Name: combined near-infrared fluorescent imaging and micro-computed tomography for directly visualizing cerebral thromboemboli
Uploaded: 2016-09-25T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Combined Near-infrared Fluorescent Imaging and Micro-computed Tomography for Directly Visualizing Cerebral Thromboemboli at JoVE.com

Dit werk werd ondersteund door de Korea Healthcare Technology R &amp; D Project, ministerie van Volksgezondheid en Welzijn (HI12C1847, HI12C0066), de Bio &amp; Medical Technology Development Program (2010-0019862) en het programma Global Research Lab (GRL) (NRF-2015K1A1A2028228) van de National Research Foundation, gefinancierd door de Koreaanse regering.

Alle dierlijke procedures aangetoond in dit protocol zijn beoordeeld en goedgekeurd door de Dongguk Universiteit Ilsan Ziekenhuis Animal Care en gebruik Comite goedgekeurd en uitgevoerd in overeenstemming met de beginselen en procedures in de NIH Guide geschetst voor de zorg en het gebruik van dieren. 1. Bereiding van exogeen Gevormd Clot Label met Fluorescentie Marker (figuur 1) <ol><li> Verdoven een muis in een inductie kamer middels 3% isofluraan gemengd met 30% zuurstof (1,5 l / min 100% zuurstof). Zorg vo...

<ol>
	<li>Saver, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time+is+brain--quantified.">Time is brain--quantified.</a> Stroke. 37 (1), 263-266 (2006).</li><li>Latchaw, R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recommendations+for+imaging+of+acute+ischemic+stroke:+a+scientific+statement+from+the+American+Heart+Association.">Recommendations for imaging of acute ischemic stroke: a scientific statement from the American Heart Association.</a> Stroke. 40 (11), 3646-3678 (2009).</li><li>Kim, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperacute+direct+thrombus+imaging+using+computed+tomography+and+gold+nanoparticles.">Hyperacute direct thrombus imaging using computed tomography and gold nanoparticles.</a> Ann Neurol. 73 (5), 617-625 (2013).</li><li>Kim, J. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+Imaging+of+Cerebral+Thromboemboli+Using+Computed+Tomography+and+Fibrin-targeted+Gold+Nanoparticles.">Direct Imaging of Cerebral Thromboemboli Using Computed Tomography and Fibrin-targeted Gold Nanoparticles.</a> Theranostics. 5 (10), 1098-1114 (2015).</li><li>Kim, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+thrombus+imaging+as+a+means+to+control+the+variability+of+mouse+embolic+infarct+models:+the+role+of+optical+molecular+imaging.">Direct thrombus imaging as a means to control the variability of mouse embolic infarct models: the role of optical molecular imaging.</a> Stroke. 42 (12), 3566-3573 (2011).</li><li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals.">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> J Pharmacol Pharmacother. 1 (2), 87-93 (2010).</li><li>Durukan, A., Tatlisumak, T., Fisher, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+ischemic+stroke.">Animal models of ischemic stroke.</a> Handbook of clinical neurology: Stroke Part 1: Basic and epidemiological aspects.Volume 92. 92, 43-66 (2009).</li><li>Overoye-Chan, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EP-2104R:+a+fibrin-specific+gadolinium-Based+MRI+contrast+agent+for+detection+of+thrombus.">EP-2104R: a fibrin-specific gadolinium-Based MRI contrast agent for detection of thrombus.</a> J Am Chem Soc. 130 (18), 6025-6039 (2008).</li><li>Kim, D. E., Schellingerhout, D., Jaffer, F. A., Weissleder, R., Tung, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Near-infrared+fluorescent+imaging+of+cerebral+thrombi+and+blood-brain+barrier+disruption+in+a+mouse+model+of+cerebral+venous+sinus+thrombosis.">Near-infrared fluorescent imaging of cerebral thrombi and blood-brain barrier disruption in a mouse model of cerebral venous sinus thrombosis.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 25 (2), 226-233 (2005).</li><li>Tung, C. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+factor+XIII+probes+for+blood+coagulation+imaging.">Novel factor XIII probes for blood coagulation imaging.</a> Chembiochem. 4 (9), 897-899 (2003).</li><li>Robinson, B. R., Houng, A. K., Reed, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Catalytic+life+of+activated+factor+XIII+in+thrombi.+Implications+for+fibrinolytic+resistance+and+thrombus+aging.">Catalytic life of activated factor XIII in thrombi. Implications for fibrinolytic resistance and thrombus aging.</a> Circulation. 102 (10), 1151-1157 (2000).</li><li>Reed, G. L., Houng, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+contribution+of+activated+factor+XIII+to+fibrinolytic+resistance+in+experimental+pulmonary+embolism.">The contribution of activated factor XIII to fibrinolytic resistance in experimental pulmonary embolism.</a> Circulation. 99 (2), 299-304 (1999).</li><li>Sun, I. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biocompatible+glycol+chitosan-coated+gold+nanoparticles+for+tumor-targeting+CT+imaging.">Biocompatible glycol chitosan-coated gold nanoparticles for tumor-targeting CT imaging.</a> Pharm Res. 31 (6), 1418-1425 (2014).</li><li>Celi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thrombus+formation:+direct+real-time+observation+and+digital+analysis+of+thrombus+assembly+in+a+living+mouse+by+confocal+and+widefield+intravital+microscopy.">Thrombus formation: direct real-time observation and digital analysis of thrombus assembly in a living mouse by confocal and widefield intravital microscopy.</a> J Thromb Haemost. 1 (1), 60-68 (2003).</li><li>Chen, I. Y., Wu, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiovascular+molecular+imaging:+focus+on+clinical+translation.">Cardiovascular molecular imaging: focus on clinical translation.</a> Circulation. 123 (4), 425-443 (2011).</li><li>Wintermark, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+recommendations+for+acute+stroke+and+transient+ischemic+attack+patients:+a+joint+statement+by+the+American+Society+of+Neuroradiology,+the+American+College+of+Radiology+and+the+Society+of+NeuroInterventional+Surgery.">Imaging recommendations for acute stroke and transient ischemic attack patients: a joint statement by the American Society of Neuroradiology, the American College of Radiology and the Society of NeuroInterventional Surgery.</a> J Am Coll Radiol. 10 (11), 828-832 (2013).</li><li>Weissleder, R., Tung, C. H., Mahmood, U., Bogdanov, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+tumors+with+protease-activated+near-infrared+fluorescent+probes.">In vivo imaging of tumors with protease-activated near-infrared fluorescent probes.</a> Nat Biotechnol. 17 (4), 375-378 (1999).</li><li>Narayanan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biocompatible+magnetite/gold+nanohybrid+contrast+agents+via+green+chemistry+for+MRI+and+CT+bioimaging.">Biocompatible magnetite/gold nanohybrid contrast agents via green chemistry for MRI and CT bioimaging.</a> ACS Appl Mater Interfaces. 4 (1), 251-260 (2012).</li><li>Amendola, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magneto-plasmonic+Au-Fe+alloy+nanoparticles+designed+for+multimodal+SERS-MRI-CT+imaging.">Magneto-plasmonic Au-Fe alloy nanoparticles designed for multimodal SERS-MRI-CT imaging.</a> Small. 10 (12), 2476-2486 (2014).</li><li>Zhu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis+of+Au-Fe3O4+heterostructured+nanoparticles+for+in+vivo+computed+tomography+and+magnetic+resonance+dual+model+imaging.">Synthesis of Au-Fe3O4 heterostructured nanoparticles for in vivo computed tomography and magnetic resonance dual model imaging.</a> Nanoscale. 6 (1), 199-202 (2014).</li></ol>

Wij toonden de toepassing van twee complementaire moleculaire beeldvorming technieken voor directe trombus beeldvorming in experimentele modellen van embolische beroerte: een fibrine gerichte gouden nanodeeltjes (fib-GC-AuNP) in vivo-microCT gebaseerde beeldvorming, en een FXIIIa gerichte optische afbeeldingssonde ex vivo fluorescentie beeldvorming. Na intraveneuze toediening van fib-GC-AuNPs werd trombi zichtbaar CT als dichte structuren, veroorzaakt door de deeltjes ingev...

Een op de 6 mensen een beroerte op een bepaald punt in hun leven hebben. Herseninfarct veruit de meest voorkomende soort beroerte, en goed voor ongeveer 80 procent van alle beroertes. Omdat thromboemboli veroorzaken de meeste van deze ischemische beroerte, is er een toenemende belangstelling voor directe trombus beeldvorming. Er werd geschat dat ongeveer 2 miljoen hersencellen sterven tijdens elke minuut van de middelste cerebrale slagader occlusie 1, wat leidt tot de slogan &quot;Time is Brain&quot;. Computertomografie (CT) studies kunnen snel worden gedaan, en zijn overal verkrijgbaar; Daarom CT blijft de beeldvorming van de keuze voor de eerste diagnose en behandeling van hyperacute ischemische beroerte. CT is bijzonder waardevol voor het informeren van de kritieke eerste beslissingen: toedienen tissue plasminogen activator (tPA) voor trombolyse en / of triaging endovasculaire stolsel retrieval-2. Huidige CT-gebaseerde trombus beeldvorming, echter niet serieel volgen cerebral thromboemboli in vivo, omdat het gebruik maakt van indirecte methoden om trombi te tonen: na vertroebeling van het bloed zwembad bij jodiumhoudend contrastmiddel, worden de trombi aangetoond dat het vullen van defecten in de vaten. Er zijn dosislimieten en de risico&#39;s verbonden aan de herhaalde toediening van jodiumhoudend contrastmiddel, dat weg staan ​​herhaalde beeldvorming van trombi op deze manier. Er is derhalve een kritische behoefte aan een directe beeldvorming methode voor cerebrale trombi in patiënten met een beroerte, zodat snellere en betere behandeling beslissingen worden genomen. Wij stellen dit bereiken door verhogen van de waarde van CT, de momenteel gebruikte front beeldvormende modaliteit voor een beroerte, met behulp van een trombus die nanodeeltjes molecular imaging agens. We hebben het gebruik van deze agent aangetoond met behulp van micro-computertomografie (microCT), een hoge-resolutie ex vivo of in vivo (kleine dieren) beeldvorming versie van CT die snelle data-acquisitie &lt;toestaatsup&gt; 3,4. Zelfs met de relatief slechte wekedelencontrast beschikbaar voor kleine dieren microCT (veel slechter dan die beschikbaar zijn vanaf menselijk formaat scanners), de imaging-agent was in staat om te zoeken en te markeren trombi door ze hyperdense op CT, een &#39;dichte vat sign&#39; verbeterd door moleculaire beeldvorming. Als aanvulling op de CT-techniek, heeft onze fractie eerder een optisch directe trombus beeldvormende techniek met behulp van Cy5.5 nabij-infrarood fluorescerende (NIRF) sonde naar cerebrale trombus last 5 visualiseren ontwikkeld. Dit is een ex vivo techniek op de post mortem hersenen, maar is zeer gevoelig, en dient te bevestigen in vivo data in het onderzoek setting. Met zowel CT en NIRF gebaseerde trombus die beeldvormingstechnieken kunnen wij vergelijken en deze technieken zeer informatieve gegevens over de rol van trombus en trombus beeldvorming in het proces van ischemische beroerte ontwikkeling. Here beschrijven we een gedetailleerd protocol van een gecombineerde techniek van in vivo microCT en ex vivo NIRF imaging direct thromboemboli visualiseren in een muismodel van embolische beroerte. Deze eenvoudige en robuuste werkwijzen bruikbaar voor ons begrip van trombotische ziekten bevorderen doordat de juiste in vivo bepaling van thrombus belasting / distributie en karakterisatie van dynamische trombus evolutie op een snelle en kwantitatieve wijze in vivo tijdens de behandeling, gevolgd door ex vivo gegevens die dient als een controle en referentiestandaard voor de bevestiging van in vivo beeldvorming bevindingen.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="588">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:155px;">Machines</td>
			<td style="width:219px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:96px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">microCT</td>
			<td>NanoFocusRay, JeonJu, Korea</td>
			<td>NFR Polaris-G90</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">NIRF imaging system</td>
			<td>Roper-scientific,Tucson, AZ</td>
			<td>coolsnap-Ez</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Laser Doppler flowmeter</td>
			<td>Perimed, Stockholm, Sweden</td>
			<td>PeriFlux System 5000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Surgical microscope</td>
			<td>Leica Microsystems, Seoul, Korea</td>
			<td>EZ4HD</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:155px;">Inhalation anesthesia machine</td>
			<td>PerkinElmer, Massachusetts, USA</td>
			<td>XGI-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Software</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;">NFR control</td>
			<td>NanoFocusRay, JeonJu, Korea</td>
			<td>NFR Polaris-G90</td>
			<td style="width:96px;">microCT control software</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:155px;">Lucion</td>
			<td>Infinitt, Seoul, Korea</td>
			<td>Lucion</td>
			<td style="width:96px;">3D render imaging software</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Lab chart 7</td>
			<td>ADInstruments, Colorado, USA</td>
			<td>Lab chart 7</td>
			<td>rCBF</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Image J software</td>
			<td>Wanye Rasband, NIH, USA</td>
			<td>1.49d</td>
			<td>imaging analysis</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Devices/Instruments</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Infusion pump</td>
			<td>Harvard, Massachusetts, USA</td>
			<td>pump 22(55-2226)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Homeothermic blanket</td>
			<td>Panlab, Barcelona, Spain</td>
			<td>HB101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Pocket cautery</td>
			<td>Daejong, Seoul, Korea</td>
			<td>DJE-39</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Brain matrice</td>
			<td>Ted pella, CA, USA</td>
			<td>15003</td>
			<td style="width:96px;">coronal section</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">PE-50 tubing</td>
			<td>Natsume, Tokyo, Japan</td>
			<td>SP-45(PE-50)</td>
			<td style="width:96px;">I.D. 0.58 mm O.D. 0.96 mm</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">PE-10 tubing</td>
			<td>Natsume, Tokyo, Japan</td>
			<td>SP-10(PE-10)</td>
			<td style="width:96px;">I.D. 0.28mm O.D. 0.61 mm</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:155px;">30 gauge needle</td>
			<td>sungshim-medical, Seoul, Korea</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Syringe</td>
			<td>CPL-medical, Ansan, Korea</td>
			<td></td>
			<td>1 &#38; 3 cc</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Gauze</td>
			<td>Panamedic, Cheonan, Korea</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Tape</td>
			<td>Scotch, Seoul, Korea</td>
			<td>3M-810</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Micro forceps</td>
			<td>Fine Science Tools, Vancouver, Canada</td>
			<td>&#160;11253-27</td>
			<td>Dumont #L5</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Micro scissor</td>
			<td>Fine Science Tools, Vancouver, Canada</td>
			<td style="width:119px;">15000-03</td>
			<td>Vannas spring</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Scissor</td>
			<td>Fine Science Tools, Vancouver, Canada</td>
			<td style="width:119px;">14084-08</td>
			<td>8.5 cm</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Black silk suture</td>
			<td>Ailee, Busan, Korea</td>
			<td>SK6071, SK728</td>
			<td>6-0 and 7-0</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Reagents</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">meloxicam</td>
			<td>Yuhan, Seoul, Korea</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">vet ointment</td>
			<td>Novartis, Basel, Swiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">10% Povidone-iodine (betadine)</td>
			<td>Firson, Cheon-an, Korea</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">FeCl3</td>
			<td>Sigma, Missouri, United States</td>
			<td>157740-5G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">TTC</td>
			<td>Amresco, Ohio, USA</td>
			<td>0765-100g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Isoflurane</td>
			<td>Hana-Pham, Gyeonggi, Korea</td>
			<td>Ifran</td>
			<td>100 mL</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">PBS</td>
			<td>Welgene, Daegu, Korea</td>
			<td style="width:119px;">LB001-02</td>
			<td>500 mL</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Gold nanoparticles</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Synthesis</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">C15 optical agent</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Synthesis</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Tissue plasminogen activator</td>
			<td style="width:219px;">Boehringer Ingelheim, Biberach, Germany</td>
			<td style="width:119px;">rtPA(actilyse)</td>
			<td>20 mg</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Normal saline</td>
			<td>Daihan Pham, Seoul, Korea</td>
			<td>48N3AF3</td>
			<td>20 mL</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

combined near-infrared fluorescent imaging and micro-computed tomography for directly visualizing cerebral thromboemboli

Direct trombus beeldvorming visualiseert de oorzaak van trombo-embolische infarct. In staat zijn om het trombus direct kunt veel beter onderzoek naar beroerte dan te vertrouwen op indirecte metingen, en zal een krachtige en robuuste vasculaire research tool zijn. We maken gebruik van een optische imaging aanpak die trombi met een moleculaire beeldvorming thrombus marker labels - Cy5.5 een nabij-infrarood fluorescerende (NIRF) probe die covalent is gekoppeld aan het fibrine strengen van de trombus door fibrine verknopen enzymatische werking van geactiveerde stollingsfactor XIIIa tijdens het proces van rijping stolsel. Een micro-computertomografie (microCT) gebaseerde benadering gebruikt trombus die goud nanodeeltjes (AuNPs) gefunctionaliseerd het hoofdbestanddeel van het stolsel targeten: fibrine. Dit document beschrijft een gedetailleerd protocol voor de gecombineerde in vivo microCT en ex vivo NIRF beeldvorming van thromboemboli in een muismodel van embolische beroerte. We tonen aan dat in vivo &lt;/ em&gt; microCT en fibrine gerichte glycol-chitosan AuNPs (fib-GC-AuNPs) kan worden gebruikt voor het visualiseren van zowel in situ trombi en cerebrale embolie trombi. We beschrijven ook het gebruik van in vivo-microCT gebaseerde directe trombus beeldvorming serieel volgen de therapeutische effecten van weefsel plasminogeen-activator-gemedieerde trombolyse. Na de laatste opnamesessie tonen we de ex vivo NIRF beeldvorming van de omvang en van de resterende thromboemboli in de hersenen. Tot slot beschrijven we kwantitatief beeld analyses van microCT en NIRF beeldgegevens. De gecombineerde techniek van directe trombus beeldvorming kunnen twee onafhankelijke methoden trombus visualisatie te vergelijken: het gebied van trombus gerelateerde fluorescentiesignaal op ex vivo beeldvorming NIRF versus de hoeveelheid hyperdense microCT thrombi in vivo.

Baseline microCT beelden, verkregen in vivo na toediening fib-GC-AuNP (10 mg / ml, 300 ul) en 1 uur na embolische beroerte, duidelijk gevisualiseerd cerebrale trombus in de MCA - ACA bifurcatie deel van het distale inwendige halsslagader (figuur 6 ). Follow-up microCT imaging toonde geen verandering in de COW trombus met zoutoplossing behandeld. Echter, behandeling met tPA vertoonden een geleidelijke dissolutie van de trombus COW (blauwe pijlen in figuur...

Watch this Scientific Journal Video about Combined Near-infrared Fluorescent Imaging and Micro-computed Tomography for Directly Visualizing Cerebral Thromboemboli at JoVE.com

Combined Near-infrared Fluorescent Imaging and Micro-computed Tomography for Directly Visualizing Cerebral Thromboemboli

Dit protocol beschrijft de toepassing van gecombineerde nabij-infrarood fluorescerende (NIRF) beeldvorming en micro-computertomografie (microCT) voor het visualiseren van cerebrale thromboemboli. Deze techniek maakt de kwantificering van trombus last en evolutie. De NIRF beeldvormende techniek visualiseert fluorescent gelabelde trombus in weggesneden hersenen, terwijl de microCT techniek visualiseert trombus in levende dieren met behulp van goud-nanodeeltjes.

Gecombineerde nabij-infrarood Fluorescent Imaging en Micro-computertomografie voor het direct visualiseren Cerebral Thromboemboli

Direct thrombus imaging visualizes the root cause of thromboembolic infarction. Being able to image thrombus directly allows far better investigation of ...

Research

JoVE Journal

Medicine

In vivo Near Infrared Fluorescence (NIRF) Intravascular Molecular Imaging of Inflammatory Plaque, a Multimodal Approach to Imaging of Atherosclerosis

In vivo Near Infrared Fluorescence NIRF Intravascular Molecular Imaging of Inflammatory Plaque, a Multimodal Approach to Imaging of Atherosclerosis

In vivo Near Infrared Fluorescentie (NIRF) Intravasculaire Moleculaire Beeldvorming van Inflammatoire Plaque, een multimodale aanpak Imaging Atherosclerose

The vascular response to injury is a well-orchestrated inflammatory response triggered by the accumulation of macrophages within the vessel wall leading ...

Retrograde Perfusion and Filling of Mouse Coronary Vasculature as Preparation for Micro Computed Tomography Imaging

Retrograde Perfusie en vullen van Muis coronaire bloedvaten als voorbereiding op Micro Computed Tomography Imaging

Visualization of the vasculature is becoming increasingly important for understanding many different disease states. While several techniques exist for ...

Near Infrared Optical Projection Tomography for Assessments of &beta;-cell Mass Distribution in Diabetes Research

Near Infrared Optical Projection Tomography for Assessments of ÃƒÅ½Ã‚Â²-cell Mass Distribution in Diabetes Research

Nabij Infrarood Optische projectie Tomografie voor de beoordeling van β-cel Massa Distributie in Diabetes Research

By adapting OPT to include the capability of imaging in the near infrared (NIR) spectrum, we here illustrate the possibility to image larger bodies of ...

Osmotic Drug Delivery to Ischemic Hindlimbs and Perfusion of Vasculature with Microfil for Micro-Computed Tomography Imaging

Osmotische Drug Delivery voor ischemische achterpoten en perfusie van vaatstelsel met Microfil voor Micro-Computed Tomography Imaging

Preclinical research in animal models of peripheral arterial disease plays a vital role in testing the efficacy of therapeutic agents designed to ...

Tissue-simulating Phantoms for Assessing Potential Near-infrared Fluorescence Imaging Applications in Breast Cancer Surgery

Tissue-simuleren Phantoms voor de beoordeling van potentiële nabij-infrarood fluorescentie beeldvorming Toepassingen in Borstkanker Chirurgie

Inaccuracies in intraoperative tumor localization and evaluation of surgical margin status result in suboptimal outcome of breast-conserving surgery ...

Assessment of Viability of Human Fat Injection into Nude Mice with Micro-Computed Tomography

Beoordeling van de levensvatbaarheid van menselijk vet Injectie in Naakt Muizen met Micro-Computed Tomography

Lipotransfer is a vital tool in the surgeon&#8217;s armamentarium for the treatment of soft tissue deficits of throughout the body. Fat is the ideal soft ...

Using Micro-computed Tomography for the Assessment of Tumor Development and Follow-up of Response to Treatment in a Mouse Model of Lung Cancer

Met behulp van micro-computertomografie voor de evaluatie van de ontwikkeling van tumoren en follow-up van de respons op de behandeling in een muismodel van longkanker

Lung cancer is the most lethal cancer in the world. Intensive research is ongoing worldwide to identify new therapies for lung cancer. Several mouse ...

Skeletal Muscle Neurovascular Coupling, Oxidative Capacity, and Microvascular Function with 'One Stop Shop' Near-infrared Spectroscopy

Skeletal Muscle neurovasculaire koppeling, oxidatieve capaciteit en microvasculaire functie met 'One Stop Shop' nabij-infrarood spectroscopie

Exercise represents a major hemodynamic stress that demands a highly coordinated neurovascular response in order to match oxygen delivery to metabolic ...

How to Administer Near-Infrared Spectroscopy in Critically ill Neonates, Infants, and Children

Hoe near-infrared spectroscopie toedienen in ernstig zieke neonaten, zuigelingen en kinderen

Near infrared spectroscopy (NIRS) calculates regional tissue oxygenation (rSO2) using the different absorption spectra of oxygenated and deoxygenated ...

Near Infrared Photoimmunotherapy for Mouse Models of Pleural Dissemination

Nabij-infrarood foto-immuuntherapie voor muismodellen van pleurale verspreiding

The efficacy of photoimmunotherapy can be evaluated more accurately with an orthotopic mouse model than with a subcutaneous one. A pleural dissemination ...