Name: combining intravital fluorescent microscopy (ivfm) with genetic models to study engraftment dynamics of hematopoietic cells to bone marrow niches
Uploaded: 2017-03-21T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Combining Intravital Fluorescent Microscopy IVFM with Genetic Models to Study Engraftment Dynamics of Hematopoietic Cells to Bone Marrow Niches at JoVE.com

Bildebehandling ble gjennomført i Indiana Center for biologisk mikroskopi ved Indiana University, ledet av Dr. Ken Dunn. Stereotaxic enheten er en prototype designet og utviklet av Mark Soonpaa, Wells senter for Pediatric forskning. Dette arbeidet ble støttet av NIH/R01DK097837-09 (NC), NIH/R01HL068256-05 (NC), NIH/NIDDK1U54DK106846-01 (NC), MPN forskning Foundation (NC) og CTSI samarbeid prosjektet IUSM/Notre Dame (NC).

Alle prosedyrer som involverer bruk av dyr ble utført med godkjenning av Animal Care og bruke komiteen av Indiana University School of Medicine. Sørg for å følge lovgivningen på dyr eksperimentering i landet der arbeidet utføres.
1. forberedelse av Mx1CreRBPJ- / - mottaker mus
<ol><li>Krysse Mx1-grobunn+ mus med RBPJlox/lox mus10 hente Mx1-grobunnpositive RBPJlox/lox mus12 ...

<ol>
	<li>Carlesso, N., Cardoso, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem+cell+regulatory+niches+and+their+role+in+normal+and+malignant+hematopoiesis.">Stem cell regulatory niches and their role in normal and malignant hematopoiesis.</a> Curr Opin Hematol. 17 (4), 281-286 (2010).</li><li>Lo Celso, C., Scadden, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+haematopoietic+stem+cell+niche+at+a+glance.">The haematopoietic stem cell niche at a glance.</a> J Cell Sci. 124 (PT 21), 3529-3535 (2011).</li><li>Calvi, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoblastic+cells+regulate+the+haematopoietic+stem+cell+niche.">Osteoblastic cells regulate the haematopoietic stem cell niche.</a> Nature. 425 (6960), 841-846 (2003).</li><li>Kiel, M. J., Yilmaz, O. H., Iwashita, T., Terhorst, C., Morrison, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SLAM+family+receptors+distinguish+hematopoietic+stem+and+progenitor+cells+and+reveal+endothelial+niches+for+stem+cells.">SLAM family receptors distinguish hematopoietic stem and progenitor cells and reveal endothelial niches for stem cells.</a> Cell. 121 (7), 1109-1121 (2005).</li><li>Zhang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+the+haematopoietic+stem+cell+niche+and+control+of+the+niche+size.">Identification of the haematopoietic stem cell niche and control of the niche size.</a> Nature. 425 (6960), 836-841 (2003).</li><li>Mendez-Ferrer, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+and+haematopoietic+stem+cells+form+a+unique+bone+marrow+niche.">Mesenchymal and haematopoietic stem cells form a unique bone marrow niche.</a> Nature. 466 (7308), 829-834 (2010).</li><li>Naveiras, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bone-marrow+adipocytes+as+negative+regulators+of+the+haematopoietic+microenvironment.">Bone-marrow adipocytes as negative regulators of the haematopoietic microenvironment.</a> Nature. 460 (7252), 259-263 (2009).</li><li>Scheiermann, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adrenergic+nerves+govern+circadian+leukocyte+recruitment+to+tissues.">Adrenergic nerves govern circadian leukocyte recruitment to tissues.</a> Immunity. 37 (2), 290-301 (2012).</li><li>Faust, N., Varas, F., Kelly, L. M., Heck, S., Graf, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insertion+of+enhanced+green+fluorescent+protein+into+the+lysozyme+gene+creates+mice+with+fluorescent+granulocytes+and+macrophages.">Insertion of enhanced green fluorescent protein into the lysozyme gene creates mice with fluorescent granulocytes and macrophages.</a> Blood. 96 (2), 716-726 (2000).</li><li>Han, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inducible+gene+knockout+of+transcription+factor+recombination+signal+binding+protein-J+reveals+its+essential+role+in+T+versus+B+lineage+decision.">Inducible gene knockout of transcription factor recombination signal binding protein-J reveals its essential role in T versus B lineage decision.</a> Int Immunol. 14 (6), 637-645 (2002).</li><li>Lo Celso, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live-animal+tracking+of+individual+haematopoietic+stem/progenitor+cells+in+their+niche.">Live-animal tracking of individual haematopoietic stem/progenitor cells in their niche.</a> Nature. 457 (7225), 92-96 (2009).</li><li>Wang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Notch-dependent+repression+of+miR-155+in+the+bone+marrow+niche+regulates+hematopoiesis+in+an+NF-kappaB-dependent+manner.">Notch-dependent repression of miR-155 in the bone marrow niche regulates hematopoiesis in an NF-kappaB-dependent manner.</a> Cell Stem Cell. 15 (1), 51-65 (2014).</li><li>Miyamoto, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myeloid+or+lymphoid+promiscuity+as+a+critical+step+in+hematopoietic+lineage+commitment.">Myeloid or lymphoid promiscuity as a critical step in hematopoietic lineage commitment.</a> Dev Cell. 3 (1), 137-147 (2002).</li><li>Luc, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Down+Regulation+of+Mpl+marks+the+transition+to+lymphoid-primed+multipotent+progenitors+with+gradual+loss+of+granulocyte-monocyte+potential.">Down Regulation of Mpl marks the transition to lymphoid-primed multipotent progenitors with gradual loss of granulocyte-monocyte potential.</a> Blood. 111 (7), 3424-3434 (2008).</li><li>Suzuki, M., Moriguchi, T., Ohneda, K., Yamamoto, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+contribution+of+the+Gata1+gene+hematopoietic+enhancer+to+erythroid+differentiation.">Differential contribution of the Gata1 gene hematopoietic enhancer to erythroid differentiation.</a> Mol Cell Biol. 29 (5), 1163-1175 (2009).</li><li>Essers, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IFNalpha+activates+dormant+haematopoietic+stem+cells+in+vivo.">IFNalpha activates dormant haematopoietic stem cells in vivo.</a> Nature. 458 (7240), 904-908 (2009).</li><li>Pietras, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Re-entry+into+quiescence+protects+hematopoietic+stem+cells+from+the+killing+effect+of+chronic+exposure+to+type+I+interferons.">Re-entry into quiescence protects hematopoietic stem cells from the killing effect of chronic exposure to type I interferons.</a> J Exp Med. 211 (2), 245-262 (2014).</li><li>Scott, M. K., Akinduro, O., Lo Celso, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+4-dimensional+tracking+of+hematopoietic+stem+and+progenitor+cells+in+adult+mouse+calvarial+bone+marrow.">In vivo 4-dimensional tracking of hematopoietic stem and progenitor cells in adult mouse calvarial bone marrow.</a> J Vis Exp. (91), e51683 (2014).</li></ol>

Denne protokollen beskriver en eksperimentell design optimalisert for å studere the kinetics av blodkreft cellene engraftment av Intravital fluorescerende mikroskopi. I denne studien ble utvidelse av myeloid progenitor celler i en WT BM eller et hakk signalering defekt BM sporet i bein calvarium av følgende Lys-GFP positive myeloide celler etter BMT i RBPJWT eller RBPJKO mottakere. Denne tilnærmingen er foreslått som en modell som kan brukes på adressen lignende spørsmål, for eksempel: jeg) å finne ekspansjon og ...

Intravital multiphoton fluorescens mikroskopi (IVFM) er en kraftig tenkelig teknikk som gir det høy oppløsning, sanntid imaging av vev med dybde opp til 1mm, avhengig av vev. Når brukt på mus-calvarium, tillater det observere atferden til blodkreft cellene i BM på en ikke-invasiv måte opp til 60-100 μm11. Denne fremgangsmåten brukes her til å bestemme the kinetics av engraftment av normal myelogen progenitors i BM av RBPJ bank-out mus mangler kanoniske hakk signalering.
Siste arbeid fra vår gruppe vist at defekt kanoniske hakk signalering i BM microenvironment fører til en myeloproliferative-lignende sykdom12. Tap hakk signalnettverk ble anskaffet av betinget sletting av DNA bindende domenet RBPJ, kritisk transkripsjon faktoren nedstrøms for kanoniske hakk signalnettverk, bruker Mx1-grobunn indusert rekombinasjon10. I denne studien ble Mx1-grobunn/RBPJlox/lox mus modell brukt. Betinget sletting av DNA-bindende motivet av RBPJ resulterer i tap av signal fra alle hakk reseptorer. I Mx1-grobunn modellen, grobunn uttrykk er drevet av Mx1 selskapet aktiveres ved administrasjon av polyI:C som resulterer i induksjon av målrettet genet sletting i blod celler så vel som stromal komponenter av flere organer, inkludert BM, milt og lever.
Mx1-grobunn+/RBPJlox/lox og Mx1-grobunn-/RBPJlox/lox mus indusert med polyI:C (heretter angitt som RBPJKO og RBPJWT, henholdsvis) var drepende bestrålt og transplantert normalt, vill type blodkreft cellene. Fra uke 4 etter transplantasjon, utviklet RBPJKO mottakere betydelige leukocytose etterfulgt av splenomegali. Selv om RBPJKO mus presentert økt andel av myelogen progenitors i BM på uke 8 etter transplantasjon og senere tidspunkt, avsløre analyse av BM uker 4 og 6 ikke slående forskjeller i deres myelogen celleinnholdet i forhold til kontrollen RBPJWT mottakere. Denne observasjon, sammen med det faktum at Mx1-grobunn uttrykkes i ulike blodkreft organer, reist spørsmålet om BM microenvironment hadde direkte innvirkning på initiering av myeloproliferative fenotypen.
For å fastslå om BM var en kritisk første side av sykdom utvikling, ble IVFM av mus-calvarium brukt i kombinasjon med BM transplantasjon (BMT), RBPJ bank-out modellen og en slektslinje sporingssystem. Transgene mus uttrykke EGFP under kontroll av bestemte lysozyme promoter (Lys-GFP)9 ble brukt til å få giver celler som kan visualiseres under BM imaging etter BMT. Lysozyme uttrykk gjelder myeloide celler og Lys-GFP markerer celler fra vanlige myelogen stamfar (CMP) til eldre granulocytt13.
IVFM med BM på ulike tidspunkt vist at Lys-GFP celler homed tilsvarende til BM av RBPJWT og RBPJKO mottakere, men utvidet og engrafted raskere i BM av RBPJKO mottakere. Denne forskjellen var dramatisk på det tidligere tidspunktet (uke 2) og gått ned over tid (uker 4 og 6). Men på disse senere tidspunkt, evaluering av blodkreft kupé i samme mottaker viste en jevn økning i antall myeloide celler i PB og lokalisert i milten av RBPJKO mus, som indikerer en økt produksjon av celler fra BM i sirkulasjonen. Analyse av Lys-GFP celler lokalisering i BM transplantert mus for 6 ukens avdekket at myeloide celler ble bosatt videre fra er blodkar i RBPJKO microenvironment enn i kontrollen.
Kollektivt, gitt kombinasjonen av IVFM med disse bestemte dyremodeller innsikt i engraftment dynamics av myeloide celler i RBPJKO BM-microenvironment. Eksperimentell design og kvantitativ tilnærming er beskrevet her er foreslått som et paradigme som kan brukes for å løse lignende spørsmål. For eksempel bruk av andre celle bestemt avstamning sporing modeller, for eksempel RAG1-GFP14 eller Gata1-GFP15 mus, kan følgende virkemåte lymfoide eller erythroid progenitors, i BM.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1033">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Ketamine cocktail</td>
			<td style="width:167px;">IU School of Medicine</td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td style="width:511px;">Ketamine 90-100mg/kg, Xylazine 2.5-5.0 mg/kg, Acepromazine 1.0-2.5 mg/kg</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">TRITC dextran</td>
			<td style="width:167px;">Tdb Consultancy</td>
			<td style="width:139px;">TD150-100mg</td>
			<td>Other color dextran may be used.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Andis hair trimmer</td>
			<td style="width:167px;">Braintree Scientific</td>
			<td style="width:139px;">CLP-323 75</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Gauze sponge</td>
			<td style="width:167px;">Med Vet International</td>
			<td style="width:139px;">PK224</td>
			<td>4-ply, 2X2</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Nair depilatory cream</td>
			<td style="width:167px;">Commercial store</td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Saline</td>
			<td style="width:167px;">Med Vet International</td>
			<td style="width:139px;">RXSAL-POD1LT</td>
			<td>0.9% Sodium Chloride poly bottle</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Insulin syringe</td>
			<td style="width:167px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:139px;">14-826-79</td>
			<td>28g, 1/2cc</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;width:216px;">Fine Forceps</td>
			<td style="width:167px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:139px;">00108-11, 00109-11</td>
			<td>straight forcep, angled forcep</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Scissor</td>
			<td style="width:167px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:139px;">15018-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Needle holder</td>
			<td style="width:167px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:139px;">12002-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">5-0 silk suture</td>
			<td style="width:167px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:139px;">MV-682</td>
			<td>Other non-absorbable suture may be used</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">WillCo- glass bottom dish</td>
			<td style="width:167px;">WillCo</td>
			<td style="width:139px;">GWSt-5040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Optical microscope oil</td>
			<td style="width:167px;">Leica</td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Stereotaxic stage insert&#160;</td>
			<td style="width:167px;">IU School of Medicine</td>
			<td style="width:139px;">Custom design</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Olympus FV1000 confocal microscope system&#160;</td>
			<td style="width:167px;">Olympus</td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Olympus XLUMPLFL 20xW, NA 0.95 objective&#160;</td>
			<td style="width:167px;">Olympus</td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Small heating pad</td>
			<td style="width:167px;">Commercial store</td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td>Zoo Med reptile heating pad</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Imaris 8.1 imaging software</td>
			<td style="width:167px;">Bitplane</td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td>3/4 D Image Visualization and Analysis software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

combining intravital fluorescent microscopy (ivfm) with genetic models to study engraftment dynamics of hematopoietic cells to bone marrow niches

Økende bevis viser at vanlige hematopoiesis er regulert av forskjellige microenvironmental bunker i BM, inkluderer spesialisert mobilnettet nisjer modulerende kritiske blodkreft stem cell (HSC) funksjoner1,2. Faktisk fremstår et mer detaljert bilde av blodkreft microenvironment nå, der den endosteal og den endothelial nisjer form funksjonelle enheter for regulering av normal HSC og deres avkom3,4,5 . Nye studier har vist betydningen av perivascular cellene, adipocytter og neuronal vedlikeholde og regulere HSC funksjon6,7,8. Videre er det bevis for at celler fra ulike linjene, dvs lymfoide og myeloide celler, hjem og bor i spesifikke nisjer i BM-microenvironment. En fullstendig kartlegging av BM-microenvironment og beboerne er imidlertid fortsatt pågår.
Transgene musen stammer uttrykke lineage bestemt fluorescerende markører eller mus genmodifiserte for å mangler utvalgte molekyler i bestemte celler i BM nisje er nå tilgjengelig. Knock-out og avstamning sporing modeller, sammen med transplantasjon tilnærminger, gi salgsmuligheten for å fornye kunnskap om rollen av "nisje" celler for definerte blodkreft bestander, som HSC B-celler, T-celler, myeloide celler og erythroid celler. Denne strategien kan være ytterligere potentiated ved å flette bruk av to-fotonet mikroskopi av calvarium. Ved å gi i vivo høy oppløsning bilder og 3D-gjengivelse av BM-calvarium, kan vi nå bestemme nøyaktig plassering der bestemte blodkreft delsett hjemme i BM og evaluere the kinetics av deres ekspansjon over tid. Her, brukes Lys-GFP transgene mus (markering myeloide celler)9 og RBPJ bank-out mus (mangler kanoniske hakk signalisering)10 i kombinasjon med IVFM til å bestemme engraftment av myeloide celler til et hakk defekt BM microenvironment.

Kohorter av 2 RBPJKO og 2 RBPJWT mottakere ble avbildet i en tenkelig økt på ulike tidspunkt: 24 h og 2, 4 og 6 uker etter transplantasjon av BM Lys-GFP celler (arbeidsflyt er illustrert i figur 1A).
I hver mouse, ble bildene anskaffet fra 6 standard regioner i BM calvarium, identifisert av deres posisjon i forhold til bifurkasjonen av sentrale venen (figur 2A, en) og det koro...

Watch this Scientific Journal Video about Combining Intravital Fluorescent Microscopy IVFM with Genetic Models to Study Engraftment Dynamics of Hematopoietic Cells to Bone Marrow Niches at JoVE.com

Combining Intravital Fluorescent Microscopy IVFM with Genetic Models to Study Engraftment Dynamics of Hematopoietic Cells to Bone Marrow Niches

Intravital fluorescens mikroskopi (IVFM) av calvarium brukes i kombinasjon med genetisk dyremodeller å studere drap og engraftment av blodkreft cellene i benmargen (BM) nisjer.

Kombinerer Intravital fluorescerende mikroskopi (IVFM) med genetisk modeller å studere Engraftment dynamikken i blodkreft cellene benmarg nisjer

Increasing evidence indicates that normal hematopoiesis is regulated by distinct microenvironmental cues in the BM, which include specialized cellular ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Combining Intravital Fluorescent Microscopy (IVFM) with Genetic Models to Study Engraftment Dynamics of Hematopoietic Cells to Bone Marrow Niches

Automated Quantification of Hematopoietic Cell &#8211; Stromal Cell Interactions in Histological Images of Undecalcified Bone

Automated Quantification of Hematopoietic Cell ÃƒÂ¢Ã¢â€šÂ¬Ã¢â‚¬Å“ Stromal Cell Interactions in Histological Images of Undecalcified Bone

Automatisert Kvantifisering av Hematopoietiske Cell - stromal Cell Samhandling i Histologiske Bilder av Undecalcified Bone

Confocal microscopy is the method of choice for the analysis of localization of multiple cell types within complex tissues such as the bone marrow. ...

An Enzymatic Method to Rescue Mesenchymal Stem Cells from Clotted Bone Marrow Samples

En enzymatisk metode for å redde stamceller fra Clotted beinmargsprøver

Mesenchymal stem cells (MSCs) - usually obtained from bone marrow - often require expansion culture. Our protocol uses clinical grade urokinase to degrade ...

Isolating Mesangiogenic Progenitor Cells (MPCs) from Human Bone Marrow

Isolating Mesangiogenic Progenitor Cells MPCs from Human Bone Marrow

Isolere Mesangiogenic stamceller (MPCS) fra human benmarg

In a research study aimed to isolate human bone marrow (hBM)-derived Mesenchymal Stromal Cells (MSCs) for clinical applications, we identified a novel ...

In Vitro and In Vivo Models to Study Corneal Endothelial-mesenchymal Transition

In Vitro and In Vivo Models to Study Corneal Endothelial-mesenchymal Transition

In vitro og in vivo-modeller for å studere hornhinne endotel-mesenchymale Transition

Corneal endothelial cells (CECs) play a crucial role in maintaining corneal clarity through active pumping. A reduced CEC count may lead to corneal edema ...

A RANKL-based Osteoclast Culture Assay of Mouse Bone Marrow to Investigate the Role of mTORC1 in Osteoclast Formation

En RANKL-baserte Osteoclast kultur analysen av musen benmarg å undersøke rollen som mTORC1 i Osteoclast-formasjonen

Osteoclasts are unique bone-resorbing cells that differentiate from the monocyte/macrophage lineage of bone marrow. Dysfunction of osteoclasts may result ...

Isolation, Culture, and Differentiation of Bone Marrow Stromal Cells and Osteoclast Progenitors from Mice

Isolasjon, kultur og differensiering av benmarg Stromal celler og Osteoclast Progenitors fra mus

Bone marrow stromal cells (BMSCs) constitute a cell population routinely used as a representation of mesenchymal stem cells in vitro. They reside within ...

Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

Beregningsorientert analyse av Caenorhabditis elegans Germline å studere distribusjon av kjerner, proteiner og Cytoskeleton

The Caenorhabditis elegans (C. elegans) germline is used to study several biologically important processes including stem cell development, apoptosis, and ...

Adult Zebrafish Injury Models to Study the Effects of Prednisolone in Regenerating Bone Tissue

Voksen sebrafisk skade modeller for å studere virkningene av prednisolon i å regenerere benvev

Zebrafish are able to regenerate various organs, including appendages (fins) after amputation. This involves the regeneration of bone, which regrows ...

Assessment of Oxidative Damage in the Primary Mouse Ocular Surface Cells/Stem Cells in Response to Ultraviolet-C (UV-C) Damage

Assessment of Oxidative Damage in the Primary Mouse Ocular Surface Cells/Stem Cells in Response to Ultraviolet-C UV-C Damage

Vurdering av oksidativ skade i primær mus okulære overflateceller / stamceller som svar på ultrafiolett-C (UV-C) skade

The ocular surface is subjected to regular wear and tear due to various environmental factors. Exposure to UV-C radiation constitutes an occupational ...

Determination of Self- and Inter-(in)compatibility Relationships in Apricot Combining Hand-Pollination, Microscopy and Genetic Analyses

Determination of Self- and Inter-incompatibility Relationships in Apricot Combining Hand-Pollination, Microscopy and Genetic Analyses

Bestemmelse av selv- og inter-in)kompatibilitetsrelasjoner i aprikos kombinere hånd-pollinering, mikroskopi og genetiske analyser

Self-incompatibility in Rosaceae is determined by a Gametophytic Self-Incompatibility System (GSI) that is mainly controlled by the multiallelic locus S. ...