Name: combining intravital fluorescent microscopy (ivfm) with genetic models to study engraftment dynamics of hematopoietic cells to bone marrow niches
Uploaded: 2017-03-21T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Combining Intravital Fluorescent Microscopy IVFM with Genetic Models to Study Engraftment Dynamics of Hematopoietic Cells to Bone Marrow Niches at JoVE.com

Imaging genomfördes i Indiana Center för biologiska mikroskopi vid Indiana University, regisserad av Dr. Ken Dunn. Stereotaxic enheten är en prototyp designade och tillverkade av Mark Soonpaa, Wells centrum för pediatrisk forskning. Detta arbete fick stöd av NIH/R01DK097837-09 (NC), NIH/R01HL068256-05 (NC), NIH/NIDDK1U54DK106846-01 (NC), MPN forskningen Foundation (NC) och den CTSI Collaborative projektet IUSM/Notre Dame (NC).

Alla förfaranden som inbegriper användning av djur utfördes med tillstånd av djur vård och använda kommittén av Indiana University School of Medicine. Se till att följa lagstiftningen om djurförsök i det land där arbetet utförs.
1. beredning av Mx1CreRBPJ- / - mottagare möss
<ol><li>Korsa Mx1-Cre+ möss med RBPJlox/lox möss10 att få Mx1-Crepositiva RBPJlox/lox möss12</s...

<ol>
	<li>Carlesso, N., Cardoso, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem+cell+regulatory+niches+and+their+role+in+normal+and+malignant+hematopoiesis.">Stem cell regulatory niches and their role in normal and malignant hematopoiesis.</a> Curr Opin Hematol. 17 (4), 281-286 (2010).</li><li>Lo Celso, C., Scadden, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+haematopoietic+stem+cell+niche+at+a+glance.">The haematopoietic stem cell niche at a glance.</a> J Cell Sci. 124 (PT 21), 3529-3535 (2011).</li><li>Calvi, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoblastic+cells+regulate+the+haematopoietic+stem+cell+niche.">Osteoblastic cells regulate the haematopoietic stem cell niche.</a> Nature. 425 (6960), 841-846 (2003).</li><li>Kiel, M. J., Yilmaz, O. H., Iwashita, T., Terhorst, C., Morrison, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SLAM+family+receptors+distinguish+hematopoietic+stem+and+progenitor+cells+and+reveal+endothelial+niches+for+stem+cells.">SLAM family receptors distinguish hematopoietic stem and progenitor cells and reveal endothelial niches for stem cells.</a> Cell. 121 (7), 1109-1121 (2005).</li><li>Zhang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+the+haematopoietic+stem+cell+niche+and+control+of+the+niche+size.">Identification of the haematopoietic stem cell niche and control of the niche size.</a> Nature. 425 (6960), 836-841 (2003).</li><li>Mendez-Ferrer, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+and+haematopoietic+stem+cells+form+a+unique+bone+marrow+niche.">Mesenchymal and haematopoietic stem cells form a unique bone marrow niche.</a> Nature. 466 (7308), 829-834 (2010).</li><li>Naveiras, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bone-marrow+adipocytes+as+negative+regulators+of+the+haematopoietic+microenvironment.">Bone-marrow adipocytes as negative regulators of the haematopoietic microenvironment.</a> Nature. 460 (7252), 259-263 (2009).</li><li>Scheiermann, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adrenergic+nerves+govern+circadian+leukocyte+recruitment+to+tissues.">Adrenergic nerves govern circadian leukocyte recruitment to tissues.</a> Immunity. 37 (2), 290-301 (2012).</li><li>Faust, N., Varas, F., Kelly, L. M., Heck, S., Graf, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insertion+of+enhanced+green+fluorescent+protein+into+the+lysozyme+gene+creates+mice+with+fluorescent+granulocytes+and+macrophages.">Insertion of enhanced green fluorescent protein into the lysozyme gene creates mice with fluorescent granulocytes and macrophages.</a> Blood. 96 (2), 716-726 (2000).</li><li>Han, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inducible+gene+knockout+of+transcription+factor+recombination+signal+binding+protein-J+reveals+its+essential+role+in+T+versus+B+lineage+decision.">Inducible gene knockout of transcription factor recombination signal binding protein-J reveals its essential role in T versus B lineage decision.</a> Int Immunol. 14 (6), 637-645 (2002).</li><li>Lo Celso, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live-animal+tracking+of+individual+haematopoietic+stem/progenitor+cells+in+their+niche.">Live-animal tracking of individual haematopoietic stem/progenitor cells in their niche.</a> Nature. 457 (7225), 92-96 (2009).</li><li>Wang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Notch-dependent+repression+of+miR-155+in+the+bone+marrow+niche+regulates+hematopoiesis+in+an+NF-kappaB-dependent+manner.">Notch-dependent repression of miR-155 in the bone marrow niche regulates hematopoiesis in an NF-kappaB-dependent manner.</a> Cell Stem Cell. 15 (1), 51-65 (2014).</li><li>Miyamoto, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myeloid+or+lymphoid+promiscuity+as+a+critical+step+in+hematopoietic+lineage+commitment.">Myeloid or lymphoid promiscuity as a critical step in hematopoietic lineage commitment.</a> Dev Cell. 3 (1), 137-147 (2002).</li><li>Luc, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Down+Regulation+of+Mpl+marks+the+transition+to+lymphoid-primed+multipotent+progenitors+with+gradual+loss+of+granulocyte-monocyte+potential.">Down Regulation of Mpl marks the transition to lymphoid-primed multipotent progenitors with gradual loss of granulocyte-monocyte potential.</a> Blood. 111 (7), 3424-3434 (2008).</li><li>Suzuki, M., Moriguchi, T., Ohneda, K., Yamamoto, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+contribution+of+the+Gata1+gene+hematopoietic+enhancer+to+erythroid+differentiation.">Differential contribution of the Gata1 gene hematopoietic enhancer to erythroid differentiation.</a> Mol Cell Biol. 29 (5), 1163-1175 (2009).</li><li>Essers, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IFNalpha+activates+dormant+haematopoietic+stem+cells+in+vivo.">IFNalpha activates dormant haematopoietic stem cells in vivo.</a> Nature. 458 (7240), 904-908 (2009).</li><li>Pietras, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Re-entry+into+quiescence+protects+hematopoietic+stem+cells+from+the+killing+effect+of+chronic+exposure+to+type+I+interferons.">Re-entry into quiescence protects hematopoietic stem cells from the killing effect of chronic exposure to type I interferons.</a> J Exp Med. 211 (2), 245-262 (2014).</li><li>Scott, M. K., Akinduro, O., Lo Celso, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+4-dimensional+tracking+of+hematopoietic+stem+and+progenitor+cells+in+adult+mouse+calvarial+bone+marrow.">In vivo 4-dimensional tracking of hematopoietic stem and progenitor cells in adult mouse calvarial bone marrow.</a> J Vis Exp. (91), e51683 (2014).</li></ol>

Det här protokollet beskriver en experimentell design optimerad för att studera kinetiken för hematopoetiska celler engraftment av Intravital fluorescerande mikroskopi. I denna studie, var utbyggnaden av myeloida stamceller i en WT BM eller i ett snäpp signalering defekt BM spåras i det ben calvarium av följande Lys-GFP positiva myeloida celler efter BMT in RBPJWT eller RBPJKO mottagare. Detta tillvägagångssätt föreslås som en modell som kan tillämpas på adress liknande frågor, till exempel: jag) att fastst...

Intravital multiphoton fluorescensmikroskopi (IVFM) är en kraftfull imaging teknik som möjliggör den högupplösta, realtid imaging av vävnader med djup upp till 1mm, beroende på vävnaden. När tillämpas på mus calvarium, tillstånd det att observera beteendet hos de hematopoetiska cellerna inom BM i ett icke-invasivt sätt upp till 60-100 μm11. Detta tillvägagångssätt används här att bestämma kineticsen av engraftment av normala myeloida i de BM av RBPJ knock-out möss som saknar kanoniska Notch signalering.
Senaste arbete från vår grupp visat att defekta kanoniska Notch signalering i BM mikromiljö leder till en myeloproliferativ-liknande sjukdom12. Förlust av Notch signalering erhölls genom villkorad radering av DNA bindande domän RBPJ, den kritiska transkriptionsfaktor nedströms av kanoniska Notch signalering, använder Mx1-Cre inducerad rekombination10. I denna studie användes Mx1-Cre/RBPJlox/lox möss modellen. Villkorliga radering av DNA-bindande motiv av RBPJ resulterar i förlust av signalering från alla Notch receptorer. I Mx1-Cre modellen, Cre uttryck drivs av promotorn Mx1 aktiveras vid administrering av polyI:C resulterar i induktion av riktade gene borttagning i blodkroppar samt liksom stromal komponenter av flera organ, inklusive BM, mjälten och levern.
Mx1-Cre+/RBPJlox/lox och Mx1-Cre–/RBPJlox/lox möss inducerad med polyI:C (härefter anges som RBPJKO och RBPJWT, respektive) var dödligt bestrålade och transplanteras med normala, vildtyp hematopoetiska celler. RBPJKO mottagare från vecka 4 efter transplantation, och utvecklat betydande leukocytos följt av splenomegali. Även om RBPJKO möss presenteras ökade andelen myeloida i BM vid 8 veckor efter transplantationen och vid senare tidpunkter, visade analys av BM vid vecka 4 och 6 inte slående skillnader i deras myeloida cellinnehåll jämfört med kontroll RBPJWT mottagare. Denna observation, tillsammans med det faktum att Mx1-Cre uttrycks i olika hematopoetiska organ, tog upp frågan om den BM mikromiljö haft direkt inverkan på inledandet av myeloproliferativa fenotypen.
För att avgöra huruvida BM var kritiska första plats för sjukdomsutvecklingen, användes IVFM av mus calvarium i kombination med BM transplantation (BMT), RBPJ knock-out modellen och en släktlinje spårningssystem. Transgena möss att uttrycka andra under kontroll av den specifika lysozym arrangör (Lys-GFP)9 användes för att få givare celler som kan visualiseras under BM imaging efter BMT. Lysozym uttryck är specifika för myeloida celler och Lys-GFP markerar celler från den gemensamma myeloida stamceller (CMP) till mogen granulocyt13.
IVFM av BM vid olika tidpunkter visat att Lys-GFP celler homed på samma sätt till BM av RBPJWT och RBPJKO mottagare, men expanderade och rekonstituerades snabbare i BM av RBPJKO mottagarna. Denna skillnad var dramatisk vid den tidigare tidpunkten (vecka 2) och minskade över tid (veckor 4 och 6). Dock vid dessa senare tidpunkter, utvärdering av hematopoetiska facket på samma mottagare visade en stadig ökning av antalet myeloida celler som cirkulerar i PB och lokaliserade i mjälten hos RBPJKO möss, vilket indikerar en ökad produktion av celler från BM i cirkulationen. Analys av Lys-GFP celler lokalisering i BM av transplanterade möss på 6 veckor visade att myeloida celler var bosatta längre från kärlsystemet i den RBPJKO närmiljön än i kontrollen.
Sammantaget gav kombinationen av IVFM med dessa specifika djurmodeller insikter i engraftment dynamik av myeloida celler i den RBPJKO BM mikromiljö. Experimentell design och kvantitativ metod beskrivs här föreslås som ett paradigm som kan användas för att ta itu med liknande frågor. Exempelvis användning av andra cell specifika härstamning spårning modeller, såsom RAG1-GFP14 eller Gata1-GFP15 möss, tillåta efter uppförandet av lymfoida eller erytroid progenitorceller, respektive i BM.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1033">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Ketamine cocktail</td>
			<td style="width:167px;">IU School of Medicine</td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td style="width:511px;">Ketamine 90-100mg/kg, Xylazine 2.5-5.0 mg/kg, Acepromazine 1.0-2.5 mg/kg</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">TRITC dextran</td>
			<td style="width:167px;">Tdb Consultancy</td>
			<td style="width:139px;">TD150-100mg</td>
			<td>Other color dextran may be used.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Andis hair trimmer</td>
			<td style="width:167px;">Braintree Scientific</td>
			<td style="width:139px;">CLP-323 75</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Gauze sponge</td>
			<td style="width:167px;">Med Vet International</td>
			<td style="width:139px;">PK224</td>
			<td>4-ply, 2X2</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Nair depilatory cream</td>
			<td style="width:167px;">Commercial store</td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Saline</td>
			<td style="width:167px;">Med Vet International</td>
			<td style="width:139px;">RXSAL-POD1LT</td>
			<td>0.9% Sodium Chloride poly bottle</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Insulin syringe</td>
			<td style="width:167px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:139px;">14-826-79</td>
			<td>28g, 1/2cc</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;width:216px;">Fine Forceps</td>
			<td style="width:167px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:139px;">00108-11, 00109-11</td>
			<td>straight forcep, angled forcep</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Scissor</td>
			<td style="width:167px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:139px;">15018-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Needle holder</td>
			<td style="width:167px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:139px;">12002-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">5-0 silk suture</td>
			<td style="width:167px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:139px;">MV-682</td>
			<td>Other non-absorbable suture may be used</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">WillCo- glass bottom dish</td>
			<td style="width:167px;">WillCo</td>
			<td style="width:139px;">GWSt-5040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Optical microscope oil</td>
			<td style="width:167px;">Leica</td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Stereotaxic stage insert&#160;</td>
			<td style="width:167px;">IU School of Medicine</td>
			<td style="width:139px;">Custom design</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Olympus FV1000 confocal microscope system&#160;</td>
			<td style="width:167px;">Olympus</td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Olympus XLUMPLFL 20xW, NA 0.95 objective&#160;</td>
			<td style="width:167px;">Olympus</td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Small heating pad</td>
			<td style="width:167px;">Commercial store</td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td>Zoo Med reptile heating pad</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Imaris 8.1 imaging software</td>
			<td style="width:167px;">Bitplane</td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td>3/4 D Image Visualization and Analysis software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

combining intravital fluorescent microscopy (ivfm) with genetic models to study engraftment dynamics of hematopoietic cells to bone marrow niches

Ökande bevis indikerar att normala blodbildningen regleras av distinkta microenvironmental ledtrådar i BM, som omfattar specialiserade cellulära nischer modulerande kritiska hematopoetiska stamceller (HSC) funktioner1,2. Faktiskt, en mer detaljerad bild av den hematopoetiska mikromiljö växer nu fram, där de endosteala och endotel nischer utgör funktionella enheter för regleringen av normal HSC och deras avkomma3,4,5 . Nya studier har visat vikten av perivaskulär, adipocyter och neuronala celler att underhålla och reglera HSC funktion6,7,8. Dessutom finns det bevis för att celler från olika härstamningar, dvs myeloiska och lymfoida celler, hem och uppehålla sig inom specifika nischer inom den BM mikromiljö. En fullständig kartläggning av den BM närmiljön och ombordvarande är dock fortfarande pågår.
Transgena möss stammar uttrycker härstamning specifika fluorescerande markörer eller möss genetiskt konstruerade för att saknar markerade molekyler i specifika celler i BM nisch finns nu tillgängliga. Knock-out och härstamning spårning modeller, i kombination med transplantation metoder, ger möjlighet att förfina kunskapen om specifika ”nisch” roll celler för definierade hematopoetiska befolkningar, såsom HSC, B-celler, T-celler, myeloida celler och erytroid celler. Denna strategi kan förstärkas ytterligare genom en sammanslagning av användning av 2-foton mikroskopi av calvarium. Genom att tillhandahålla i vivo hög upplösning imaging och 3D-rendering av den BM calvarium, kan vi nu bestämma just den plats där enskilda hematopoetiska undergrupper hemma i BM och utvärdera kineticsen av sin expansion över tid. Här, Lys-GFP transgena möss (märkning myeloida celler)9 och RBPJ knock-out möss (saknar kanoniska Notch signalering)10 används i kombination med IVFM för att bestämma engraftment av myeloida celler till en Notch defekt BM mikromiljö.

Kohorter av 2 RBPJKO och 2 RBPJWT mottagare var avbildad i en individuell bildsession vid olika tidpunkter: 24 h och 2, 4 och 6 veckor efter transplantation av BM Lys-GFP celler (arbetsflöde illustreras i figur 1A).
I varje mus förvärvades bilder från 6 standard regioner i den BM calvarium, identifieras genom sin ställning i förhållande till bifurkationen av central ven (figur 2A, <strong...

Watch this Scientific Journal Video about Combining Intravital Fluorescent Microscopy IVFM with Genetic Models to Study Engraftment Dynamics of Hematopoietic Cells to Bone Marrow Niches at JoVE.com

Combining Intravital Fluorescent Microscopy IVFM with Genetic Models to Study Engraftment Dynamics of Hematopoietic Cells to Bone Marrow Niches

Intravital fluorescensmikroskopi (IVFM) av calvarium används i kombination med genetiska djurmodeller studera homing och engraftment av hematopoetiska celler i benmärgen (BM) nischer.

Att kombinera Intravital fluorescerande mikroskopi (IVFM) med genetiska modeller att studera Engraftment Dynamics av hematopoetiska celler till benmärgen nischer

Increasing evidence indicates that normal hematopoiesis is regulated by distinct microenvironmental cues in the BM, which include specialized cellular ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Combining Intravital Fluorescent Microscopy (IVFM) with Genetic Models to Study Engraftment Dynamics of Hematopoietic Cells to Bone Marrow Niches

Automated Quantification of Hematopoietic Cell &#8211; Stromal Cell Interactions in Histological Images of Undecalcified Bone

Automated Quantification of Hematopoietic Cell ÃƒÂ¢Ã¢â€šÂ¬Ã¢â‚¬Å“ Stromal Cell Interactions in Histological Images of Undecalcified Bone

Automatiserad Kvantifiering av hematopoetisk cell - stromacells- Interaktioner i Histologiska bilder från Undecalcified Bone

Confocal microscopy is the method of choice for the analysis of localization of multiple cell types within complex tissues such as the bone marrow. ...

An Enzymatic Method to Rescue Mesenchymal Stem Cells from Clotted Bone Marrow Samples

En enzymatisk metod för att rädda mesenkymala stamceller från Clotted benmärgsprov

Mesenchymal stem cells (MSCs) - usually obtained from bone marrow - often require expansion culture. Our protocol uses clinical grade urokinase to degrade ...

Isolating Mesangiogenic Progenitor Cells (MPCs) from Human Bone Marrow

Isolating Mesangiogenic Progenitor Cells MPCs from Human Bone Marrow

Isolations Mesangiogenic stamceller (MPC) från human benmärg

In a research study aimed to isolate human bone marrow (hBM)-derived Mesenchymal Stromal Cells (MSCs) for clinical applications, we identified a novel ...

In Vitro and In Vivo Models to Study Corneal Endothelial-mesenchymal Transition

In Vitro and In Vivo Models to Study Corneal Endothelial-mesenchymal Transition

In vitro och in vivo-modeller för att studera hornhinnan Endothelial-mesenkymala Transition

Corneal endothelial cells (CECs) play a crucial role in maintaining corneal clarity through active pumping. A reduced CEC count may lead to corneal edema ...

A RANKL-based Osteoclast Culture Assay of Mouse Bone Marrow to Investigate the Role of mTORC1 in Osteoclast Formation

En RANKL-baserade Osteoclast kultur analys av mus benmärgen att undersöka betydelsen av mTORC1 Osteoclast bildandet

Osteoclasts are unique bone-resorbing cells that differentiate from the monocyte/macrophage lineage of bone marrow. Dysfunction of osteoclasts may result ...

Isolation, Culture, and Differentiation of Bone Marrow Stromal Cells and Osteoclast Progenitors from Mice

Isolering, kultur och differentiering av benmärgens stromaceller och Osteoclast stamfäder från möss

Bone marrow stromal cells (BMSCs) constitute a cell population routinely used as a representation of mesenchymal stem cells in vitro. They reside within ...

Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

Computational analys av den Caenorhabditis elegans könsceller att studera fördelningen av atomkärnor, proteiner och cytoskelettet

The Caenorhabditis elegans (C. elegans) germline is used to study several biologically important processes including stem cell development, apoptosis, and ...

Adult Zebrafish Injury Models to Study the Effects of Prednisolone in Regenerating Bone Tissue

Adult zebrafiskar skada modeller för att studera effekterna av prednisolon i regenererande benvävnad

Zebrafish are able to regenerate various organs, including appendages (fins) after amputation. This involves the regeneration of bone, which regrows ...

Assessment of Oxidative Damage in the Primary Mouse Ocular Surface Cells/Stem Cells in Response to Ultraviolet-C (UV-C) Damage

Assessment of Oxidative Damage in the Primary Mouse Ocular Surface Cells/Stem Cells in Response to Ultraviolet-C UV-C Damage

Bedömning av oxidativ skada i de primära musokulära ytcellerna/stamcellerna som svar på ultraviolett-C (UV-C) Skada

The ocular surface is subjected to regular wear and tear due to various environmental factors. Exposure to UV-C radiation constitutes an occupational ...

Determination of Self- and Inter-(in)compatibility Relationships in Apricot Combining Hand-Pollination, Microscopy and Genetic Analyses

Determination of Self- and Inter-incompatibility Relationships in Apricot Combining Hand-Pollination, Microscopy and Genetic Analyses

Bestämning av själv- och inter-(in)kompatibilitetsrelationer i aprikos som kombinerar handpollinering, mikroskopi och genetiska analyser

Self-incompatibility in Rosaceae is determined by a Gametophytic Self-Incompatibility System (GSI) that is mainly controlled by the multiallelic locus S. ...