Name: combined near-infrared fluorescent imaging and micro-computed tomography for directly visualizing cerebral thromboemboli
Uploaded: 2016-09-25T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Combined Near-infrared Fluorescent Imaging and Micro-computed Tomography for Directly Visualizing Cerebral Thromboemboli at JoVE.com

Questo lavoro è stato sostenuto dalla Corea Healthcare Technology R &amp; S del progetto, Ministero della Salute e del Welfare (HI12C1847, HI12C0066), il Programma di Bio &amp; Medical Technology Development (2.010-0.019.862) e programma di Global Research Lab (GRL) (NRF-2015K1A1A2028228) del Fondazione nazionale delle Ricerche, finanziato dal governo coreano.

Tutte le procedure sugli animali hanno dimostrato in questo protocollo sono stati esaminati e approvati dal Comitato di cura e l&#39;uso di animali Ilsan Hospital Dongguk University e condotto in conformità con i principi e le procedure descritte nella Guida NIH per la cura e l&#39;uso di animali. 1. Preparazione di esogena coagulo formato etichetta con la fluorescenza Marker (Figura 1) <ol><li> Anestetizzare un topo in una camera di induzione utilizzando 3% isoflurano miscelato con il 30% di ossigeno (1,5 L ...

<ol>
	<li>Saver, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time+is+brain--quantified.">Time is brain--quantified.</a> Stroke. 37 (1), 263-266 (2006).</li><li>Latchaw, R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recommendations+for+imaging+of+acute+ischemic+stroke:+a+scientific+statement+from+the+American+Heart+Association.">Recommendations for imaging of acute ischemic stroke: a scientific statement from the American Heart Association.</a> Stroke. 40 (11), 3646-3678 (2009).</li><li>Kim, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperacute+direct+thrombus+imaging+using+computed+tomography+and+gold+nanoparticles.">Hyperacute direct thrombus imaging using computed tomography and gold nanoparticles.</a> Ann Neurol. 73 (5), 617-625 (2013).</li><li>Kim, J. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+Imaging+of+Cerebral+Thromboemboli+Using+Computed+Tomography+and+Fibrin-targeted+Gold+Nanoparticles.">Direct Imaging of Cerebral Thromboemboli Using Computed Tomography and Fibrin-targeted Gold Nanoparticles.</a> Theranostics. 5 (10), 1098-1114 (2015).</li><li>Kim, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+thrombus+imaging+as+a+means+to+control+the+variability+of+mouse+embolic+infarct+models:+the+role+of+optical+molecular+imaging.">Direct thrombus imaging as a means to control the variability of mouse embolic infarct models: the role of optical molecular imaging.</a> Stroke. 42 (12), 3566-3573 (2011).</li><li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals.">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> J Pharmacol Pharmacother. 1 (2), 87-93 (2010).</li><li>Durukan, A., Tatlisumak, T., Fisher, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+ischemic+stroke.">Animal models of ischemic stroke.</a> Handbook of clinical neurology: Stroke Part 1: Basic and epidemiological aspects.Volume 92. 92, 43-66 (2009).</li><li>Overoye-Chan, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EP-2104R:+a+fibrin-specific+gadolinium-Based+MRI+contrast+agent+for+detection+of+thrombus.">EP-2104R: a fibrin-specific gadolinium-Based MRI contrast agent for detection of thrombus.</a> J Am Chem Soc. 130 (18), 6025-6039 (2008).</li><li>Kim, D. E., Schellingerhout, D., Jaffer, F. A., Weissleder, R., Tung, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Near-infrared+fluorescent+imaging+of+cerebral+thrombi+and+blood-brain+barrier+disruption+in+a+mouse+model+of+cerebral+venous+sinus+thrombosis.">Near-infrared fluorescent imaging of cerebral thrombi and blood-brain barrier disruption in a mouse model of cerebral venous sinus thrombosis.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 25 (2), 226-233 (2005).</li><li>Tung, C. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+factor+XIII+probes+for+blood+coagulation+imaging.">Novel factor XIII probes for blood coagulation imaging.</a> Chembiochem. 4 (9), 897-899 (2003).</li><li>Robinson, B. R., Houng, A. K., Reed, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Catalytic+life+of+activated+factor+XIII+in+thrombi.+Implications+for+fibrinolytic+resistance+and+thrombus+aging.">Catalytic life of activated factor XIII in thrombi. Implications for fibrinolytic resistance and thrombus aging.</a> Circulation. 102 (10), 1151-1157 (2000).</li><li>Reed, G. L., Houng, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+contribution+of+activated+factor+XIII+to+fibrinolytic+resistance+in+experimental+pulmonary+embolism.">The contribution of activated factor XIII to fibrinolytic resistance in experimental pulmonary embolism.</a> Circulation. 99 (2), 299-304 (1999).</li><li>Sun, I. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biocompatible+glycol+chitosan-coated+gold+nanoparticles+for+tumor-targeting+CT+imaging.">Biocompatible glycol chitosan-coated gold nanoparticles for tumor-targeting CT imaging.</a> Pharm Res. 31 (6), 1418-1425 (2014).</li><li>Celi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thrombus+formation:+direct+real-time+observation+and+digital+analysis+of+thrombus+assembly+in+a+living+mouse+by+confocal+and+widefield+intravital+microscopy.">Thrombus formation: direct real-time observation and digital analysis of thrombus assembly in a living mouse by confocal and widefield intravital microscopy.</a> J Thromb Haemost. 1 (1), 60-68 (2003).</li><li>Chen, I. Y., Wu, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiovascular+molecular+imaging:+focus+on+clinical+translation.">Cardiovascular molecular imaging: focus on clinical translation.</a> Circulation. 123 (4), 425-443 (2011).</li><li>Wintermark, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+recommendations+for+acute+stroke+and+transient+ischemic+attack+patients:+a+joint+statement+by+the+American+Society+of+Neuroradiology,+the+American+College+of+Radiology+and+the+Society+of+NeuroInterventional+Surgery.">Imaging recommendations for acute stroke and transient ischemic attack patients: a joint statement by the American Society of Neuroradiology, the American College of Radiology and the Society of NeuroInterventional Surgery.</a> J Am Coll Radiol. 10 (11), 828-832 (2013).</li><li>Weissleder, R., Tung, C. H., Mahmood, U., Bogdanov, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+tumors+with+protease-activated+near-infrared+fluorescent+probes.">In vivo imaging of tumors with protease-activated near-infrared fluorescent probes.</a> Nat Biotechnol. 17 (4), 375-378 (1999).</li><li>Narayanan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biocompatible+magnetite/gold+nanohybrid+contrast+agents+via+green+chemistry+for+MRI+and+CT+bioimaging.">Biocompatible magnetite/gold nanohybrid contrast agents via green chemistry for MRI and CT bioimaging.</a> ACS Appl Mater Interfaces. 4 (1), 251-260 (2012).</li><li>Amendola, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magneto-plasmonic+Au-Fe+alloy+nanoparticles+designed+for+multimodal+SERS-MRI-CT+imaging.">Magneto-plasmonic Au-Fe alloy nanoparticles designed for multimodal SERS-MRI-CT imaging.</a> Small. 10 (12), 2476-2486 (2014).</li><li>Zhu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis+of+Au-Fe3O4+heterostructured+nanoparticles+for+in+vivo+computed+tomography+and+magnetic+resonance+dual+model+imaging.">Synthesis of Au-Fe3O4 heterostructured nanoparticles for in vivo computed tomography and magnetic resonance dual model imaging.</a> Nanoscale. 6 (1), 199-202 (2014).</li></ol>

Abbiamo dimostrato l&#39;uso di due complementari molecolari tecniche di imaging per l&#39;imaging trombo diretta in modelli sperimentali di ictus embolico: un fibrina mirata nanoparticelle d&#39;oro (FIB-GC-AUNP) per l&#39;imaging microCT-based in vivo, e un FXIIIa mirato sonda di imaging ottico per ex vivo per immagini a fluorescenza. Dopo somministrazione endovenosa di fib-GC-AuNPs, trombi divenne visibile alla TC come strutture dense, causata dalle particelle diventando...

Uno in 6 persone avranno un ictus a un certo punto nella loro vita. Ictus ischemico è di gran lunga il tipo di tratto più comune, e rappresenta circa il 80 per cento di tutti i casi di ictus. Perché tromboembolie causano la maggior parte di questi ictus ischemico, vi è un crescente interesse per l&#39;imaging diretto trombo. E &#39;stato stimato che circa 2 milioni di cellule cerebrali muoiono durante ogni minuto di cerebrale media occlusione dell&#39;arteria 1, che porta lo slogan &quot;Il tempo è cervello&quot;. La tomografia computerizzata (CT) studi può essere fatto rapidamente, e sono ampiamente disponibili; Per questo motivo, CT rimane il imaging di scelta per la diagnosi e il trattamento di ictus ischemico iperacuto iniziale. CT è particolarmente utile per informare le prime decisioni critiche: la somministrazione di attivatore tissutale del plasminogeno (tPA) per trombolisi e / o triaging a endovascolare coagulo-recupero 2. Attuale CT-based Imaging trombo, tuttavia, non può in serie monitorare cerebral tromboembolie in vivo, perché utilizza metodi indiretti per dimostrare trombi: dopo opacizzazione della pozza di sangue da parte di contrasto iodati, il trombi sono dimostrati come difetti di riempimento nei vasi. Ci sono limiti di dose ei rischi associati con la somministrazione ripetuta di contrasto iodato, che precludono ripetono l&#39;imaging di trombi in questo modo. Pertanto, vi è una necessità critica per una metodologia di imaging diretto trombi cerebrale nei pazienti con ictus, per consentire più veloce e migliori decisioni di trattamento da effettuare. Noi proponiamo di ottenere questo risultato, migliorando il valore del CT, la modalità di imaging prima linea attualmente utilizzata per il colpo, con l&#39;uso di un agente di imaging molecolare nanoparticular trombo-seeking. Abbiamo dimostrato l&#39;uso di questo agente utilizzando micro-tomografia computerizzata (microCT), ad alta risoluzione ex vivo o in vivo (piccoli animali) la versione per immagini della TC che permette l&#39;acquisizione rapida di dati &lt;sup&gt; 3,4. Anche con il relativamente scarso contrasto dei tessuti molli a disposizione per le piccole microCT animali (molto peggio di quanto disponibili da scanner umani imprese), l&#39;agente di imaging è stato in grado di cercare e contrassegnare trombi facendoli iperdensa alla TC, un &#39;segno nave densa&#39; arricchito da molecolare imaging. A complemento della tecnica CT, il nostro gruppo ha già messo a punto una tecnica di imaging trombo diretta ottica utilizzando la sonda fluorescente Cy5.5 nel vicino infrarosso (NIRF) di visualizzare cerebrale trombo onere 5. Questa è una tecnica ex vivo sul cervello post mortem, ma è molto sensibile, e serve a confermare dati in vivo nella cornice di ricerca. Avendo entrambi TC e NIRF basano tecniche di imaging trombo-seeking ci permette di confrontare e contrapporre queste tecniche per ottenere i dati altamente informativi sul ruolo di trombi e di imaging trombo nel processo di sviluppo ictus ischemico. Here, descriviamo un protocollo dettagliato di una tecnica combinata di microCT in vivo e ex vivo l&#39;imaging NIRF di visualizzare direttamente tromboembolie in un modello murino di ictus embolico. Questi metodi semplici e robusti sono utili per migliorare la nostra comprensione delle malattie trombotiche consentendo l&#39;accurata nella valutazione vivo di trombi carico / distribuzione e caratterizzazione dell&#39;evoluzione trombo dinamica in modo rapido e quantitativa in vivo durante la terapia, seguita da ex vivo dati che serve come controllo e standard di riferimento per la conferma dei risultati di imaging in vivo.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="588">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:155px;">Machines</td>
			<td style="width:219px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:96px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">microCT</td>
			<td>NanoFocusRay, JeonJu, Korea</td>
			<td>NFR Polaris-G90</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">NIRF imaging system</td>
			<td>Roper-scientific,Tucson, AZ</td>
			<td>coolsnap-Ez</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Laser Doppler flowmeter</td>
			<td>Perimed, Stockholm, Sweden</td>
			<td>PeriFlux System 5000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Surgical microscope</td>
			<td>Leica Microsystems, Seoul, Korea</td>
			<td>EZ4HD</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:155px;">Inhalation anesthesia machine</td>
			<td>PerkinElmer, Massachusetts, USA</td>
			<td>XGI-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Software</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;">NFR control</td>
			<td>NanoFocusRay, JeonJu, Korea</td>
			<td>NFR Polaris-G90</td>
			<td style="width:96px;">microCT control software</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:155px;">Lucion</td>
			<td>Infinitt, Seoul, Korea</td>
			<td>Lucion</td>
			<td style="width:96px;">3D render imaging software</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Lab chart 7</td>
			<td>ADInstruments, Colorado, USA</td>
			<td>Lab chart 7</td>
			<td>rCBF</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Image J software</td>
			<td>Wanye Rasband, NIH, USA</td>
			<td>1.49d</td>
			<td>imaging analysis</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Devices/Instruments</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Infusion pump</td>
			<td>Harvard, Massachusetts, USA</td>
			<td>pump 22(55-2226)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Homeothermic blanket</td>
			<td>Panlab, Barcelona, Spain</td>
			<td>HB101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Pocket cautery</td>
			<td>Daejong, Seoul, Korea</td>
			<td>DJE-39</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Brain matrice</td>
			<td>Ted pella, CA, USA</td>
			<td>15003</td>
			<td style="width:96px;">coronal section</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">PE-50 tubing</td>
			<td>Natsume, Tokyo, Japan</td>
			<td>SP-45(PE-50)</td>
			<td style="width:96px;">I.D. 0.58 mm O.D. 0.96 mm</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">PE-10 tubing</td>
			<td>Natsume, Tokyo, Japan</td>
			<td>SP-10(PE-10)</td>
			<td style="width:96px;">I.D. 0.28mm O.D. 0.61 mm</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:155px;">30 gauge needle</td>
			<td>sungshim-medical, Seoul, Korea</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Syringe</td>
			<td>CPL-medical, Ansan, Korea</td>
			<td></td>
			<td>1 &#38; 3 cc</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Gauze</td>
			<td>Panamedic, Cheonan, Korea</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Tape</td>
			<td>Scotch, Seoul, Korea</td>
			<td>3M-810</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Micro forceps</td>
			<td>Fine Science Tools, Vancouver, Canada</td>
			<td>&#160;11253-27</td>
			<td>Dumont #L5</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Micro scissor</td>
			<td>Fine Science Tools, Vancouver, Canada</td>
			<td style="width:119px;">15000-03</td>
			<td>Vannas spring</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Scissor</td>
			<td>Fine Science Tools, Vancouver, Canada</td>
			<td style="width:119px;">14084-08</td>
			<td>8.5 cm</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Black silk suture</td>
			<td>Ailee, Busan, Korea</td>
			<td>SK6071, SK728</td>
			<td>6-0 and 7-0</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Reagents</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">meloxicam</td>
			<td>Yuhan, Seoul, Korea</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">vet ointment</td>
			<td>Novartis, Basel, Swiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">10% Povidone-iodine (betadine)</td>
			<td>Firson, Cheon-an, Korea</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">FeCl3</td>
			<td>Sigma, Missouri, United States</td>
			<td>157740-5G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">TTC</td>
			<td>Amresco, Ohio, USA</td>
			<td>0765-100g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Isoflurane</td>
			<td>Hana-Pham, Gyeonggi, Korea</td>
			<td>Ifran</td>
			<td>100 mL</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">PBS</td>
			<td>Welgene, Daegu, Korea</td>
			<td style="width:119px;">LB001-02</td>
			<td>500 mL</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Gold nanoparticles</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Synthesis</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">C15 optical agent</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Synthesis</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Tissue plasminogen activator</td>
			<td style="width:219px;">Boehringer Ingelheim, Biberach, Germany</td>
			<td style="width:119px;">rtPA(actilyse)</td>
			<td>20 mg</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Normal saline</td>
			<td>Daihan Pham, Seoul, Korea</td>
			<td>48N3AF3</td>
			<td>20 mL</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

combined near-infrared fluorescent imaging and micro-computed tomography for directly visualizing cerebral thromboemboli

l&#39;imaging diretto trombo visualizza la causa principale di infarto tromboembolica. Essere in grado di immagine trombo permette direttamente di gran lunga migliore ricerca di ictus che basarsi su misure indirette, e sarà uno strumento potente e robusto ricerca vascolare. Usiamo un approccio di imaging ottico che etichetta trombi con un pennarello l&#39;imaging molecolare trombo - una sonda fluorescente Cy5.5 vicino infrarosso (NIRF) che è legata covalentemente ai filamenti di fibrina del trombo dall&#39;azione enzimatica fibrina reticolazione di attivazione fattore della coagulazione XIIIa durante il processo di maturazione coagulo. Un micro-tomografia computerizzata (microCT) approccio basata su utilizza nanoparticelle di oro trombo-seeking (AuNPs) funzionalizzati di indirizzare il componente principale del coagulo: fibrina. Questo documento descrive un protocollo dettagliato per la combinata in vivo microCT e ex vivo l&#39;imaging NIRF di tromboembolie in un modello murino di ictus embolico. Abbiamo dimostrato che in vivo &lt;/ em&gt; microCT e AuNPs glicole-chitosano fibrina mirati (FIB-GC-AuNPs) può essere utilizzato per la visualizzazione sia in situ trombi e cerebrale trombi embolico. Descriviamo anche l&#39;uso di imaging in vivo trombo diretta microCT-based per monitorare serialmente gli effetti terapeutici del plasminogeno tissutale trombolisi attivatore-mediata. Dopo l&#39;ultima sessione di imaging, dimostriamo da ex vivo NIRF imaging la portata e la distribuzione di tromboembolie residua nel cervello. Infine, si descrive l&#39;immagine di analisi quantitative e microCT NIRF dati di imaging. La tecnica combinata di immagini dirette trombo permette due metodi indipendenti di visualizzazione trombo da confrontare: l&#39;area del segnale fluorescente trombi correlati a ex vivo NIRF l&#39;imaging rispetto al volume di iperdensa microCT trombi in vivo.

Immagini Baseline microCT, ottenuti in vivo dopo somministrazione FIB-GC-AUNP (10 mg / ml, 300 ml) in 1 ora dopo ictus embolico, chiaramente visualizzato trombo cerebrale nel MCA - ACA zona biforcazione distale dell&#39;arteria carotide interna (Figura 6 ). Follow-up di immagini microCT non ha mostrato alcun cambiamento nel trombo mucca con trattamento salino. Tuttavia, il trattamento con tPA mostrato una graduale dissoluzione del trombo COW (frecce blu in <stro...

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Combined Near-infrared Fluorescent Imaging and Micro-computed Tomography for Directly Visualizing Cerebral Thromboemboli

Questo protocollo descrive l&#39;applicazione della tomografia combinata a fluorescenza nel vicino infrarosso (NIRF) imaging e micro-computerizzata (microCT) per la visualizzazione tromboembolie cerebrale. Questa tecnica consente la quantificazione del carico trombotico ed evoluzione. La tecnica di imaging NIRF visualizza fluorescente trombo nel cervello asportato, mentre la tecnica microCT visualizza trombo all&#39;interno gli animali viventi utilizzando oro-nanoparticelle.

Imaging fluorescente combinata vicino infrarosso e la tomografia micro-computerizzata per Direttamente Visualizzazione cerebrale tromboembolie

Direct thrombus imaging visualizes the root cause of thromboembolic infarction. Being able to image thrombus directly allows far better investigation of ...

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By adapting OPT to include the capability of imaging in the near infrared (NIR) spectrum, we here illustrate the possibility to image larger bodies of ...

Osmotic Drug Delivery to Ischemic Hindlimbs and Perfusion of Vasculature with Microfil for Micro-Computed Tomography Imaging

Osmotica Drug Delivery per arti posteriori ischemico e la perfusione dei vasi con Microfil per Micro-Tomografia Computerizzata Imaging

Preclinical research in animal models of peripheral arterial disease plays a vital role in testing the efficacy of therapeutic agents designed to ...

Tissue-simulating Phantoms for Assessing Potential Near-infrared Fluorescence Imaging Applications in Breast Cancer Surgery

Tissue-simulando Phantoms per valutare il potenziale vicino infrarosso applicazioni di imaging di fluorescenza nella chirurgia del cancro al seno

Inaccuracies in intraoperative tumor localization and evaluation of surgical margin status result in suboptimal outcome of breast-conserving surgery ...

Assessment of Viability of Human Fat Injection into Nude Mice with Micro-Computed Tomography

Valutazione della solidità del grasso umano iniezione in topi nudi con Micro-Tomografia Computerizzata

Lipotransfer is a vital tool in the surgeon&#8217;s armamentarium for the treatment of soft tissue deficits of throughout the body. Fat is the ideal soft ...

Using Micro-computed Tomography for the Assessment of Tumor Development and Follow-up of Response to Treatment in a Mouse Model of Lung Cancer

Utilizzando la tomografia micro-computerizzata per la valutazione di sviluppo del tumore e follow-up di risposta al trattamento in un modello murino di cancro ai polmoni

Lung cancer is the most lethal cancer in the world. Intensive research is ongoing worldwide to identify new therapies for lung cancer. Several mouse ...

Skeletal Muscle Neurovascular Coupling, Oxidative Capacity, and Microvascular Function with 'One Stop Shop' Near-infrared Spectroscopy

Muscolo scheletrico Neurovascular accoppiamento, capacità ossidativa e funzione microvascolare con 'One Stop Shop' spettroscopia nel vicino infrarosso

Exercise represents a major hemodynamic stress that demands a highly coordinated neurovascular response in order to match oxygen delivery to metabolic ...

How to Administer Near-Infrared Spectroscopy in Critically ill Neonates, Infants, and Children

Come somministrare la spettroscopia del vicino infrarosso in neonati, neonati e bambini gravemente malati

Near infrared spectroscopy (NIRS) calculates regional tissue oxygenation (rSO2) using the different absorption spectra of oxygenated and deoxygenated ...

Near Infrared Photoimmunotherapy for Mouse Models of Pleural Dissemination

Fotoimmunoterapia nel vicino infrarosso per modelli murini di disseminazione pleurica

The efficacy of photoimmunotherapy can be evaluated more accurately with an orthotopic mouse model than with a subcutaneous one. A pleural dissemination ...