Name: automated lipid bilayer membrane formation using a polydimethylsiloxane thin film
Uploaded: 2016-07-10T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Automated Lipid Bilayer Membrane Formation Using a Polydimethylsiloxane Thin Film at JoVE.com

This work was supported by the Pioneer Research Center Program (NRF-2012-0009575) and National Research Foundation Grants (NRF-2012R1A1B4002413, NRF-2014R1A1A2059341) from the National Research Foundation of Korea. This work was also partially supported by the Inha University Research Grant.

1. Herstellung der Lösung <ol><li> Herstellung der Pufferlösung: <ol><li> Formulierung Pufferlösung aufzulösen 1 M KCl (Kaliumchlorid), 10 mM Tris-HCl (Tris-Hydrochlorid) und 1 mM EDTA (Ethylendiamintetraessigsäure) in destilliertem Wasser und pH-Einstellung auf 8,0. </li><li> Filtern Sie die Lösung, die ein 0,20 um-Filter. Zu sterilisieren, autoklaviert die Lösung bei 121 ° C für 15 min. </li></ol></li><li> Herstellung von Lipid-Lösung für Pre-Malerei: <ol><li> Um die Lipidlösung für Vorlackierung formul...

<ol>
	<li>Hanke, W., Schulue, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Planar lipid bilayers: methods and applications. , (2012).</li><li>Mirzabekov, T. A., Silberstein, A. Y., Kagan, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+planar+lipid+bilayer+membranes+for+rapid+screening+of+membrane+active+compounds.">Use of planar lipid bilayer membranes for rapid screening of membrane active compounds.</a> Methods Enzymol. 294, 661-674 (1999).</li><li>Bayley, H., Cremer, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stochastic+sensors+inspired+by+biology.">Stochastic sensors inspired by biology.</a> Nature. 413 (6852), 226-230 (2001).</li><li>Fang, Y., Lahiri, J., Picard, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=G+protein-coupled+receptor+microarrays+for+drug+discovery.">G protein-coupled receptor microarrays for drug discovery.</a> Drug. Discov. Today. 8 (16), 755-761 (2003).</li><li>Majd, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Applications+of+biological+pores+in+nanomedicine,+sensing,+and+nanoelectronics.">Applications of biological pores in nanomedicine, sensing, and nanoelectronics.</a> Curr. Opin. Biotechnol. 21 (4), 439-476 (2010).</li><li>Kim, Y. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthetic+Biomimetic+Membranes+and+Their+Sensor+Applications.">Synthetic Biomimetic Membranes and Their Sensor Applications.</a> Sensors (Basel). 12 (7), 9530-9550 (2012).</li><li>Ryu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Investigation+of+Ion+Channel+Activities+of+Gramicidin+A+in+the+Presence+of+Ionic+Liquids+Using+Model+Cell+Membranes.">Investigation of Ion Channel Activities of Gramicidin A in the Presence of Ionic Liquids Using Model Cell Membranes.</a> Sci Rep. 5, (2015).</li><li>Wood, C., Williams, C., Waldron, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patch+clamping+by+numbers.">Patch clamping by numbers.</a> Drug. Discov. Today. 9 (10), 434-441 (2004).</li><li>Mueller, P., Rudin, D. O., Tien, H. T., Wescott, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reconstitution+of+cell+membrane+structure+in+vitro+and+its+transformation+into+an+excitable+system.">Reconstitution of cell membrane structure in vitro and its transformation into an excitable system.</a> Nature. 194, 979-980 (1962).</li><li>Montal, M., Mueller, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Formation+of+bimolecular+membranes+from+lipid+monolayers+and+a+study+of+their+electrical+properties.">Formation of bimolecular membranes from lipid monolayers and a study of their electrical properties.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 69, 3561-3566 (1972).</li><li>Baaken, G., Sondermann, M., Schlemmer, C., Ruhe, J., Behrends, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Planar+microelectrode-cavity+array+for+high-resolution+and+parallel+electrical+recording+of+membrane+ionic+currents.">Planar microelectrode-cavity array for high-resolution and parallel electrical recording of membrane ionic currents.</a> Lab Chip. 8 (6), 938-944 (2008).</li><li>Costello, R., Peterson, I., Heptinstall, J., Byrne, N., Miller, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+robust+gel-bilayer+channel+biosensor.">A robust gel-bilayer channel biosensor.</a> Adv. Mater. Opt. Electron. 8 (2), 47-52 (1998).</li><li>Ide, T., Yanagida, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+artificial+lipid+bilayer+formed+on+an+agarose-coated+glass+for+simultaneous+electrical+and+optical+measurement+of+single+ion+channels.">An artificial lipid bilayer formed on an agarose-coated glass for simultaneous electrical and optical measurement of single ion channels.</a> Biochem. Biophys. Res. Commun. 265 (2), 595-599 (1999).</li><li>Jeon, T. J., Malmstadt, N., Schmidt, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hydrogel-encapsulated+lipid+membranes.">Hydrogel-encapsulated lipid membranes.</a> J Am Chem Soc. 128 (1), 42-43 (2006).</li><li>Malmstadt, N., Jeon, T. J., Schmidt, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-Lived+Planar+Lipid+Bilayer+Membranes+Anchored+to+an+In+Situ+Polymerized+Hydrogel.">Long-Lived Planar Lipid Bilayer Membranes Anchored to an In Situ Polymerized Hydrogel.</a> Adv. Mater. 20 (1), 84-89 (2008).</li><li>Jeon, T. J., Poulos, J. L., Schmidt, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+storable+and+shippable+lipid+bilayer+membrane+platform.">Long-term storable and shippable lipid bilayer membrane platform.</a> Lab. Chip. 8 (10), 1742-1744 (2008).</li><li>Ryu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+Lipid+Membrane+Formation+Using+a+Polydimethylsiloxane+Film+for+Ion+Channel+Measurements.">Automated Lipid Membrane Formation Using a Polydimethylsiloxane Film for Ion Channel Measurements.</a> Anal. Chem. 86 (18), 8910-8915 (2014).</li><li>Yaws, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Chemical Properties Handbooks: Physical, Thermodynamic, Environmental, Transport, Safety, and Health Related Properties for Organic and Inorganic Chemicals. , (1999).</li><li>Windholz, M., Budavari, S., Stroumtsos, L. Y., Fertig, M. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Merck index. An encyclopedia of chemicals and drugs. , (1976).</li><li>Miller, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Ion Channel Reconstitution. , (1986).</li><li>Miller, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Open-state+substructure+of+single+chloride+channels+from+Torpedo+electroplax.">Open-state substructure of single chloride channels from Torpedo electroplax.</a> Philos. Trans. R. Soc. Lond. B. Biol. Sci. 299 (1097), 401-411 (1982).</li><li>Benz, R., Frohlich, O., Lauger, P., Montal, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrical+capacity+of+black+lipid+films+and+of+lipid+bilayers+made+from+monolayers.">Electrical capacity of black lipid films and of lipid bilayers made from monolayers.</a> Biochim. Biophys. Acta. 394 (3), 323-334 (1975).</li><li>Priel, A., Gil, Z., Moy, V. T., Magleby, K. L., Silberberg, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ionic+requirements+for+membrane-glass+adhesion+and+giga+seal+formation+in+patch-clamp+recording.">Ionic requirements for membrane-glass adhesion and giga seal formation in patch-clamp recording.</a> Biophys. J. 92 (11), 3893-3900 (2007).</li></ol>

Our BLM formation technique provides a powerful tool for cell membrane and ion channel studies, in contrast to conventional techniques that have limited potential for industrial use. We developed a membrane precursor using a PDMS thin film, and devised a frozen membrane precursor with expedited self-assembly.
As opposed to conventional membrane formation methods with hydrophobic films, where membrane formation only occurs via surface interactions between the film and the lipid solution,20...

Künstliche Lipiddoppelschichtmembran oder schwarze Lipidmembran (BLM), ist ein wichtiges Werkzeug für die Mechanismen von Zellmembranen und Ionenkanäle, sowie für das Verständnis der Wechselwirkungen zwischen Ionenkanälen und Ionen / Moleküle. 1-7 Obwohl der Patch-Clamp - Methode Aufklären künstrekonstruierte Membranen Lipid - Doppelschicht als Alternative Werkzeuge für die Ionenkanal - Studien wird häufig der Goldstandard für die Zellmembran Studien betrachtet, ist es mühsam ist und hoch qualifizierten Operatoren für Ionenkanal - Messungen erfordert. 8 Während entstanden sind, sind 9,10 sie auch mit mühsamen assoziiert Prozesse und spezifisches Know-how. Darüber hinaus sind Membranen auf mechanische Störungen anfällig. Daher Lipid - Doppelschicht - Technologien bisher eingeführt haben nur begrenzte praktische Anwendungen. 11 Um die Robustheit und Langlebigkeit der Lipidmembranen, Costello et al zu verbessern. 12 und Ide und Yanagida <sup&gt; 13 haben eine freistehende Lipid - Doppelschicht von Hydrogelen unterstützt entwickelt. Trotz verbesserte Langlebigkeit jedoch (&lt;24 h) wurde Bilayer Robustheit nicht verbessert. Jeon et al. 14 entwickelt ein Hydrogel verkapselt Membran (HEM) mit intimen Hydrogel-Lipid - Doppelschicht Kontakt, zu einer erhöhten Lebensdauer erreicht wird (bis zu mehrere Tage). Um die Lebensdauer des HEM erhöhen, Malmstadt und Jeon et al. Erstellt ein Hydrogel verkapselt Membran mit Hydrogel-Lipid - Bindung über in-situ kovalente Konjugation (cgHEM). 15 In beiden Systemen Membranlebensdauer deutlich erhöht (&gt; 10 Tage) . Jedoch waren die Membranbildungssysteme nicht ausreichend robust und nicht gespeichert werden könnten oder geliefert, wo der Lipid-Doppelschichten für die Verwendung zu befreien Know-how erforderlich. Die Entwicklung einer Lipid-Doppelschicht-Plattform hat sich um zunehmende Robustheit und Langlebigkeit der BLMs in erster Linie drehte. Obwohl die Langlebigkeit der BLMs hat su gewesenbstantially kürzlich verbessert wurden ihre Anwendungen wegen mangelnder Transportfähigkeit und Lagerbarkeit begrenzt. Um diese Probleme zu überwinden, Jeon et al. Eine speicherbare Membransystem erzeugt und stellte eine Membran Vorläufers (MP). 16 auf einen MP konstruieren, bereiteten sie ein Gemisch aus n- Decan und Hexadecan , enthaltend 3% DPhPC (1,2-diphytanoyl- sn - glycero-3-Phosphatidylcholin) zur Steuerung des Gefrierpunktes der Lipidlösung , so dass sie bei ~ 14 ° C (unterhalb der Raumtemperatur, oberhalb typischen Kühlschranktemperatur einfrieren würde). In diesem Experiment wurde die MP verteilt auf eine kleine Öffnung auf eine Polytetrafluorethylen (PTFE) -Folie und anschließend in einem Kühlschrank bei 4 ° C eingefroren. Wenn der MP auf Raumtemperatur gebracht wurde, aufgetaut die MP und eine Lipiddoppelschicht automatisch gebildet wurde, die Expertise Eliminieren typischerweise mit Membranbildung verbunden. Allerdings war die Erfolgsquote der BLM vom MP gemacht so günstig wie ~ 27%, und die Membran Formation war inkonsistent (30 min bis 24 h), die Begrenzung der praktischen Anwendungen. In dieser Studie wird ein Polydimethylsiloxan (PDMS) Dünnfilm anstelle einer herkömmlichen hydrophoben dünnen Filmen (PTFE, Polyoxymethylen, Polystyrol) bis (a) Steuerherstellungszeit und (b) erhöhen die Erfolgsrate der BLM Bildung verwendet, wie zuvor von Ryu berichtet et al. 17 Hierin wurde die Membranbildung durch Extraktion von Lösungsmitteln erleichtert aufgrund der porösen Natur des PDMS, und die Zeit für die Membranbildung erforderlich war erfolgreich in dieser Studie kontrolliert. In diesem System, da die Lipidlösung in die PDMS-Dünnfilm, eine konsistente Membranbildungszeit absorbiert wurde, wurde erreicht. Außerdem wurde Membranlebensdauer verlängert durch langsame Absorption von Lösungsmitteln in die PDMS-Dünnfilm, ein Ergebnis der Zugabe von Squalen zu der Lipidlösung. Wir führten optischen und elektrischen Messungen zu überprüfen, dass Membranen mit dieser Technik sind für i geeignet gebildetauf den Kanälen Studien.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1448">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Potassium Chloride</td>
			<td style="width:172px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:199px;">P9333</td>
			<td style="width:743px;">For buffer solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Tris-hydrochloride</td>
			<td style="width:172px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:199px;">1185-53-1</td>
			<td>For buffer solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Ethylenediaminetetraacetic acid</td>
			<td style="width:172px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:199px;">60-00-4</td>
			<td>For buffer solution</td>
		</tr>
		<tr height="23">
			<td height="23" style="height:23px;width:335px;">n-decane</td>
			<td style="width:172px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:199px;">44074-U</td>
			<td>For lipid solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Hexadecane</td>
			<td style="width:172px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:199px;">544-76-3</td>
			<td>For lipid solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Squalene</td>
			<td style="width:172px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:199px;">S3626</td>
			<td>For lipid solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Gramicidin A</td>
			<td style="width:172px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:199px;">11029-61-1</td>
			<td>Membrane protein</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">1,2-diphytanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine</td>
			<td style="width:172px;">Avanti Polar Lipids, Inc.</td>
			<td style="width:199px;">850356</td>
			<td>For membrae formation</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Sylgard 184a and 184b elastromer kit</td>
			<td style="width:172px;">Dow Corning Asia</td>
			<td style="width:199px;"></td>
			<td>To produce PDMS thin film</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">0.2 &#956;m filter</td>
			<td style="width:172px;">Satorius stedim</td>
			<td style="width:199px;">16534----------K</td>
			<td>To filter buffer solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Rotator</td>
			<td style="width:172px;">FinePCR</td>
			<td style="width:199px;">AG</td>
			<td>To dissolve lipid homogeneously</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Autoclave</td>
			<td style="width:172px;">Biofree</td>
			<td style="width:199px;">BF-60AC</td>
			<td>To sterilize buffer solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Spin coater</td>
			<td style="width:172px;">Shinu Mst</td>
			<td style="width:199px;">SP-60P</td>
			<td>To spread PDMS prepolymer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Vaccum dessiccator</td>
			<td style="width:172px;">Welch</td>
			<td style="width:199px;">2042-22</td>
			<td>To remove air bubble in PDMS prepolymer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">500 &#956;m&#160; punch</td>
			<td style="width:172px;">Harris Uni-Core</td>
			<td style="width:199px;">0.5</td>
			<td>To create an aperture on the PDMS thin film</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">CNC machine</td>
			<td style="width:172px;">SME trading</td>
			<td style="width:199px;">SME 2518</td>
			<td>To fabricate membrane formation chamber</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Halogen fiber optic illuminator</td>
			<td style="width:172px;">Motic</td>
			<td style="width:199px;">MLC-150C</td>
			<td>To illuminate the aperture of PDMS thin film for optical observation</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Digital microscope</td>
			<td style="width:172px;">Digital blue</td>
			<td style="width:199px;">QX-5</td>
			<td>To optically observe lipid bilayer membrane formation</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Electrode</td>
			<td style="width:172px;">A-M Systems</td>
			<td style="width:199px;"></td>
			<td>To electrically observe membrane formation</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Microelectrode amplifier (Axopatch amplifier)</td>
			<td style="width:172px;">Axon Instruments</td>
			<td>Axopatch 200B Amplifier</td>
			<td>To measure capacitance of the membrane (described as microelectrode amplifier in the manuscript)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

automated lipid bilayer membrane formation using a polydimethylsiloxane thin film

Eine künstliche Lipiddoppelschicht oder schwarze Lipidmembran (BLM) ist ein leistungsfähiges Werkzeug, Ionenkanäle und Protein-Wechselwirkungen, sowie für Biosensor-Anwendungen für die Untersuchung. Jedoch weisen herkömmliche BLM Bildungstechniken mehrere Nachteile, und sie erfordern häufig spezifische Know-how und eine aufwendige Arbeit. Insbesondere leiden herkömmliche BLMs von niedrigen Bildung Erfolgsraten und inkonsistent Membranbildung Zeit. Hier zeigen wir eine speicherbare und transportierbare BLM Erzeugungssystem mit kontrolliertem Ausdünnungs Zeit und verbesserte BLM Bildungsrate von üblicherweise verwendeten Folien ersetzt (Polytetrafluorethylen, Polyoxymethylen, Polystyrol) zu Polydimethylsiloxan (PDMS). In diesem Experiment wird ein poröser strukturierte Polymer wie PDMS-Dünnfilm verwendet. Zusätzlich, im Gegensatz zu konventionell verwendeten Lösungsmitteln mit niedriger Viskosität, erlaubt die Verwendung von Squalen eine kontrollierte Ausdünnungs Zeit über langsame Lösungsmittelabsorption durch PDMS, Membranlebensdauer verlängert wird. In der Werbunghinaus, indem eine Mischung aus Squalen und Hexadecan verwendet wurde, wurde der Gefrierpunkt der Lipidlösung erhöht (~ 16 ° C), außerdem wurden Membranvorläufern hergestellt, die auf unbestimmte Zeit gelagert werden können und ohne weiteres transportiert werden. Diese Membranvorstufen BLM Bildungszeit von reduzierten &lt;1 h und erreicht eine BLM-Bildungsrate von ~ 80%. Außerdem zeigten Ionenkanal Gramicidin A Versuche mit der Durchführbarkeit des Membransystems.

Optimierung der MPES Lösung Zusammensetzung Verschiedene Zusammensetzungen von Lipiden und Lösungsmittel wurden getestet, um erfolgreich Lipid-Bilayer-Membranen aus MPES rekonstituieren. Das MP - System mit einem Gemisch aus n- Decan und Hexadecan , enthaltend 3% DPhPC 14 zeigte eine geringe Erfolgsrate der Membranbildung (~ 27%). Zusätzlich kann, wie kontinuierlich Lipidlösung extrahiert die PDMS-Film war es erforderlich, die Lösungsmitte...

Watch this Scientific Journal Video about Automated Lipid Bilayer Membrane Formation Using a Polydimethylsiloxane Thin Film at JoVE.com

Automated Lipid Bilayer Membrane Formation Using a Polydimethylsiloxane Thin Film

Wir zeigen eine speicherbare, transportierbar Lipid-Doppelschicht Bildungssystem. Eine Lipid-Doppelschicht-Membran kann mit mehr als 80% Erfolgsquote innerhalb von 1 h gebildet werden, wenn eine gefrorene Membran Vorläufer auf Umgebungstemperatur gebracht wird. Dieses System wird mühsamen Prozesse reduzieren und Know-how mit Ionenkanälen verbunden.

Automatisierte Lipid Bilayer Membrane Formation eines Polydimethylsiloxans Dünnschicht unter Verwendung

An artificial lipid bilayer, or black lipid membrane (BLM), is a powerful tool for studying ion channels and protein interactions, as well as for ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

A Chitosan Based, Laser Activated Thin Film Surgical Adhesive, 'SurgiLux': Preparation and Demonstration

A Chitosan Based, Laser Activated Thin Film Surgical Adhesive &quot;SurgiLux &#39;: Vorbereitung und Demonstration

Sutures are a 4,000 year old technology that remain the 'gold-standard' for wound closure by virtue of their repair strength (~100 KPa). However, sutures ...

Forschung

Biotechnik

Creating Transient Cell Membrane Pores Using a Standard Inkjet Printer

Erstellen Transient Zelle Membranporen Mit einem Standard-Inkjet-Drucker

Bioprinting has a wide range of applications and significance, including tissue engineering, direct cell application therapies, and biosensor ...

Lipid Bilayer Vesicle Generation Using Microfluidic Jetting

Lipiddoppelschicht Vesicle Erzeugung anhand Mikrofluidik Jetting

Bottom-up synthetic biology presents a novel approach for investigating and reconstituting biochemical systems and, potentially, minimal organisms. This ...

Biomembrane Fabrication by the Solvent-assisted Lipid Bilayer (SALB) Method

Biomembrane Fabrication by the Solvent-assisted Lipid Bilayer SALB Method

Biomembran Fabrication durch das Lösungsmittel-unterstützten Lipiddoppelschicht (SALB) Methode

In order to mimic cell membranes, the supported lipid bilayer (SLB) is an attractive platform which enables in vitro investigation of membrane-related ...

Double Emulsion Generation Using a Polydimethylsiloxane (PDMS) Co-axial Flow Focus Device

Double Emulsion Generation Using a Polydimethylsiloxane PDMS Co-axial Flow Focus Device

Doppelemulsion Erstellung Mit einem Polydimethylsiloxan (PDMS) Co-Axial Flow Fokus Geräte-

Double emulsions are useful in a number of biological and industrial applications in which it is important to have an aqueous carrier fluid. This paper ...

Ligand Nano-cluster Arrays in a Supported Lipid Bilayer

Ligand Nano-Cluster-Arrays in einem unterstützten Lipid Bilayer

Currently there is considerable interest in creating ordered arrays of adhesive protein islands in a sea of passivated surface for cell biological ...

Spontaneous Formation and Rearrangement of Artificial Lipid Nanotube Networks as a Bottom-Up Model for Endoplasmic Reticulum

Spontane Bildung und Neuordnung der künstlichen Lipid Nanotube Netze als Bottom-Up-Modell für endoplasmatische Retikulum

We present a convenient method to form a bottom-up structural organelle model for the endoplasmic reticulum (ER). The model consists of highly dense ...

Immobilization of Live Caenorhabditis elegans Individuals Using an Ultra-thin Polydimethylsiloxane Microfluidic Chip with Water Retention

Immobilization of Live Caenorhabditis elegans Individuals Using an Ultra-thin Polydimethylsiloxane Microfluidic Chip with Water Retention

Immobilisierung von Live Caenorhabditis Elegans Einzelpersonen, die eine ultraflache Polydimethylsiloxan Mikrofluidik-Chip mit Wassereinlagerungen

Radiation is widely used for biological applications and for ion-beam breeding, and among these methods, microbeam irradiation represents a powerful means ...

Material Formation of Recombinant Spider Silks through Aqueous Solvation using Heat and Pressure

Materialbildung von Rekombinanten Spider-Seiden durch wässrige Lösung mit Wärme und Druck

Many spiders produce seven types of silks. Six of the silks are fiber in form when produced by the spiders. These fibers are not water soluble. In order ...

An Automated Method to Perform The In Vitro Micronucleus Assay using Multispectral Imaging Flow Cytometry

Eine automatisierte Methode zur Durchführung des In-Vitro-Mikrokern-Assays mit multispektraler Bildflusszytometrie

The in vitro micronucleus (MN) assay is often used to evaluate cytotoxicity and genotoxicity but scoring the assay via manual microscopy is laborious and ...