Name: combined near-infrared fluorescent imaging and micro-computed tomography for directly visualizing cerebral thromboemboli
Uploaded: 2016-09-25T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Combined Near-infrared Fluorescent Imaging and Micro-computed Tomography for Directly Visualizing Cerebral Thromboemboli at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet av Korea Healthcare Technology R &amp; D Project, Helse- og velferd (HI12C1847, HI12C0066), Bio &amp; Medical Technology Development Program (2010-0019862) og Global Research Lab (GRL) program (NRF-2015K1A1A2028228) av National Research Foundation, finansiert av den koreanske regjeringen.

Alle dyr prosedyrer demonstrert i denne protokollen er gjennomgått og godkjent av Dongguk universitetet Ilsan Hospital Animal Care og bruk komité og utført i samsvar med prinsippene og prosedyrene som er beskrevet i Guide NIH for omsorg og bruk av dyr. 1. Utarbeidelse av eksogent Dannet Clot Merket med Fluorescence Marker (figur 1) <ol><li> Bedøve en mus i en induksjonskammeret ved anvendelse av 3% isofluran blandet med 30% oksygen (1,5 l / min 100% oksygen). Sørg for tilstrekkelig dybde av anestesi ved ?...

<ol>
	<li>Saver, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time+is+brain--quantified.">Time is brain--quantified.</a> Stroke. 37 (1), 263-266 (2006).</li><li>Latchaw, R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recommendations+for+imaging+of+acute+ischemic+stroke:+a+scientific+statement+from+the+American+Heart+Association.">Recommendations for imaging of acute ischemic stroke: a scientific statement from the American Heart Association.</a> Stroke. 40 (11), 3646-3678 (2009).</li><li>Kim, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperacute+direct+thrombus+imaging+using+computed+tomography+and+gold+nanoparticles.">Hyperacute direct thrombus imaging using computed tomography and gold nanoparticles.</a> Ann Neurol. 73 (5), 617-625 (2013).</li><li>Kim, J. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+Imaging+of+Cerebral+Thromboemboli+Using+Computed+Tomography+and+Fibrin-targeted+Gold+Nanoparticles.">Direct Imaging of Cerebral Thromboemboli Using Computed Tomography and Fibrin-targeted Gold Nanoparticles.</a> Theranostics. 5 (10), 1098-1114 (2015).</li><li>Kim, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+thrombus+imaging+as+a+means+to+control+the+variability+of+mouse+embolic+infarct+models:+the+role+of+optical+molecular+imaging.">Direct thrombus imaging as a means to control the variability of mouse embolic infarct models: the role of optical molecular imaging.</a> Stroke. 42 (12), 3566-3573 (2011).</li><li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals.">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> J Pharmacol Pharmacother. 1 (2), 87-93 (2010).</li><li>Durukan, A., Tatlisumak, T., Fisher, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+ischemic+stroke.">Animal models of ischemic stroke.</a> Handbook of clinical neurology: Stroke Part 1: Basic and epidemiological aspects.Volume 92. 92, 43-66 (2009).</li><li>Overoye-Chan, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EP-2104R:+a+fibrin-specific+gadolinium-Based+MRI+contrast+agent+for+detection+of+thrombus.">EP-2104R: a fibrin-specific gadolinium-Based MRI contrast agent for detection of thrombus.</a> J Am Chem Soc. 130 (18), 6025-6039 (2008).</li><li>Kim, D. E., Schellingerhout, D., Jaffer, F. A., Weissleder, R., Tung, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Near-infrared+fluorescent+imaging+of+cerebral+thrombi+and+blood-brain+barrier+disruption+in+a+mouse+model+of+cerebral+venous+sinus+thrombosis.">Near-infrared fluorescent imaging of cerebral thrombi and blood-brain barrier disruption in a mouse model of cerebral venous sinus thrombosis.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 25 (2), 226-233 (2005).</li><li>Tung, C. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+factor+XIII+probes+for+blood+coagulation+imaging.">Novel factor XIII probes for blood coagulation imaging.</a> Chembiochem. 4 (9), 897-899 (2003).</li><li>Robinson, B. R., Houng, A. K., Reed, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Catalytic+life+of+activated+factor+XIII+in+thrombi.+Implications+for+fibrinolytic+resistance+and+thrombus+aging.">Catalytic life of activated factor XIII in thrombi. Implications for fibrinolytic resistance and thrombus aging.</a> Circulation. 102 (10), 1151-1157 (2000).</li><li>Reed, G. L., Houng, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+contribution+of+activated+factor+XIII+to+fibrinolytic+resistance+in+experimental+pulmonary+embolism.">The contribution of activated factor XIII to fibrinolytic resistance in experimental pulmonary embolism.</a> Circulation. 99 (2), 299-304 (1999).</li><li>Sun, I. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biocompatible+glycol+chitosan-coated+gold+nanoparticles+for+tumor-targeting+CT+imaging.">Biocompatible glycol chitosan-coated gold nanoparticles for tumor-targeting CT imaging.</a> Pharm Res. 31 (6), 1418-1425 (2014).</li><li>Celi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thrombus+formation:+direct+real-time+observation+and+digital+analysis+of+thrombus+assembly+in+a+living+mouse+by+confocal+and+widefield+intravital+microscopy.">Thrombus formation: direct real-time observation and digital analysis of thrombus assembly in a living mouse by confocal and widefield intravital microscopy.</a> J Thromb Haemost. 1 (1), 60-68 (2003).</li><li>Chen, I. Y., Wu, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiovascular+molecular+imaging:+focus+on+clinical+translation.">Cardiovascular molecular imaging: focus on clinical translation.</a> Circulation. 123 (4), 425-443 (2011).</li><li>Wintermark, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+recommendations+for+acute+stroke+and+transient+ischemic+attack+patients:+a+joint+statement+by+the+American+Society+of+Neuroradiology,+the+American+College+of+Radiology+and+the+Society+of+NeuroInterventional+Surgery.">Imaging recommendations for acute stroke and transient ischemic attack patients: a joint statement by the American Society of Neuroradiology, the American College of Radiology and the Society of NeuroInterventional Surgery.</a> J Am Coll Radiol. 10 (11), 828-832 (2013).</li><li>Weissleder, R., Tung, C. H., Mahmood, U., Bogdanov, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+tumors+with+protease-activated+near-infrared+fluorescent+probes.">In vivo imaging of tumors with protease-activated near-infrared fluorescent probes.</a> Nat Biotechnol. 17 (4), 375-378 (1999).</li><li>Narayanan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biocompatible+magnetite/gold+nanohybrid+contrast+agents+via+green+chemistry+for+MRI+and+CT+bioimaging.">Biocompatible magnetite/gold nanohybrid contrast agents via green chemistry for MRI and CT bioimaging.</a> ACS Appl Mater Interfaces. 4 (1), 251-260 (2012).</li><li>Amendola, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magneto-plasmonic+Au-Fe+alloy+nanoparticles+designed+for+multimodal+SERS-MRI-CT+imaging.">Magneto-plasmonic Au-Fe alloy nanoparticles designed for multimodal SERS-MRI-CT imaging.</a> Small. 10 (12), 2476-2486 (2014).</li><li>Zhu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis+of+Au-Fe3O4+heterostructured+nanoparticles+for+in+vivo+computed+tomography+and+magnetic+resonance+dual+model+imaging.">Synthesis of Au-Fe3O4 heterostructured nanoparticles for in vivo computed tomography and magnetic resonance dual model imaging.</a> Nanoscale. 6 (1), 199-202 (2014).</li></ol>

Vi demonstrerte bruk av to komplementære molekylære bildeteknikker for direkte trombusavbilding i eksperimentelle modeller av embolisk slag: fibrin målrettet gull nanopartikkel (fib-GC-AuNP) for in vivo microCT basert bildebehandling, og en FXIIIa målrettet optisk avbildning probe for ex vivo fluorescerende bildebehandling. Etter intravenøs administrering av fib-GC-AuNPs, ble tromber synlig for CT som tette strukturer, på grunn av at partiklene blir innfanget i det tr...

Én av 6 personer vil ha et slag på et tidspunkt i livet. Hjerneinfarkt er langt den vanligste slag type, og står for om lag 80 prosent av alle slagtilfeller. Fordi tromboemboli forårsake de fleste av disse iskemisk slag, er det en økende interesse i direkte trombusavbilding. Det ble anslått at om lag 2 millioner hjerneceller dør i løpet av hvert minutt av midt cerebral arterie okklusjon 1, som fører til slagordet &quot;Tid er Brain&quot;. Computertomografi (CT) undersøkelser kan gjøres raskt, og er allment tilgjengelig; på grunn av dette, CT forblir avbildning av valget for den innledende diagnose og behandling av hyperakutt hjerneinfarkt. CT er spesielt verdifull for å informere de kritiske tidlige beslutninger: administrere vevsplasminogenaktivator (tPA) for trombolyse og / eller triaging til endovaskulær blodpropp-henting 2. Nåværende CT-baserte trombusavbilding, kan imidlertid ikke serielt spore cerebral tromboemboli in vivo, fordi den bruker indirekte metoder for å demonstrere tromber: etter opasifikasjon av blodet pool av joderte kontrast, er tromber demonstrert som fylling av feil i skipene. Det er dosegrenser og risiko forbundet med gjentatt administrasjon av joderte kontrast, som utelukker gjentatte avbildning av tromber på denne måten. Det er derfor et kritisk behov for en direkte avbildning metodikk for cerebral blodpropper hos slagpasienter, for å tillate raskere og bedre behandling beslutninger for å bli gjort. Vi foreslår å oppnå dette ved å øke verdien av CT, den tiden brukes frontlinjen avbildningsfunksjonalitet for slag, med bruk av en trombe søkende nanoparticular molekylær avbildning agent. Vi har vist at bruk av denne agenten ved hjelp av mikro-computertomografi (microCT), en høy oppløsning ex vivo eller in vivo (små dyr) avbildning versjon av CT som tillater rask datainnsamling &lt;sup&gt; 3,4. Selv med relativt dårlig bløtvev kontrast tilgjengelig for små dyr microCT (mye verre enn tilgjengelig fra menneskelig størrelse skannere), bilde agent var i stand til å søke og markere tromber ved å gjøre dem hyperdense på CT, en &quot;tett fartøy skilt &#39;forsterket av molekylære bildebehandling. Utfyller CT teknikken, har vår gruppe tidligere utviklet en optisk direkte trombusavbilding teknikk med Cy5.5 nær-infrarødt fluorescerende (NIRF) probe for å visualisere cerebral blodpropp byrde 5. Dette er en ex vivo teknikk på post mortem hjerner, men er svært følsom, og tjener til å bekrefte in vivo data i forsknings setting. Å ha både CT og NIRF basert trombe søkende imaging teknikker tillater oss å sammenligne og kontrast disse teknikkene for å oppnå svært informative data om rollen til tromben og trombusavbilding i ferd med iskemisk hjerneslag utvikling. Here, beskriver vi en detaljert protokoll av en kombinert teknikk for in vivo microCT og ex vivo avbildning NIRF til direkte å visualisere tromboemboli i en musemodell av emboliske slag. Disse enkle og robuste metoder er anvendelige for å fremme forståelsen av trombotiske sykdommer ved å muliggjøre den nøyaktige in vivo vurdering av tromben byrde / fordelings og karakterisering av dynamisk trombe utvikling i en rask og kvantitativ måte in vivo i løpet av terapi, etterfulgt av ex vivo data som tjener som en kontroll og referansestandard for bekreftelse av in vivo avbildning funn.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="588">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:155px;">Machines</td>
			<td style="width:219px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:96px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">microCT</td>
			<td>NanoFocusRay, JeonJu, Korea</td>
			<td>NFR Polaris-G90</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">NIRF imaging system</td>
			<td>Roper-scientific,Tucson, AZ</td>
			<td>coolsnap-Ez</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Laser Doppler flowmeter</td>
			<td>Perimed, Stockholm, Sweden</td>
			<td>PeriFlux System 5000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Surgical microscope</td>
			<td>Leica Microsystems, Seoul, Korea</td>
			<td>EZ4HD</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:155px;">Inhalation anesthesia machine</td>
			<td>PerkinElmer, Massachusetts, USA</td>
			<td>XGI-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Software</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;">NFR control</td>
			<td>NanoFocusRay, JeonJu, Korea</td>
			<td>NFR Polaris-G90</td>
			<td style="width:96px;">microCT control software</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:155px;">Lucion</td>
			<td>Infinitt, Seoul, Korea</td>
			<td>Lucion</td>
			<td style="width:96px;">3D render imaging software</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Lab chart 7</td>
			<td>ADInstruments, Colorado, USA</td>
			<td>Lab chart 7</td>
			<td>rCBF</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Image J software</td>
			<td>Wanye Rasband, NIH, USA</td>
			<td>1.49d</td>
			<td>imaging analysis</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Devices/Instruments</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Infusion pump</td>
			<td>Harvard, Massachusetts, USA</td>
			<td>pump 22(55-2226)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Homeothermic blanket</td>
			<td>Panlab, Barcelona, Spain</td>
			<td>HB101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Pocket cautery</td>
			<td>Daejong, Seoul, Korea</td>
			<td>DJE-39</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Brain matrice</td>
			<td>Ted pella, CA, USA</td>
			<td>15003</td>
			<td style="width:96px;">coronal section</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">PE-50 tubing</td>
			<td>Natsume, Tokyo, Japan</td>
			<td>SP-45(PE-50)</td>
			<td style="width:96px;">I.D. 0.58 mm O.D. 0.96 mm</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">PE-10 tubing</td>
			<td>Natsume, Tokyo, Japan</td>
			<td>SP-10(PE-10)</td>
			<td style="width:96px;">I.D. 0.28mm O.D. 0.61 mm</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:155px;">30 gauge needle</td>
			<td>sungshim-medical, Seoul, Korea</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Syringe</td>
			<td>CPL-medical, Ansan, Korea</td>
			<td></td>
			<td>1 &#38; 3 cc</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Gauze</td>
			<td>Panamedic, Cheonan, Korea</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Tape</td>
			<td>Scotch, Seoul, Korea</td>
			<td>3M-810</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Micro forceps</td>
			<td>Fine Science Tools, Vancouver, Canada</td>
			<td>&#160;11253-27</td>
			<td>Dumont #L5</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Micro scissor</td>
			<td>Fine Science Tools, Vancouver, Canada</td>
			<td style="width:119px;">15000-03</td>
			<td>Vannas spring</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Scissor</td>
			<td>Fine Science Tools, Vancouver, Canada</td>
			<td style="width:119px;">14084-08</td>
			<td>8.5 cm</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Black silk suture</td>
			<td>Ailee, Busan, Korea</td>
			<td>SK6071, SK728</td>
			<td>6-0 and 7-0</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Reagents</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">meloxicam</td>
			<td>Yuhan, Seoul, Korea</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">vet ointment</td>
			<td>Novartis, Basel, Swiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">10% Povidone-iodine (betadine)</td>
			<td>Firson, Cheon-an, Korea</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">FeCl3</td>
			<td>Sigma, Missouri, United States</td>
			<td>157740-5G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">TTC</td>
			<td>Amresco, Ohio, USA</td>
			<td>0765-100g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Isoflurane</td>
			<td>Hana-Pham, Gyeonggi, Korea</td>
			<td>Ifran</td>
			<td>100 mL</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">PBS</td>
			<td>Welgene, Daegu, Korea</td>
			<td style="width:119px;">LB001-02</td>
			<td>500 mL</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Gold nanoparticles</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Synthesis</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">C15 optical agent</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Synthesis</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Tissue plasminogen activator</td>
			<td style="width:219px;">Boehringer Ingelheim, Biberach, Germany</td>
			<td style="width:119px;">rtPA(actilyse)</td>
			<td>20 mg</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Normal saline</td>
			<td>Daihan Pham, Seoul, Korea</td>
			<td>48N3AF3</td>
			<td>20 mL</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

combined near-infrared fluorescent imaging and micro-computed tomography for directly visualizing cerebral thromboemboli

Direkte trombusavbilding visualiserer rotårsak av tromboembolisk infarkt. Å være i stand til å bilde tromben tillater direkte langt bedre undersøkelse av slag enn å stole på indirekte målinger, og vil være en potent og robust vaskulær forskningsverktøy. Vi bruker en optisk avbildning tilnærming som etiketter tromber med en molekylær avbildning trombe markør - en Cy5.5 nær-infrarødt, fluorescent (NIRF) probe som er kovalent bundet til fibrin-tråder av tromben av fibrin-tverrbindings enzymatisk virkning av aktivert koagulasjonsfaktor XHIa under prosessen av blodpropp modning. En mikro-computertomografi (microCT) -basert tilnærmingen bruker trombe økende gullnanopartikler (AuNPs) funksjon å målrette den viktigste komponenten av blodpropp: fibrin. Dette dokumentet beskriver en detaljert protokoll for den kombinerte in vivo microCT og ex vivo avbildning av NIRF tromboemboli i en musemodell av emboliske slag. Vi viser at in vivo &lt;/ em&gt; microCT og fibrin-målrettet glykol-kitosan AuNPs (fib-GC-AuNPs) kan brukes til å visualisere både in situ tromber og cerebral embolic tromber. Vi beskriver også bruken av in vivo microCT baserte direkte trombusavbilding til serielt overvåke den terapeutiske effekten av vevsplasminogenaktivator-mediert trombolyse. Etter siste bildebehandling økten, vi demonstrere ved ex vivo NIRF bildebehandling omfang og fordeling av rest tromboemboli i hjernen. Til slutt beskriver vi kvantitativ bildeanalyse av microCT og NIRF bildedata. Den kombinerte teknikk for direkte trombusavbilding tillater to uavhengige metoder for visualisering tromben som skal sammenlignes: arealet av trombe-relaterte fluorescerende signal på ex vivo avbildning NIRF lignet med volumet av hyperdense microCT tromber in vivo.

Baseline microCT bilder, oppnås in vivo etter administrering av fib-GC-AuNP (10 mg / ml, 300 ul) ved 1 time etter embolisk slag, tydelig visualisert cerebral trombose i MCA - ACA bifurkasjon område av den distale arteria carotis interna (Figur 6 ). Oppfølging microCT bildebehandling viste ingen endring i COW trombe med saltvann behandling. Men behandling med tPA viste en gradvis avvikling av COW tromben (blå pilspisser i Figur 6). Dette funn...

Watch this Scientific Journal Video about Combined Near-infrared Fluorescent Imaging and Micro-computed Tomography for Directly Visualizing Cerebral Thromboemboli at JoVE.com

Combined Near-infrared Fluorescent Imaging and Micro-computed Tomography for Directly Visualizing Cerebral Thromboemboli

Denne protokollen beskriver bruk av kombinerte nær-infrarødt fluorescerende (NIRF) bildebehandling og mikro-computertomografi (microCT) for å visualisere cerebral tromboemboli. Denne teknikken tillater kvantifisering av trombe byrde og evolusjon. Den NIRF avbildningsteknikk visualiserer fluorescensmerkede trombe i utskåret hjernen, mens microCT teknikken visualiserer trombe inne levende dyr med gullnanopartikler.

Kombinert Nær-infrarød Fluorescent Imaging og Micro-computertomografi for Direkte Visualisering Cerebral tromboemboli

Direct thrombus imaging visualizes the root cause of thromboembolic infarction. Being able to image thrombus directly allows far better investigation of ...

Research

JoVE Journal

Medicine

In vivo Near Infrared Fluorescence (NIRF) Intravascular Molecular Imaging of Inflammatory Plaque, a Multimodal Approach to Imaging of Atherosclerosis

In vivo Near Infrared Fluorescence NIRF Intravascular Molecular Imaging of Inflammatory Plaque, a Multimodal Approach to Imaging of Atherosclerosis

The vascular response to injury is a well-orchestrated inflammatory response triggered by the accumulation of macrophages within the vessel wall leading ...

Retrograde Perfusion and Filling of Mouse Coronary Vasculature as Preparation for Micro Computed Tomography Imaging

Retrograd perfusjon og Fylling av Mouse Coronary blodkar som forberedelse for Micro Datatomografiscanning Imaging

Visualization of the vasculature is becoming increasingly important for understanding many different disease states. While several techniques exist for ...

Near Infrared Optical Projection Tomography for Assessments of &beta;-cell Mass Distribution in Diabetes Research

Near Infrared Optical Projection Tomography for Assessments of ÃƒÅ½Ã‚Â²-cell Mass Distribution in Diabetes Research

Near Infrared optisk projeksjon Tomography for vurderinger av β-celle Mass Distribusjon i Diabetes Research

By adapting OPT to include the capability of imaging in the near infrared (NIR) spectrum, we here illustrate the possibility to image larger bodies of ...

Osmotic Drug Delivery to Ischemic Hindlimbs and Perfusion of Vasculature with Microfil for Micro-Computed Tomography Imaging

Osmotisk Drug Delivery til iskemisk bakbena og perfusjon av blodkar med Microfil for Micro-CT Imaging

Preclinical research in animal models of peripheral arterial disease plays a vital role in testing the efficacy of therapeutic agents designed to ...

Tissue-simulating Phantoms for Assessing Potential Near-infrared Fluorescence Imaging Applications in Breast Cancer Surgery

Tissue-simulere Phantoms for Assessing Potensielle nær-infrarødt fluorescens bildebehandlingsprogrammer i Breast Cancer Surgery

Inaccuracies in intraoperative tumor localization and evaluation of surgical margin status result in suboptimal outcome of breast-conserving surgery ...

Assessment of Viability of Human Fat Injection into Nude Mice with Micro-Computed Tomography

Vurdering av Livskraftig of Human Fat Injeksjon i Nude Mus med Micro-Datatomografiscanning

Lipotransfer is a vital tool in the surgeon&#8217;s armamentarium for the treatment of soft tissue deficits of throughout the body. Fat is the ideal soft ...

Using Micro-computed Tomography for the Assessment of Tumor Development and Follow-up of Response to Treatment in a Mouse Model of Lung Cancer

Ved hjelp av Micro-computertomografi for vurdering av tumorutvikling og oppfølging av respons på behandlingen i en musemodell for lungekreft

Lung cancer is the most lethal cancer in the world. Intensive research is ongoing worldwide to identify new therapies for lung cancer. Several mouse ...

Skeletal Muscle Neurovascular Coupling, Oxidative Capacity, and Microvascular Function with 'One Stop Shop' Near-infrared Spectroscopy

Skjelettmuskel nevrovaskulære kopling og oksidativt kapasitet mikrovaskulær funksjon med 'One Stop Shop' nær infrarød spektroskopi

Exercise represents a major hemodynamic stress that demands a highly coordinated neurovascular response in order to match oxygen delivery to metabolic ...

How to Administer Near-Infrared Spectroscopy in Critically ill Neonates, Infants, and Children

Hvordan administrere nær-infrarød spektroskopi i kritisk syke nyfødte, spedbarn og barn

Near infrared spectroscopy (NIRS) calculates regional tissue oxygenation (rSO2) using the different absorption spectra of oxygenated and deoxygenated ...

Near Infrared Photoimmunotherapy for Mouse Models of Pleural Dissemination

Nær infrarød fotoimmunoterapi for musemodeller av pleural formidling

The efficacy of photoimmunotherapy can be evaluated more accurately with an orthotopic mouse model than with a subcutaneous one. A pleural dissemination ...