المضيف الممرض. بالمقارنة مع الكائنات نموذج أخرى، فإن هذه الثقافات الإنسانية هي مفيدة بشكل خاص لدراسة آلية العدوى لمسببات الأمراض التي تظهر أنماط مختلفة من خصوصية المضيف. وكمثال على ذلك، علينا أن نظهر إصابة الثقافات الجهاز المشيمة والساقطية مع الاختيارية البكتيريا الممرضة المستوحدة الليستيريا ذات الصلة سريريا، داخل الخلايا.

الشكل 1 (معدلة من زيلدوفيتش وBakardjiev 22) البيانية والمشيمة ذات الصلة وتشريح الرحم ويبين الشكل 2 الإجمالي تمثيلا والصور نسيجية من الزغابات المشيمية، بينما يوضح الشكل (3) الأنسجة الساقطة. هذا البروتوكول يصف لأول مرة مجموعة من المشيمة الطازجة والأنسجة الساقطية في المستشفى أو العيادة. العينة التي تم جمعها هي خليط من المشيمة الجنين (الزغب) ومكونات الرحم الأمهات (الساقط). بعد الشطف مع العازلة التي تحتوي على المضادات الحيوية واسعة الطيف ومضادات الفطريات، يتم فحص العينة بأكملها عن طريق العين باستخدام مربع الضوء. توضع الزغب والساقط في أنابيب منفصلة ونقل على الجليد إلى المختبر. في المختبر، يتم استخدام مجهر تشريح لتقدير الخصائص الشكلية غرامة من الأنسجة السليمة. الصور التمثيلية للزغابي (الشكل 2A) والأنسجة الساقطية ويبين الشكل (3A) التي تم الحصول عليها مع مجهر تشريح مع اثنين من مصادر الضوء معقوفة الخارجية لتكون مرجعا. يتم إنشاؤها الثقافات الجهاز زغبي من العينات الأشهر الثلاثة الأولى. تتكون ثقافات الأشجار زغبي محطة صغيرة مع 2-6 فروع. ومن المهم أن تشريح فروع زغبي أن تنتهي في الأعمدة الأرومة الغاذية extravillous وأوعية دموية جيدا. وينظر إلى هذه الميزات كفرع نهايات (السهام) &quot;رقيق&quot; أو &quot;غامض&quot;، وخافت الوردي إلى الأحمر هوى خطية أن الدورات من خلال فروع الشجرة على اليسار في الشكل 2A. في المقابل، الأوعية الدموية وأرومة مغذية extravillous لا تصور بسهولة لشجرة على اليمين من هذه الصورة، والتي ستكون دون المستوى الأمثل للثقافة. خلال اليوم الأول للثقافة وأرومة مغذية extravillous تهاجر إلى ECM، رHUS ترسيخ الأشجار زغبي في مصفوفة على transwell. يتم إنشاؤها الثقافات الجهاز الساقطية من أول وأوائل العينات الثلاثة أشهر الثانية. يتم تحويل بطانة الرحم بأكمله إلى الساقط قريبا جدا بعد الزرع. وبشكل أكثر تحديدا، وتعرف الساقط القاعدي الغشاء المخاطي في الرحم الكامنة مباشرة في موقع المشيمة / الزرع، الساقط capsularis يعرف الغشاء المخاطي المغطي للجنين، ويشير الساقط الجداري إلى ما تبقى من بطانة الرحم. التصور تحت المجهر تشريح تبين أن العينة الحمل الأولى يتكون إلى حد كبير من الجدارية الساقط وcapsularis الساقط (من اليسار وشظايا الأنسجة المناسبة، على التوالي، في الشكل 3A). وتتميز capsularis الساقط بسهولة عن طريق رقيقة وطبيعتها غشائي. للثقافات الجهاز، يتم قطع الساقط الجداري إلى 3 مم 3 شظايا مع مقص تشريح الصغيرة وadheتتم إزالة الإيجار الدم يتخثر بالملقط. وبعد الحضانة بين عشية وضحاها، يصاب الأنسجة مع L. الليستريا. ويستند البروتوكول العدوى المذكورة أعلاه على فحص حماية الجنتاميسين يستخدم لدراسة نمو الخلايا وانتشار البكتيريا داخل الخلايا الاختيارية 16. يتم تحضين الثقافات الجهاز في المتوسط ​​خالية من المضادات الحيوية مع L. المستوحدة لمدة 5 ساعة. تغسل الثقافات مع برنامج تلفزيوني العقيمة لإزالة البكتيريا من المتوسط. بعد ذلك، يتم إضافة جنتاميسين للقضاء على الكائنات الحية خارج الخلية. الأدب مسبق من مختبرنا تستخدم المناعي والفحص المجهري متحد البؤر لتحديد توطين الأنسجة البكتيرية على مختلف timepoints بعد إصابة 2. يتم شطف الثقافات الجهاز في برنامج تلفزيوني، ثابتة في 4٪ امتصاص العرق، وإما المجمدة جزءا لا يتجزأ في أكتوبر المتوسطة وتخزينها في -80 درجة مئوية، أو وتخزينها في درجة حرارة الغرفة جزءا لا يتجزأ من البارافين. يمكن أقسام الأنسجة يكون ستاINED لالمناعي (IF) أو المناعى (IHC) تحليل البكتيريا وتوطين خلية حقيقية النواة. الشكل 2B هو ممثل IF صورة لمقطع المجمدة المعدة من 8.3 أسبوع الثقافة الجهاز زغبي في 72 ساعة بعد الإصابة. لاحظ عبئا ثقيلا البكتيري (مخضر) في EVTs في نهايات الفروع زغبي، والنقص النسبي في البكتيريا في الطبقة شجرة بطانة الأرومة الغاذية المخلوية (مضان أحمر). في الأعمال السابقة، كنا مماثلة إذا تلطيخ لتوطين L. اللستيريا في الثقافات الجهاز زغبي في timepoints مختلفة بعد العدوى. أكثر من 72 ساعة، وانتشار العدوى من EVT إلى أرومة غاذية خلوية جنوب المخلوي وسدى زغابي الأساسي. والجدير بالذكر، وطبقة synyctiotrophoblast مقاومة للإصابة 2. تمثيلية الصور المجهرية الخفيفة من أقسام الأنسجة الساقطية جزءا لا يتجزأ من البارافين H &amp; E الملون وأعدت من 14.3 الأسبوع specime<html> وترد نانو ثانية في أرقام 3B و 3C. وكان جزءا لا يتجزأ من هذا الغشاء transwell ECM المغلفة لإظهار الثقافة الجهاز في الوضع الطبيعي (الشكل 3B). تظهر الصورة الغدد مبطنة الظهارية (النجمة) والأوعية الدموية مبطنة البطانية (الماس) المتمركزة بتباين داخل مقصورة الخلايا اللحمية الساقطة. بالإضافة إلى ذلك، هناك خلايا مناعية الأمهات المنتشرة في جميع أنحاء سدى ساقطي في مناطق ذات كثافة متغيرة. IHC وإذا يمكن أن تستخدم تلطيخ لتحديد البكتيريا توطين microanatomical، نسبة إلى الخلايا المناعية المقيمين محددة. وكمثال على ذلك، الضامة CD14 + (مخضر) توطين لبطانة الأوعية الدموية والمنتشرة داخل سدى (الشكل 3D)، في حين أن مجاميع كبيرة من L. ويلاحظ اللستيريا (مضان أحمر) في الغالب في سدى ساقطي في 48 ساعة بعد الإصابة (الشكل 3D). <table border="1" fo:keep-together.within-page="1"</html style=";text-align:right;direction:rtl">FO: المحافظة على مع next.within صفحة = &quot;دائما&quot;&gt; <tbody><tr><td> غسل العازلة </td><td> متوسطة جمع </td><td> متوسطة الزغابي </td><td> متوسطة ساقطي </td></tr><tr><td> برنامج تلفزيوني </td><td> DMEM / F-12 مع GlutaMAX </td><td> DMEM / F-12 مع GlutaMAX </td><td> DMEM / F-12 مع GlutaMAX </td></tr><tr><td> البنسلين 100 وحدة دولية / مل </td><td> مصل بقري جنيني 2.5٪ </td><td> مصل بقري جنيني 20٪ </td><td> مصل بقري جنيني 2.5٪ </td></tr><tr><td> الستربتومايسين 100 ميكروغرام / مل </td><td> البنسلين 100 وحدة دولية / مل </td><td> البنسلين 100 وحدة دولية / مل </td><td> 17β استراديول 300 غ / مل </td></tr><tr><td> الجنتاميسين 50 ميكروغرام / مل </td><td> الستربتومايسين 100 ميكروغرام / مل </td><td> الستربتومايسين 100 ميكروغرام / مل </td><td> البروجسترون 20 نانوغرام / مل </td></tr><tr><td> أمفوتيريسين ب 1.25 ميكروغرام / مل </td><td> الجنتاميسين 50 ميكروغرام / مل </td><td></td><td></td></tr><tr><td> &lt;<html> / td&gt; <td> أمفوتيريسين ب 1.25 ميكروغرام / مل </td><td></td><td></td></tr></tbody></table> الجدول 1: وصفات وسائل الإعلام مكونات وتجمعات لإعداد العازلة اغسل والمتوسطة مجموعة، زغبي المتوسطة، وساقطي المتوسطة. <img alt="شكل 1" src="/files/ftp_upload/54237/54237fig1.jpg" /> الشكل 1. المشيمة هيكل. (A) هيكل وحدة فيتو المشيمة في الرحم الأمومي، (ب) توسيع صندوق في الفقرة (أ) يسلط الضوء على أن الأرومة الغاذية الجنين (T) واصطف واستحم الزغب المشيمي في دم الأم وترسو في الساقط من قبل أرومة مغذية extravillous (EVT). الواردة في الزغابات هي السفن الجنين (اناث)، الخلايا الليفية، والضامة الجنين. تعديل من زيلدوفيتش وBakardjiev 22.<html> &quot;&gt; الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم. <img alt="الشكل 2" src="/files/ftp_upload/54237/54237fig2.jpg" /> الشكل 2: الثقافات الجهاز زغبي - إجمالي الممثل والصور المجهرية (A) اثنين من الأشجار زغبي النهائية مع عمر الحمل 6 أسابيع، وينظر تحت المجهر تشريح. ملاحظة نهايات &quot;رقيق&quot; (السهام) والأوعية الدموية الجنين بارز التعقيب من خلال فروع الشجرة على اليسار التي تجعل هذه القطعة مناسبة للثقافة الجهاز. (ب) المجهري المناعي للثقافة الجهاز (العمر الحملي 8.3 أسابيع) 72 ساعة بعد العدوى مع المستوحدة الليستيريا، وتسليط الضوء عبء ثقيل البكتيرية [الأخضر] في أرومة مغذية extravillous. يظهر دابي باللون الأزرق، وβHCG + أرومة غاذية مخلوية باللون الأحمر. الحانات النطاق = 1 ملم (A)، و 250 ميكرون (B).7 / 54237fig2large.jpg &quot;الهدف =&quot; _ فارغة &quot;&gt; الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم. <img alt="الشكل (3)" src="/files/ftp_upload/54237/54237fig3.jpg" /> الرقم 3: الثقافة الجهاز ساقطي - إجمالي الممثل والصور المجهرية (A) الساقط الجداري لل[يسار] وcapsularis الساقط [حق] في الحمل عمر 6 أسابيع، وينظر تحت المجهر تشريح. القسم الملون الإلكتروني (B) H &amp; 14.3 الأسبوع الحملي سن الساقط الجداري للثقافة الجهاز يظهر الغدد والأوعية الدموية المنظمة بتباين في جميع أنحاء سدى ساقطي. و(الماس، ◆) و(النجمة *) تسليط الضوء على سفينة التمثيلية والغدة، على التوالي. الخط البني في الحافة السفلى هو transwell غشاء، على حافة الهاوية. (C) H &amp; E الملطخة قسم من 14.3 الأسبوع الساقط عمر الحمل الجداري للثقافة الجهاز في أعلى التكبير دemonstrates الشرايين دوامة العضلات الجدران جزءا لا يتجزأ من سدى ساقطي. الخلايا المناعية الأمهات صغيرة مع نواة مستديرة داكنة، وتوزع بشكل غير منتظم في جميع أنحاء سدى. (D) المناعي المجهري الثقافة الجهاز 48 ساعة بعد الإصابة مع L. اللستيريا، وتسليط الضوء مناطق كبيرة من البكتيريا [الأحمر] في سدى ساقطي، وCD14 + الأمهات الضامة [الأخضر] بطانة الأوعية الدموية الفضاء متعرج والمنتشرة في سدى. على نطاق والحانات = 1 ملم (A)، و 250 ميكرون (B)، 50 ميكرون (C و D). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/54237/54237fig3large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Human Placental and Decidual Organ Cultures to Study Infections at the Maternal-fetal Interface at JoVE.com

Human Placental and Decidual Organ Cultures to Study Infections at the Maternal-fetal Interface

ووصف وهناك طريقة بسيطة لإنشاء المشيمة الإنسان الأساسية (زغابي) والثقافات الجهاز الساقطة. الثقافات الجهاز زغبي والساقطية هي أدوات لا تقدر بثمن لدراسة المرضية في واجهة الإنسان الأم والجنين. ويتجلى العدوى ببكتيريا الليستيريا الخلايا اللستيريا الاختيارية.

الثقافات المشيمة وساقطي الجهاز الإنسان لدراسة العدوى في واجهة الأم والجنين

The placenta shows a large degree of interspecies anatomic variability. To best understand biology and pathophysiology of the human placenta, it is ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

An Experimental Model to Study Tuberculosis-Malaria Coinfection upon Natural Transmission of Mycobacterium tuberculosis and Plasmodium berghei

An Experimental Model to Study Tuberculosis-Malaria Coinfection upon Natural Transmission of Mycobacterium tuberculosis and Plasmodium berghei

نموذج تجريبي لدراسة الملاريا والسل عدوى مرافقة على انتقال الطبيعية السل المتفطرة و المتصورة berghei</i

Coinfections naturally occur due to the geographic overlap of distinct types of pathogenic organisms. Concurrent infections most likely modulate the ...

Humanized Mouse Model to Study Bacterial Infections Targeting the Microvasculature

أنسنة نموذج الفأر لدراسة الالتهابات البكتيرية استهداف الأوعية الدموية الدقيقة

Neisseria meningitidis causes a severe, frequently fatal sepsis when it enters the human blood stream. Infection leads to extensive damage of the blood ...

Isolation of Human Monocytes by Double Gradient Centrifugation and Their Differentiation to Macrophages in Teflon-coated Cell Culture Bags

عزل حيدات الإنسان من مزدوجة التدرج الطرد المركزي والتمايز لالضامة في تفلون المغلفة حقائب خلية ثقافة

Human macrophages are involved in a plethora of pathologic processes ranging from infectious diseases to cancer. Thus they pose a valuable tool to ...

Isolation of Leukocytes from the Human Maternal-fetal Interface

عزل الكريات البيضاء من واجهة الإنسان الأم والجنين

Pregnancy is characterized by the infiltration of leukocytes in the reproductive tissues and at the maternal-fetal interface (decidua basalis and decidua ...

Isolation of Leukocytes from the Murine Tissues at the Maternal-Fetal Interface

عزل الكريات البيض من أنسجة الفئران في واجهة الأم والجنين

Immune tolerance in pregnancy requires that the immune system of the mother undergoes distinctive changes in order to accept and nurture the developing ...

Methods to Study Lipid Alterations in Neutrophils and the Subsequent Formation of Neutrophil Extracellular Traps

طرق لدراسة الدهون التعديلات في العدلات وتشكيل لاحقة من الفخاخ خارج الخلية العدلات

Lipid analysis performed by high performance thin layer chromatography (HPTLC) is a relatively simple, cost-effective method of analyzing a broad range of ...

Methodology for the Study of Horizontal Gene Transfer in Staphylococcus aureus

Methodology for the Study of Horizontal Gene Transfer in Staphylococcus aureus

منهجية لدراسة نقل أفقي جين في<em&gt; المكورات العنقودية الذهبية</em

One important feature of the major opportunistic human pathogen Staphylococcus aureus is its extraordinary ability to rapidly acquire resistance to ...

The WinCF Model - An Inexpensive and Tractable Microcosm of a Mucus Plugged Bronchiole to Study the Microbiology of Lung Infections

نموذج وينف - غير مكلفة و تراكتابل مصغر من المخاط توصيل القصبات لدراسة الأحياء الدقيقة من التهابات الرئة

Many chronic airway diseases result in mucus plugging of the airways. Lungs of an individual with cystic fibrosis are an exemplary case where their ...

Overexpression and Purification of Human Cis-prenyltransferase in Escherichia coli

Overexpression and Purification of Human Cis-prenyltransferase in Escherichia coli

أوفيركسريسيون وتنقية الإنسان<em&gt; رابطة الدول المستقلة</em&gt; -prenyltransferase في<em&gt; الإشريكية القولونية</em

Prenyltransferases (PT) are a group of enzymes that catalyze chain elongation of allylic diphosphate using isopentenyl diphosphate (IPP) via multiple ...